低氧诱导因子-1/低氧反应元件通路在心肌保护中的研究进展

背景 低氧诱导因子-1 (hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是目前公认的在缺氧状态下发挥重要作用的核转录因子,其活化后可介导低氧反应保护作用,在一定程度上能够减轻心肌的缺血/再灌注损伤(ischemic reperfusion injury,I/RI).目的 探究HIF-1/低氧反应元件(hypoxia response element,HRE)通路是如何被激活并发挥心肌保护的作用. 内容 从HIF-I的概述、调节以及HIF-1/HRE通路的激活机制及其心肌保护作用方面进行综述,并以HIF-1为靶点探究后处理的心肌保护作用的机制,对其在心肌保护作用中与其他关键性的转录因子之间的内在联系作一简要综述. 趋向 后处理能否激活HIF-1/HRE通路诱导红细胞生成素(erythropoietin,EPO)、血红素加氧酶1(hemeoxygenase1,HO-1)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等保护性蛋白的表达,以减轻心肌I/RI,尚需进一步探讨.     

褪黑素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察褪黑素(Mel)对大鼠肝组织caspase-3表达的影响及对肝缺血再灌注损伤的保护作用.方法 将72只Wistar大鼠,随机分为褪黑素处理3、6、12、24 h组(Mel组),同样乙醇溶媒对照组(Alc组)和生理盐水对照组(NS组)也分别按3、6、12、24 h各自分为4组,总共为12组.建立肝缺血再灌注损伤模型,于不同时点测定血清肝组织生化酶:ALT、AKP、对肝组织进行Caspase-3免疫组织化学染色.结果 ALT在再灌注后各时点Mel组均显著低于Alc及NS对照组(P＜0.05),AKP在再灌注后6、12、24 h,Mel组显著低于Alc及NS对照组(P＜0.05),Mel组再灌注后各时点的Caspase-3染色阳性细胞率均显著低于对照组(Alc组和Ns组,P＜0.05),以上各项指标在各时点Alc组与NS组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Mel能够减轻大鼠肝缺血再灌注损伤时的肝功能损害,抑制肝细胞Caspase-3的表达,减少肝细胞凋亡,对大鼠肝脏缺血再灌注损伤具有保护作用.     

缺血再灌注损伤对肝脏免疫原性的影响

目的 观察缺血再灌注损伤对肝脏免疫原性的影响.方法 30只大鼠均分为3组,利用免疫荧光及Western blol检测缺血30min再灌注组及缺血60min再灌注组及对照组的肝脏中共刺激分子B7蛋白的表达水平.结果 正常肝脏B7-1、B7-2表达处于极低水平(0.035±0.005、0.025±0.004),缺血再灌注后肝脏B7-1、B7-2的蛋白表达明显升高(P<0.01),缺血再灌注60min组的B7-1、B7-2的表达水平明显高于缺血30min再灌注组(B7-1:0.070±0.017比0.051±0.008,B7-2:0.042±0.004.比0.037±0.004,P<0.01).结论 缺血再灌注损伤使共刺激分子B7蛋白表达升高,提示缺血再灌注损伤可使移植肝免疫原性升高,这些均能促进急性排斥反应的发生.     

Nitric Oxide Regulates Expression of Sonic Hedgehog and Hypoxia-Inducible Factor-1α in an Experimental Model of Kidney Ischemia-Reperfusion

This study was designed to determine the effect of L-arginine on hypoxia inducible factor alpha (HIF-1 α) and Sonic hedgehog (Shh) levels considered to be involved in the development of ischemia/reperfusion (I/R) injury. Unilaterally nephrectomized Sprague-Dawley rats were subjected to 60 minutes of left renal ischemia followed by 45 minutes of reperfusion. Group 1 were sham-operated animals; group 2, I-R/Untreated animals; and group 3, I-R/L-Arg-treated animals. Serum creatinine, blood urea nitrogen (BUN), and kidney malondialdehyde (MDA) levels were determined as well as examining the kidneys histologically. The treatment of rats with L-Arg produced a significant reduction in the levels of BUN, creatinine, MDA, and histopathological score compared to renal I/R groups. The Shh expression in the tubulus epithelia were intensely increased in the I-R/L-Arg group when compared to that of the Sham-control and the I-R/untreated groups. Additionally, the HIF-1α expression in the tubulus epithelia and the interstitial spaces were intensely increased in the I-R/L-Arg group. These findings suggest that NO reduces the renal dysfunction associated with I/R of the kidney and may act as a trigger to induce Shh and HIF-1 activity.     

