构建趾深屈肌腱横断模型:移植腱周膜预防肌腱粘连

背景:肌腱修复术后肌腱与周围组织的粘连问题一直是临床工作中难以解决的问题之一。目的:构建雌性来亨鸡制备双爪第3趾趾深屈肌腱横断模型,研究腱周膜移植对预防肌腱术后粘连的作用。方法:造模成功后,左爪第3趾为实验组1,肌腱切断后缝合,取鸡同侧第4趾趾深屈肌腱腱周膜包绕实验组1肌腱吻合端,左爪第4趾为实验组2直接缝合皮肤。右爪第3趾为对照组1,肌腱切断后缝合,不修复腱周膜;右爪第4趾手术不损伤腱周膜为对照组2,肌腱进行大体观察和组织学观察。结果与结论:术后28 d,来亨鸡肌腱大体观察及组织学观察采用Kruskal-WallisH和Nemenyi检验两两比较,实验组1术后效果优于对照组1(P0.05),但较对照组2及实验组2略差(P0.05);实验组2术后效果优于对照组1组(P0.05),与对照组2比较,差异不显著(P0.05)。屈趾功能采用LSD-t检验两两比较,实验组1术后效果优于对照组1(P0.05),但较对照组2及实验组2略差(P0.05),实验组2术后效果优于对照组1(P0.05),与对照组2比较,差异不显著(P0.05)。结果提示,腱周膜移植可以有效预防术后肌腱粘连,切取腱周膜对正常肌腱滑动影响不大。     

磷酸果糖抑制肌腱胶原产生和趾屈指肌腱吻合后的粘连

背景：有实验证实外源性6-磷酸果糖能降低肌腱细胞Ⅰ型胶原的产生量,减轻肌腱术后粘连的形成。 目的：观察6-磷酸果糖对肌腱术后粘连形成的影响。 方法：取72只兔行中趾屈指肌腱切断吻合,随机分成实验组与对照组(n=36),分别于腱鞘内注入6-磷酸果糖与生理盐水,术后4,8周后行肌腱粘连检测、生物力学测定、组织学观察和扫描电镜观察;术后1,2,4,8周采用原位杂交方法测定肌腱转化生长因子β1和Ⅰ型胶原mRNA的表达。 结果与结论：术后4,8周,与对照组比较,实验组肌腱缝合处光滑,屈趾肌腱滑动距离较长,肌腱滑动受限较轻(P < 0.05),但两组最大抗断裂载荷差异无显著性意义(P > 0.05);扫描电镜和组织学观察结果显示,对照组胶原纤维排列紊乱,实验组胶原纤维排列整齐。实验组转化生长因子β1和Ⅰ型胶原mRNA表达水平均低于对照组(P < 0.05)。证实6-磷酸果糖能有效抑制转化生长因子β1在肌腱损伤修复中的作用,减轻粘连形成。     

Ⅰ型胶原蛋白生物膜在损伤肌腱内源性愈合过程中的作用

目的探讨Ⅰ型胶原蛋白生物膜材料在损伤肌腱内源性愈合过程中的作用。方法选取16只健康SD大鼠随机分成实验组和对照组,每组8只。通过手术切割缝合方法建立大鼠损伤肌腱模型,采用改良Kessler法修复损伤的肌腱。实验组在损伤肌腱修复后使用Ⅰ型胶原蛋白生物膜包裹处理后关闭伤口,对照组在损伤肌腱修复后直接关闭伤口,分别于治疗后第1、2、3、4周取材,HE染色观察肌腱愈合情况,免疫荧光(IF法)检测肌腱愈合过程中Ⅰ型胶原蛋白的表达情况。结果随着治疗时间推移,肉眼观察到实验组肌腱光滑,与周围组织极少有粘连;对照组肌腱损伤处与周围组织粘连明显。HE染色发现,实验组肌腱细胞及胶原纤维沉积呈线性排列,较为整齐;对照组肌腱组织周围可见大量成纤维细胞及毛细血管向肌腱细胞浸润,与肌腱细胞融合,胶原排列紊乱,实验组肌腱愈合质量明显优于对照组。免疫荧光检测发现,2组成熟新生肌腱细胞多表达Ⅰ型胶原,核被染成蓝色荧光,显微镜下观察可见荧光足够亮,并能稳定较长时间;通过染色细胞计数,治疗后1~4周实验组Ⅰ型胶原蛋白表达高于对照组(P<0.05),胶原纤维排列更加有序(P<0.05)。2组表达Ⅰ型胶原蛋白特性的细胞比例比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ⅰ型胶原蛋白生物膜材料在损伤肌腱内源性愈合过程中有促进作用。     

