β-榄香烯对胃癌细胞Akt通路活化和凋亡相关蛋白表达的影响

目的：旨在探讨β-榄香烯对人胃癌BGC823细胞Akt通路的活化和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和PARP表达的影响。方法：实验分为对照组和β-榄香烯处理组,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）试验法检测β-榄香烯对人胃癌BGC823细胞的药物敏感性,采用Western blot检测蛋白表达,应用SPSS（13.0软件包）进行统计学分析。结果：β-榄香烯处理胃癌BGC823细胞24h的IC50为46.56μg/ml,选用50μg/ml和200μg/ml的β-榄香烯处理24h,BGC823细胞凋亡率分别为12.33%和42.59%,与对照组相比有统计学差异（P〈0.05）。与对照组相比,β-榄香烯处理组Bcl-2与Bax的比值显著下调、伴有PARP裂解。进一步检测发现β-榄香烯处理组明显下调了Akt的磷酸化水平,从而有效抑制Akt信号转导通路。结论：β-榄香烯可以通过抑制Akt信号通路的活化、下调Bcl-2与Bax的比值和诱导PARP裂解,进而抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

抑制PI3K/Akt通路提高HeLa细胞化疗效果的实验研究

目的探讨抑制PI3K/Akt信号转导通路提高抗癌药物对人宫颈癌HeLa细胞的杀伤作用。方法采用MTT法检测Celecoxib、DDP及Docetaxel单独或联合PI3K抑制剂LY294002对人宫颈癌HeLa细胞的抑制率;采用流式细胞技术检测药物单独或联合作用对HeLa细胞凋亡的影响。结果(1)联合LY294002能够显著提高Celecoxib、DDP及Docetaxel对HeLa细胞抑制率;(2)LY294002与Celecoxib、DDP及Docetaxel的协同治疗指数均小于1,二者起协同治疗作用;(3)联合LY294002能够增加HeLa细胞的凋亡水平。结论抑制PI3K/Akt信号转导通路能够显著提高Celecoxib、DDP及Docetaxel对HeLa细胞杀伤作用。     

PI3K/Akt/mdm2信号通路活化对胃癌细胞阿霉素敏感性的影响

目的 研究PI3K/Akt/mdm2信号通路活化对胃癌细胞阿霉素(DOX)敏感性的影响.方法 分别用DOX和PI3K特异性抑制剂wortmannin处理胃癌细胞株SGC7901,采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡,免疫沉淀法检测PI3K活性,Western blot法检测PI3K-p85、phospho-Akt(S473)、phospho-mdm2(S166)、Akt和p53的表达.结果 DOX能诱导胃癌细胞SGC7901凋亡,且凋亡率与作用时间密切相关,联合应用wortmannin后,可促进胃癌细胞凋亡.DOX作用SGC7901细胞3、6、12和24 h后, PI3K活性逐渐增强,分别为(8.4±1.7)%、(12.7±2.1)%、(17.4±3.2)%和(16.8±2.4)%;同时,还促进Akt、mdm2磷酸化和p53表达.wortmannin可以抑制mdm2磷酸化,进一步增强p53的表达.结论 DOX可以诱导PI3K/Akt通路异常激活,并通过促进mdm2磷酸化降低胃癌细胞化疗敏感性.     

PI3K/Akt信号通路在肿瘤化疗耐药中的作用

磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在细胞内发挥重要的作用,参与了许多生理和病理活动.目前研究发现在许多肿瘤中过度激活的PI3K/Akt信号通路与肿瘤化疗耐药的产生密切相关,体外研究显示采用PI3K/Akt信号通路抑制剂可以逆转肿瘤细胞的耐药.本文简要介绍了PI3K/Akt信号通路的基本组成结构,并重点介绍其在肿瘤化疗耐药中的作用.     

