Th17/Treg及其相关细胞因子在阿霉素肾病大鼠血清及肾组织中的表达水平及意义

目的 探讨阿霉素(ADM)肾病大鼠Th17相关的IL-17和Treg相关的IL-10表达水平及意义.方法 采用一次性尾静脉注射阿霉素的方法制备大鼠ADM模型,对照组注射等量的生理盐水,ADM组20只大鼠在造模后尿蛋白均达到50mg/24 h以上,表明造模成功,采用流式细胞术检测外周血中Th17细胞和Treg细胞数量及比例;ELISA法检测各组血清和肾组织中Th17相关的IL-17和Treg相关IL-10水平.结果 ADM模型组大鼠在第14天出现蛋白尿,随着时间的推移,蛋白尿的量持续升高,在第56天达到峰值,各时间点(14,28,42,56 d) ADM组大鼠的蛋白尿水平明显高于同时间的对照组(P＜0.001);ADM组和对照组Th17细胞百分率分别为(3.13±0.09)％、(0.88±0.05)％,ADM组较对照组明显升高(P＜0.001);ADM组和对照组Treg细胞百分率分别为(1.94±0.15)％、(5.02±0.15)％,ADM组明显低于对照组(P＜0.001);ADM组Th17/Treg细胞比例较对照组高(P＜0.001),ADM组大鼠(14,28,42,56 d)的血清及肾组织IL-17表达水平明显高于对照组(P＜0.001);IL-10表达水平明显低于对照组(P＜0.001).结论 Th17/Treg为主的免疫失衡在ADM发病中起重要作用,可通过抑制或中和内源性IL-17的表达和提升Treg的表达纠正失衡的Th17/Treg,此方法可能成为儿童原发性肾病(PNS)治疗的新途径之一.     

Th17细胞与急性冠状动脉综合征

辅助性T细胞（T help,Th）17是新近发现的T效应细胞亚群,主要分泌IL-17因子,在多种自身免疫性疾病、感染性疾病、炎症性疾病中发挥重要作用。急性冠状动脉综合征（acute coronary syndrome）的发病与动脉粥样硬化斑块的不稳定性密切相关。Th17细胞在调控慢性炎症、动脉粥样硬化、血栓形成中起重要作用,加速动脉粥样硬化的进程。并且Th17细胞可能在动脉粥样硬化斑块的不稳定性中起驱动作用。     

孟鲁司特钠对小儿毛细支气管炎TH17/Treg的调节作用及疗效研究

目的：观察孟鲁司特钠对小儿毛细支气管炎Th17/Treg的调节作用及疗效。方法：选取2013年6月至2015年4月我院儿科治疗的毛细支气管炎患儿124例,随机分为对照组和观察组各62例。对照组给予常规综合治疗,包括吸氧、利巴韦林抗病毒、沙丁胺醇气雾剂平喘、合并细菌感染时抗感染、氯丙嗪镇静等;观察组在对照组治疗基础上加用孟鲁司特钠片4 mg/d,每天睡前顿服,连续治疗7 d。流式细胞仪检测Th17和Treg细胞水平,ELISA法测定IL-17和IL-10表达水平,评价疗效。结果：治疗前,两组Th17、Treg、IL-17、IL-10水平比较差异无统计学意义（P均>0.05）;治疗后,两组Th17、IL-17水平均降低且观察组低于对照组,Treg、IL-10水平均升高且观察组高于对照组（P均<0.05）。观察组总有效率90.32%,高于对照组的72.58%,且症状消失时间和住院时间均短于对照组（P均<0.05）。结论：孟鲁司特钠可以调节毛细支气管炎患儿体内Th17/Treg平衡,对小儿毛细支气管炎具有一定的临床应用价值。     

Tet调控Th17/Treg细胞分化参与自身免疫性疾病发病的研究进展

CD4⁺ T细胞是人体免疫重要的一部分,其中辅助性T细胞17（T helper cell 17,Th17）和调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）两个新近发现的CD4⁺ T细胞亚群在自身免疫疾病的发生发展中也起关键作用。Th17细胞能够引起自身免疫和炎性反应,而Treg细胞抑制疾病发生并维持免疫稳态;10～11易位蛋白（ten-eleven translocation,Tet）作为DNA去甲基化的关键因子,当其缺失时能够影响Th17/Treg免疫平衡。本文针对Tet调控Th17/Treg细胞分化参与自身免疫疾病发生发展的研究进展作一综述。     