组织工程滑膜化肌健移植的实验研究

目的：观察用组织工程学方法形成的滑膜化肌鞘内移植后的形态变化。方法：在30只兔后肢的第2践腱鞘内移植入滑膜化肌腱段替代趾深屈肌腱。在不同时相点观察移植肌腱的愈合状况，粘连程度及屈趾功能。结果：滑膜化肌腱与受体肌腱之间形成了牢固的纤维性结合，粘连轻。结论：用组织工程学方法构建的滑膜化肌腱可以作为一种新的肌腱移植材料。     

壳聚糖/PLGA乳化膜预防鸡趾屈肌腱粘连的实验研究

目的研究壳聚糖／PLGA乳化膜预防鸡趾鞘管区屈肌腱粘连的效果。方法雌性成年种禽45只，随机分成3组．每组15只。A组为对照组，B组为PLGA膜组，C组为壳聚糖／PLGA乳化膜组。将左足三、四趾趾浅屈肌腱切除，横断趾深屈肌腱，作改良Kessler法缝合．B、C两组分别局部包裹PLGA膜及壳聚糖／PLGA乳化膜。术后2、4、6周取材，分别行大体观察、组织学检查和生物力学测定。结果组织学检查显示：3组肌腱愈合进程无明显差异，B组局部白细胞浸润较其他两组明显。两实验组缝合处粘连评分及将肌腱牵出鞘管所需最大力量与对照组相比差异有显著统计学意义（P〈0．05）。结论局部应用PLGA膜及壳聚糖／PLGA乳化膜均能减轻肌腱术后粘连，前者局部炎症反应较明显，而后者无明显炎症反应发生．因而壳聚糖／PLGA乳化膜是一种较理想的预防肌腱粘连的可降解材料。     

肌腱细胞转化生长因子β及其受体表达:6-磷酸果糖的抑制效应(英文)

背景:转化生长因子β在肌腱愈合与粘连形成中具有重要的作用,抑制转化生长因子β及其受体表达可起到一定的防止肌腱术后粘连作用。目的:探讨转化生长因子β天然抑制剂6-磷酸果糖对兔屈趾肌腱腱鞘、腱外膜和腱内膜细胞转化生长因子β及其受体的影响。方法:取兔屈趾肌腱分离培养腱鞘、腱外膜和腱内膜细胞。3种细胞分别加入6-磷酸果糖(实验组)或不加6-磷酸果糖(对照组)培养。采用酶联免疫吸附实验定量检测转化生长因子β及其受体的表达,原位杂交和免疫组织化学观察观测转化生长因子β1的表达。结果与结论:实验组细胞转化生长因子β及其受体的表达均较对照组下降(P0.05)。实验组3种细胞阳性转化生长因子β1mRNA表达率及细胞内转化生长因子β1mRNA表达强度均较对照组明显降低(P0.05)。免疫组化显示加入6-磷酸果糖培养后,3种细胞转化生长因子β1表达均明显降低。     

无滑膜肌腱滑膜化的组织工程学研究

我们将兔趾腱鞘内滑膜组织进行体外培养,经原代培养和传代培养,制成滑膜细胞悬液,再把兔腱鞘外无滑膜肌腱段放入滑膜细胞悬液中混全培养。经光镜、扫描电镜和免疫组织化学检测。结果显示,滑膜细胞爬行并覆盖了无滑膜肌腱段的表面,使无滑膜肌腱形成了有滑膜肌腱。     

