MRL/lpr狼疮小鼠肾脏明胶酶表达随增龄变化及意义

目的 观察不同周龄MBL/lpr狼疮小鼠肾脏明胶酶的表达及其随增龄而发生的活性变化及意义。方法 取8、16与24周龄RMRL/lpr狼疮小鼠的肾组织进行常规病理检测。利用含有放射自显影的成像乳胶对冷冻肾组织切片进行原位明胶酶活性的检测;利用免疫组织化学检测肾脏明胶酶A与明胶酶B的酶B的蛋白表达变化,十二氨基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PACE）明胶酶谱法检测肾脏明胶酶A、B的活性变化。结果 8周龄狼疮小鼠肾组织吵仅在血管处检测到明胶酶的活性;16与24周龄狼疮小鼠肾小球内明胶酶的净活性明显增加。在肾小球以及肾小管间质上也可检测到明胶酶的活性,乙二胺四乙酸（EDTA）能够抑制肾脏明胶酶的活性,免疫组织化学与SDS-PAGE明胶酶谱法结果显示其肾组织中明胶酶A与明胶酶B的蛋白质表达及活性均明显增加。结论 明胶酶A、B在自发性狼疮小鼠肾炎中的表达及活化随增龄均明显增加,活化态的明胶酶可能在狼疮性肾炎细胞外基质重塑中发挥重要的作用。     

升主动脉缩窄鼠升主动脉瘤的扫描电镜观察

目的：观察升主动脉缩窄鼠升主动脉瘤的形态特征，为动脉瘤的临床和实验研究提供资料。方法：以幼年wistar大鼠制作升主动脉缩窄鼠动脉瘤模型，取出动脉瘤，用扫描电镜观察。结果：动脉瘤的弹力板出现肥大、断裂，弹力板间的弹力纤维广泛破坏；动脉瘤壁中有炎性细胞浸润；平滑肌细胞大部分萎缩或消失；动脉瘤内皮严重受损，部分动脉瘤壁中有红细胞浸润。结论：动脉瘤存在超微结构的改变，提示以上形态学改变是动脉瘤发生的重要病理学基础。     

升主动脉缩窄术后大鼠动脉瘤形态学研究

目的研究升主动脉缩窄术后升主动脉瘤形态学和形成原因。方法将40只WisIar大鼠随机分为对照组和实验组。制备升主动脉缩窄模型,于术后3～5个月取升主动脉,采用光镜、特殊染色及基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-3）免疫组织化学的方法对升主动脉瘤进行观察。结果幼年Wistar大鼠升主动脉缩窄术后3．5个月后产生升主动脉瘤,此模型成瘤率为63．3％,其中夹层动脉瘤成瘤率为36．7％,MMP-2、MMP-3在升主动脉瘤中表达强阳性。结论大鼠升主动脉缩窄术产生升主动脉瘤的机率较高．并旱现MMP-2、MMP-3表达强阳性。     

DQ明胶原位酶谱分析方法在检测乳腺癌组织中明胶酶活性的应用

基质金属蛋白酶家族（MMPs）在肿瘤的侵袭和转移中具有重要的作用．其中最重要的是明胶酶类,包括MMP-2和MMP-9。由于能特异性的降解基底膜的主要成分Ⅳ型胶原而发挥作用,因此又称为Ⅳ型胶原酶。明胶酶以酶原形式分泌,在细胞外被活化后才能发挥作用,促进肿瘤细胞的侵袭和转移。但是以往在明胶酶的检测方法中,未能既检测其活性又能对其进行定位．本实验中所采用的DQ明胶原位酶谱分析的方法可以兼顾这两个方面。     

