疏肝健脾方药对肝郁脾虚证荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的：观察肝郁脾虚因素刺激对荷瘤S180小鼠肿瘤生长和腹腔巨噬细胞功能的影响，以及疏肝健脾方药对该模型的反证作用。方法：昆明小鼠右前腋下接种S180肉瘤细胞12h后，给予肝郁脾虚因素刺激，治疗组给予疏肝健脾方药0．3ml／只，连续10d。小鼠于造模后第10天全部处死，测定巨噬细胞功能，并称取瘤重。结果：荷瘤小鼠经肝郁脾虚因素刺激后，与肿瘤组比较，其巨噬细胞各噬能力(P〈0．05)、杀瘤能力(P＜0．01)和产生N0的能力明显下降(P＜0．01)，且瘤重明显增大(P＜0．01)；经疏肝健脾方药治疗后，不仅能明显改善巨噬细胞功能，而且还能减轻瘤重。结论：肝郁脾虚因素刺激能抑制荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞功能，并能促进肿瘤细胞的生长。应用硫肝健脾方药能明显改善肝郁脾虚证荷瘤小鼠巨噬细胞的功能和减缓肿瘤细胞的生长。     

健脾理气颗粒对H22肝癌小鼠抑瘤机制的实验研究

目的:探讨健脾理气颗粒对H22肝癌小鼠的抑瘤作用机制。方法:采用细胞接种的方法建立H22肝癌小鼠动物模型,将小鼠分成3组:正常荷瘤组、健脾理气颗粒荷瘤组、健脾理气颗粒脾虚荷瘤组,各10只。检测健脾理气颗粒对H22肝癌小鼠体质量、抑瘤率、血清微量DNA含量、转移指标VEGF表达、凋亡指标Bcl-2表达、诱导分化指标C-myc表达和增值指标PCNA表达的影响。结果:正常荷瘤组小鼠体质量明显减轻,健脾理气颗粒荷瘤组和健脾理气颗粒脾虚荷瘤组小鼠体质量无明显变化,与正常荷瘤组比较具有统计学意义(P<0.05);健脾理气颗粒荷瘤组抑瘤率为28.1%(P<0.05),健脾理气颗粒脾虚荷瘤组为32.4%(P<0.01),具有统计学意义;健脾理气颗粒荷瘤组、健脾理气颗粒脾虚荷瘤组可减少血清微量DNA的表达物,与正常荷瘤组比较,具有统计学意义(P<0.05);健脾理气颗粒荷瘤组、健脾理气颗粒脾虚荷瘤组可降低VEGF的表达,与正常荷瘤组比较,具有统计学意义(P<0.05);健脾理气颗粒脾虚荷瘤组Bcl-2的表达比正常荷瘤组低(P<0.05);健脾理气颗粒荷瘤组、健脾理气颗粒脾虚荷瘤组可下调C-myc的表达,与正常荷瘤组比较,具有统计学意义(P<0.05);正常荷瘤组、健脾理气颗粒荷瘤组、健脾理气颗粒脾虚荷瘤组的PCNA表达无差别。结论:健脾理气颗粒能抑制H22肝癌肿瘤的生长,其作用机制可能是抑制了VEGF的表达,下调了Bcl-2和C-myc的表达,并表现为血清微量DNA含量的下降。     

熟地黄多糖诱导H_(22)荷瘤小鼠细胞凋亡作用的研究

目的:探讨熟地黄多糖体内诱导肿瘤细胞凋亡的作用机理,观察熟地黄多糖对肿瘤细胞中Bcl-2蛋白表达的影响及细胞凋亡形态学上的变化,为临床应用提供实验依据。方法:采用H22肝癌腹水瘤株接种小鼠制备模型,随机分为模型组、阳性对照组、熟地黄多糖组。免疫组化法检测肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达、TUNEL法检测细胞凋亡指数。结果:与模型组比较,熟地黄多糖组的Bcl-2蛋白平均光密度值降低,与模型组比较差异显著(P0.01);熟地黄多糖组的凋亡指数明显上升(P0.05)。结论:熟地黄多糖对H22荷瘤小鼠肿瘤组织中Bcl-2蛋白的表达有明显的抑制作用,使凋亡细胞数目明显增多,熟地黄多糖能有效诱导H22荷瘤小鼠肿瘤细胞发生凋亡。     