青蒿治疗难治性类风湿关节炎患者的疗效及对TH17/Treg细胞因子的影响

目的：探讨青蒿治疗难治性类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者的疗效及是否可纠正Th17/Treg失衡及对细胞因子的影响。方法：病例来源于某院风湿免疫科,64例难治性RA患者纳入,17例难治性RA患者继续应用MTX为对照组,23例难治性RA患者应用青蒿为青蒿治疗组,24例难治性RA患者应用TNFi拮抗剂+MTX为阳性对照组。予观察3组第0,4,8,12周疗效,ELISA法检测患者血清细胞因子水平IL-10、IL-17和TNF-α表达情况;多参数流式细胞术检测各组患者外周血Treg和Th17细胞表达水平。结果：（1）青蒿治疗组和阳性对照组第8周起疗效比MTX对照组对比有统计学意义;阳性对照组第4周起比青蒿治疗组效果有统计学意义;（2）青蒿治疗组和阳性对照组患者第8周血清IL-10浓度显著高于MTX组;青蒿治疗组和阳性对照组患者血清IL-17浓度显著低于MTX组。此外,青蒿治疗组和阳性对照组患者TNF-α、ESR和CRP浓度显著低于MTX组;（3）流式细胞仪检测示青蒿治疗组和阳性对照组患者Treg细胞百分比显著高于MTX组;青蒿治疗组和阳性对照组患者血清Th17细胞百分比显著低于MTX组。结论：青蒿治疗难治性类风湿关节炎患者效果明显优于MTX,但效果较TNFi拮抗剂+MTX差,其抑制炎性因子的机制可能通过纠正RA患者的TH17/Treg失衡达到治疗目的。     

青蒿素对变应性接触性皮炎小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响

目的探讨青蒿素(Art)在变应性接触性皮炎(ACD)中对Th17和Treg的影响及机制。方法以DNFB致敏和激发制作小鼠ACD模型,局部外涂Art进行干预,采用RT-PCR和ELISA检测Treg/Th17细胞特异性核因子及相关细胞因子的表达与含量,流式细胞术检测Treg细胞数量,West-ern blot方法检测信号转导子和转录激活子STAT3的磷酸化活性表达。结果与正常组相比,模型组IL-6、IL-17含量、ROR-γt及STAT3的活性表达明显升高,同时Foxp3表达降低。Art明显降低ROR-γt表达、下调IL-6及IL-17水平,同时增加Foxp3表达并促进Treg产生,减弱STAT3的磷酸化活性。结论 Art可能通过调节Treg/Th17免疫平衡,对DN-FB诱导的ACD小鼠发挥免疫治疗作用。     

LncRNA XLOC_003810 modulates thymic Th17/Treg balance in myasthenia gravis with thymoma

Imbalance of T helper 17 (Th17)/regulatory T (Treg) cells is involved in the pathogenesis of myasthenia gravis with thymoma (MG-T). Long non-coding RNAs (lncRNAs) are implicated in the regulation of Th17/Treg balance. This study was designed to explore the role of XLOC_003810, a novel lncRNA, in regulating the Th17/Treg balance in MG-T. The thymic CD4⁺ T cells were isolated from control subjects and MG-T patients. The Th17/Treg balance was evaluated by determining proportions of Th17 and Treg cells and expression of Th17- and Treg- associated molecules. Lentivirus-mediated silencing and overexpression of XLOC_003810 in CD4⁺ T cells were performed. The results showed that XLOC_003810 expression was higher in MG-T thymic CD4⁺ T cells than that in the control group. Furthermore, the ratio of Th17/Treg cells, proportion of Th17 cells and levels of Th17-associated molecules were significantly increased, whereas the proportion of Treg cells and levels of Treg-associated molecules were decreased in MG-T thymic CD4⁺ T cells. Importantly, the Th17/Treg imbalance in MG-T thymic CD4⁺ T cells was aggravated by XLOC_003810 overexpression, whereas it was attenuated by XLOC_003810 silencing. Collectively, XLOC_003810 modulates thymic Th17/Treg balance in MG-T patients, providing the scientific basis for the clinical targeted therapy of MG-T.     