低氧诱导因子1α高表达对小鼠急性缺血性肾损伤的影响

目的 探讨低氧预处理诱导低氧诱导因子1α（HIF-1α）高表达对小鼠肾缺血再灌注损伤（IRI）的影响及其可能机制。 方法 雄性C57BL/6N小鼠35只，随机分为健康对照组、氯化钴（CoCl2）组和8%O2组，每组10只；预处理12 h后，以上3组各取5只，分为缺血再灌注（IR）组、CoCl2＋IR组、8%O2＋IR组；另设5只作为假手术对照组。采用夹闭双侧肾蒂30 min的方法建立肾缺血动物模型，观察CoCl2和8％O2预处理对小鼠IR 24 h后肾功能、肾组织病理和相关肾损伤指标的影响及与CoCl2和8％O2诱导HIF-1α及其保护性靶基因血红素氧化酶1（HO-1）表达之间的关系。 结果 CoCl2＋IR组小鼠的肾功能[BUN (35.2±12.2) mmol/L，Scr (34.0±9.7) μmol/L]和8%O2＋IR组小鼠的肾功能[BUN (31.8±9.1) mmol/L，Scr (41.6±10.6) μmol/L]均较IR组[BUN (65.8±2.6) mmol/L，Scr (229.5±11.2) μmol/L]显著改善（P < 0.01）；与此相一致，CoCl2＋IR组和8%O2＋IR组的病理学改变、细胞凋亡程度和波形蛋白的表达均明显低于IR组。另外，CoCl2组和8%O2组中HIF-1α及其靶基因HO-1的表达明显高于健康对照组。 结论 低氧预处理可上调体内HIF-1α表达，对小鼠IRI肾脏具有良好保护效果     

Effect of metallothionein on the renal injury induced by chronic intermittent hypoxia in mice

Objective To investigate the mechanism of chronic intermittent hypoxia (CIH)- induced renal injury and the protection of metallothionein (MT). Methods 8-10 weeks old male MT-1 transgenic (MT-TG) mice (n=12) and the wide type (WT) mice (n=12) were randomly divided into two groups respectively, Air mimic control(Ctrl) group (n=6) and CIH group (n=6). The period of chronic intermittent hypoxia was continued for 8 weeks. The CIH paradigm consisted of 20.9% O2 and 8% O2 fraction of inspiration O2 (FiO2) alternation cycles (30 episodes per hour) with 20 seconds at the nadir FiO2 for 12 hours/day during daylight. The nadir hemoglobin oxygen saturations mainly ranged from 60% to 70%. Urine, blood, kidney were collected at the end of study respectively. Histopathology, Western blotting and colorimetric method for related target were performed respectively. Results In WT mice, renal fibrosis, the expression of connective tissue growth factor (CTGF), type-1 plasminogen activator inhibitor (PAI - 1), hypoxia - inducible factor 1α (HIF - 1α), transforming growth factor β1 (TGF-β1), phosphorylated Smad2 and the MDA content were significantly increased by CIH (P＜0.01). In WT mice, the expression of MT detected by using Western blotting was significantly decreased by CIH (P＜0.01). However, in MT-TG mice, above-mentioned indicators showed no significant difference between CIH and Ctrl group. Conclusions Oxidative stresses is the main mechanism of CIH - induced renal injury. The possible molecular mechanism of CIH - induced renal injury is that CIH increases the expression of HIF - 1α in kidney tissue, then activate the TGF - β1 - Smad2 signaling pathway and lead to the renal fibrosis. The protection of MT on CIH-induced renal injury may be via its antioxidant effect.     

