73株大肠埃希菌耐药表型分析

目的分析临床分离的大肠埃希菌的耐药性、产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）阳性率及耐药性之间的关系。方法用微量肉汤稀释法检测2009年10月至2010年3月分离的73株大肠埃希菌的耐药性,用酶抑制剂增强实验纸片法检测产ESBLs菌株。结果 73株大肠埃希菌产ESBLs20株,阳性率为27.4%。产ESBLs菌株对青霉素类和第一、第二代头孢菌素耐药率〉95%,对第三代头孢菌素中头孢哌酮、头孢噻肟和头孢曲松耐药率均为95%,但头孢他定耐药率为20%。对酶抑制剂哌拉西林/三唑巴坦、替卡西林/克拉维酸和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率〈30%,耐药率低于30%的还有头孢西丁、阿米卡星,未检测到亚胺培南耐药株。非产ESBLs菌株耐药率明显低于产ESBLs菌株。结论本医院分离的产ESBLs大肠埃希菌的比例低于国内其他地区,具有显著的耐药性。     

大肠埃希氏菌感染的临床护理

大肠埃希氏菌又名大肠杆菌,主要寄生在大肠内,一般不致病,在一定条件下可引起肠道外感染,如腹膜炎、胆囊炎、尿道感染、腹泻等.该细菌属多重耐药菌,能同时对β-内酰胺类和氨基糖甙类药物产生耐药[1].2008年12月至2009年2月我科发生2例大肠埃希氏菌感染病例,通过精心治疗与护理治愈出院.现将报告如下.     

大肠埃希菌中氟喹诺酮耐药机制功能分析

目的 分析拓扑异构酶的突变和外排泵系统在大肠埃希菌(Escherichia coli)氟喹诺酮类药物耐药机制中的作用.方法 本研究通过基因重组技术对大肠埃希菌中拓扑异构酶不同点突变的功能进行了准确测定,同时也对大肠埃希菌中不同外排泵及膜蛋白的功能进行了分析.结果 在不同的菌株中,acrAB或tolC的切除所引起细菌耐药性的变化不同.对拓扑异构酶点突变的功能分析显示,gyrA中的点突变(S83和D87)在喹诺酮耐药机制中起主要作用,没有gyrA上的点突变,parC上的点突变(S80和A108)对细菌的耐药性不产生影响,但单独gyrA上的点突变(S83和D87)也仅导致敏感菌株对萘啶酸耐药,而对其他氟喹诺酮类药物仍表现为敏感.当对喹诺酮敏感的大肠埃希菌K-12同时具备gyrA(S83L和D87N)和parC(S801和A108V)上的点突变后,重组菌株对氟喹诺酮会自然产生耐药性,而并不需要过度表达的外排泵.结论 拓扑异构酶的突变在大肠埃希菌氟喹诺酮药物的耐药机制中起主要作用,对氟喹诺酮药物耐药的菌株通常应同时具备gyrA和parC上的点突变.     

大肠埃希菌耐药性分析

目的了解大肠埃希茵产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况;比较产ESBLs菌与非产ESBLs菌时10种抗生素的耐药率.指导临床合理用药.方法收集2007年7月～2008年6月临床分离的大肠埃希菌36株,用双纸片增效试验法和K-B法,进行产ESBLs细菌的检测和药敏试验.结果 36株大肠埃希茵中,共检出产ESBLs菌27株,栓出率为75%,除亚胺培南外,产ESBLs菌对其它10种抗生素的耐药率均显著高于非产ESBLs菌,亚胺培南未发现耐药株.结论本院大肠埃希菌产ESBLs率高,亚胺培南是治疗我院产ESBLs菌引起感染的有效抗生素.     

医院感染大肠埃希菌耐药性的调查分析

目的 调查分析大肠埃希菌引起的感染及其耐药性,以便指导临床用药.方法 对本院血、尿、痰等标本细菌培养分离出的大肠埃希菌用全自动微生物分析系统鉴定,用纸片扩散法进行抗生素敏感试验,双纸片协同筛选试验检测产超广谱β-内酰胺酶.结果 引起感染的大肠埃希菌对头孢唑林、头孢呋辛、氨苄西林、左氧氟沙星的耐药率为47.8%～78%;对头孢他啶、头孢吡肟、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦等均呈现良好的敏感性,耐药率为3.4%～24.6%;对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低,分别为0和1.7%.产ESBLs菌株的耐药率比非产ESBLs菌株耐药明显升高.结果 大肠埃希菌对青霉素类、喹诺酮类、头孢1代和2代抗生素的耐药性较高;对头孢3代和4代抗生素、头霉素类、阿米卡星、呋喃妥因和哌拉西林/他唑巴坦的耐药性较低;目前对亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦最敏感.结论 应根据抗生素敏感试验选择敏感药物进行治疗,并检测相应的产ESBLs情况.     