健脾理气方药对荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨健脾理气方药对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用及其抗肿瘤机制。方法:建立小鼠脾虚肝郁的动物模型,再选用小鼠Hca-F腹水型肝癌细胞株,制作肿瘤动物模型,观察健脾理气方药对荷瘤小鼠外周血中T淋巴细胞亚群的调节作用。结果:健脾理气方药可以使CD4+TP细胞表达增加,CD+8T细胞表达降低。结论:健脾理气方药能够通过调节荷瘤小鼠异常的免疫状态而发挥其抗肿瘤作用。     

熟地黄多糖对H22荷瘤小鼠细胞色素C和Caspase-3蛋白的影响

目的:探讨熟地黄多糖对H22荷瘤小鼠线粒体凋亡途径中细胞色素C和Caspase-3的作用机制。方法:用H22肝癌腹水瘤株接种小鼠右侧腋下构建实体瘤模型,随机分组为模型组、环磷酰胺组、熟地黄多糖组,连续灌胃给药8 d。剥离肿瘤组织,应用免疫组化法分别检测肿瘤组织中细胞色素C与Caspase-3的表达情况。结果:熟地黄多糖可使H22瘤小鼠肿瘤组织中细胞色素C和Caspase-3的表达水平明显增高,与模型组比较差异显著(P0.01)。结论:熟地黄多糖能上调H22荷瘤小鼠肿瘤内细胞色素C和Caspase-3的表达,其机制可能是促进线粒体释放细胞色素C及其Caspase-3的激活,启动线粒体凋亡途径,从而诱导肿瘤细胞凋亡来发挥抗肿瘤作用。     

小柴胡汤诱导荷瘤小鼠S_(180)细胞凋亡及对细胞周期的影响

目的探讨小柴胡汤SRBD对荷瘤小鼠S180的抑瘤作用及可能机制。方法通过体内实验,观察不同浓度SRBD对小鼠肉瘤S180的抑制作用,用流式细胞仪(FCM)检测法研究SRBD诱导肿瘤细胞凋亡以及对肿瘤细胞周期的影响。结果SRBD中、小剂量组中SRBD对荷瘤鼠S180细胞有明显抑制作用,各剂量组SRBD均可诱导荷瘤鼠S180细胞凋亡,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);SRBD中、小剂量组S期细胞数明显减少(P<0.05),G0/G1期细胞数明显增加(P<0.05),S180细胞增殖指数明显下降(P<0.05)。结论SRBD对小鼠肉瘤S180的生长具有抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡及抑制癌细胞增殖周期有关。     

珠子参抑制小鼠肝癌及诱导细胞凋亡的研究

目的：观察珠子参对小鼠H22肝癌的抑制作用及其机理。方法：建立小鼠肝癌实体瘤和腹水瘤模型，观察珠子参对荷瘤小鼠抑瘤率和生命延长率，放免法（RIA）检测实体瘤小鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量，流式细胞仪技术（FCM）检测肿瘤细胞凋亡并进行周期分析。结果：珠子参能显著抑制肿瘤生长，抑瘤率达44．89％，且能明显延长荷瘤小鼠生命；珠子参组小鼠血清中TNF—α浓度高于正常对照组，而比模型对照组低（P〈0．05）；FCM分析显示，珠子参各组G0／G1期和S期细胞（%）减少，而G2／M期细胞和凋亡细胞（％）增加。结论：珠子参对H22肝癌小鼠具有良好的抑瘤作用，其作用机制可能与珠子参阻止G2／M期细胞转换而影响癌细胞在细胞周期中的进程，干扰S期DNA合成以及诱导小鼠肝癌细胞凋亡有关；此外珠子参能明显抑制荷瘤小鼠TNF—α水平的异常增高，使其维持在一定水平而发挥抗肿瘤、调节机体免疫力等作用。     

健脾扶正法对脾虚荷瘤化疗鼠NK,IL—2活性的影响

应用中西医结合塑模型的方法，复制了小鼠脾虚荷瘤模型。用相应的健脾方药，观察了健脾扶正法对脾虚荷瘤模型小鼠化疗后脾细胞ＮＫ及ＩＬ－２活性的影响。结果表明，化疗配合健脾扶正方药各组ＮＫ、ＩＬ－２活性明显高于单纯化疗各组且尤以化配合滋脾阴方组为著。     