脱细胞羊膜预防生物衍生肌腱修复鸡屈趾肌腱Ⅱ区缺损修复后的粘连

背景：羊膜有预防肌腱修复后粘连的作用,但存在一定的免疫排斥反应。 目的：探讨脱细胞羊膜对生物衍生肌腱修复鸡屈趾深肌腱Ⅱ区缺损修复后肌腱粘连的预防作用。 方法：分别以罗曼鸡右爪的第2,3,4趾将实验分成生物衍生肌腱组,生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组以及自体肌腱组,建立屈趾深肌腱Ⅱ区1 cm缺损模型。以生物衍生肌腱桥接第2,3趾缺损,以自体肌腱桥接第4趾的肌腱缺损,在第3趾的生物衍生肌腱和上下吻合口周围包裹完整的脱细胞羊膜。 结果与结论：生物衍生肌腱组与自体肌腱组移植物为外源性愈合,生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组羊膜有效地防止了成纤维细胞向修复区域内浸润,形成内源性愈合。肌腱粘连程度生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组优于生物衍生肌腱组和自体肌腱组,生物衍生肌腱组和自体肌腱组相似,移植物周围的炎症反应生物衍生肌腱+脱细胞羊膜组>生物衍生肌腱组>自体肌腱组。证实脱细胞羊膜能通过机械性阻挡周围肉芽组织向修复区域内生长而防止外源性愈合造成的肌腱粘连。     

核心蛋白聚糖对鼠肌腱细胞I型胶原及其mRNA的影响

目的:探讨核心蛋白聚糖(Decorin,DCN)对大鼠肌腱细胞I型胶原的影响,为进一步临床应用提供理论依据。方法:50μg/μL的DCN作用大鼠肌腱细胞12h后,采用免疫细胞化学,免疫荧光方法观察DCN对大鼠肌腱细胞I型胶原蛋白的影响,采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测DCN对大鼠肌腱细胞I型胶原mRNA表达的影响。结果:DCN在早期能够明显减少肌腱细胞的I型胶原蛋白的合成,免疫荧光定量分析实验组和对照组相差显著;DCN早期还能够显著下调肌腱细胞I型胶原蛋白mRNA水平的表达。结论:DCN在早期对大鼠肌腱细胞I型胶原的形成起着抑制作用。     

体内移植羊膜对家兔肌腱损伤模型肌腱愈合的影响

研究的目的在于观察羊膜体内移植对肌腱损伤修复的影响。60 只跟腱损伤家兔动物模型采用同体对照动物实验方法,大体观察伤口愈合、肌腱粘连及肌腱肥大情况,并分别于术后第 2、4、6 周等3个时间点取跟腱,HE染色观察损伤区域炎细胞浸润和成纤维细胞数量,免疫组化染色观察胶原纤维排列塑形状况,拉伸试验测定肌腱弹性模量。另取 4 只家兔不做肌腱切断术作为正常对照,在第 0周 测定肌腱弹性模量。全部实验动物皮肤切口在术后 1 周 内基本愈合,未发生伤口感染情况。羊膜实验组跟腱粘连动物数量和肌腱断裂区域肥大程度低于阴性对照组(P<0.05)。术后第 2 周,两组动物炎症反应均达到最高值,但羊膜实验组炎细胞（包括中性粒细胞和单核细胞）浸润数量低于阴性对照组(P<0.05)。两组实验动物样本中成纤维细胞数量和胶原纤维积累数量无明显差异（P >0.05）,但羊膜实验组成纤维细胞和胶原纤维排列更具有序性,尤其是在术后第 6 周,明显好于阴性对照组。术后第 2 周和第4 周,羊膜实验组肌腱弹性模量均优于阴性对照组(P <0.05)。羊膜具有促进肌腱早期愈合和抗炎、抗粘连作用。     

