mRNA expression of oncogenes in patients with allergic dermatitis induced by trichloroethylene

目的:探讨三氯乙烯(trichloroethylene,TCE)药疹样皮炎病人外周血癌基因c-fos、c-myc、K-ras、p53 mRNA表达水平的变化情况.方法:分别抽取4例健康人(对照组)及4例三氯乙烯致变态反应病人(病例组)抗凝外周全血,采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)技术检测外周血中c-fos、c-myc、K-ras和p53 mRNA的表达水平.结果:与健康对照者比较,三氯乙烯药疹样皮炎病人外周血c-fos mRNA表达水平升高352％,c-myc mRNA升高41％,K-ras mRNA升高136％,p53 mRNA升高64％,两组间上述基因mRNA表达水平的差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论:三氯乙烯药疹样皮炎病人外周血癌基因表达水平增加,提示三氯乙烯可能有一定的致癌风险.     

三氯乙烯对CYP1A2 高表达肝细胞株凋亡基因和癌基因的影响

目的： 构建CYP1A2基因高表达载体,转染到L02肝细胞,建立CYP1A2高表达细胞株并检测三氯乙烯对该细胞株凋亡基因和癌基因的影响。方法：根据GenBank提供的CYP1A2基因cDNA序列设计引物,PCR扩增该基因并将其克隆到慢病毒高表达载体pLVX-acGFP1-C1中,将已经构建的慢病毒载体对293FT细胞进行转染,收集病毒上清,感染正常L02肝细胞。用嘌呤霉素进行筛选得到CYP1A2高表达L02细胞株,通过荧光定量PCR和Western blot对细胞株进行鉴定。用不同剂量三氯乙烯对正常L02肝细胞和CYP1A2高表达细胞进行染毒12 h,采用PCR方法检测凋亡基因 (Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因 (c-fos、c-myc、K-ras、p53)mRNA表达的变化。结果：测序证明重组慢病毒高表达载体CYP1A2基因序列与GenBank提供的CYP1A2序列一致,荧光定量PCR检测显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2 mRNA表达比正常L02肝细胞提高317倍,Western blot结果显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2蛋白表达水平比正常L02肝细胞高3.41倍。三氯乙烯染毒后,CYP1A2高表达细胞中凋亡基因Bcl-2 mRNA表达水平与正常肝细胞无显著性差异(P>0.05),而Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达水平高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。CYP1A2高表达细胞中癌基因c-myc和p53 mRNA表达水平低于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01),而c-fos和K-ras mRNA则高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。结论：三氯乙烯对CYP1A2高表达细胞凋亡基因和癌基因表达有显著影响,提示CYP1A2是三氯乙烯在体内代谢的重要因素,与三氯乙烯毒性存在一定关系。     

沉默c-fos基因对PM2.5染毒人支气管上皮细胞癌基因和凋亡相关基因表达的影响

目的： 探讨沉默c-fos基因对PM_2.5染毒人支气管上皮细胞（HBE细胞）癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法： 采用RNA干扰技术,根据GenBank提供的c-fos mRNA序列,设计合成shRNA干扰序列,将重组慢病毒载体转染HBE细胞,构建c-fos基因沉默细胞株。采用实时荧光定量PCR（qPCR）和Western blot对c-fos基因沉默效果进行鉴定。以HBE细胞、c-fos基因沉默细胞为实验对象,用浓度为50 μg/mL的PM_2.5混悬液染毒24 h,同时设立阴性对照组,qPCR和Western blot分别检测部分癌基因c-myc、k-ras、c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8在mRNA及蛋白质表达水平的变化。结果： 转染c-fos-shRNA慢病毒的HBE细胞中,经qPCR和Western blot检测发现,与对照组HBE细胞相比,c-fos mRNA表达水平下降70.1%,c-fos蛋白表达水平下降53.7%。PM_2.5染毒HBE细胞后,与未染毒的对照组比较,c-myc和k-ras mRNA表达水平分别升高30.46%、27.17%,差异均有统计学意义（P < 0.05）,c-fos、Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别升高50.78%、71.91%、74.16%,p53 mRNA表达水平下降12.27%,差异均有统计学意义（P < 0.01）。PM_2.5染毒c-fos基因沉默细胞后,与未染毒组比较,c-myc、k-ras mRNA表达水平分别下降13.08%、5.39%,Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别下降25.03%、21.37%（P < 0.05）,p53 mRNA下降53.39%（P < 0.01）。此外,c-fos基因沉默细胞染毒后,与HBE正常细胞染毒后比较,c-myc、k-ras、p53、c-fos、Caspase-3和Caspase-8的mRNA表达水平均有所下降（P < 0.05）;仅c-myc蛋白表达下降（P < 0.01）。结论： 成功构建c-fos基因沉默细胞株;PM_2.5可引起HBE细胞癌基因和凋亡相关基因表达水平明显升高,c-fos基因沉默在一定程度上能抑制PM_2.5对癌基因和凋亡相关基因的激活作用。     

