下丘脑腹外侧视前区通过抑制结节乳头体核对大鼠睡眠觉醒的调控作用

目的 研究睡眠调节中枢下丘脑腹外侧视前区（VLPO）与觉醒调节关键区域结节乳头体核（TMN）之间的联系在大鼠睡眠-觉醒周期调控中的作用.方法 将雄性SD大鼠随机分为对照组（TMN＋ACSF＆VLPO＋ ACSF组）与实验组（TMN＋ ACSF＆VLPO＋ L-Glu组,TMN＋ Bic＆VLPO＋ ACSF组,TMN＋Bic＆VLPO＋L-Glu组）,采用脑立体定位技术确定大鼠VLPO以及TMN插管位置并进行核团内微量注射和多导睡眠描记技术等方法观察和记录大鼠睡眠的变化.结果 与TMN＋ACSF＆VLPO＋ACSF组（n=8）相比,TMN＋ACSF＆VLPO＋L-Glu组（n=7）VLPO内微量注射L-谷氨酸（L-Glu）可使大鼠觉醒减少（42.30±3.75,P＜0.01）,非快动眼睡眠（NREM）和总睡眠时间（TST）增多（61.97±3.41,P＜0.01;77.68±3.74,P＜0.01）,快动眼睡眠（REM）无明显改变,差异无统计学意义;与TMN＋ACSF＆VLPO＋L-Glu组（n=7）相比,TMN＋Bic＆VLPO＋L-Glu组（n=8）中荷包牡丹碱（Bicuculline,Bic）和L-Glu相继分别微量注射于TMN和VLPO后,大鼠觉醒增加（79.22±3.93,P＜0.01）,NREM（34.82±3.23,P＜0.01）和REM（5.97± 1.10,P＜0.05）以及TST（40.79±3.92,P＜0.01）减少,即TMN注射Bic可拮抗L-Glu在VLPO引起的促睡眠作用.结论 VLPO可通过GABAA受体抑制TMN神经元活动而产生促睡眠作用.     

腹外侧视前区GABA能神经元对大鼠睡眠-觉醒周期的影响

目的 研究腹外侧视前区(VLPO）γ-氨基丁酸(GABA)能神经元对大鼠睡眠—觉醒周期的影响。方法 采用脑立体定位、核团微量注射和多导睡眠描记技术。结果 VLPO双侧分别微量注射GABA合成关键酶(谷氨酸脱羧酶，GAD)抑制剂3-巯基丙酸(3-MP，5μg，0．1μl)，与对照组相比，注射后当日对大鼠睡眠—觉醒周期无影响；注射后第1天大鼠睡眠量减少，觉醒时间增加；第2、3天恢复正常。结论 GABA能神经元在VLPO参与大鼠睡眠—觉醒周期调节且有促睡眠作用。     

去甲肾上腺素对腹外侧视前区神经元的作用途径研究

目的 研究去甲肾上腺素(NA)对腹外侧视前区(VLPO)中两种类型神经元(促睡眠神经元和中间神经元)的作用途径.方法 采用全细胞膜片钳技术,通过药理学方法在C57BL/6小鼠脑片上,研究NA对VLPO中两种类型神经元兴奋或抑制作用的途径.通过RT-PCR鉴定VLPO脑区NMDA受体表达的类型.结果 电生理结果显示,NA(100 μmol/L)对VLPO中间神经元的兴奋作用能被NMDA受体阻断剂(AP5)阻断(P＜0.05,n = 8),不能被AMPA受体阻断剂(CNQX)和γ-氨基丁酸受体阻断剂阻断.NA(100μmol/L)对VLPO促睡眠神经元的抑制作用均不能被AP5、CNQX和氟马西尼(flumazenil)阻断.RT-PCR结果显示NM-DA 受体的3种亚型(GluN2A、GluN2B、GluN1)在VLPO中均有表达.结论 NA对VLPO中间神经元的兴奋作用是通过谷氨酸能神经元释放谷氨酸引起的间接效应,该兴奋效应由VLPO中间神经元上的NMDA受体介导.     

腹外侧视前核微量注射5-羟色胺酸和麦角新碱对大鼠睡眠-觉醒周期的影响

目的 观察5—羟色胺(5—HT)在大鼠腹外侧视前核(VLPO)对睡眠—觉醒周期的影响。方法 采用脑立体定位、核团微量注射和多导睡眠描记技术。结果 VLP0微量注射5—羟色胺酸(5—HTP，5—HT前体)使大鼠睡眠减少，觉醒增加；而VLPO微量注射非特异性5—HT受体阻断剂麦角新碱可使大鼠睡眠增加、觉醒减少。结论 5—HT在VLPO参与睡眠—觉醒周期调节中具有促觉醒作用。     