血红蛋白抗大鼠大肠埃希菌阴道感染研究

目的:探讨血红蛋白在大鼠体内是否具有抗菌抑炎作用。方法:构建大鼠阴道感染模型后随机设立实验组和对照组,阴道给予血红蛋白后观察子宫宫颈阴道脏器指数,并采用组织病理切片检测血红蛋白治疗前后各组指标变化。结果:子宫宫颈阴道脏器指数经统计学分析示血红蛋白组、模型对照组间无差异(P0.05),基质对照组与前两组比均有显著性差异(P0.05),基质对照组的脏器指数增加明显。结论:血红蛋白能减轻大鼠大肠埃希菌阴道感染炎症病变程度。     

大肠埃希氏菌的qnrB基因检测与耐药机制研究

目的探索本地区医院大肠埃希氏菌喹诺酮耐药基因的分布及耐药机制。方法采用PCR扩增与测序、基因初步定位、质粒接合转移实验等方法确定喹诺酮耐药的大肠埃希氏菌qnr的基因类型,以分析研究有关的耐药特点与机制。结果各大肠埃希氏菌株中仅qnrB基因阳性,qnrA、qnrS、qnrC、qnrD、qepA、aac（6’）-Ib-cr基因均阴性;并且qnrB基因包括qnrB2、qnrB5、qnrB9、qnrB16、qnrB18、qnrB19和qnrB31等位基因;在这些qnrB等位基因中,qnrB31与qnrB16、qnrB2与qnrB9同源性较高;各qnrB等位基因分别位于约21.0 kb至28.0 kb长的质粒上。结论在本地区医院存在不同的qnrB等位基因流行;实验菌株的喹诺酮耐药与qnrB等位基因结构中LexA-蛋白结合位点共有序列缺失有关。     

大肠埃希菌对碳青霉烯类药物的耐药机制研究

目的 研究我院普外科重症监护病房(ICU)出现的对碳青霉烯类抗菌药物耐药的大肠埃希菌分子流行病学特征和碳青霉烯耐药机制.方法 采用琼脂稀释法检测分离株的抗菌药物敏感性,采用脉冲场琼脂糖凝胶电泳(PFGE)研究碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌分子流行病学机制,采用特异性PCR、DNA测序分析、接合试验、质粒提取和质粒转化试验、外膜蛋白分析等技术研究碳青霉烯耐药的分子机制.结果 我院分离的14株碳青霉烯耐药菌分别属于10个流行克隆型,均表现对包括亚胺培南和美罗培南在内多种抗菌药物耐药,碳青霉烯类耐药基因扩增显示均携带KPC-2型碳青霉烯酶基因,质粒提取与转化试验显示KPC-2定位于约56 kb大小的质粒上,SDS-PAGE分析发现耐药株多出现外膜蛋白的改变.结论 我院出现多个流行克隆型的碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌,质粒型碳青霉烯酶KPC-2是我院泛耐型大肠埃希菌介导对碳青霉烯类耐药的主要原因,外膜孔蛋白改变参与介导大肠埃希菌对碳青霉烯类高度耐药.     

尿路感染大肠埃希菌耐药性分析

目的 了解尿路感染大肠埃希菌对临床常用抗菌素的耐药性,指导临床合理使用抗菌药物.方法 按<全国临床检验操作规程>第二版接种分离,分纯菌落均经先德AR/S.2X全自动微生物培养鉴定系统鉴定到种,药敏采用深圳黑马生物工程有限公司生产的药敏板检测,用先德AR/S.2X微生物药敏分析系统进行药敏及产超光谱β-内酰胺酶(ESBLs)的分析判定.结果 大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑啉的耐药率已大于80%,对三代头孢菌素,氟喹诺酮类抗菌素耐药也很严重达46.5%-67.7%,ESBLs检出率分别为53.2%.结论 大肠埃希菌对临床常用抗菌药耐药严重,应加强耐药检测,降低细菌耐药率.     

575株泌尿外科泌尿道感染大肠埃希菌耐药性分析

目的：了解医院泌尿外科泌尿道感染的主要病原菌及大肠埃希菌的耐药率,为临床合理用药提供依据。方法对2011~2013年泌尿外科住院泌尿道感染患者尿培养分离出的575株大肠埃希菌进行药敏分析。结果泌尿道感染以革兰氏阴性杆菌为主,其中大肠埃希菌占院54.2%~69.3%;产ESBLs菌株检出率为院36.9%~46.3%;2011~2013年泌尿外科及全院大肠埃希菌大多抗菌药物耐药率呈下降趋势,但对青霉素类、头孢一代耐药率较高,产ESBLs株耐药率明显高于非产ESBLs。结论泌尿道感染大肠埃希菌分离率最高,且细菌耐药严重,特别是产ESBLs株耐药更为严重,应当加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物,减少耐药菌株的产生。     

