原发性肝癌组织中明胶酶A基因表达增强

目的　了解基质降解对原发性肝癌的作用。方法　 33例原发性肝细胞癌患者术中取癌组织及癌旁组织 ;提取组织总RNA ;用逆转录共扩增定量PCR方法测定明胶酶A (MMP2 )基因表达水平。结果　肝癌组织明胶酶A基因表达水平 (3 2 0± 0 34 )明显高于癌旁的肝硬化组织 (0 70±0 16 )及正常肝组织 (0 34± 0 0 7)。肝癌患者MMP2 基因表达水平与血清AFP浓度、肿瘤大小无关。结论　明胶酶A在原发性肝癌的进展中可能起重要作用。     

胃癌组织中明胶酶A的表达

目的 探讨明胶酶A在胃癌组织中的表达及其意义。方法 采用免疫组化方法检测36例胃癌组织明胶酶A的表达。结果 明胶酶A在正常胃组织中表达极低（2／14），癌旁组织低表达（7／18），胃癌组织高表达（31／36）。明胶酶A表达与胃癌大小、Lauren分型无关。早期胃癌不表达，进展期胃癌特别是有浆膜侵袭和转移者，其明胶酶A呈显著高表达。明胶酶A表达定位于胃癌基质，以巨噬细胞为主。结论 明胶酶A表达可作为判断胃癌侵袭与转移的标志；巨噬细胞在此过程中可能发挥着重要作用。     

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝细胞癌发生过程中的基质金属蛋白酶动态变化

目的 研究基质金属蛋白酶（MMPs)在肝细胞癌形成过程中的动态变化及作用。方法 采用二乙基亚硝胺（DENA）诱癌建立大鼠肝癌模型。应用明胶酶谱法测定诱癌过程中癌变发生的三个阶段6个时相肝组织中MMP-2和MMP-9的表达及活性。结果 肝癌发生过程中基质金属蛋白酶呈持续升高的趋势，至早期癌变期及肿瘤演进期（16-24周）MMP-2，MMP-9的表达呈一个较高的平台，且发现MMP-2的活性形式表达显著增加。结论 MMPs的表达不同与肝星状细胞的激活和肝细胞癌形成有关。而与肿瘤的结节数及大小无关。     

明胶酶A基因高表达与胃癌浸润转移的关系

目的：研究明胶酶A基因表达对胃癌浸润转移的影响，方法：采用原位杂交技术检测36例胃癌组织明胶酶AmRNA表达，结果：正常胃组织，癌旁和胃癌组织明胶酶A mRNA表达阳性率分别是8．3％，35．7％和83．3％，三者间差异均有显著性意义（P＜0．01），有浆膜浸润和淋巴结转移的胃癌，其表达阳性率分别为93．1％，和90．6％，无浆膜浸润和淋巴结转移的胃癌其表达阳性率分别为42．9％和25．0％，差异均有显著性意义（P＜0．01），明胶酶AmRNA表达定位于肿瘤浸润边缘的基质成分，以巨噬细胞为主，结论：明胶酶A mRNA高表达可促进胃癌的浸润和转移，检测明胶酶A mRNA有可能成为判断进民期胃癌及其严重程度的标志。     

乙酰肝素酶mRNA在肝细胞癌中的表达及点突变研究

目的 探讨乙酰肝素酶（HPA）mRNA在肝细胞癌（HCC）中的表达及点突变的意义。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测33例HCC中HPA的表达，用T—A克隆测序法检测其扩增产物有无突变，并与HCC临床病理学指标分析。结果 有16例癌组织HPA表达阳性，阳性率（48．5％）显著高于癌周肝组织（P〈0．01）。术后转移复发组HPA阳性率显著高于无转移复发组（P〈0．01）。7例PCR产物测序发现有4例均存在2处点突变，其中一处为有义突变，突变率为57．1％。结论 HCC中HPAmRNA表达率增高，可作为HCC术后预测转移复发的一个重要指标。HPA基因点突变可能是其表达率增高的原因之一。     

c-met在人肝细胞癌中表达的研究

应用分子杂交法，研究c-met mRNA在人肝细胞癌中的表达及其意义。Northern blot结果表明，癌组织中有16例表达，癌周肝中有12例表达。c-met在肝细胞癌组织中的表达与癌周肝组织中的表达无显著差异(P>0．05)。经统计学处理发现c-met和HCC分化程度、分期、大小、HBsAg、AFP、门静脉癌栓间无显著相关(P>0.05)。研究结果表明．c-met基因可能在肝癌形成及转移过程中起调节作用。     