他克莫司对白癜风小鼠Th17/Treg细胞平衡及黑素细胞丢失的影响

目的 探究他克莫司对白癜风小鼠辅助性T17（Th17）/调节性T （Treg）细胞平衡和黑素细胞丢失的影响。方法 将小鼠随机分为对照组、模型组和他克莫司低、中、高剂量组（涂抹10、50、100 mg 0.03%他克莫司软膏）,使用松香/蜡混合物对小鼠背部相同位置进行去毛,大小为2 cm×2 cm,将其分为两部分：用药区域与非用药区域,面积1：1。除对照组外,于小鼠背部用药区均匀涂抹50 mg 40%莫诺苯宗软膏,每天1次,连续90 d,制备白癜风模型。莫诺苯宗涂抹30 d后开始于相同位置涂抹他克莫司软膏,2种药膏涂抹时间间隔7 h,他克莫司软膏每天早晚各涂抹1次,连续用药60 d。肉眼观察小鼠皮毛脱色情况并进行脱色评分,通过反射式共聚焦显微镜（RCM）观察小鼠皮肤黑素细胞和黑色素的分布,取小鼠皮损进行苏木精-伊红染色（HE）和马松染色（MF）对基底层黑素细胞和含黑色素的毛囊进行计数,通过流式细胞术测定小鼠外周血中Th17和Treg淋巴细胞的比例,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血白细胞介素-17（IL-17）、IL-22和叉头型基因p3（Foxp3）的含量。结果 与对照组比较,白癜风模型组小鼠用药区皮毛明显脱色,脱色评分显著升高（P<0.05）,皮损处色素明显缺失;含黑色素的毛囊和黑素细胞显著减少（P<0.05）;Th17/Treg淋巴细胞比例显著升高（P<0.05）;血清IL-17、IL-22水平显著上升,Foxp3水平显著降低（P<0.05）。与模型组比较,他克莫司各组小鼠皮毛脱色情况明显改善,脱色评分显著降低（P<0.05）,皮损处可见色素分布及黑素细胞;含黑色素的毛囊和黑素细胞显著增多（P<0.05）;Th17/Treg淋巴细胞比例显著降低（P<0.05）;IL-17、IL-22水平显著降低,Foxp3水平显著升高（均P<0.05）。结论 他克莫司可调控白癜风小鼠Th17/Treg淋巴细胞平衡,抑制其黑素细胞丢失。     

右美托咪定对重度烧伤患者外周血Th17细胞和Treg细胞数量的影响

目的：评价早期使用右美托咪定对重度烧伤患者外周血辅助性T细胞17（Th17）及调节性T细胞（Treg）细胞数量的影响。方法：选择40例烧伤面积≥30%总体表面积患者,随机分为两组（n=20）：右美托咪定组（A组）、烧伤对照组（B组）。另设立健康志愿者组（C组,n=20）。入院即给与A组1 μg·kg-1·h-1的速率泵注右美托咪定48 h,其余两组患者不给予右美托咪定泵注,其余治疗均相同。患者分别于入院即刻（T1）、伤后24 h（T2）、伤后7 d（T3）时抽取外周静脉血,共3次;C组仅采血1次。分别利用流式细胞术检测Th17细胞以及Treg细胞。结果：T2、T3时间点A组的VAS疼痛评分低于B组; T1、T2时间点A、B组外周血中Th17细胞百分比均高于C组（P<0.05）;A组T3时间点外周血中Th17细胞比例小于T1、T2时间点（P<0.05）,但高于B组T3时间点（P<0.05）; T1、T2时间点A、B组外周血中Treg细胞比例均低于C组（P<0.05）,T3时间点A组外周血中Treg细胞比例高于B组（P<0.05）。结论：早期使用右美托咪定能减轻大面积烧伤患者烧伤后引起的细胞免疫抑制,保持机体的免疫能力。     

Th17/Treg平衡在类风湿关节炎中作用的研究进展

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性多关节滑膜炎为主要特征的自身免疫性疾病。虽然目前对于RA的确切发病机制尚不明确,但一般认为和T细胞相关。最近研究发现调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)和Th17细胞在RA的发生发展中发挥重要作用。Th17细胞能够分泌促炎症因子IL-17,通过诱导基质金属蛋白酶(ma-trix metallo proteinases,MMPs)和破骨细胞生成,促进骨滑膜炎症、骨和关节损伤;而Treg则通过释放抑制性细胞因子IL-10和TGF-β发挥免疫效应,调控RA中的炎症性免疫应答过程。单独TGF-β作用下诱导初始T细胞分化为Treg,而在TGF-β和IL-6共同作用下诱导初始T细胞分化为Th17细胞,因此,Th17和Treg细胞在特定的细胞因子微环境下可以相互转化。调节Th17/Treg之间的平衡可能成为治疗RA的新方法。该文将对Th17/Treg平衡在RA发生发展中的调节作用作一综述。     