SD大鼠骨基质明胶吸附骨髓间充质干细胞修复骨缺损的实验研究

目的:探讨大鼠骨基质明胶吸附骨髓间充质干细胞修复骨缺损的可行性。方法:采用第5代(P5)SD大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),经Hoeschst 33344(sigma)荧光杂料标记后,调配制成的1×106个／ml细胞浓度后与骨基质明胶(BMG)共同培养6 h,然后植入SD大鼠双侧胫骨的实验性骨缺损中(A组),同时作胫骨骨缺损单纯BMG植入(B组),无植入物(C组)两组对照。术后8周处死,取骨缺损区组织进行组织学观察,其中A组行荧光染料标记测定以确认骨缺损区的骨痂是否来源于MSCS。结果:①A组:胫骨骨缺损区可见大量新生不规则骨纤维组织、软骨及纤维骨痂填充,可见骨细胞、骨组织和骨小梁,已形成骨髓腔。②B组:胫骨骨缺损区可见大量纤维组织、少量新生不规则骨纤维组织及骨骼肌组织,伴有多核巨细胞和少量炎性细胞,缺损区边缘带有骨痂组织。③C组:胫骨骨缺损区可见大量纤维组织及骨骼肌组织填充生长,伴有多核巨细胞和少量炎性细胞,缺损区边缘带有少量骨痂组织。荧光染色鉴定确认胫骨骨缺损区的骨痂来源于MSCs。结论:大鼠骨基质明胶吸附骨髓间充质干细胞修复骨缺损具有安全性、可行性及有效性。     

优化明胶酶谱法检测自发性高血压大鼠血浆MMP-2和MMP-9活性

目的以优化明胶酶谱法检测自发性高血压大鼠(SHR)血浆基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与-9(MMP-9)的活性。方法以含明胶的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱法为基础,改变孵育时间、工作液成份,采用不同pH值的孵育液及不同冻融次数的样品,观察对基质金属蛋白酶(MMPs)活性的影响。并以优化的酶谱法检测Wistar及自发性高血压大鼠血浆MMPs的相对活性。结果凝胶孵育时间由42 h缩短为17 h不影响酶谱法检测结果。省略漂洗步骤及洗脱液仅使用2.5%Triton X-100、孵育液中去除NaN3及NaCl且电泳后步骤将去离子水更换为蒸馏水也不影响实验结果。孵育液pH值在7.2～8.8范围内均可用于酶谱法。血浆样品反复冻融多达6次不影响酶谱法检测结果。用优化的酶谱法检测结果显示,与Wistar大鼠相比,SHR大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性显著增高。结论优化酶谱法与常规方法相比更为简便经济,检测大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性所得结果一致。     

转化生长因子β1及其2型受体在实验性大鼠升主动脉瘤中的表达

目的 研究转化生长因子β1(TGFβ1)及其2型受体(TGFβRⅡ)在实验性大鼠升主动脉瘤中的表达及其意义. 方法 缩窄幼年Wistar大鼠升主动脉制作升主动脉瘤模型,4个月后处死动物,用免疫组织化学和Western blotting方法 检测动脉瘤壁TGFβ1和TGFβRⅡ的表达. 结果 免疫组织化学显示,TGFβ1表达于动脉瘤和对照组动脉全层;TGFβRⅡ大量表达于动脉瘤增生的内膜和中膜平滑肌层,而对照组表达很弱.Western blotting显示,动脉瘤组织中TGFβ1和TGFβRⅡ表达均强于对照组. 结论 TGFβ1和TGFβRⅡ在动脉瘤中表达强于对照组,TGFβ信号通路可能在动脉瘤形成过程中起重要作用.     