大鼠下丘脑腹外侧视前区和结节乳头体核的直接神经纤维投射研究

目的探讨促睡眠调节中枢下丘脑腹外侧视前区(VLPO)与促觉醒调节中枢结节乳头体核(TMN)之间是否具有双向调节的直接通路。方法将SD大鼠随机分为对照组( ACSF 组)与实验组( TMN + ACSF&VLPO + DiO 组, TMN+DiO&VLPO+ACSF组),采用脑立体定位技术,核团内微量注射、冰冻切片等方法观察和记录大鼠VLPO和TMN分别注射细胞膜荧光探针Fast DiO后的TMN和VLPO的荧光信号。结果 TMN+ACSF&VLPO+DiO组大鼠注射Fast DiO术后72 h, TMN 脑区神经细胞可见明显的绿色荧光;TMN+DiO&VLPO+ACSF组大鼠注射Fast DiO术后72 h, VLPO脑区神经细胞也可见明显的绿色荧光。结论 VLPO与TMN间有双向直接神经纤维投射。     

腺苷对大鼠下丘脑视前正中核神经元调控睡眠的作用

目的 研究腺苷(AD)对下丘脑视前正中核(MnPN)神经元调控大鼠睡眠-觉醒周期的影响.方法 将SD大鼠随机分为3组:人工脑脊液(ACSF)组、AD组和硝基苯硫嘌呤核苷(NBTI)组,每组5只.采用脑立体定位、微透析和多导睡眠描计技术观察MnPN区给予AD、NBTI 对大鼠睡眠-觉醒周期的影响.结果 MnPN区微透析A...     

Adenosine level of variation in rat ventrolateral preopic area after sleep deprivation

目的 研究睡眠剥夺大鼠促睡眠中枢腹外侧视前区(VLPO)内腺苷变化规律.方法 将SD大鼠随机分为对照组和睡眠剥夺组.采用脑立体定位、微透析、多导睡眠描计技术和高效液相色谱法观察两组大鼠的睡眠剥夺前、睡眠剥夺期以及睡眠剥夺后恢复期VLPO内腺苷含量变化.结果 与对照组比较,睡眠剥夺组睡眠剥夺前觉醒(W)、非快速眼动(NREM)睡眠和快速眼动(REM)睡眠无明显变化;而在睡眠剥夺期W时间增加58.5%(P＜0.01),NREM时间减少55.7%(P＜0.01),REM时间差异无统计学意义;在睡眠剥夺后恢复期W时间减少18.4%(P＜0.05),NREM时间增加17.4%(P＜0.05),REM时间差异无统计学意义.与对照组比较,睡眠剥夺开始的2 h内睡眠剥夺组的VLPO内腺苷相对含量无显著变化.而随后的4 h VLPO内腺苷相对含量明显升高(P＜0.05).睡眠剥夺后恢复期的3 h内睡眠剥夺组的VLPO 内腺苷相对含量显著减少(P＜0.05).结论 腺苷在VLPO内参与睡眠-觉醒周期的调节.     

大白鼠视前外侧区的纤维联系

应用辣根过氧化物酶微量注射法研究了大白鼠视前外侧区的传入联系。结果表明,在额前皮质、梨状皮质、隔内侧核、隔外侧核、杏仁核群、海马、丘脑旁室核、连结核、下丘脑背内侧核、下丘脑腹内侧核、下丘脑外侧核、下丘脑室周核、弓状核、视上核、室旁核、乳头体核、脑桥中缝核、网状外侧核均见有标记细胞。对视前外侧区的传入联系与生殖功能的关系进行了讨论。     

剥夺异相睡眠对大鼠海马结构突触囊泡膜蛋白表达的影响

目的: 观察剥夺异相睡眠对大鼠海马结构突触囊泡膜蛋白表达的影响. 方法: 34只雄性Wistar大鼠随机分为4组:①剥夺异相睡眠组(PSD, n＝9),采用"小平台水环境法"(Flower Pot Technique)剥夺大鼠异相睡眠;②大平台对照组(TC, n＝8)置于"平台水环境",平台直径为20㎝;③普通鼠笼对照组(CC, n＝9);④非游泳对照组(NC, n＝8). 除NC组外,其余3组大鼠在Morris水迷宫中进行游泳训练对比,水迷宫记录分析系统自动记录游泳速度、游泳距离、逃避潜伏期等相关参数. 通过免疫组织化学方法检测大鼠海马结构突触囊泡膜蛋白(synaptophysin, SYN)的表达. 结果: 从第2日开始到第4日,PSD组大鼠游泳距离大于CC组和TC组,有显著性差异(P<0.05). PSD组和NC组大鼠海马结构突触囊泡膜蛋白阳性产物的光密度值较CC组和TC组低(P<0.05). 结论: 剥夺异相睡眠可能通过影响海马结构突触的增长使大鼠的空间辨别性学习记忆能力下降.     