新鲜羊膜与脱细胞羊膜修复腱鞘缺损预防肌腱粘连北大核心

背景:羊膜独有的结构可阻止某些物质通过,能保证包裹内组织正常营养供应,而且具有抗粘连、组织相容性好、炎性反应轻、纤维包裹少及可降解等特性。目的:比较新鲜羊膜及脱细胞羊膜修复腱鞘缺损,预防肌腱粘连和促进肌腱愈合的作用。方法:取60只雄性来亨鸡,制作双足第三足趾制备肌腱及腱鞘损伤模型,随机分为3组修复,新鲜羊膜组采用新鲜人羊膜修复腱鞘缺损,脱细胞羊膜组采用人脱细胞羊膜修复腱鞘缺损,对照组不做腱鞘修复。修复后进行第三足趾组织学观察及生物力学测试。结果与结论:①组织学观察:修复后2周,3组均存在充血水肿及炎症反应,新鲜羊膜组最轻,对照组最严重,3组水肿及炎症反应随时间延长逐渐减轻。修复12周,各组假鞘较修复后4周明显成熟,新鲜羊膜组及脱细胞羊膜组假鞘表面细胞致密层状排列整齐,表面光滑;对照组假鞘表面细胞排列紊乱,结构松散,可见表面纤维组织突出假鞘表面;②生物力学测试:脱细胞羊膜组、新鲜羊膜组修复后4,8,12周的肌腱滑动距离均大于对照组(P<0.05),前2组间比较差异无显著性意义;脱细胞羊膜组、新鲜羊膜组修复后4,8周的肌腱最大拉伸断裂强度高于对照组(P<0.05),且新鲜羊膜组高于脱细胞羊膜组(P<0.05),3组修复后12周的肌腱最大拉伸断裂强度无差异;③结果表明:新鲜羊膜和脱细胞羊膜均可用于重建腱鞘缺损,预防肌腱粘连,新鲜羊膜在促进早期肌腱愈合方面优于脱细胞羊膜。     

异种生物型防肌腱粘连膜的兔实验研究

目的研究不同异种生物型膜预防新西兰大白兔趾伸肌腱粘连的效果.方法成年新西兰大门兔54只,不分性别,随机分A、B、C组,每组18只,A组为正常对照组,B组为超薄膜组,C组为薄膜组.将新两兰大白兔左足第三趾伸肌腱切开,再缝合,B、C两组分别局部包裹超薄膜及薄膜.手术后2、4、6周取材,分别行大体观察、组织学检杳和炎性反应评估.结果组织学检查显示,两组肌腱愈合进程无明显差异.B组肌腱内未见明显炎性反应,外保护膜薄而均匀,炎性反应较轻.C组肌腱炎性反应较重,外保护膜出现水肿与纤维素样变性.结论局部应用超薄膜及薄膜均能减轻肌腱术后粘连,前者局部炎性反应较轻,而后者见明显炎性反应.超薄膜是一种较理想的预防肌腱粘连的可降解材料.     

脱细胞异体真皮结合玻璃酸钠在腱鞘重建中的应用

背景:脱细胞异体真皮被自体组织取代后即不被机体视为异物,可减少局部炎症细胞浸润,减轻炎症反应,能够达到重建腱鞘后在体内永久存留的可能性。目的:探寻脱细胞异体真皮重建腱鞘结合玻璃酸钠预防肌腱粘连松解后再粘连的效果。方法:将腕部肌腱损伤修复后粘连需要再次手术行肌腱松解的56例患者随机分为试验组(n=26)与对照组(n=30)。试验组肌腱粘连行肌腱松解后,以脱细胞异体真皮缝合成直径大于肌腱的套管状套于肌腱粘连处,使套管达到远近端未粘连部分各1 cm,缝合固定重建腱鞘两端于周围组织,套管内注射玻璃酸钠,缝合伤口;对照组肌腱松解后直接缝合伤口。术后随访半年,对比两组肌腱松解情况及再次粘连发生情况。结果与结论:试验组26例患者51根肌腱,有效49根,无效2根,有效率为96%;对照组30例患者58根肌腱,有效46根,无效12根,有效率为79%,两组有效率比较差异有显著性意义(P0.05)。表明以脱细胞异体真皮重建腱鞘结合玻璃酸钠预防肌腱粘连松解后再粘连效果明显。     

无滑膜肌腱滑膜化的实验研究及其意义

无滑膜肌腱滑膜化的实验研究及其意义张正治，刘正津，糜建红第三军医大学重庆６３００３８本实验将家兔的鞘外无滑膜肌腱段放入膝关节腔内进行在体肌腱培养，另将胎儿无滑膜肌腱段体外与滑膜细胞联合培养，培养的肌腱段经组织学切片，免疫组化染色，扫描电镜观察。结果显...     