NF-κB及调节活化正常T细胞表达和趋化因子在升主动脉瘤形成中的表达

目的探讨激活的NF-κB及调节活化正常T细胞表达和趋化因子(RANTES)的表达及其在升主动脉瘤形成中的作用。方法4周龄雌性Wistar大鼠40只,随机分成升主动脉瘤组(20只)和正常对照组(20只)。制作升主动脉瘤动物模型,术后3个月取材,免疫组织化学方法分析NF-κB、RANTES的蛋白表达,RT-PCR方法检测其mRNA的表达。结果模型组动脉壁NF-κB和RANTES表达明显升高,而正常动脉壁中未见或极少见NF-κB和RANTES表达。RT-PCR显示,模型组的动脉瘤内NF-κB和RANTES mRNA表达增强,两者呈显著性正相关。结论NF-κB和RANTES在动脉瘤中表达强于对照组,NF-κB和RANTES在升主动脉瘤病变的发生发展过程中可能起重要作用。     

慢性肾病患者血清、尿液中明胶酶变化的临床意义

目的:探讨血、尿MMP-2、MMP-9的水平和活性变化与慢性肾脏病(CKD)患者肾功能及尿蛋白的关系.方法:用ELISA法及明胶酶谱法检测90例CKD患者血、尿明胶酶的水平,其中慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis,CGN)60例,慢性肾小管间质性肾炎(chronic tubuloint...     

"Z"型覆膜支架介入治疗主动脉瘤的实验研究

血管内介入性方法治疗主动脉瘤,具有独特的优点:1.微创,对病人损伤小,术后病人恢复快;2.可适用于有手术禁忌症的病人.     

肝原颗粒对实验动物的毒理学研究

本文报告了肝原颗粒小鼠急性毒性和大鼠90天长期毒性试验。结果表明,肝原颗粒对小鼠灌胃给药的LD_(50)>252g(生药)/kg/次;大鼠90天长期毒性试验对动物一般状况、体重增长、外周血象、肝肾功能及病理组织学检查等未见明显毒性。     

微囊对大鼠松果体细胞作用的实验研究

目的　探讨微囊化处理后大鼠松果体细胞 5羟色胺 N 乙酰转移酶 (NAT)mRNA的表达及细胞微囊的免疫原性 ,进一步明确人工松果体组织的功能活性与免疫屏蔽效能。　方法　海藻酸钠 聚赖氨酸 海藻酸钠生物微胶囊 (APA微囊 )包裹大鼠松果体细胞 ,采用RT PCR技术检测微囊与对照组松果体细胞的NATmRNA表达 ;运用3H标记胸腺嘧啶核苷 (3H TdR)掺入法比较微囊组、空囊组及游离松果体细胞的淋巴细胞转化值。　结果　不同培养时间对照组和微囊组松果体细胞的NATmRNA表达水平无显著差异 ;微囊组淋巴细胞转化值明显低于游离的松果体细胞 (P <0 0 1) ,但仍高于空囊组 (P <0 0 5 )。　结论　微囊包裹不影响松果体细胞NATmRNA的表达 ,表明APA微囊内松果体细胞代谢正常 ,分泌功能旺盛 ;松果体微囊有一定的免疫保护效应 ,但其隔离作用仍不完全。     

我国一些野生哺乳动物主动脉弓上动脉干分枝初步比较解剖

本报告共解剖中国野生哺乳动物115例,隶属5目、12科、24种。对主动脉弓上发出的四条大动脉干,即成对左、右颈总动脉和左、右锁骨下动脉,进行了比较解剖。经分类归纳为二类八型,并对每型血管的分布作了描述。在我们解剖的这些种类中,初步看到一种趋势:在非对称类中,Ⅱa型与Ⅱb型食肉目动物占绝对优势,而在Ⅲ型中则以啮齿目种类居多。     

脱细胞同种异体神经移植物修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的 观察脱细胞处理的同种异体神经移植物修复大鼠坐骨神经缺损的作用。方法 用组织工程学方法制备的大鼠同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损,并对再生神经进行电生理学功能测试,光镜、电镜观察移植物内的再生神经,并进行统计分析。结果 术后13周内,动物未见炎症及排斥反应。用脱细胞处理的同种异体神经移植物修复神经缺损,再生神经的传导功能、纤维数量、轴突直径、有髓纤维占有的面积与自体神经移植对照及计量学上统计分析均无显著性差异。结论 脱细胞处理的同种异体神经移植物具有良好的组织相容性,它对缺损的坐骨神经再生有促进作用。     