本院近期泌尿系大肠埃希菌感染耐药性调查分析

目的 调查分析泌尿系感染大肠埃希菌的耐药性以便指导临床用药.方法 对本院泌尿系感染者的中段尿细菌培养分离出的大肠埃希菌用全自动微生物分析系统鉴定,用纸片扩散法进行抗生素敏感试验,双纸片协同筛选试验和纸片扩散法表型确证试验检测产超广谱B-内酰胺酶.结果 引起泌尿系感染的大肠埃希菌对头孢噻吩、庆大霉素、环丙沙星、复方新诺明耐药率均>40%;对头孢他啶、头孢噻肟、阿米卡星、头孢呋辛、头孢唑林、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南均呈现良好的敏感性,耐药率均<20%;产 ESBLs菌株对头孢噻肟、头孢噻吩、头孢呋辛、庆大霉素的耐药率比非产ESBLs菌株耐药明显升高(P<0.1301).结论 泌尿系感染应根据抗生素敏感试验选择敏感药物进行治疗,并检测相应的产ESBLs情况.     

福田区致泻性大肠埃希菌感染的流行病学分析

目的了解深圳市福田区门诊腹泻病例中致泻性大肠埃希菌感染状况及相关因素,为临床治疗和预防提供科学依据。方法采集门诊腹泻监测病例的大便样本、肛拭子或呕吐物标本,进行致病菌的分离培养,对阳性菌株进行分子生物学特征分析。结果福田区门诊腹泻病例监测中致泻性大肠埃希菌感染率为10.31%（114/1106）,病例以EPEC、ETEC、EIEC感染为主。EPEC、EIEC、ETEC在不同年龄组的感染情况不同,差异有统计学意义（χ2=2.680,P=0.001;χ2=18.278,P=0.006;χ2=13.948,P=0.030）,且以青壮年居多;但在季节性分布、男女性别比例和户籍分布中差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论福田区致泻性大肠埃希菌阳性病例以EPEC、ETEC、EIEC感染为主。应重视辖区内腹泻病例的致泻性大肠埃希菌感染,继续做好腹泻监测并积极防治含致泻性大肠埃希菌感染的腹泻病例,避免疫情爆发。     

第三代头孢耐药大肠埃希菌表型及其基因型分析

抗生素的广泛应用导致产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBL)的大肠埃希菌不断增加,产酶菌株不仅对青霉素类,三代头孢菌素和单环β-内酰胺类高度耐药,对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类等抗菌药物的耐药性也明显高于非产酶菌株,给临床治疗带来极大困难.不同地区、医院抗生素使用策略不同,所分离的占优势的产酶株基因型也不相同.本研究对珠海市人民医院2005年1月到2007年12月期间产ESBL大肠埃希菌进行了分析.     

碳青霉烯类抗菌药物耐药的大肠埃希菌KPC酶检测与分析

大肠埃希菌是医院内感染和社区获得性感染的重要病原菌,其耐药性十分严重.我们在我院分离的一株碳青霉烯类抗菌药物耐药的大肠埃希菌E902774的耐药机制研究中存在A类碳青霉烯酶KPC(肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶)-2酶.     

养殖动物分离的大肠埃希菌质粒介导喹诺酮耐药机制的研究

目的 调查养殖业动物大肠埃希菌对喹诺酮类抗生素的耐药情况,阐明耐药机制,为控制畜牧养殖业滥用抗生素提供依据.方法 从7省市9家养殖场采集鸡和猪的肛门拭子样本,分离并鉴定其中的大肠埃希菌,PCR扩增筛选其中的质粒上的喹诺酮耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、qnrC、qnrD和aac(6')-I 6-cr,并进行测序和药敏试验,通过接合试验以确定耐药基因的可转移性以及在喹诺酮耐药中的作用.结果 在818株大肠埃希菌中检出38株qnr阳性菌株和75株aac阳性菌株,其中gyrA突变的有15株,parC突变的有13株.结论 养殖业动物分离大肠埃希菌对喹诺酮的耐药性较为普遍,质粒介导的喹诺酮耐药作为一个重要的机制参与其中,提示应加强食源性细菌耐药性的监测.     