沉默c-fos基因对PM2.5染毒人支气管上皮细胞癌基因和凋亡相关基因表达的影响

目的： 探讨沉默c-fos基因对PM_2.5染毒人支气管上皮细胞（HBE细胞）癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法： 采用RNA干扰技术，根据GenBank提供的c-fos mRNA序列，设计合成shRNA干扰序列，将重组慢病毒载体转染HBE细胞，构建c-fos基因沉默细胞株。采用实时荧光定量PCR（qPCR）和Western blot对c-fos基因沉默效果进行鉴定。以HBE细胞、c-fos基因沉默细胞为实验对象，用浓度为50 μg/mL的PM_2.5混悬液染毒24 h，同时设立阴性对照组，qPCR和Western blot分别检测部分癌基因c-myc、k-ras、c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8在mRNA及蛋白质表达水平的变化。结果： 转染c-fos-shRNA慢病毒的HBE细胞中，经qPCR和Western blot检测发现，与对照组HBE细胞相比，c-fos mRNA表达水平下降70.1%，c-fos蛋白表达水平下降53.7%。PM_2.5染毒HBE细胞后，与未染毒的对照组比较，c-myc和k-ras mRNA表达水平分别升高30.46%、27.17%，差异均有统计学意义（P < 0.05），c-fos、Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别升高50.78%、71.91%、74.16%，p53 mRNA表达水平下降12.27%，差异均有统计学意义（P < 0.01）。PM_2.5染毒c-fos基因沉默细胞后，与未染毒组比较，c-myc、k-ras mRNA表达水平分别下降13.08%、5.39%，Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别下降25.03%、21.37%（P < 0.05），p53 mRNA下降53.39%（P < 0.01）。此外，c-fos基因沉默细胞染毒后，与HBE正常细胞染毒后比较，c-myc、k-ras、p53、c-fos、Caspase-3和Caspase-8的mRNA表达水平均有所下降（P < 0.05）；仅c-myc蛋白表达下降（P < 0.01）。结论： 成功构建c-fos基因沉默细胞株；PM_2.5可引起HBE细胞癌基因和凋亡相关基因表达水平明显升高，c-fos基因沉默在一定程度上能抑制PM_2.5对癌基因和凋亡相关基因的激活作用。     

CyclinE及相关基因在人原发性肝癌中的表达及其意义

[目的]研究CyclinE、CDK4、VEGF、c-myc及p53基因在肝癌中的表达及其意义.[方法]采用荧光实时定量PCR技术、免疫组织化学技术及蛋白免疫印迹技术对肝癌组织、自身癌旁组织的CyclinE、CDK4、VEGF、c-myc及p53基因的表达水平进行检测.[结果]肝癌组织中的CyclinE、CDK4、VEGF、c-myc及p53 mRNA的表达水平均高于自身癌旁组织(P均＜0.05);CyclinE蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为59.52％;CDK4蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为40.48％;VEGF蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为35.71％;c-myc蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为7.62％;p53蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为52.38％;而在癌旁组织不表达或呈微弱表达.相比于中、高分化肝癌患者,低分化癌组织中的各蛋白的阳性表达率均显著升高(CyclinE:94.74％ys 30.43％;CDK4:47.37％ vs 34.78％:VEGF:42.11％ vs 30.43％;c-myc:57.89％vs 39.13％;p53:63.16％ys 43.48％),且差异有统计学意义(均P＜0.05).相比于没有发生肝外转移的肝癌患者,有肝外转移的癌组织中的各蛋白的阳性表达率均显著升高(CyclinE:81.25％ vs 46.15％;CDK4:68.75％vs 23.08％;VEGF:43.75％ vs 30.77％:c-myc:62.50％ vs 38.46％;p53:62.50％ vs 46.15％),且差异有统计学意义(P均＜0.05).[结论]CyclinE、CDK4、VEGF、c-myc及p53基因在人肝细胞癌组织中的表达呈阳性,且阳性表达程度与肿瘤分化程度和有无肝外转移相关.     