乌司他丁对失血性休克大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的：探讨乌司他丁对失血性休克大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法：24只雄性Wista大鼠随机分为假手术组、生理盐水治疗组、乌司他丁治疗组,每组8只。建立大鼠失血性休克模型。乌司他丁治疗组,予以乌司他丁25000U·kg-1加入2mL生理盐水静脉推注,并完成液体复苏;生理盐水治疗组予以2mL生理盐水静脉推注,并完成复苏;假手术组,除不放血和输液外,其他处理与模型相同。观察3h后处死大鼠,取血液离心分离血浆检测肝功能指标、血清肿瘤坏死因子（TNF-α）;取肝右叶2块肝组织,1块用于肝组织病理改变和肝细胞凋亡观察;1块用于肝组织匀浆,离心取上清液进行肝组织MDA、SOD、髓过氧化物酶（MPO）检测。结果：失血性休克大鼠肝脏再灌注3h后,生理盐水治疗组肝组织发生了严重缺血再灌注损伤,肝细胞水样变,肝窦淤血变窄,间质大量炎性细胞浸润,而乌司他丁治疗组仅有轻度再灌注损伤。乌司他丁治疗组肝细胞凋亡、肝功能指标ALT、AST、血清TNF-α水平、肝组织MDA含量、MPO活性较生理盐水治疗组均有不同程度的减少（P〈0.05）,SOD活性较生理盐水治疗组升高（P〈0.05）。结论：乌司他丁对大鼠失血性休克再灌注后肝脏损伤具有保护作用,其机制可能与抑制中性粒细胞浸润、抑制氧自由基的形成、抗肝细胞凋亡相关。     

热休克蛋白在缺血后处理器官保护中的作用

背景 缺血后处理(ischemic postconditioning,IPo)减轻器官缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)的效果确切,临床实用性强,成为近年来的研究热点.热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是细胞应激反应的生物学标志及内源性保护蛋白,参与器官I/RI过程.目的 总结国内外对IPo与HSP在器官I/RI中作用的研究成果,为IPo器官保护机制的研究提供思路.内容 国内外学者研究证实IPo可以减轻多种器官的I/RI,并将其应用于临床,取得一定的疗效.HSP通过减轻再灌注过程中的氧化应激反应和炎症反应,减少细胞凋亡,保护细胞骨架的完整性,发挥细胞保护作用.趋势 IPo器官保护作用的机制研究应成为广大学者今后的研究方向,与其为临床应用提供理论基础.     

碱性成纤维细胞生长因子对兔全脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对兔脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 24只大白兔,随机均分为假手术组、对照组和bFGF组,以“四血管阻断 体循环低血压”法制作兔心搏骤停后脑缺血再灌注损伤模型。bFGF组在缺血30min时将bFGF 30μg／kg经耳缘静脉注入,此后以10μg·kg-1·h-1微泵输入持续6 h,对照组仅应用等剂量的生理盐水,假手术组仅分离血管而不作其他处理。持续监测动脉血压、体温、心率,分别于夹闭血管前(T0)、开放血管即刻(T1)、开放血管后 0．5(T2)、1(T3)、3(T4)、6h(T5)测定血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100B蛋白浓度,实验结束取脑组织测定脑水含量,在电镜下观察其超微结构。结果对照组、bFGF组T4 ,5时血清NSE、S-100B浓度高于假手术组(P<0．01);bFGF组T4 ,5时血清NSE、S-100B浓度低于对照组(P<0．05)。血清NSE与S- 100B浓度间的相关系数为0．736(P<0．01)。对照组和bFGF组脑水含量高于假手术组(P<0．01)。 bFGF组脑组织病理改变比对照组轻。结论 bFGF对兔脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

丙泊酚对全脑缺血/再灌注损伤大鼠保护作用研究

目的探讨丙白酚对大鼠全脑缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury,I/RI）的保护作用。方法65只Wistar雄性大鼠采用完全随机法分为5组：假手术组（S组）、缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)组(I/R)组、丙泊酚组1(P1)、丙泊酚组2(P2)、丙泊酚组...     

阿片类药物减轻急性缺血/再灌注损伤及相关机制

背景 缺血预处理对于器官缺血/再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury,I/RI）具有强大的保护作用,但其临床应用受到时机以及伦理学的限制.近年来有研究发现阿片类药物预处理以及后处理对组织器官I/RI同样具有保护作用,其既不损伤器官又能产生与缺血预处理相同的效果,是更为可行的治疗措施. 目的 在将阿片类药物处理推广至临床应用前,仍需进行更多大规模的临床研究.拟就阿片类处理减轻I/RI的发展过程及其作用机制进行探讨. 内容 阿片类药物处理I/RI的几种方式及其机制. 趋向 阿片类药物处理比较其他损伤性处理方式更易操作,且对I/RI同样具有保护作用,有望成为日后治疗的热点之一.     