疏肝健脾方药对慢性胃炎肝郁证模型大鼠外在表征及NO、ET的影响

目的:研究疏肝健脾方药对慢性胃炎肝郁证模型大鼠外在表征及血清一氧化氮(NO)和内皮素(ET)的影响,探讨其疗效机制。方法:采用氨水加慢性束缚法复制慢性胃炎肝郁证模型,设正常组、模型组(病证组)、疏肝健脾方药高剂量组、疏肝健脾方药低剂量组。测定NO含量(硝酸还原酶法)及ET含量(ELISA法)。结果:病证组大鼠外在表征发生明显改变。各给药组大鼠的在给药后外在表征发生好转。病证组大鼠ET、NO逐渐升高,而给药组ET水平均低于病证组(P0.05),NO未见明显变化。结论:疏肝健脾方药可通过调节ET水平,改善慢性胃炎肝郁证的外在表征以及胃血管血流,从而发挥较好的慢性胃炎防治作用。     

健脾扶正法对脾虚荷瘤化疗鼠NK、IL－2活性的影响

应用中西医结合塑造模型的方法，复制了小鼠脾虚（包括脾气虚、脾阳虚和脾阴虚证）荷瘤模型。用相应的健脾方药，观察了健脾扶正法对脾虚荷瘤模型小鼠化疗后脾细胞ＮＫ及ＩＬ—２活性的影响。结果表明，化疗配合健脾扶正方药各组ＮＫ、ＩＬ—２活性明显高于单纯化疗各组（Ｐ＜０．０５或０．０１）且尤以化疗配合滋脾阴方组为著。提示健脾扶正方药可提高肿瘤化疗机体的免疫机能，从而对化疗起减毒增效作用。     

肝郁、脾虚和肝郁脾虚证模型大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴功能的变化及柴疏四君子汤的作用

目的：比较肝郁、脾虚和肝郁脾虚模型大鼠甲状腺功能的变化及应用疏肝健脾方后的效用。方法：大鼠随机分为正常对照组、肝郁组、脾虚组、肝郁脾虚组、肝郁柴疏四君子汤组（肝郁治疗组）、脾虚柴疏四君子汤组（脾虚治疗组）、肝郁脾虚柴疏四君子汤组（肝郁脾虚治疗组）7组,每组10只。肝郁组、脾虚组、肝郁脾虚组及其各治疗组大鼠分别采用慢性束缚、过度疲劳+饮食失节、慢性束缚+过度疲劳+饮食失节法造模,正常对照组不予处理;3个模型治疗组分别于造模第2周末（即造模第15天起）,按3.57 g·kg^-1给予大鼠柴疏四君子汤颗粒灌胃,连续2周;各模型组和正常对照组给予等量蒸馏水。实验第29天,测定各组大鼠血清三碘甲腺原氨酸（T₃）、甲状腺素（T₄）、促甲状腺激素（TSH）、血清和下丘脑促甲状腺激素释放激素（TRH）。结果：与正常组相比,肝郁组、脾虚组和肝郁脾虚组大鼠血清T3,T4,TRH均显著降低（P<0.05）,TSH均显著升高（P<0.05）;脾虚组和肝郁脾虚组大鼠下丘脑TRH均显著降低（P<0.05）;肝郁组大鼠下丘脑TRH无明显变化。与肝郁组相比,肝郁柴疏四君子汤治疗组大鼠血清T4显著升高（P<0.05）,TSH显著降低（P<0.05）,血清T3TRH和下丘脑TRH无明显变化;与脾虚组相比,脾虚柴疏四君子汤治疗组大鼠血清T3显著升高（P<0.05）,TSH显著降低（P<0.05）,下丘脑TRH有升高趋势,血清T4,TRH无明显变化;与肝郁脾虚组相比,肝郁脾虚柴疏四君子汤治疗组大鼠血清T3,下丘脑TRH均显著升高（P<0.05）,血清TSH显著降低（P<0.05）,血清T4,TRH无明显变化。结论：肝郁、脾虚、肝郁脾虚三证模型大鼠存在甲状腺功能减低并伴有下丘脑-垂体-甲状腺轴调节异常,其中肝郁证存在下丘脑TRH的释放障碍,脾虚和肝郁脾虚则同时还存在TRH合成的抑制。柴疏四君子汤对3个证候模型的甲状腺功能及其轴调节具有一定的改善作用,但以对肝郁脾虚证的作用最优。     