结直肠癌APC、K-ras、p53基因突变检测

目的:探讨结直肠癌中APC、K-ras、p53基因突变模式。方法:应用酚/氯仿法提取48例结直肠癌组织及其相应正常黏膜组织的DNA,用聚合酶链反应(PCR)、单链构象多态性分析(SSCP)和DNA测序等方法检测APC基因第15外显子突变密集区(mutation cluster region,MCR)区段、K-ras和p53基因的突变。结果:APC、K-ras和p53基因的突变率分别为37.5%(18/48)、43.8%(21/48)和35.4%(17/48)。48例结直肠癌组织中,有42例发生APC、K-ras或p53基因突变,突变率高达87.5%(42/48),其中仅有APC、K-ras或p53 1种基因发生突变的发生率分别为16.7%(8/48)、25.0%(12/48)和20.8%(10/48)。单独1种基因发生突变的总发生率为62.5%(30/48)。APC和p53,APC和K-ras或p53和K-ras 2种基因均有突变的发生率分别为6.3%(3/48)、10.4%(5/48)和4.2%(2/48)。APC、K-ras和p53 3种基因均发生突变的发生率为4.2%(2/48)。2种和3种基因均发生突变的总发生率为25%(12/48)。结论:结直肠癌的发生、发展并不完全遵循由正常结直肠黏膜上皮细胞向腺瘤和侵袭性癌转化的过程中,及依次发生“APC→K-ras→p53→DCC”突变累积这一经典的结直肠癌发生发展模式,可能存在其他结直肠癌发病机制。     

三氯乙烯药疹样皮炎患者血清miRNAs差异表达谱分析

目的：分析三氯乙烯药疹样皮炎（OMLDT）患者和三氯乙烯接触者血清microRNA（miRNA）表达谱的差异。方法：分别采集5名三氯乙烯药疹样皮炎患者和5名接触者血液,分离血清,抽提总RNA进行Hy3荧光标记,然后浓缩标记的样品,运用miRCURY LNA芯片进行miRNA芯片杂交,杂交后进行图像扫描,所得数据使用GenePix Pro V6.0软件进行miRNA差异表达分析并采用qPCR进行验证。对差异较大的miRNA用miRWalk 2.0进行靶基因预测,并与其他预测软件结果进行比较。结果：OMLDT患者与三氯乙烯接触者比较,共有69个差异表达的miRNAs,其中低表达30个,高表达39个（包含miR-199b）。qPCR验证亦显示miR-199b在OMLDT中高表达。靶基因预测结果显示miR409-3p和miR485-3p在5个预测软件均预测到了共同的靶基因。结论：三氯乙烯药疹样皮炎患者血清miRNAs表达谱发生了显著改变,miR-199b可能是OMLDT潜在的易感生物标志物。     

c-myc和p16在口腔鳞癌中的协同作用

背景与目的：口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中c—myc和p16的蛋白表达已有一些报道,其基因扩增和mRNA表达研究很少,未见有从多个水平探讨OSCC中c-myc和p16协同作用的研究。本研究旨在探讨OSCC中c-myc和p16基因在基因扩增、mRNA表达和蛋白质表达三个水平上的协同作用。方法：用原位杂交和免疫组化技术与图像分析相结合的方法,对30例OSCC组织中c-myc和p16两种基因的扩增、mRNA表达和蛋白表达状况进行定性、定位、定量研究。结果：OSCC中c-myc的扩增阳性率为63．30%,p16基因未见扩增。c-myc和p16在OSCC中的mRNA表达率分别是83．3％和93．3％,蛋白表达率分别是60．00%和86．7％。相关性分析表明,p16与c-myc在mRNA表达(r=0．6765,P=4．055 6E-05)和蛋白表达(r=0．5642,P=0．00l2)都呈显著性相关。结论：c-myc基因扩增和高表达在OSCC发生、发展中具有重要作用。在OSCC中c-myc和p16的表达具有一定的内在联系。     