部分睡眠剥夺对大鼠免疫功能的影响

目的 :探讨睡眠与免疫的关系。方法 :将SD大鼠 2 2只随机分为睡眠剥夺组和对照组各 11只 ,采用免疫学方法分别观察了脾细胞增殖反应 ,迟发型超敏反应的变化。结果 :由刀豆蛋白A ,脂多糖诱导的细胞增殖反应降低 ,脾细胞抗体分泌减少 ,迟发型超敏反应抑制 ,胸腺和脾脏质量降低。结论 :睡眠剥夺可抑制大鼠的免疫功能。     

大鼠睡眠剥夺后行为及下丘脑诱生型一氧化氮合酶mRNA表达的变化

目的:观察快动眼睡眠 (rapid eye movement sleep, REMS)剥夺大鼠行为的改变及其下丘脑诱生型一氧化氮合酶 (iNOS) mRNA表达的时相变化.方法:小站台水环境法剥夺大鼠睡眠24、48、72 h后,用旷场实验 (open field test, OFT) 观察大鼠主动行为的变化,同时用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR) 检测其下丘脑iNOS mRNA的表达.结果:睡眠剥夺24、48 h组大鼠的旷场实验得分较非剥夺组高 (P<0.01),剥夺72 h后降低;睡眠剥夺24 h及48 h组iNOS mRNA的表达量无显著变化,但剥夺72 h组iNOS mRNA的表达量大幅度增加 (P<0.01).结论:内源性一氧化氮 (NO) 增加可能是睡眠剥夺后机体精神行为变化的重要原因,高水平的NO可能直接或间接通过其他的睡眠调节因子介导这种作用.     

大鼠下丘脑星形胶质细胞对不同时段睡眠剥夺的反应

目的：探索不同时段睡眠剥夺后大鼠下丘脑内星形胶质细胞的反应．方法：雄性大鼠45只随机分为3组,每组内再分3组：睡眠剥夺组7只,采用小环境水平台法建立大鼠睡眠剥夺模型,分别剥夺睡眠3,6,12,24,48,72,96h;与其对应的大平台对照组7只;正常单独笼养组1只．接受同一处理的大鼠各有3只．用免疫组化的方法检测胶原纤维酸性蛋白（GFAP）在下丘脑的表达变化．结果：GFAP在下丘脑核群的表达出现随睡眠剥夺时间长短变化的趋势,在交叉上核和室旁核的表达于24h达在高峰后下降,在弓状核的表达于48h达高峰。在视上核的表达开始即上升,24h达高峰后下降．结论：星形胶质细胞可能参与下丘脑核团的生物节律调节．     

REM睡眠剥夺及精神病药物对大鼠行为的影响

采用放射免疫分析法（ＲＩＡ）和Ｎｏｒｔｏｎ氏行为观察量表对ＲＥＭ睡眠剥夺和精神病药物大鼠的脑内局部如皮层、下丘脑、边缘叶等组织内的ｃＡＭＰ测定和大鼠行为的量表评定、结果提示、精神病药物及ＲＥＭ睡眠剥夺与精神药物在边缘叶有相反方向的ｃＡＭＰ改变，行为改变表现为平均行为分与下丘脑的ｃＡＭＰ含量改变有一致性，下丘脑与行为改变有关，给于外界干预，可以影响大鼠的生活习性     

睡眠剥夺对大鼠不同脑区 syp 表达的影响

目的：观察睡眠剥夺对大鼠不同脑区神经元细胞syp表达的影响。方法20只SD大鼠随机分为对照组（10只）和模型组（10只）。模型组大鼠利用水上站立法建立睡眠剥夺大鼠模型,分别在睡眠剥夺24和72 h时随机取5只大鼠,处死,通过免疫组化方法观察大鼠不同脑区神经元细胞syp表达变化,对照组不做任何处理,其余同模型组。结果模型组大鼠海马区、前额叶皮质神经元syp表达明显低于对照组,差异显著,而两组纹状体区神经元syp表达差异不显著。结论睡眠剥夺后可导致大鼠皮层和海马神经元syp表达明显降低,对纹状体区神经元syp表达无影响。     

剥夺睡眠对人体免疫功能的影响

目的探讨睡眠与免疫功能的关系。方法采用流式细胞仪和单向琼脂扩散法对20例军校学员进行了剥夺睡眠48h后细胞免疫和体液免疫功能的测定。结果剥夺睡眠48h后，T细胞亚群CD4、CD8以及免疫球蛋白lgG、IgA、IgM和补体C3、C4的含量与剥夺睡眠前相比无显著性差异（P>0.05），NK细胞值则显著降低（P＜0．01）。结论剥夺睡眠48h对人体免疫功能有影响，睡眠与免疫功能有关。