抑制PI3 K/ Akt 通路提高肺腺癌细胞化疗的 效果

 目的　探讨PI3 K/ Akt 信号转导通路抑制剂L Y294002 对肺腺癌细胞株A549 及裸鼠移植瘤化 疗的增敏作用。方法　采用MTT 法及流式细胞仪检测L Y294002 、紫杉醇、L Y294002 联合紫杉醇对 A549 细胞增殖及凋亡的影响;通过裸鼠移植瘤模型检测L Y294002 、紫杉醇、L Y294002 联合紫杉醇对 A549 细胞成瘤性的影响。结果　L Y294002 可增强紫杉醇对A549 细胞的抑制作用,并且可提高其凋亡 率。裸鼠移植瘤实验显示,L Y294002 与紫杉醇均可抑制移植瘤的生长,联用后抑瘤率增加。结论　 L Y294002 可增强紫杉醇对A549 细胞、裸鼠移植瘤的化疗的敏感性,抑制PI3 K/ Akt 信号转导通路可提 高肺腺癌化疗的效果。     

二氢青蒿素通过PTEN/PI3K/Akt通路抑制胃癌细胞的增殖

  目的  探讨二氢青蒿素(dihydroartemisinin, DHA)通过PTEN/PI3K/Akt通路对人胃癌细胞株SGC7901细胞周期的影响及其分子机制。  方法  不同浓度(6.25、12.5、25、50、100μmol/L)DHA作用SGC7901细胞24、48、72h后, 细胞计数法检测SGC7901细胞增殖的情况。不同浓度DHA作用SGC7901细胞24 h后, 流式细胞术测定细胞周期的分布; RT-PCR和Western blotting分别测定cyclin D1、P27的mRNA和蛋白的表达水平; Western blotting测定PTEN、PI3K、p-Akt的表达水平。分别以PTEN特异性小干扰RNA(PTEN-siRNA)及无关序列对照siRNA(non-specific siRNA, NS-siRNA)转染细胞, 加入100μmol/L DHA, 作用SGC7901细胞24 h后, Western blotting测定cyclin D1、P27、PTEN、PI3K、p-Akt的表达水平。  结果  DHA剂量和时间依赖性抑制SGC7901细胞的增殖, 使细胞周期阻滞于G1期(P < 0.05)。RT-PCR和Western blotting分析结果显示, 100μmol/L DHA作用SGC7901细胞24 h后, cyclin D1 mRNA和蛋白表达显著下降, P27 mRNA和蛋白表达显著上升(P < 0.05)。PTEN的蛋白表达显著增加, PI3K和p-Akt的表达水平逐渐下降(P < 0.05)。敲低PTEN表达后, DHA对PI3K和p-Akt的表达水平的影响明显减弱, 与此同时, cyclin D1表达水平升高, P27表达有所下降(P < 0.05)。  结论  DHA通过抑制PTEN/PI3K/Akt信号通路的活化, 影响细胞增殖相关基因cyclin D1和P27的表达, 进而使细胞阻滞于G₀/G₁期, 抑制人胃癌SGC7901细胞的增殖。      

吲哚美辛对胃癌细胞株MKN-45细胞增殖的影响

 流行病学研究发现长期服用非甾体消炎药(NASIDs)的人群消化道肿瘤的发病率显著低于未服用人群[1] ,目前基础研究认为NSAIDs主要作用点为环氧酶(COX)。本实验研究环氧酶抑制剂吲哚美辛(indomethacin)对胃癌细胞株MKN 4 5细胞增殖的影响。1　材料与方法1.1　材料胃癌细胞株MKN 4 5 (低分化腺癌)由山东大学医学院生化教研室提供;吲哚美辛、MTT购自Sigma公司;RP MI16 4 0培养液购自Hyclone公司;其余还有酶联免疫检测仪(DG 30 2 2 ) ;激光流式细胞仪(FACScan) ;透射电镜(HI TACHIH 80 0 ) ;细胞培养箱(FORMASCIENTIFIC) ;倒置显微镜(COIC)等。1.2　方法1.2 .1　吲哚美辛对MKN 4 5细胞形态的影响将对数生长期的MKN 4 5细胞以1×10 6/瓶接种于培养瓶中。37℃,5 %(体积分数)CO2 条件下孵育2 4h后更换培养液,并加入吲哚美辛,使其终浓度分别5 0、10 0、2 5 0、5 0 0 μmol/L ,倒置显微镜下观察细胞形态变化。1.2 .2　吲哚美辛对MKN 4 5细胞的生长...     