急性肾损伤诱导急性肺损伤的研究进展

急性肾损伤是一种ICU患者中常见的疾病,致死率较高,当合并肺损伤时,致死率显著提高,可达到80%。急性肾损伤可导致全身体液灌注量增加,血浆渗透压升高进而引起肺水肿和急性呼吸衰竭。同时,炎症反应,氧化应激,细胞凋亡和可溶性调节因子代谢异常等也可能参与急性肾损伤诱导的肺损伤。对急性肾损伤诱导肺损伤的临床认识和可能发病机制的研究,将有助于临床疾病的治疗和死亡率的降低,同时也将有助于对其它肾脏疾病发病机制的认识。     

银甲片通过纠正外周血Th17/Treg平衡改善慢性输卵管炎大鼠不孕

目的 探讨银甲片是否通过纠正外周血Th17/Treg平衡改善慢性输卵管炎大鼠不孕。方法 100只雌性Wistar大鼠,其中82只构建慢性输卵管炎大鼠模型,造模成功后,取80只随机分为模型组、左旋氧氟沙星组(20 mg·kg^-1)、银甲片低剂量组(0.38 g·kg^-1·d^-1)、银甲片中剂量组(0.76 g·kg^-1·d^-1)、银甲片高剂量组(1.52 g·kg^-1·d^-1),每组16只,另取16只设为空白对照组。治疗组分别按不同剂量灌胃给药,模型组与空白对照组灌服等量生理盐水(20 mL·kg^-1·d^-1),每日1次,灌胃7 d后停药1 d,7 d为1个周期,共灌胃3个周期。给药结束后,观察大鼠受孕情况,采集血样和输卵管组织。采用HE染色观察输卵管组织病理变化;透射电镜观察输卵管组织超微结构变化;ELISA检测血清中TNF-α、IL-6含量;流式细胞术检测外周血Treg、Th17细胞比例;RT-qPCR和Western blotting检测输卵管组织IL-17、IL-10、Foxp3、RORγt mRNA及蛋白表达。结果 与空白对照组相比,模型组大鼠输卵管纤毛、微绒毛稀疏,线粒体肿胀;且TNF-α、IL-6含量、Th17细胞比例及输卵管组织IL-17、RORγt mRNA和蛋白表达明显升高,大鼠受孕率、IL-10、Treg细胞比例及Foxp3 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组比较,银甲片高剂量组改善大鼠输卵管结构;明显降低模型大鼠TNF-α、IL-6含量、Th17细胞比例及输卵管组织IL-17、RORγt mRNA和蛋白表达;明显升高大鼠受孕率及IL-10、Treg细胞比例和Foxp3 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论 银甲片可有效地调节Th17/Treg平衡,进而调节Treg和Th17细胞介导的炎性反应,提高慢性输卵管模型大鼠受孕率。     

CNI induced Th17/Treg imbalance and susceptibility to renal dysfunction in renal transplantation

Calcineurin inhibitors (CNI) prevent graft rejection by blocking interleukin-2 (IL-2), which was required for development and function of Foxp3⁺CD4⁺CD25⁺ regulatory T cells (Treg). Recently, IL-2 was reported to play a part in the inhibition of Th17 cells. The renal transplantation recipient who used CNI regularly might have Th17/Treg imbalance with increased Th17 cells and decreased Treg cells, which would cause renal dysfunction even rejection. To assess the effect of CNI on Th17 cells and Treg cells, we included 123 renal transplantation recipients (101 in a stable stage and 22 with renal dysfunction) and 27 healthy volunteers. Among all the recipients, 103 recipients used CNI and 20 recipients used sirolimus without CNI. The recipients who used CNI were further classified into four groups according to the blood levels of CNI: Of all these subjects, Th17 and Treg frequencies in the peripheral blood were analyzed by flow cytometry (FCM). Serums IL-17, IL-23, IL-6, IFN-r, and TGF-β were analyzed by ELISA. The results demonstrated that the transplantation recipient treated by CNI revealed an obvious increase in peripheral Th17 frequencies and a significant decrease in Treg frequencies when compared with the sirolimus group and healthy people (P < 0.05). Even more, the transplantation recipient with renal dysfunction had the highest level of Th17 cells (P < 0.05) while the lowest Treg cells compared with stable recipient and healthy control, with increased serums IL-6 and IL-17. Our results indicated that CNI was associated with Th17/Treg imbalance in peripheral blood, which supported the followed generation of renal dysfunction after transplantation.     