p38MAPK基因对PM2.5染毒HK-2细胞部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨p38MAPK基因对PM_2.5染毒人肾上皮细胞（HK-2）部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法：根据GenBank提供的p38MAPK mRNA序列,设计合成干扰序列,将重组慢病毒载体转染HK-2细胞,构建p38MAPK基因沉默细胞株。分别采用实时荧光定量PCR （qPCR）和Western blot法检测p38MAPK mRNA和蛋白的表达水平鉴定沉默效果。用50 μg/mL的PM_2.5混悬液分别染毒正常HK-2细胞和p38MAPK基因沉默细胞24 h,利用荧光定量PCR和Western blot检测癌基因c-myc,c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平。结果：qPCR和Western blot检测结果显示,与正常HK-2细胞比较,p38MAPK基因沉默细胞中p38MAPK mRNA的表达下降了58.50%,p38MAPK蛋白表达水平下降了51.33%（P<0.01）。PM_2.5混悬液对HK-2细胞和p38MAPK基因沉默HK-2细胞染毒后,qPCR检测结果显示,与正常HK-2细胞未染毒组比较,正常HK-2细胞PM_2.5染毒组中c-myc、c-fos、Caspase-8和Casepase-9基因表达分别升高39.89%、15.12%、19.47%和15.45%,p53和Bcl-2基因表达分别下降21.54%和31.77%,差异均具有统计学意义（P<0.05）;与正常HK-2细胞PM_2.5染毒组比较,p38MAPK基因沉默HK-2细胞PM_2.5染毒组中c-myc、c-fos、p53、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达分别下降了84.55%、63.55%、34.49%、37.19%和54.97%,差异均具有统计学意义（P<0.05）。Western blot检测结果显示,与正常HK-2细胞未染毒组比较,正常HK-2细胞PM_2.5染毒组中的c-myc和Caspase-8蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少;与正常HK-2细胞PM_2.5染毒组比较,p38MAPK基因沉默HK-2细胞PM_2.5染毒组中的c-myc、Caspase-8和Bcl-2蛋白表达减少（均为P<0.05）。结论：成功构建了p38MAPK基因沉默细胞株,PM_2.5可引起HK-2细胞癌基因和凋亡相关基因表达水平升高,p38MAPK基因可能参与PM_2.5对HK-2细胞的毒性作用过程。     

白藜芦醇对卵巢癌细胞增殖活力、增殖基因mRNA表达及Wnt信号通路的影响

目的研究白藜芦醇对卵巢癌细胞增殖活力、增殖基因mRNA表达及Wnt信号通路的影响。方法培养卵巢癌SKOV3细胞株,并随机分为四组,对照组用不含药物的DMEM处理,白藜芦醇组用含有不同剂量(20、40、80μmol/L)的白藜芦醇处理。处理24 h后,使用酶标仪检测表示细胞增殖活力的光密度(OD_(490))值,荧光定量PCR检测细胞周期基因c-myc、细胞周期蛋白A(cyclin A)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21及上皮间质转化基因N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的mRNA表达水平,Western blotting法检测Wnt信号通路分子糖原合成激酶-3β(GSK-3β)和β-连环蛋白(β-catenin)的蛋白表达水平。结果 20、40、80μmol/L白藜芦醇组SKOV3细胞的OD_(490)值、细胞中c-myc、cyclin A、cyclin D1、N-cadherin、Vimentin的mRNA表达水平及β-catenin的蛋白表达水平均明显低于对照组,细胞中p21、E-cadherin的mRNA表达水平及GSK-3β的蛋白表达水平均明显高于对照组,且随着白藜芦醇剂量的升高,SKOV3细胞的OD_(490)值、细胞中c-myc、cyclin A、cyclin D1、N-cadherin、Vimentin的mRNA表达水平及β-catenin的蛋白表达水平逐渐下降,细胞中p21、E-cadherin的mRNA表达水平及GSK-3β的蛋白表达水平逐渐升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论白藜芦醇能够以剂量依赖性的方式降低卵巢癌细胞的增殖活力、调节增殖基因的表达,且这一作用与Wnt信号通路激活的受抑制有关。     