温热化疗对胃癌细胞的杀伤作用

目的：评价温热化疗对人胃癌细胞的体外杀伤作用。方法：6株人胃癌细胞（AGS，MKN45，SGC7901，NCI-N87，SNU—1和SNU-16）和临床病例来源胃癌细胞，处理分常温对照、温热、常温化疗和温热化疗4组；MTT评价细胞增殖和细胞毒作用；光镜动态观察细胞基本形态变化；透射电镜和荧光染色定性观察细胞死亡形式；流式细胞术定量分析凋亡和坏死比例。结果：根据MTT和光镜观察，温热和化疗对抑制胃癌细胞增殖具协同作用；联合温热处理能够增强胃癌细胞对CDDP的敏感性，温热化疗抑制胃癌细胞增殖和杀伤胃癌细胞的药物浓度远低于常温化疗；透射电镜和荧光染色显示温热化疗杀伤AGS和SNU—1细胞包括诱导凋亡和坏死两种形式，流式定量分析显示诱导凋亡是主要形式。结论：温热和化疗抑制胃癌细胞增殖具协同作用，温热增强胃癌细胞对化疗的敏感性；温热化疗杀伤胃癌细胞包括诱导凋亡和坏死两种形式，其中凋亡是主要形式。     

顺铂等化疗药物对胃癌细胞端粒酶活性的影响

目的：探讨端粒酶作为化疗敏感性指标的可行性。方法：选择IC50剂量的顺铂，丝裂霉素C，阿霉素及5－氟脲嘧啶和甲酰四氢叶酸处理胃癌细胞，采用半定量TRAP－银染法检测药物处理前后胃癌细胞端粒酶活性。并应用流式细胞学检测细胞周期和细胞凋亡率。结果：顺铂，丝裂霉素C和阿霉素在诱导两细胞凋亡的同时，下调端粒酶活性，且其抑制作用呈时间依赖关系；5－氟脲嘧啶和甲酰四氢叶酸对胃癌细胞端粒酶活性无明显抑制作用，结论：化疗前后细胞端粒酶活性的变化，可作为化疗敏感性指标。     

c-Myc在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨c-Myc在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:免疫组化和qRT-PCR检测胃癌组织及其癌旁组织中c-Myc的表达;qRT-PCR和Western blot检测人胃黏膜细胞GES-1和人胃癌细胞HGC-27、AGS、SGC-7901中c-Myc的表达;HGC-27细胞转染siRNA-NC和siRNA-c-Myc。48 h后,CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测细胞低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）、CXC亚家族受体4（cysteine X cysteine receptor 4,CXCR4）和基质细胞衍生因子（stromal cell derived factor-1,SDF-1）蛋白表达。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中c-Myc mRNA表达和免疫组化评分升高（P＜0.05）。与GES-1组相比,HGC-27组、SGC-7901组和AGS组中c-Myc mRNA和蛋白表达均升高（P＜0.05）。与siRNA-NC组相比,siRNA-c-Myc组细胞在24 h、48 h和72 h增殖能力减弱（P＜0.05）,G0/G1期细胞比例升高（P＜0.05）,G2/M和S期细胞比例降低（P＜0.05）,迁移细胞数和侵袭细胞数减少（P＜0.05）,HIF-1α、CXCR4和SDF-1蛋白表达降低（P＜0.05）。结论:敲低c-Myc可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞周期阻滞,该作用可能是通过抑制HIF-1α/CXCR4通路实现的。     

红花多糖抑制PI3K/Akt信号通路诱导人胃癌细胞凋亡的研究

目的 探讨红花多糖通过抑制PI3K/Akt信号通路调控胃癌细胞凋亡的机制。方法 MTT比色法观察SPS对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖的抑制作用,流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡,实时荧光定量RT-PCR法和Western Blot法检测蛋白激酶B(Akt)基因及蛋白的表达情况。结果 红花多糖在一定范围内以剂量依赖方式和时间依赖方式抑制SGC-7901胃癌细胞生长。流式细胞仪检测,SGC-7901细胞经红花多糖处理24 h,其早期凋亡率、细胞坏死或晚期凋亡率显著增加,呈现明显的剂量依赖性。Real-time PCR和Western Blot检测发现,SPS处理的细胞Akt基因及蛋白表达量明显下降。结论 红花多糖对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖具有明显的抑制作用,该抑制作用具有一定的时间依赖性和剂量依赖性;红花多糖能够下调Akt mRNA表达,降低Akt和p-Akt蛋白的表达量,抑制Akt通路发挥抗肿瘤作用。     