聚合物表面生物修饰对肌腱细胞黏附特性的影响

为了探讨增强肌腱细胞与聚合物材料黏附力学特性的措施 ,采用生物可降解聚合物—乳酸与羟基乙酸共聚物 85 / 15 ,制成透光的薄膜 ,在膜表面裱衬聚赖氨酸的基础上 ,表面裱衬细胞外基质 ( I型胶原蛋白、纤维粘连蛋白 ,以及相应的抗体 )和生长因子 (类胰岛素生长因子 1) ,接种转化人胚肌腱细胞后 ,利用微吸管实验技术测定转化人胚肌腱细胞与聚合物薄膜的黏附力。结果显示 :在聚合物薄膜表面裱衬纤维粘连蛋白或 I型胶原蛋白 ,可明显提高转化人胚肌腱细胞与聚合物薄膜的黏附力 ( P<0 .0 5 ) ,但若在此基础上进一步分别复合裱衬纤维粘连蛋白抗体或 I型胶原蛋白抗体 ,则引起转化人胚肌腱细胞与聚合物薄膜的黏附力明显下降 ( P<0 .0 5 ) ;肌腱细胞对聚合物薄膜的黏附力与细胞外基质蛋白 (纤维粘连蛋白或 I型胶原蛋白 )的裱衬浓度有很好的依赖性 ;I型胶原蛋白和纤维粘连蛋白介导转化人胚肌腱细胞与聚合物薄膜的特异性黏附作用 ;二者复合裱衬浓度达到一定比例时 ,可产生协同作用 ,增强黏附效果 ;这种特异性黏附作用可被相应的抗体分子所抑制 ;生长因子对转化人胚肌腱细胞有明显的促黏附作用。提示 ,材料表面生物修饰可促进转化人胚肌腱细胞与聚合物的黏附作用 ,这对构建组织工程化肌腱具有重要的指导意义     

核心蛋白聚糖对鼠肌腱细胞Ⅰ型胶原及其mRNA的影响

目的：探讨核心蛋白聚糖（Decorin，DCN）对大鼠肌腱细胞Ⅰ型胶原的影响，为进一步临床应用提供理论依据。方法：50μg/μL的DCN作用大鼠肌腱细胞12h后，采用免疫细胞化学，免疫荧光方法观察DCN对大鼠肌腱细胞Ⅰ型胶原蛋白的影响，采用半定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测DCN对大鼠肌腱细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。结果：DCN在早期能够明显减少肌腱细胞的Ⅰ型胶原蛋白的合成，免疫荧光定量分析实验组和对照组相差显著；DCN早期还能够显著下调肌腱细胞Ⅰ型胶原蛋白mRNA水平的表达。结论：DCN在早期对大鼠肌腱细胞Ⅰ型胶原的形成起着抑制作用。     