PM2.5对HK-2肾细胞部分癌基因和凋亡基因表达的影响

目的： 探讨PM_2.5对人肾上皮细胞（HK-2）部分癌基因和凋亡基因表达的影响。方法： 利用CCK-8试剂盒测定PM_2.5混悬液对HK-2细胞的半数抑制浓度（IC₅₀）;实验设阴性对照组、PM_2.5混悬液低剂量（10 μg/mL）、高剂量（50 μg/mL）染毒组和阳性对照组（Cr⁶⁺ 10 μmol/L）,分别对HK-2细胞处理24 h后利用实时荧光定量PCR （qPCR）和Western blot检测癌基因（c-myc、c-fos、p53）和凋亡基因（Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2） mRNA和蛋白的表达水平。结果： PM_2.5混悬液对HK-2细胞的IC₅₀为95.98 μg/mL;经PM_2.5混悬液染毒24 h,qPCR结果显示,与阴性对照组比较,PM_2.5混悬液高剂量组和阳性对照组c-myc、c-fos、Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达均升高,差异均有统计学意义（P < 0.01）;p53和Bcl-2 mRNA表达降低,差异均有统计学意义（P < 0.01）。Western blot结果显示,与阴性对照组比较,PM_2.5混悬液高剂量组和阳性对照组c-myc、c-fos、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达均升高,差异均有统计学意义（P < 0.01）;p53和Bcl-2蛋白表达均降低,差异均具有统计学意义（P < 0.05）。结论： PM_2.5可引起HK-2细胞中部分癌基因表达上升、抑癌基因表达下降、促凋亡基因表达上升和抑凋亡基因表达下降,提示PM_2.5对HK-2肾细胞部分癌基因和凋亡基因具有一定的促进与激活作用。     

珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应及机制研究

目的观察珠子参体外诱导人肝癌细胞凋亡效应并初探其分子机制。方法体外细胞培养采用人肝癌细胞株SMMC-7721,分为对照(BL)组、珠子参(PJ)组、二甲基亚砜(DMSO)组及5-FU组,采用电镜观察作用后肝癌细胞超微结构改变;流式细胞仪检测肝癌细胞周期和凋亡率;RT-PCR法检测癌基因c-myc、c-fos和抑癌基因p53、p21表达的变化。结果与对照组比较,电镜下珠子参组SMMC-7721细胞染色质浓缩,分解成大小不一有膜包绕团块,内含有新月形DNA物质及细胞器,形成凋亡小体;周期分析可见G0/G1期细胞阻滞,阻止了细胞向S期的转换,并引起细胞凋亡,凋亡率达38.34%;RT-PCR半定量分析珠子参能降低癌基因c-myc表达(P<0.05),增高抑癌基因p53和p21表达(P<0.05)。结论珠子参能诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,部分作用机制可能与阻滞细胞停留在G0/G1,降低癌基因c-myc和c-fos表达,增高抑癌基因p53和p21表达有关。     

PM2.5对L02肝细胞部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响

目的： 探讨细颗粒物（PM_2.5）对人正常肝细胞（L02肝细胞）癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法： 以L02肝细胞为研究对象，设10和50 μg/mL两个PM_2.5混悬液染毒组，以未染毒的L02肝细胞为阴性对照，10 μmol/L的K₂CrO₄（下用Cr⁶⁺表示）染毒细胞为阳性对照，均处理24 h，应用实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）和Western blot技术分别检测促癌基因c-myc、c-fos、抑癌基因p53和促凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8，抑凋亡基因Bcl-2的mRNA以及相应的蛋白表达变化。结果： qPCR法分析结果显示，与阴性对照组比较，10、50 μg/mL PM_2.5混悬液染毒组以及阳性对照组L02肝细胞癌基因c-myc的mRNA表达水平分别升高69.5%、118.0%、51.1%，c-fos表达水平分别升高50.3%、64.4%、23.3%，p53表达水平分别下降4.0%、22.0%、18.0%；凋亡相关基因Caspase-3的mRNA表达水平分别升高31.0%、30.5%、42.0%，Caspase-8表达分别升高25.3%、40.3%、64.5%，Bcl-2表达分别下降40.5%、46.9%、41.4%，差异均有统计学意义（P < 0.05）。Western blot法分析结果显示，在10、50 μg/mL PM_2.5混悬液和Cr⁶⁺染毒后L02肝细胞c-myc蛋白表达水平分别升高32.3%、49.3%、70.6%，c-fos蛋白表达水平分别升高11.3%、50.2%、45.2%，p53蛋白表达水平分别下降17.5%、40.0%、42.9%；Caspase-3蛋白表达水平分别升高23.1%、33.9%、43.1%，Caspase-8蛋白表达水平分别升高31.4%、52.1%、80.0%，Bcl-2蛋白表达水平分别下降14.3%、23.3%、36.9%，差异均有统计学意义（P < 0.05）。结论： PM_2.5染毒引起L02肝细胞中促癌基因和促凋亡相关基因表达升高，抑癌基因和抑凋亡相关基因表达下降，提示PM_2.5对L02肝细胞的恶性转化和凋亡可能有促进与激活作用。     