PI3K／Akt途径在朊蛋白介导胃癌耐药中的作用研究

目的：探讨P13K／Akt途径在朊蛋白（PrPc）介导胃癌耐药中的作用。方法：脂质体基因转染法建立高表达PrPc的胃癌细胞亚系。Western印迹检测转染细胞中Akt蛋白的表达。噻唑蓝（MTT）比色法测定单独或联用P13K抑制剂LY294002时转染细胞对化疗药物的敏感性。流式细胞仪检测单独或联用LY294002时转染细胞内阿霉素蓄积和潴留。结果：将PrPc正义载体pcDNA—PrP转入SGC7901,成功建立PrPc高表达胃癌细胞亚系并命名为PS;空载体转染细胞命名为BS。Western—Blot显示磷酸化Akt在PS中的表达较Bs及SGC7901增高,而三者的总Akt则无差别。未经LY294002处理时,在阿霉素或长春新碱的作用下,PS的存活率分别为91．4％±3．4％和89．4％±3．8％,较BS（79．2％±4．3％和75．9％±2．1％）明显增高（均）,PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量分别为4．4±0．3和4．2±0．4,明显低于BS（8．2±0．5和8．0±0．3）（均）;当联合LY294002处理后,PS在两种药物作用下的存活率均随着LY294002浓度的增加逐渐降低,并均在LY294002为30tLmol／L时接近BS（均）,PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量逐渐增高,并均在LY294002为30μmol／L时接近BS（均）。结论：PrPc介导的胃癌耐药与P13K／Akt途径活性密切相关,抑制P13K／Akt途径活性可逆转PrPc介导的胃癌耐药。     

贝母素乙通过调控PI3K/Akt信号通路诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的：探究贝母素乙（Peiminine）对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡的影响及其可能作用机制。方法：采用不同浓度贝母素乙或联合PI3K抑制剂LY294002干预MCF-7细胞,MTT法检测细胞增殖能力;Hoechst33258染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡情况;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化;Western blotting检测细胞中PI3K(p110α)、Akt、p-Akt(ser473)、Bad、Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3以及线粒体和胞浆中细胞色素C(Cyt C)等蛋白表达水平。结果：贝母素乙可呈时间-浓度依赖性抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞出现凋亡形态改变,促进细胞凋亡,并降低线粒体膜电位,上调细胞中Bad、Bax、cleaved-Caspase-3及胞浆中Cyt C蛋白表达水平,下调PI3K(p110α)、p-Akt、Bcl-2和线粒体中Cyt C蛋白表达水平,而Akt蛋白表达水平无显著变化。然而,联合LY294002干预可增强贝母素乙对MCF-7细胞凋亡的促进作用。结论：贝母素乙可诱导乳腺癌MCF-7细胞凋...     

芹菜素通过 PI3K/Akt 信号通路诱导 Hela 细胞凋亡

目的：初探芹菜素（Apigenin）对人宫颈癌细胞 Hela 的抑制机制。方法：MTT 法检测 Apigenin 对 Hela细胞的增殖抑制作用,实时无标记细胞分析技术测量 Apigenin 对 Hela 细胞生长曲线的影响。Western blot 检测 Apigenin 对 Hela 细胞中 PI3K/ Akt 信号通路的影响。结果：与阴性对照组相比,Apigenin 能显著抑制 Hela细胞的增殖（P <0.01）,当药物浓度为20μmol/ L 时抑制率达到（80.5±5.3）%,IC50值为（6.8±0.8）μmol/ L。细胞生长曲线反映,Apigenin 减缓了 Hela 细胞的增殖,对数期细胞经20μmol/ L Apigenin 处理后,细胞数量迅速下降。Western blot 结果显示,Apigenin 能显著抵抗 IGF -1引起的 Akt 激活但并不能降低 PI3K 的磷酸化水平。同时 Apigenin 还能降低 Bcl -2/ Bax 比例,提高 Caspase -3活性,启动细胞线粒体凋亡。结论：Apigenin可以通过 PI3K/ Akt 信号通路促进 Hela 细胞的凋亡。     