肝细胞癌中SEMA3B基因的表达及其意义

目的 通过对SEMA3B基因在原发性肝细胞癌（HCC）组织中表达的检测，探讨该基因与HCC发生机制的关系。方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测35例HCC组织及癌旁肝组织SEMA3BmRNA表达水平。结果 （1）在所有受检的癌旁肝组织中，SEMA3BmRNA表达率为85．7％（30／35），明显高于癌组织的表达率20．0％（7／35），差异有统计学意义（P〈0．01）；（2）合并有肝硬化（20／28）或者乙肝（19／28）的患者，其癌组织中SEMA3B基因的表达缺失率显著高于无肝硬化（8／28）或乙肝阴性（9／28）患者（P〈0．05）；（3）SEMA3B基因的异常表达情况与年龄、性别的差异无统计学意义（P〉0．05），与HCC患者术前肝功能Child—Pugh分级评价和血清AFP的检测值高低无相关（P〉0．05）；（4）SEMA3B的表达缺失率与TNM分期关系无统计学差异，低分化型癌组织中SEMA3B基因缺失率高于中、高分化型，但差异无统计学意义（P〉0．05）。此外，该基因的缺失与肿瘤大小无关（P〉0．05）。结论 SEMA3B基因在HCC组织中的高频表达缺失说明该基因的失活与HCC的发生密切相关。SEMA3B基因是定位于染色体3p21．3区域的与HCC相关的抑癌基因，并且可能在HCC的发生发展方面起重要作用。     

肝细胞生长因子受体在人肝细胞癌中表达的研究

作者应用分子杂交法，研究肝细胞生长因子受体（ｃ－ｍｅｔ）ｍＲＮＡ在人肝细胞癌中的表达及其意义。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析结果表明：在癌组织中有１６例ｃ－ｍｅｔ表达阳性，在癌周肝中有１２例ｃ－ｍｅｔ表达阳性。ｃ－ｍｅｔ在肝细胞癌组织中与癌周肝组织中的表达阳性的例数差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。经统计学处理发现ｃ－ｍｅｔ和肝细胞癌分化程度、分期、大小、ＨＢｓＡｇ、ＡＦＰ、门静脉癌栓间无显著相关（Ｐ＞０．０５）。作者认为ｃ－ｍｅｔ基因可能在肝癌形成及转移过程中起调节作用。     

内毒素诱导大鼠肝细胞白蛋白表达下降的分子机制

目的　探讨内毒素诱导肝细胞白蛋白表达下降的分子机制。方法　 1μg/ml内毒素刺激肝细胞后 ,分别在 0 ,2 ,8,12和 2 4h时留取肝细胞及上清检测白蛋白mRNA及其蛋白水平的变化。细胞内信号蛋白p38激酶和ERK激酶的特异性阻断剂SB2 0 35 80和PD980 5 9预处理肝细胞后检测上清中白蛋白的浓度。结果　内毒素刺激后 2 4h白蛋白mRNA下降约为 30 % ,与此同时白蛋白浓度下降约 5 0 %。SB2 0 35 80和PD980 5 9可以在体外抑制内毒素诱导肝细胞白蛋白表达的下降。结论　内毒素在转录水平抑制肝细胞白蛋白mRNA的表达来抑制白蛋白的合成。这一过程与细胞内信号传导通路p38和ERK激酶密切相关 ,进一步阐明了感染时低白蛋白血症的分子机制。     

肝素酶与肝细胞癌侵袭转移的关系

我们应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 33例原发性肝细胞肝癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)标本中肝素酶 (heparanase,HPA)的基因表达 ,并结合病人的临床病理学和随访资料 ,以探讨HPA可否作为HCC转移潜能的可靠标志。对象与方法1.研究对象 :新鲜冷冻的标本取自 2 0 0 0年 8月至 2 0 0 1年 4月浙江大学医学院附属第二医院普外科、肿瘤外科手术切除并经病理学检查证实的 33例HCC(包括癌和癌旁肝组织 )和 9例肝脏良性肿瘤 (取瘤旁肝组织作正常对照 )。收集病人临床病理学检查资料 ,HCC组中 ,男 2 8例 ,女 5例 ;年龄2 9～ …     

人肝细胞癌中nm23表达的研究

目的:研究转移抑制基因nm23mRNA在人肝细胞癌中的表达及其意义.方法:应用分子杂交及RT-PCR方法对30例人肝细胞癌中nm23表达进行研究.结果:Northern blot结果表明,阳性带位于0.8Kb处;癌组织、癌旁组织中nm23的表达结果显示:癌组织中有19例表达,癌周肝组织中有3例表达.nm23在肝细胞癌组织中的表达明显高于癌周肝组织(P0.05).结论:nm23基因可能在肝癌形成及转移过程中起调节作用.     