反义寡核苷酸抑制耐药基因逆转产ESBLs大肠埃希菌的多重耐药性

目的 研究抑制产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(E.coli)耐药基因CTX-M表达的反义寡核苷酸(AS-ODNs)对其耐药性的影响.方法 用脂质体包裹AS-ODNs W086后导入目的细菌B052,通过平板克隆形成实验计数菌落数(CFU);微量法测定细菌生长曲线;通过RT-PCR法检测B052耐药基因CTX-M的表达变化,用液体稀释法检测W086对B052最小抑菌浓度(MIC)影响.结果 AS-ODNs W086明显抑制B052的生长,W086各剂量组B052的CFU与空白对照组比较明显减少(P＜0.05),且具有浓度依赖性抑制效应,而单纯脂质体组、单纯W086组及对照链组与空白对照组无明显差异;W086能显著抑制B052 CTX-M的表达.结论 AS-ODNs能特异高效地与CTX-MmRNA结合并阻断其表达,有效逆转了B052的多重耐药性;AS-ODNs为解决细菌耐药问题提供了一个新的研究策略.     

产AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中整合子与多重耐药的研究

目的探讨整合子介导的耐药机制在产AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多重耐药中的作用.方法5株产AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分离自2002年1月-2004年5月间我院呼吸科住院的患者,采用E-test试验条进行药敏试验、电转化试验,筛选、分离耐药质粒.PCR扩增Ⅰ型整合子基因盒插入序列,分子克隆和序列分析.结果所有产酶菌株通过电转化试验可将头孢西丁耐药性传递给受体菌,5个产AmpC酶耐药质粒中,有4个检出整合酶序列,其中3个携带2种抗药性基因盒,包括氨基糖苷乙酰转移酶基因aacA4;氨基糖苷腺苷转移酶基因aadA5;二氢叶酸还原酶基因dfrA17;氯霉素外排蛋白编码基因cmL44.结论整合子介导的抗药性基因盒参与了产质粒AmpC酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌多重耐药的形成,应引起高度重视.     

携耶尔森菌HPI大肠埃希菌的致泻性调查

ＨＰＩ(ｈｉｇｈ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙｉｓｌａｎｄ)为高致病力群耶尔森菌 (包括鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌生物群 1Ｂ)中发现的一种毒力岛 ,介导铁载体耶尔森杆菌素 (ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅｙｅｒｓｉｎｉａｂａｃｔｉｎ)的生物合成和摄取 ,为菌株致小鼠死亡所必需。近年来国内外学者在许多大肠埃希菌分离菌株中先后也发现了此ＨＰＩ〔1,2〕,然而 ,目前尚不明了大肠埃希菌中检出的ＨＰＩ是否与菌株的致病性有关。我们对分离自杭州各类人群的大肠埃希菌菌株 ,应用菌落原位杂交技术和ＰＣＲ技术检测ＨＰＩ的…     

大肠埃希菌对结直肠癌小鼠免疫相关细胞因子表达的影响

目的研究大肠埃希菌对结直肠癌小鼠免疫相关细胞因子表达的影响并探讨其作用机制。方法运用AOM-DSS建立结直肠癌小鼠模型,标记为AOM-DSS组,大肠埃希菌与AOM-DSS共喂养小鼠,标记为AOM-DSS+Escherichia coli组,未做任何处理组标记为Control组;ELISA实验检测血清中炎性因子IFN-γ、IL-6、COX-2、iNOS的含量;Western blot实验检测组织中Vasohibin-1、p65蛋白表达。结果与Control组相比,AOM-DSS组、AOM-DSS+Escherichia coli组IFN-γ、IL-6、COX-2、iNOS含量均显著升高,Vasohibin-1蛋白表达量均显著升高,p65蛋白表达量均显著升高,小鼠体质量均显著降低(P0.05);与AOM-DSS组相比,AOM-DSS+Escherichia coli组IFN-γ、IL-6、COX-2、iNOS含量均显著降低,Vasohibin-1蛋白表达量显著降低,p65蛋白表达量显著降低,小鼠瘤质量显著升高(P0.05)。结论大肠埃希菌可抑制Vasohibin-1的表达,而后可抑制结直肠癌小鼠免疫相关细胞因子的表达,发挥抑癌作用,其机制与部分失活NF-κB有关,将可为结直肠癌的治疗提供实验依据。     

大肠埃希菌的耐药特性及其产超广谱β-内酰胺酶的分析

观察大肠埃希菌的耐药特性及产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况，为临床正确选择抗生素提供药敏依据。用微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)，用ESBLs表型确证试验检测出产ESBLs的大肠埃希菌。共检出314株大肠埃希菌。对其中298株大肠埃希菌进行了ESBLs检验，检出产ESBLs菌81株，检出率为27．2％；81株产ESBLs菌对多种药物耐药率较高，除亚胺培南、头孢哌酮，舒巴坦、庆大霉素和阿米卡星外，大肠埃希菌产ESBLs株对其他9种抗生素的耐药性明显高于非产ESBLs株。大肠埃希菌产ESBLs率高，应引起临床高度重视，对检测出的大肠埃希菌均应进行ESBLs检测，产ESBLs细菌有较高的交叉耐药性和多重耐药性，对亚胺培南和头孢哌酮，舒巴坦的敏感性好。