解郁肝舒胶囊联合阿德福韦酯、联苯双酯治疗慢性乙型肝炎52例

目的:探讨解郁肝舒胶囊联合阿德福韦酯、联苯双酯治疗慢性乙型肝炎(CHB)的临床疗效及对CHB患者免疫调节功能的影响.方法:103例CHB患者(肝郁脾虚证)随机分成观察组52例和对照组51例.对照组口服阿德福韦酯片,10 mg/次,1次/d;联苯双酯片,25 ～ 50 mg/次,3次/d,口服,至肝功能正常后4周停服.观察组在此基础上加用解郁肝舒胶囊,3粒/次,3次/d.两组疗程均为24周.检测e抗原(HBeAg)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及HBV-DNA,观察肝郁脾虚证证候积分,检测T细胞亚群和血清免疫球蛋白.结果:治疗后两组血清HBV-DNA水平及ALT均呈下降趋势,治疗后24周观察组HBV-DNA低于对照组(P＜0.01);治疗后12,24周观察组ALT水平均低于对照组(P＜0.01);治疗后12,24周观察组ALT复常例数均高于对照组(P＜0.05);治疗后观察组HBV-DNA转阴例数高于对照组(P＜0.05);观察组CD3+,CD4+及CD4+/CD8+均明显上升并高于对照组,CD8+明显下降并低于对照组(P ＜0.05,P＜0.01);观察组IgG,IgA及IgM水平均明显降低,且低于对照组(P＜0.01);观察组治疗后胃胀、胁肋胀痛、腹胀、食少纳呆、便澹不爽、情绪抑郁、善太息及肝郁脾虚证总分均明显低于对照组(P＜0.01).结论:解郁肝舒胶囊联合阿德福韦酯、联苯双酯能抗乙肝病毒、保护肝功能、减轻临床症状,其作用机制可能与调节细胞免疫与体液免疫功能有关.     

肝郁脾虚因素促进DEN诱发大鼠实验性肝癌的研究

目的：观察肝郁脾虚因素刺激对二乙基亚硝胺（DEN）诱发大鼠实验性肝癌发生及免疫功能的影响。方法：建立大鼠实验性肝癌肝郁脾虚证动物模型。大鼠给予诱癌剂（DEN70mg/kg灌胃，每周1次，连续8周），同时给予肝郁脾虚（束缚加饮食失节法）刺激至第19周，断头处死，做病理切片，HER染色，镜下观察肝组织病变；取肝组织用流式细胞术检测DNA含量；测定脾脏T，B淋巴细胞转化率和腹腔巨程式细胞吞噬中性红能力。结果：肝郁脾虚因素可明显降低该模型大鼠的体重和免疫功能并可使肝细胞DNA含量发生异常变化。结论：肝郁脾虚因素可促进DEN诱发大鼠实验性肝癌的发生发展。     

疏肝健脾合养心安神法治疗肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征临床观察

目的:观察疏肝健脾合养心安神法治疗腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚型的临床疗效.方法:选取腹泻型肠易激综合征肝郁脾虚型患者共60例,采用随机数字表法分为两组各30例,治疗组给予痛泻要方(疏肝健脾)合甘麦大枣汤加减(养心安神)治疗;对照组给予马来酸曲美布汀片治疗.疗程均为4周,比较两组患者治疗前后的主要临床症状、精神状态评分及...     

小半夏加茯苓颗粒对荷瘤小鼠抑瘤及免疫调节作用的研究

目的研究小半夏加茯苓颗粒对小鼠S180、H22实体瘤的抑制作用以及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法建立S180、H22荷瘤小鼠模型,观察小半夏加茯苓颗粒的抑瘤作用,并检测各组小鼠的脾T淋巴细胞亚群的分布、CoA诱导的脾淋巴细胞增殖活性以及血清中TNF-α的含量。结果小半夏加茯苓颗粒对S180和H22荷瘤小鼠的肿瘤均具有明显抑制作用,抑瘤率分别为11.5%和9.3%;同时小半夏加茯苓颗粒可明显上调荷瘤小鼠CD4+、CD8+T细胞数量(P<0.01)及CD4+/CD8+比值(P<0.05);小半夏加茯苓颗粒可明显增强CoA诱导的荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力(P<0.01)以及血清中TNF-α的含量(P<0.05)。结论小半夏加茯苓颗粒可增强荷瘤小鼠的免疫功能,抑制模型鼠肿瘤的生长。     