原发性肝细胞癌中错配修复基因hMLH1的表达及其意义

目的　探讨错配修复基因hMLH1在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其意义。方法　采用免疫组织化学和逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)检测48例肝癌组织、2 3例癌旁组织和2 5例正常肝组织中hMLH1蛋白和mRNA的表达情况,同时采用原位末端标记法测定癌组织的细胞凋亡指数。结果　48例肝癌组织、2 3例癌旁组织和2 5例正常肝组织的hMLH1mRNA表达分别为62 .5 % (3 0 /4 8)、10 0 .0 % (2 3 /2 3 )和10 0 .0 % (2 5 /2 5 ) ,蛋白表达分别为60 .41% (2 9/4 8)、91.3 0 % (2 1/2 3 )和10 0 .0 0 % (2 5 /2 5 )。hMLH 1表达与肝癌组织的临床分期有明显相关,hMLH1表达阳性的肝癌组织的细胞凋亡指数升高为(3 .5 62±0 .2 3 3 ) %。结论　hMLH1在肝癌组织中低表达,提示错配修复基因hMLH1功能缺陷在肝癌的发生、发展过程中起重要作用     

E-钙粘素在原发性肝细胞癌中表达的研究

我们应用免疫组织化学Ｓ Ｐ法 ,研究Ｅ 钙粘素 (Ｅ Ｃａｄｈｅｒｉｎ)在原发性肝细胞癌中的表达及其与肝癌的侵袭转移、预后的关系 ,结果报道如下。一、对象与方法1.一般资料 :原发性肝细胞癌根治性切除术患者 82例 ,术前未经任何治疗 ,组织选取癌与癌旁交界处。收集患者术前甲胎蛋白 (ＡＦＰ)、ＨＢｓＡｇ、镜下门静脉瘤栓、肿瘤包膜、癌细胞分化程度等指标。对照组为正常肝组织 2 0例 ,取自肝破裂手术切除的正常肝组织。门脉性肝硬化组织活检标本 2 0例。2 .方法 :免疫组织化学染色程序按Ｓ Ｐ试剂盒说明书进行。3.光镜下阳性结果判定 :按…     

u-PA和明胶酶A、B蛋白在人腹主动脉瘤组织中表达的研究

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原活化物(u-PA)和明胶酶A、B在腹主动脉瘤(AAA)组织中蛋白的表达和产生的来源。方法 用u-PA和明胶酶A(MMP-2)、明胶酶B(MMP-9)的单克隆抗体,以免疫组织化学SABC方法在10例AAA组织和10例正常腹主动脉组织的切片上控测u-PA和MMP-2、MMP-9抗原(蛋白)。结果 u-PA和MMP-9蛋白在AAA组织中主要浸润于中层和外膜巨噬细胞表达,在正常腹主动脉组织中无表达,MMP-2蛋白在AAA组织中主要由中层平滑肌细胞表达,在正常腹主动脉组织中无表达。结论 由巨噬细胞产生的u-PA直接激活,并调节MMP-2和MMP-9的活性,在AAA的形成、扩张和破裂中起着关键性的作用。     

肝细胞癌组织中CYP27A1的表达及其临床意义

目的:探讨CYP27A1在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库,利用R软件采用Wilcoxon秩和检验、配对资料Wilcoxon符号秩检验比较CYP27A1在肝细胞癌和正常肝组织中的表达情况。采用Kaplan-Meier分析及Cox回归分析评估CYP27A1和生存率之间的相关性并探索HCC独立危险因素。采用基因富集分析(GSEA)结合蛋白互作网络进行CYP27A1的生物学功能研究。结果:CYP27A1在肝癌组织中的表达显著低于正常肝组织(P<0.01);CYP27A1表达水平与HCC患者临床分期显著相关,临床分期越高,CYP27A1表达越低(P<0.01);CYP27A1低表达与HCC患者不良预后相关,并且是影响HCC患者预后的独立危险因素(P均<0.05);CYP27A1低表达样本富集到细胞周期、粘着力、胞吞作用、基因复制等功能及ErbB信号通路和p53信号通路。结论:CYP27A1表达与HCC临床分期及预后相关,可能成为临床诊治HCC的生物标志物。     