肿瘤坏死因子α、肾损伤分子1在急性缺血再灌注损伤大鼠肾脏及血清中的表达变化

目的观察肾脏急性缺血再灌注损伤(ischermic reperfusion,I/R)后大鼠肾脏及血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、肾损伤分子1(kidney injury molecule-1,Kim-1)的表达变化。方法选取雄性SD大鼠96只,体质量250~300 g,随机分为假手术组(Sham组,n=48),缺血再灌注组(I/R组,n=48),通过夹闭双肾动脉建立大鼠肾脏缺血再灌注模型,各组于术后2h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h每时点随机选取8只大鼠,分别取血及肾皮质标本。全自动生化分析仪检测血清肌酐、尿素氮,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清TNF-α、Kirm-1水平,免疫组织化学检测肾组织TNF-α、Kim-1表达。结果与Sham组血清肌酐、尿素氮水平[(50.8±6.8)μmol/L、(4.7±0.5)mmol/L]比较,I/R组均于I/R损伤后6 h开始升高[血清肌酐I/R 6 h时为(79.6±8.8)μmol/L、尿素氮I/R 6 h时为(9.3±1.6)mmol/L,均P0.05]。ELISA检测结果显示,与Sham组血清TNF-α(843.0±60.5)、Kim-1(453.7±56.4)水平比较,I/R组均于I/R 2 h开始升高[I/R 2 h时血清TNF-α为(944.2±68.3)、Kim-1为(1081.3±126.2),均P0.05],48 h达高峰,但TNF-α于72 h明显下降(3 094.4±230.5),血清Kim-1水平48~72 h保持高值。免疫组织化学检测显示I/R损伤后TNF-α、Kim-1主要表达于肾小管,且均在12 h表达最多。结论血清TNF-α与Kim-1能较早提示急性肾脏损伤,但Kim-1优于TNF-α。     

NFκB抑制剂对大鼠肝脏移植再灌注损伤的保护作用

目的　探讨大鼠肝脏移植后核因子κB(NFκB)活化对炎性介质表达和中性粒细胞浸润集聚的影响。方法　供受体鼠分别于术前 15min腹腔注射NFκB抑制剂脯氨酸二硫代氨基甲酸酯 (ProDTC 15mg/kg)。 结果　与对照组相比 ,应用ProDTC者移植后NFκBp6 5含量、肿瘤坏死因子 α(TNF α)、巨噬细胞炎性蛋白 2 (MIP 2 )、细胞间粘附分子 1(ICAM 1)mRNA表达和蛋白表达明显下降 ;髓过氧化物酶 (MPO)活性明显减低 (P均 <0 0 1)。ProDTC也显著降低天门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶 (ALT)、乳酸脱氢酶 (LDH)水平 (P <0 0 1)。结论　ProDTC抑制移植后NFκB活化从而下调了TNF α、MIP 2、ICAM 1表达从而减轻中性粒细胞浸润及肝脏缺血再灌注损伤。     

静脉注射含饱和氢气生理盐水减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 研究静脉注射含饱和氢气生理盐水对小鼠肾脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制.方法 健康、雄性的C57BL/6小鼠随机分为3组,每组10只.假手术组(SO组)小鼠仅接受中线开腹、双侧肾蒂游离及关腹操作;缺血再灌注组(IR组)小鼠用无损伤动脉夹同时钳夹双侧肾蒂,阻断45 min,制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射生理盐水,5 ml/kg;实验组小鼠制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射含饱和氢气生理盐水,5 ml/kg.各组小鼠于肾脏再灌注6 h时检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr);检测肾组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的含量;观察肾脏组织形态学变化并检测肾小管上皮细胞的凋亡情况;观察肾组织中巨噬细胞的浸润情况;检测各组小鼠肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和IL-17 mRNA的水平.结果 实验组血清BUN和Scr水平明显低于IR组(P<0.05).实验组肾组织病理改变较IR组明显减轻,其肾小管损伤评分明显低于IR组(P<0.01),肾小管上皮细胞凋亡明显轻于IR组(P<0.05).实验组肾组织内MDA含量低于IR组(P<0.05).实验组小鼠肾组织内中性粒细胞和巨噬细胞的浸润较IR组减少(P<0.05).实验组TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-17mRNA的水平均低于IR组(P<0.05).结论 静脉注射含饱和氢气生理盐水能够在一定程度上减轻肾脏IR损伤,其机制可能与抑制肾脏IR后炎症反应有关.     