蝴蝶草提取物体内抗肿瘤作用的研究

目的:观察壮药蝴蝶草提取物体内抗肿瘤作用.方法:取生长良好的小鼠移植肿瘤S180,H22细胞,在小鼠前肢腋窝皮下接种0.2 mL瘤细胞悬液,接种24 h后,随机分成5组,即蝴蝶草提取物低、中、高剂量组,荷瘤对照组,阳性对照组,每组10只,雌雄各半,蝴蝶草提取物低、中、高剂量组分别为3,6,12 g·kg-1,ig每天1次,连续给药10d,观察壮药蝴蝶草提取物对S180肉瘤小鼠和H22肝癌小鼠的抑瘤率,对荷瘤小鼠的免疫功能和造血系统的影响,以及对荷瘤小鼠生命延长率的影响.结果:与荷瘤对照组比,壮药蝴蝶草提取物对小鼠移植肿瘤S180,H22具有明显的抑制作用(P＜0.01或P＜0.05),其中高剂量的抑瘤率分别为54.42％,60.77％;能显著提高S180肉瘤小鼠和H22肝癌小鼠的生命延长率(P＜0.01或P＜0.05),与哪一组比较？其中高剂量的延长率分别为82.13％,83.10％.对荷瘤小鼠的免疫功能(脾脏指数和胸腺指数)和造血系统无明显影响.结论:壮药蝴蝶草提取物对荷瘤S180和H22小鼠肿瘤增殖有较好的抑制作用,能明显延长荷瘤小鼠的生存时间.     

齐墩果酸对H22荷瘤小鼠肿瘤组织中细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的:通过研究齐墩果酸在H22荷瘤小鼠肿瘤组织中细胞凋亡相关蛋白的表达的影响,探讨其在肿瘤发生、发展过程中的可能作用及意义。方法:建立H22荷瘤小鼠实体瘤模型进行体内试验,将50只已接种H22细胞株的小鼠随机分为模型组,环磷酰胺40 mg·kg-1组,齐墩果酸低、中、高剂量组(1.25,2.50,5.00 mg·kg-1),连续灌胃给药10 d;处死小鼠,检测肝/体比及脾脏指数;采用免疫组化法检测瘤体内凋亡抑制基因生存素(survivin)及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的蛋白表达水平;利用原位末端标记法检测凋亡指数。结果:齐墩果酸可改善H22荷瘤小鼠的肝/体比和脾指数,齐墩果酸低、中、高剂量组对H22荷瘤小鼠肿瘤组织中survivin蛋白表达水平比模型组均显著降低(P0.01);齐墩果酸高、中剂量组对H22荷瘤小鼠肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达水平与模型组比较显著降低(P0.01,P0.05);细胞经齐墩果酸处理后,survivin,Bcl-2表达下调,齐墩果酸各组细胞凋亡指数与模型组比较均显著升高,差异显著(P0.01)。结论:齐墩果酸可通过抑制H22荷瘤小鼠肿瘤细胞中survivin及Bcl-2蛋白的表达,提高凋亡率,诱导肿瘤细胞凋亡,还可改善荷瘤小鼠机体免疫力。survivin,Bcl-2异常表达与肿瘤的发生密切相关,通过共同调节凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

石见穿对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的:观察石见穿对肝癌H22小鼠肿瘤生长的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:肝癌H22荷瘤小鼠随机分为5组:模型组、石见穿提取物高、中、低(40,10,2.5 g·kg-1 ig)3个剂量组和阳性药环磷酰胺(CTX,0.025 g·kg-1,ip)对照组.连续10d.于第11天观测抑瘤率、脾指数、胸腺指数、血清中肿瘤坏死因子-a(TNF-α)和血骨内皮细胞生长因子(VEGF)的含量.结果:与模型组比较,石见穿提取物高、中、低剂量组的抑瘤率分别为23.83％,48.93％ (P ＜0.01)和27.48 (P＜0.05);石见穿提取物中、低剂量组脾指数和胸腺指数升高,但差异无统计学意义;石见穿提取物各剂量组血清中TNF-α和VEGF含量下降,以中剂量组VEGF含量下降明显,模型组(28.64±7.18)pg·mL-1,中剂量组(21.22 +5.60)pg·mL-1(P＜0.05).结论:石见穿提取物对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用,其作用机制可能与下调细胞因子VEGF含量有关.     

化积止痛巴布剂穴位贴敷配合益气化积方内服对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的探究化积止痛巴布剂穴位贴敷配合益气化积方内服对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其作用机理。方法选合格的SPF级昆明种雌性小鼠50只,分为5组,即空白组、模型组、药物组、穴贴组、药物+穴贴组。接种瘤株,各实验组分别给予相应治疗。14d后,观察不同处理方法对H22荷瘤小鼠瘤质量、抑瘤率的影响。结果药物+穴贴组和药物组的瘤质量与模型组比较差异具有统计学意义(P0.01);药物组、穴贴组、药物+穴贴组的抑瘤率分别为22.4%、11.2%、41.1%。结论化积止痛巴布剂穴位贴敷配合益气化积方内服均能减小瘤质量,对H22荷瘤小鼠肿瘤有明显抑制作用,抗肿瘤的机理可能是多环节的。