PI3K/Akt途径在朊蛋白介导胃癌耐药中的作用研究

目的:探讨PI3K/Akt途径在朊蛋白(PrPc)介导胃癌耐药中的作用.方法:脂质体基因转染法建立高表达PrPc的胃癌细胞亚系.Western印迹检测转染细胞中Akt蛋白的表达.噻唑蓝(MTT) 比色法测定单独或联用PI3K抑制剂LY294002时转染细胞对化疗药物的敏感性.流式细胞仪检测单独或联用LY294002时转染细胞内阿霉素蓄积和潴留.结果:将PrPc正义载体pcDNA-PrP转入SGC7901,成功建立PrPc高表达胃癌细胞亚系并命名为PS;空载体转染细胞命名为BS.Western-Blot显示磷酸化Akt在PS中的表达较BS及SGC7901增高,而三者的总Akt则无差别.未经LY294002处理时,在阿霉素或长春新碱的作用下,PS的存活率分别为91.4%±3.4%和89.4%±3.8%,较BS(79.2%±4.3%和75.9%±2.1%)明显增高(均 ),PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量分别为4.4±0.3和4.2±0.4,明显低于BS(8.2±0.5和8.0±0.3)(均 );当联合LY294002处理后,PS在两种药物作用下的存活率均随着LY294002浓度的增加逐渐降低,并均在LY294002为30μmol/L时接近BS(均 ),PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量逐渐增高,并均在LY294002为30μmol/L时接近BS(均 ).结论:PrPc介导的胃癌耐药与PI3K/ Akt途径活性密切相关,抑制PI3K/ Akt途径活性可逆转PrPc介导的胃癌耐药.     

异莲心碱通过PI3K/Akt/mTOR信号通路影响结肠癌SW480细胞增殖、 凋亡和自噬

目的：探讨异莲心碱（Iso）通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和自噬的影响。方法：用 10、20和40 μmol/L的Iso处理结肠癌SW480细胞,CCK-8法、流式细胞术和WB法分别检测Iso对细胞增殖活力、凋亡和自噬相关 蛋白LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62表达的影响。然后,用20 μmol/L的Iso和25 μmol/L的PI3K激活剂740 Y-P分别处理SW480细胞,将细 胞分为对照组、740 Y-P组、Iso组和Iso+740 Y-P组,流式细胞术、WB法检测Iso和740 Y-P对各组细胞凋亡及细胞中LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、 p62、PI3K、p-PI3K、 mTOR和p-mTOR蛋白表达的影响。结果：10、20和40 μmol/L的Iso处理后,SW480细胞增殖活力均显著下 降（均P<0.05）,细胞凋亡率均显著升高（均P<0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达均显著上调（均P<0.05）,p26蛋白表达显著下调（P<0.05）。 Iso和740 Y-P处理后,与对照组相比,740 Y-P 组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达均显著下降（均P<0.05）,p26、p-PI3K/PI3K和 p-mTOR/mTOR 表达均显著升高（均 P<0.05）;Iso 组 细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达升高（均 P<0.05）,p26、p-PI3K/PI3K和 p-mTOR/mTOR 表达均显著下降（均 P<0.05）;与 740 Y-P 组相比,Iso+740 Y-P 组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达升高（P<0.05）, p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著下降（均P<0.05）;与Iso组相比,Iso+740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达下 降（均P<0.05）,p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著升高（均P<0.05）。结论：Iso通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路 抑制结肠癌SW480细胞增殖并诱导细胞凋亡和自噬。     

银杏内酯B通过阻抑PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制胃癌HGC-27 细胞的恶性生物学行为