瘦素对肠缺血/再灌注损伤大鼠肝脏功能的影响及其机制

目的:探讨瘦素(leptin)对大鼠肠缺血/再灌注(I/R)损伤时肝脏的保护作用及其机制。方法:99只Wistar大鼠随机分成11组:假手术组,肠缺血45min再灌注15min、30min、1h、3h、6h的肠I/R损伤组和相应时间点的leptin治疗组,每组9只大鼠。肠I/R损伤组和leptin治疗组建立大鼠肠I/R损伤模型;leptin治疗组于再灌注的同时腹腔注射leptin0.2mg/kg。假手术组术后1h处死,其余各组大鼠于相应时间点处死,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT),肝组织中白细胞介素-6(IL-6)、IL-10和超氧化物歧化酶(SOD)水平的动态变化。结果:肠I/R组血清ALT随着时间变化逐渐升高,肝组织中的IL-6水平于再灌注3h显著升高,而IL-10水平基本处于平稳的波动状态,SOD活性于再灌注早期呈略微下降趋势,1h后逐步回升至假手术组水平;leptin治疗后血清ALT水平基本稳定在较低水平,再灌注3h后,肝组织IL-6水平较损伤组明显降低,同时SOD活性显著提高,IL-10水平于再灌注15min时突然增高,随即恢复到假手术组水平。结论:leptin对大鼠肠I/R造成的肝脏功能损伤具有改善作用,可能与其调节肝组织中的细胞因子释放、提高肝脏的抗氧化损伤能力有关。     

黄腐酸钠对肝硬化大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的　观察黄腐酸钠对肝硬化大鼠肝脏的缺血再灌注损伤的保护作用。方法　用四氯化碳橄榄油制作肝硬化大鼠模型后 ,术前 3d灌胃 2 %黄腐酸钠 10 0mg/ (kg·d) ,每天两次。两次肝门阻断后于下腔静脉取血 ,检测血清ET 1、TNF α、IL 6值 ,同时取肝左叶肝脏组织病理检查。结果　术后黄腐酸钠组血清ET 1、TNF α、IL 6值均较对照组降低。与对照组比较均有显著性意义 (P <0 0 5 )。光学显微镜检查 ,黄腐酸钠组的肝细胞病理损伤程度比对照组轻。结论　术前用黄腐酸钠对肝硬化大鼠的肝缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

P选择素、细胞间黏附分子-1在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤中的作用

目的观察P选择素（Ps）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在大鼠胰腺移植缺血再灌注损伤中的作用及Ps单克隆抗体的治疗作用。方法75只SD大鼠随机分为假手术组、移植组和治疗组。移植组和治疗组均进行全胰十二指肠移植术，但治疗组于再灌注前5rain静脉注射Ps单克隆抗体。3组分别于腹主动脉开放后1（n=5）、3（n=5）、6（n=5）h取血测定血清淀粉酶水平，并切取胰腺标本进行组织病理学观察及Ps、ICAM．1免疫组织化学染色。结果移植组胰腺组织损伤随再灌注时间的延长而加重，血淀粉酶升高，与中性粒细胞浸润直接相关；而治疗组胰腺组织损伤不明显，血淀粉酶减低。移植组各时段Ps、ICAM-1均有阳性表达，且Ps再灌注1h为表达高峰，ICAM．1随再灌注时间延长表达逐渐增加，假手术组、治疗组Ps、ICAM-1不表达。结论Ps及ICAM-1按一定时间顺序参与胰腺移植缺血再灌注损伤的病理过程；Ps可能是胰腺移植缺血再灌注损伤的起始因素；抗Ps单克隆抗体对移植胰腺缺血再灌注损伤有保护作用。     

Antioxidant and protective effects of silymarin on ischemia and reperfusion injury in the kidney tissues of rats

Background Renal ischemia/reperfusion (I/R) injury is a major cause of acute renal failure. Silymarin is extracted from Silybum marianum and Cynara cardunculus seeds and fruits. The aim of this study is to investigate whether silymarin administration prevents the damage induced by I/R in rat kidneys. Materials and methods Thirty male Wistar rats were randomly divided into five experimental groups (n = 6, each) as follows; control group, sham-operated group, I/R group, silymarin group, and I/R + silymarin group. In the I/R and I/R + silymarin groups, both renal arteries were occluded using nontraumatic microvascular clamps for 45 min. Then, at the end of 24 h of reperfusion, the animals were killed. Kidney function tests, the serum and tissue antioxidant enzymes and oxidant products were determined. Results Animals that were subjected to I/R exhibited significant increase in serum urea, creatinine, and cystatin C levels compared with the rats treated with silymarin prior to the I/R process (P < 0.001). The serum enzymatic activities of superoxide dismutase and glutathione peroxidase significantly decreased in the I/R group; however, this reduction was significantly improved by the treatment with silymarin (P < 0.001 and P < 0.05, respectively). Renal I/R produced a significant increase in serum and tissue malondialdehyde, nitric oxide, and protein carbonyl as compared with controls. Treatment with silymarin resulted in significant reduction in these markers (P < 0.001). Conclusion Based on our findings, silymarin protects the kidneys against I/R injury. This finding may provide a basis for the development of novel therapeutic strategies for protection against the damages caused by I/R.     