PM2.5对L02肝细胞部分癌基因和凋亡相关基因表达的影响

目的： 探讨细颗粒物（PM_2.5）对人正常肝细胞（L02肝细胞）癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法： 以L02肝细胞为研究对象,设10和50 μg/mL两个PM_2.5混悬液染毒组,以未染毒的L02肝细胞为阴性对照,10 μmol/L的K₂CrO₄（下用Cr⁶⁺表示）染毒细胞为阳性对照,均处理24 h,应用实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）和Western blot技术分别检测促癌基因c-myc、c-fos、抑癌基因p53和促凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8,抑凋亡基因Bcl-2的mRNA以及相应的蛋白表达变化。结果： qPCR法分析结果显示,与阴性对照组比较,10、50 μg/mL PM_2.5混悬液染毒组以及阳性对照组L02肝细胞癌基因c-myc的mRNA表达水平分别升高69.5%、118.0%、51.1%,c-fos表达水平分别升高50.3%、64.4%、23.3%,p53表达水平分别下降4.0%、22.0%、18.0%;凋亡相关基因Caspase-3的mRNA表达水平分别升高31.0%、30.5%、42.0%,Caspase-8表达分别升高25.3%、40.3%、64.5%,Bcl-2表达分别下降40.5%、46.9%、41.4%,差异均有统计学意义（P < 0.05）。Western blot法分析结果显示,在10、50 μg/mL PM_2.5混悬液和Cr⁶⁺染毒后L02肝细胞c-myc蛋白表达水平分别升高32.3%、49.3%、70.6%,c-fos蛋白表达水平分别升高11.3%、50.2%、45.2%,p53蛋白表达水平分别下降17.5%、40.0%、42.9%;Caspase-3蛋白表达水平分别升高23.1%、33.9%、43.1%,Caspase-8蛋白表达水平分别升高31.4%、52.1%、80.0%,Bcl-2蛋白表达水平分别下降14.3%、23.3%、36.9%,差异均有统计学意义（P < 0.05）。结论： PM_2.5染毒引起L02肝细胞中促癌基因和促凋亡相关基因表达升高,抑癌基因和抑凋亡相关基因表达下降,提示PM_2.5对L02肝细胞的恶性转化和凋亡可能有促进与激活作用。     

Effect of cytochrome P450 inducers on expression of oncogenes and a tumor suppressor gene in human colon cancer cells

To examine the possibility that chemical inducers of cytochrome P450 may have effects on the expression of oncogenes and a tumor suppressor gene, human colon LS174T cells were treated with different cytochrome P450 inducers such as benzanthracene (Ba), pyrazole (Pyr) and phenobarbital-hydrocortisone (Pb-Hc). Three forms of cytochrome P450 (CYP1A1, CYP1A2 and CYP2E1) were detected in the colon cell line and all of them were induced following chemical treatments. Altered expression of c-fos, c-myc, c-jun, was observed following the treatments. c-src, K-ras and p53 were not significantly affected by any of the treatments at the time-point selected. Interestingly, c-fos expression was the most dramatically altered by different treatments, showing repression with all of the treatments. These data show that some oncogenes are responsive to inducers of cytochrome P450, the enzyme system by which many carcinogens are activated.