Decorin对僵直膝关节滑膜B型细胞增殖及I型胶原蛋白表达的影响

目的:探讨重组核心蛋白聚糖(decorin)对人僵直膝关节滑膜B型细胞的增殖和Ⅰ型前胶原蛋白(PcⅠ)mRNA表达及Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)合成的影响,为decorin治疗人膝关节僵直提供理论依据。方法:分离培养人僵直膝关节滑膜B型细胞,分别加入不同浓度(0.1、5和10 mg/L)的decorin;培养24 h、48 h和72 h后用MTT法测定关节滑膜B型细胞的活力;用流式细胞术检测滑膜B型细胞的周期和凋亡;RT-PCR法检测滑膜B型细胞的PcⅠmRNA表达;Western blot检测ColⅠ的合成。结果:5和10 mg/L的decorin可有效降低滑膜B型细胞的活力(P0.05),明显增加处于G0/G1期细胞的百分比(P0.05),并下调PcⅠmRNA的表达,抑制ColⅠ的合成;同时实验组和对照组均未检测到终末期凋亡细胞。结论:Decorin可抑制人僵直膝关节滑膜B型细胞的增殖、PcⅠmRNA的表达和ColⅠ的合成,在防治膝关节僵直中可能起一定的作用。     

无滑膜肌腱滑膜化的实验研究

实验将胎儿指屈肌腱鞘内滑膜组织进行体外培养，经原代培养和传代培养制成滑膜细胞悬液，再与胎儿掌长肌肌腱联合培养。结果显示，滑膜细胞爬行并覆盖了掌长肌肌腱的表面。为无滑膜肌腱滑膜化提供了实验形态学依据。     

可吸收表皮生长因子复合膜防止肌腱粘连的研究

背景：采用液态分子生物材料作为屏障预防肌腱粘连发生,存在药物降解快、流失量大、屏障作用不理想等问题,因此研究者们越来越多的倾向于膜态屏障材料的研制开发。同时发现肌腱损伤后,腱细胞在多种内源性的生长因子作用下增殖分化,促进了肌腱的内源性愈合,但究竟哪一种因子是肌腱愈合的特异性因子,也是学者们研究的焦点之一。 目的：观察表皮生长因子复合胶原膜在预防鞘管区肌腱粘连、促进肌腱内源性愈合中的作用。 方法：将30只10月龄雄性leghorn公鸡随机分为3组,每组10只。将每只鸡的左足第三趾造成挤压撕脱伤模型,用改良Kessler缝合法缝接。断端分别包裹复合有表皮生长因子的胶原膜、单纯的胶原膜以及断端不加任何处理。术后4周,对标本进行大体观察、生物力学测试、光镜、电镜等观察。 结果与结论：表皮生长因子胶原膜组肌腱粘连程度较轻,腱缝合段内的胶原纤维数量多,以粗大的Ⅰ型胶原为主;成纤维细胞数量少,腱细胞成熟。单纯胶原膜组肌腱粘连较轻,但腱缝合段内的胶原纤维数量少,排列稀疏,以纤细的Ⅲ型胶原为主;空白对照组肌腱与周围组织粘连重,腱缝合段内的胶原纤维数量较多,排列紊乱,Ⅰ、Ⅲ型胶原交错排列。结果表明表皮生长因子来促进肌腱的内源性愈合,可降解胶原膜修复腱鞘可阻止肌腱的外源性愈合,从而达到防止肌腱粘连的目的。     

心脏淋巴循环阻断后心肌间质I、III型胶原蛋白mRNA的表达

目的观察兔心脏淋巴循环阻断后I、III型胶原蛋白变化的规律,并探讨其机制。方法将34只健康成年新西兰白兔随机分为实验组和对照组,每组各半。阻断实验组动物心脏淋巴循环,用原位杂交的方法测定各个观察时期I、III型胶原蛋白mRNA的表达。分别于术前、术后3、7、14、30、60d取静脉血,应用ELISA法测定血清中PICP、PIIINP的浓度。结果术后7、14、30dI、III型胶原蛋白mRNA的表达明显强于其它各观察期和对照组。实验组术后7、14、30d血清中PICP、PIIINP水平:明显高于术前、术后3d和60d(P<0.05),也明显高于相应对照组(P<0.05);术前、术后3、60d以及与对照组间无明显差异(P>0.05);I、III型胶原蛋白mRNA的表达与血清中PICP、PIIINP变化一致。结论兔心脏淋巴循环阻断后,心肌间质中I、III型胶原蛋白于第7d开始合成增加,持续至30、60d恢复正常。I、III型胶原蛋白增加是心脏淋巴循环阻断后心肌间质纤维化的原因之一。