绞股蓝总皂苷对非酒精性脂肪肝大鼠Treg/Th17免疫功能的影响

目的 研究绞股蓝总皂苷对非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）大鼠肝脏保护作用及免疫调节作用机制。方法 48只SD大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,多烯磷脂酰胆碱胶囊组（阳性对照组,150 mg·kg^-1）及绞股蓝总皂苷高、中、低（240,120,60 mg·kg^-1）剂量组,除正常对照组外,其余各组连续饲喂高脂饲料10周,制备NAFLD模型;模型成功后,各组连续给药8周。实验期间,分别于给药0,4,8周眼眶取血检测血清AST、ALT;末次给药后,采用流式细胞技术检测外周血Th17和Treg细胞含量;酶联免疫法检测血清IL-17、IL-10及TNF-α含量。HE染色检查肝组织病理变化和免疫组化法检查肝组织IL-17和Foxp3表达。结果 给药4周,绞股蓝总皂苷高剂量显著降低大鼠血清ALT、AST（P<0.01）;给药8周,绞股蓝总皂苷各剂量均能显著降低血清ALT、AST（P<0.05,0.01）。绞股蓝总皂苷高、中剂量能改善肝组织病变,降低TNF-α水平;高剂量显著降低IL-17、升高IL-10水平（P<0.05,0.01）,降低淋巴细胞IL-17含量,升高CD4⁺CD25⁺Treg含量（P<0.05）,明显减少炎症因子IL-17的表达和增加Foxp3表达。结论 绞股蓝总皂苷能改善NAFLD大鼠肝脏病变,其作用机制可能与调节肝脏Treg/Th17细胞平衡,减少促炎症因子和增加抗炎因子产生相关。     

桔梗总皂苷调控Th17/Treg免疫失衡改善哮喘模型小鼠气道炎症

目的 探究桔梗总皂苷是否通过介导Notch通路对哮喘Th17/Treg平衡进行调控。方法 48只BALB/c小鼠随机分为正常对照组,模型组,桔梗总皂苷低、中、高剂量组(15,30,60 mg·kg^-1)和地塞米松组,每组8只。雾化吸入卵清蛋白建立小鼠哮喘模型,药物干预8周后,测定小鼠气道高反应性。取材支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)细胞计数、ELISA检测、HE、PAS及Masson染色,流式细胞术检测小鼠肺组织Th17、Treg细胞百分比及Th17/Treg比值变化情况,qPCR检测小鼠肺组织Notch1、Jagged1、RORγt、Foxp3表达水平,Western blotting检测小鼠肺组织中Notch1、Jagged1、Hes1及RORγt、Foxp3、IL-10、IL-17蛋白表达情况。结果 与模型组相比,桔梗总皂苷中、高剂量组小鼠气道阻力减小,BALF中炎性细胞数量及炎性因子IL-4、IL-5、IL-13含量降低,血清IL-17、IL-6、IgE含量降低,BALF中INF-γ及血清中IL-10含量水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。HE、PAS及Masson结果显示,桔梗总皂苷高剂量组及地塞米松组能够显著缓解炎性细胞浸润及支气管膜破坏情况,减少杯状细胞增生,同时减轻组织胶原纤维散出程度。流式细胞术结果显示,桔梗总皂苷中、高剂量组Th17细胞数量及Th17/Treg占比均显著减少,Treg细胞数量显著增加(P<0.05或P<0.01)。qPCR及Western blotting结果显示,桔梗总皂苷给药处理后小鼠肺组织Notch1、Jagged1、RORγt mRNA及Notch1、Jagged1、Hes1、RORγt、IL-10、IL-17蛋白的表达水平均显著降低,Foxp3 mRNA及Foxp3蛋白的表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论 桔梗总皂苷能够介导Notch通路对哮喘Th17/Treg平衡进行调控,从而起到减轻气道炎症,抑制哮喘发作的作用。     

窒息致新生儿急性肾损伤的早期诊断

目的探讨窒息导致新生儿急性肾功能损伤（AKI）的早期诊断标准。方法对本院2011年1月～2012年4月诊断为AKI的52例窒息新生儿的临床资料进行回顾性分析。结果 52例新生儿在早期做出诊断36例,确诊后及时给予有效的治疗,其中,治愈34例,死亡2例,病死率为5.56%。16例在未在早期做出诊断,死亡5例,死亡率为31.25%。早期诊断与未早期诊断患儿死亡率差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论对新生儿急性肾损伤的早期诊断、治疗可提高患儿的存活率。