抑制低氧诱导因子-1α表达对小鼠肠缺血／再灌注所致肺损伤的影响

目的探讨通过低氧诱导因子-1α（hypoxiainduciblefactor-1α,HIF—1α）抑制剂YC-1预先抑制该基因表达对肠缺血,再灌注（ischemia／reperfusion,I／R）致急性肺损伤的影响。方法6周～8周龄健康雄性C57BL／6小鼠36只,采用随机数字表法随机分为3组（每组12只）：假手术组（S组）、I／R组和I／R±YC—I预处理组（YC—I组）。YC-1组于术前10min腹腔注入YC-1（1mg／kg）,采用夹闭C57BL／6小鼠肠系膜前动脉45min后再灌注6h的方法造成肠YR损伤模型,取小鼠肺标本称重后计算肺湿干重比,苏木素-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色后观察肺组织病理学改变,分光光度法测定髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活性、酶联免疫吸附测定法检测肺组织肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素（interleukin,IL）-1β表达,反转录-PCR法检测HIF-1α、Toll样受体4（toll—likereceptor4,TLR4）mRNA的表达。结果与I／R组比较,预先抑制HIFqct表达使肺实质水肿及中性粒细胞浸润聚集减少,肺组织病理学损伤减轻,肺湿干重比显著降低（RnOI）,MPO活性下调[（1．88±0．82）u／g],TNF-α[（187±20）ng／L）]、IL一1β[（536±54）ng／L）]、HIF-1α、TLR4mRNA的表达水平下降（P〈0．05）。结论YC-1预处理可使肺组织TLR4mRNA表达下调,抑制肠I／R肺组织中促炎细胞因子的释放,明显减轻小鼠肠I／R后急性肺损伤。     

丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血/再灌注损伤中自噬潮的影响

目的 研究丙泊酚预处理对大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)期间自噬潮的影响及其机制. 方法 采用大鼠在体心肌I/R损伤模型,将90只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为5组(每组18只):①假手术组(Sham组),只穿线不结扎;②I/R组;③丙泊酚预处理组(P+I/R组);④Ⅰ型磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)抑制剂A66预处理组(A+I/R组);⑤丙泊酚+A66预处理组(P+A+I/R组).采用结扎冠状动脉左前降支的方法制备心肌I/R模型.除Sham组外,其余各组均缺血30 min,再灌注120 min.缺血前15 min,P+I/R组通过股静脉输注丙泊酚15 mg·kg1·h1;A+I/R组缺血前1h腹腔注射A66溶液10 mg/kg;P+A+I/R组在缺血前1h腹腔注射A66溶液10 mg/kg,缺血前15 min再通过股静脉输注丙泊酚15 mg·kg1·h-1.模型制备后取心肌,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyhetrazolium chloride,TTC)法染色并计算梗死面积百分比,酶标法测定乳酸脱氢酶(lactate dehydwgenase,LDH)活性,Western bolt法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)-Ⅱ、P62蛋白的表达量,电子显微镜定性观察自噬体、自噬溶酶体的数量.结果 与I/R组比较,P+I/R组与P+A+I/R组梗死面积[(50.1±-3.9)％比(26.5±1.3)％、(42.6±1.9)％]显著减小(P＜0.05),血清LDH活性降低,LC3-Ⅱ表达水平降低,P62表达水平升高(P＜0.05),自噬体、自噬溶酶体明显减少.与P+I/R组比较,P+A+I/R组梗死面积[(26.5±1.3)％比(42.6±1.9)％]显著增加(P＜0.05),血清LDH活性升高,LC3-Ⅱ表达水平升高,P62表达水平降低(P＜0.05),自噬体、自噬溶酶体增加. 结论 丙泊酚预处理激活PI3K/蛋白激酶B(pmtein kinase B,Akt)通路,抑制I/R心肌中自噬潮进行,对大鼠心肌I/R损伤产生保护作用.