实验性铅中毒对大鼠海马神经生长因子基因表达的影响

目的观察实验性铅中毒对大鼠海马神经生长因子(NGF)基因表达的影响,探讨铅致学习记忆损害的分子毒理学机制。方法逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和原位杂交法。结果正常大鼠海马组织可表达NGF mRNA,铅染毒后海马NGF mRNA含量显著下降。海马组织中神经生长因子mRNA表达量与铅染毒时间呈负相关。结论铅可使海马组织神经生长因子基因表达下降。     

腺嘌呤致大鼠雄性不育发病机理的实验研究

目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)超家族的细胞内信号转导分子Smad2、Smad4蛋自在腺嘌呤所致雄性不育的大鼠睾丸内定位、分布及作用机制。方法应用免疫组织化学SABC法检测正常成年及腺嘌呤(300mg／kg)灌胃后第7、14、21d大鼠睾丸中Smad2、Smad4的定位和分布,并通过图像分析系统进行统计学分析,同时应用放射免疫法测定血清中睾酮(T)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的含量。结果Smad2免疫阳性产物位于实验大鼠各级生精细胞及支持细胞的胞质内,Samd4则位于间质细胞的胞质内;灌胃后第21d大鼠睾丸中Smad2、Smad4表达明显高于正常成年及7、14d大鼠,同时,血清中T较正常成年及7、14d大鼠明显降低,LH、FSH明显增高。结论腺嘌呤所致雄性不育可能与Smad2在大鼠睾丸生精细胞中表达增强及Smad4在睾丸间质细胞中表达增强,直接或间接影响睾丸的生精功能有关。     

原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法的研究

介绍一种用原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法在同一切片中显示生长抑素ｍＲＮＡ和相对应的生长抑素。同时还比较了六种不同固定液对原位杂交组织化学和原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法的影响。结果表明Ｚａｍｂｏｎｉ氏固定液用于原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法最佳，而４％多聚甲醛磷酸缓冲液用单纯原位杂交最佳。原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法显示的下丘脑室周核生长抑素免疫反应阳性神经元均含有相应生     

大鼠实验性腹膜炎自愈期间肾上腺皮质组织化学变化的研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠６０只，分为实验性腹膜炎组和空白对照组，实验组大鼠通过腹腔注射剂量为０．６５ｍｌ／ｋｇ的无菌松节油，制成大鼠急性腹膜炎模型；对照组大鼠未经任何处理。将动物于注射后１、３、５、７、１０ｄ处死，取其肾上腺做组织化学染色，注射后１、３、５ｄ，束状带和网状带细胞内脂滴和胆固醇的含量均降低，琥珀酸脱氢酶和３β－羟基类固醇脱氢酶的活性增强，这些变化以注射后３ｄ最明显并以束状带显著，５     

培养的大鼠间皮细胞的形态特点及抗凝与纤溶功能的研究

目的 观察间皮细胞在培养状态下的形态学特征，测定其抗凝与纤溶作用的强度，为血管假体内腔铺被细胞的选择提供依据。方法 取SD大鼠大网膜、主动脉、皮下结缔组织用作间皮、内皮及成纤维细胞的培养。倒置显微镜及扫描电镜下观察各自的形态特点。取3类细胞第3代融合后48h的无血清培养液，放射免疫法测定6-酮-PGF1α(前列环素的代谢产物)的含量，发色底物法测定纤溶酶原激活物活性。结果 在相同培养状态下，间皮细胞生长较快，表现出许多与内皮细胞相似的形态特点。间皮细胞培养液中6-酮-PGF1α浓度显著高于成纤维细胞及内皮细胞培养液中的浓度，纤溶酶原激活物活性也高于成纤维细胞者，但与内皮细胞相比无显著性差异。结论 在相同培养状态下，间皮细胞具有与内皮细胞相似的结构与功能特点，可能为血管假体内腔铺被层的理想材料。