目的：探讨银杏内酯B（GKB）是否通过阻抑PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制胃癌HGC-27细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭。方法：将HGC-27细胞分为对照、GKB低剂量（100 mg/L）、GKB高剂量（200 mg/L）、GKB高剂量（200 mg/L）+740Y-P（PI3K激活剂）、Ly294002（PI3K抑制剂）组。采用MTT、Edu、FCM、Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力,qPCR和WB法分别检测各组细胞中PI3K mRNA、Akt mRNA、mTOR mRNA和Ki-67、caspase-3、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白的表达。构建胃癌HGC-27细胞裸鼠移植瘤模型,观察GKB对移植瘤生长的影响,WB法检测移植瘤组织中Ki-67、caspase-3、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白的表达。结果：体外实验结果表明,与对照组相比,GKB低剂量组、GKB高剂量组、Ly294002组HGC-27细胞的增殖活力及细胞增殖率、迁移和侵袭细胞数,PI3K、Akt、mTOR mRNA表达,以及Ki-67、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达均显著降低（均P<0.05）;细胞凋亡率、caspase-3蛋白表达均显著升高（均P<0.05）;740Y-P可部分逆转GKB对HGC-27细胞的抑制作用（均P<0.05）。荷瘤裸鼠实验结果显示,GKB可显著抑制HGC-27细胞裸鼠移植瘤的生长（P<0.05）,且可下调PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达。结论：GKB可通过阻抑PI3K/Akt/mTOR信号通路而抑制胃癌HGC-27细胞增殖、迁移与侵袭并促进其凋亡。     

Activation of PI3K/Akt signaling and hormone resistance in breast cancer

Akt is a serine/threonine kinase that has been demonstrated to play an important role in survival when cells are exposed to different apoptotic stimuli. Recent studies show that aberrant activation of Akt in breast carcinoma is associated with a poor prognosis and resistance to endocrine therapy and chemotherapy. The Akt signaling pathway is currently attracting considerable attention as a new target for effective therapeutic strategies. We investigated the incidence of Akt activation in 252 primary breast carcinomas and relationships among the activation of Akt, HER2 overexpression, hormone receptor expression, and alteration of the PTEN gene. Eighty-four cases (33.3%) were positive for pAkt expression. pAkt was significantly associated with HER2 overexpression (p<0.0001) and LOH at the PTEN gene locus (p<0.01). There was an inverse correlation between pAkt and PR (p<0.05). We also retrospectively examined the relationship between Akt activation and the efficacy of endocrine therapy for metastatic breast cancer. Of these 36 metastatic breast cancer cases, 12 cases (33.4%) were considered to show positive pAkt expression. In the pAkt-positive patients, endocrine therapy demonstrated worse efficacy than in pAkt-negative patients (p<0.01). In addition, the clinical benefit was the smallest in the patients positive both for HER2 and pAkt (p<0.01). The clinical benefit rate of estrogen deprivation therapy with AI or LH-RH agonist was significantly lower in the pAkt-positive patients than that in the pAkt-negative ones (p<0.05), and there was a tendency for the clinical benefit of SERM to be smaller in the pAkt-positive patients (p=0.09). These findings therefore suggest that Akt activation induces endocrine resistance in metastatic breast cancer, irrespective of the kind of endocrine agents that were administered. Our findings indicate that the activation of Akt in the downstream pathway of HER2 plays an important role in resistance to endocrine therapy for breast cancer. Our findings suggest that pAkt may be a useful predictor of resistance to endocrine therapy for breast cancer, while also suggesting that the inhibition of Akt may increase the efficacy of endocrine therapy.     

Knockdown of CLN5 inhibits the tumorigenic properties of glioblastoma cells via the Akt/mTOR signaling pathway

Gliomas are highly malignant tumors with a rapid progression and poor prognosis. The present study investigated the cellular effects of CLN5-knockdown in the glioblastoma (GBM) U251 and U87MG cell lines. The Cell Counting Kit-8 and colony formation assays indicated that CLN5-knockdown inhibited the proliferation of GBM cells. Additionally, the results of the Transwell and scratch assays revealed that CLN5-knockdown significantly inhibited migration and invasion, and the flow cytometry analysis confirmed that apoptosis was promoted. Knockdown of CLN5 downregulated the expression levels of MMP-2, Bcl-2, cyclin D1, CDK4 and CDK6, and upregulated the expression levels of Bax and activated caspase-9. Additionally, it blocked GBM cells in the G1-phase and induced early apoptosis. Knockdown of CLN5 inhibited the activation of the Akt and mTOR signaling pathways in GBM by decreasing the levels of phosphorylated (p)-Akt and p-mTOR. The present data suggested that downregulation of CLN5 may be a potential treatment option for GBM. Knockdown of CLN5 inhibited the development of GBM via the inhibition of the Akt and mTOR signaling pathways.