肝细胞癌门静脉癌栓中肝细胞生长因子及其受体的表达

目的研究肝细胞生长因子（HGF）及其受体C-Met在肝细胞癌门静脉癌栓中的表达,探讨HGF及C-Met的表达与门静脉癌栓形成与发展的关系。方法用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测HGFmRNA及C-MetmRNA在20例肝细胞癌门静脉癌栓及其癌旁组织、10例无门静脉癌栓形成的肝细胞癌和癌旁组织及10例正常肝组织中的表达。结果HGF及C-Met在肝癌及癌栓中的阳性表达率均显著高于正常肝组织及癌旁组织,差异有统计学意义（P〈0．05）,HGF及C—Met在癌栓中及肝癌中表达的阳性率比较差异无统计学意义（P〉0．05）,HGF与C—Met在各组织中的表达阳性率高低差异无统计学意义（P〉0．05）。HGF及C—Met在肝癌及癌栓中的表达量均显著高于正常肝组织及癌旁组织,差异有统计学意义（P〈0．05）,HGF及C-Met在癌栓中表达量显著高于其在肝癌中表达量（P〈0．05）,HGF与C-Met在各组织中的表达量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HGF及C-Met参与了肝癌的形成,而肝癌患者HGF及C-Met量的升高可能是肝癌发展形成门静脉癌栓的原因之一,HGF及C—Met可作为门静脉癌栓形成的监测指标。     

IGF-Ⅱ基因在肝细胞癌组织中表达的研究

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是各种癌症中恶性程度很高的一种癌瘤之一,本研究应用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测IGF-Ⅱ基因在肝癌、癌旁和正常组织中的表达情况,分析其在肝癌发生中的作用,探讨肝癌的发生机制并探索可用于肝癌早期诊断及筛选的分子标志物。     

内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺泡灌洗液明胶酶活性的变化

目的　探讨明胶酶在内毒素诱导急性肺损伤中的作用。方法　将大鼠随机分为正常对照组及脂多糖(LPS)静注后 2、4、6 h组(L2 h、L4 h 和 L6 h 组)。以 LPS 静脉注射建立急性肺损伤(ALI)模型。检测肺损伤指标、肺泡灌洗液中7S蛋白含量及明胶酶活性。以免疫组织化学法观察肺组织Ⅳ型胶原。结果L2 h组7S蛋白含量显著高于对照组(P<0. 05),L4 h和 L6 h组进一步显著升高。7S蛋白含量与肺通透指数、肺湿/干重比、肺血管通透性显著相关(r分别为 0 .80、0 .61、0 .78,P<0. 05)。L2 h组明胶酶 A(MMP 2)活性较对照组显著性升高(P< 0 .01),并持续至 6 h;明胶酶 B(MMP- 9)在对照组几乎检测不到,在 L2 h组发现其活性,在 L4 h和 L6 h组并进一步显著性升高(P<0. 01)。Ⅳ型胶原染色显示,LPS导致了基底膜的破坏。结论　明胶酶可通过破坏基底膜而参与内毒素诱导急性肺损伤的病理过程。     

一氧化氮合酶的表达与原发性肝细胞癌分化及细胞凋亡的关系

目前诱生性一氧化氮合酶 (ｉＮＯＳ)及其催化产生的ＮＯ与肿瘤的关系正成为研究热点 ,肿瘤的发生发展则与凋亡关系密切。本研究以ｉＮＯＳ间接反映ＮＯ在体内的生成情况 ,对ＮＯ与肝细胞肝癌中细胞分化和凋亡的关系进行了研究。1.材料与方法 :(1)研究对象 :ＨＣＣ标本均随机取自本院 1996～ 1999年手术切除的肝脏标本 ,共 5 0例 ,均为ＨＢｓＡｇ阳性病人 ,术后病理证实均为ＨＣＣ ,其中 3 0例有ＰＣＨＴ。男 43例 ,女 7例 ,平均年龄为 5 4岁。 (2 )实验步骤 :ｉＮＯＳ组织免疫组化 :按常规石蜡切片ＡＢＣ免疫组化染色法操作 (单克隆抗体由美…