血府逐瘀汤诱导内皮细胞促血管新生的基因调控研究

目的 研究血府逐瘀汤促进内皮细胞参与血管新生的机制。方法 通过血府逐瘀汤含药血清对内皮细胞ECV304增殖、细胞周期、迁移和体外成血管的影响,明确药物具有显著的促血管新生作用,并运用基因芯片技术分析药物对血管新生各调控因子的作用。结果 2.5%血府逐瘀汤含药血清作用48 h能显著促进ECV304细胞活性、增加S期细胞数目,诱导内皮细胞迁移和促体外成血管作用。在此药物作用条件下,血府逐瘀汤上调4个,下调10个血管新生调控基因的表达。结论 血府逐瘀汤促ECV304参与血管新生的机制复杂,呈多途径、多靶点现象。     

化通脉注射液对人脐静脉血管内皮细胞ECV304增殖的影响

[目的]以血清药理学的方法观察血化瘀通脉注射液(HYTM)对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,为治疗性血管新生的靶基因选择提供线索。[方法]取对数生长期的内皮细胞,同步化于G0期,2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐(CCK-8)检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测5溴-2脱氧尿苷(BrdU)的掺入。[结果]与空白血清对照组相比,10%的HYTM含药血清体积添加分数可显著提高细胞增殖活性。[结论]10%的HYTM含药血清体积添加分数通过促进细胞DNA合成,可能具有保护血管内皮的作用。     

阿魏酸对人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖作用

目的：观察阿魏酸对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,为治疗性血管新生的靶基因选择提供依据。方法：取对数生长期的内皮细胞,分为阿魏酸低、中、高浓度组,同步化于G0期,ELISA法检测BrdU的掺入;RT-PCR法检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA的表达情况。结果：与对照组相比,不同浓度阿魏酸均可显著提高BrdU的掺入量,上调VEGFmRNA的表达,且在10^2ng/ml～10^4ng/ml之间呈一定的量效关系。结论：阿魏酸能显著促进体外培养的ECV304细胞的增殖,可能具有血管新生的作用。     

化瘢通脉注射液对人脐静脉血管内皮细胞ECV304增殖的影响

【目的】以血清药理学的方法观察血化瘀通脉注射液（HYTM）对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响，为治疗性血管新生的靶基因选择提供线索。【方法】取对数生长期的内皮细胞，同步化于CO期，2-（2-甲氧基-4-硝基苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2，4-二磺酸苯）-2H-四唑单钠盐（CCK-8）检测细胞增殖活性；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测5溴-2脱氧尿苷（Brdu）的掺入。【结果】与空白血清对照组相比，10％的HYTM含药血清体积添加分数可显著提高细胞增殖活性。【结论】10％的HYTM含药血清体积添加分数通过促进细胞DNA合成，可能具有保护血管内皮的作用。     

血府逐瘀汤促血管新生中VEGF通路的作用研究

目的:探讨VEGF通路在血府逐瘀汤促血管新生中的作用.方法:运用血清药理学方法,以1.25％,2.5％,5％的血府逐瘀汤含药血清和空白血清诱导处理血管内皮细胞ECV304,分别采用MTT比色法,Boyden小室迁移法和体外成血管实验检测内皮细胞增殖、迁移和成血管能力,并通过酶联免疫法、免疫组化和RT-PCR检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR2)分泌和表达的情况.结果:1.25％含药血清除了能提高体外成血管能力外,对其余指标均无影响;2.5％含药血清明显促进内皮细胞增殖、迁移及成血管,并能显著提高VEGF及VEGFR2的表达;5％含药血清仅上调胞内VEGF的表达,进而促进内皮细胞的迁移和黏附.结论:血府逐瘀汤通过上调VEGF-VEGFR2途径,诱导内皮细胞增殖、迁移和血管形成,部分说明了药物促血管新生的作用机制.     

尿酸利仙含药血清对TNF-α介导内皮细胞增殖的影响

目的:H-细胞水平探讨尿酸利血含药血清对TNF-α介导的内皮细胞增殖的影响.方法:用MTT法测定不同浓度(0～3000u/ml)的肿瘤坏死因子-α对人血管内皮细胞(Endothelial cell of vessels,ECV)增殖的影响和不同浓度(1%～5%)的尿酸利仙含药血清对中浓度(900u/ml)TNF-α介导ECV增殖的作用.结果:与Ou/ml浓度组相比,浓度为900u/ml TNT-α对ECV增殖有促进作用,浓度为3000u/ml TNF-α对ECV增殖有抑制作用,与同一血清浓度的TNF-α组相比,2%、5%含药血清组对中浓度TNF-α介导ECV增殖有抑制作用.结论:尿酸利仙含药血清能降低TNT-α活性,起保护内皮细胞的作用.     

含中药血清对血管内皮细胞生长因子诱导的人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的：探讨含中药血清对人脐静脉内皮细胞增殖的影响。方法：通过在4代人脐静脉内皮细胞的培养液中加入血管内皮细胞生长因子和含中药血清，应用流式细胞仪分析其细胞周期，结果。含中药血清可以降低细胞周期中S期细胞的数目，抑制细胞的DNA合成，尤以高剂量含中药血清作用明显，结论：含高剂量中药的大鼠血清有抑制血管内皮细胞生长因子诱导内皮细胞增殖的作用。     

加减清营汤对损伤的血管内皮细胞保护作用研究

目的:观察加减清营汤对H2O2损伤的血管内皮细胞活力和NO、t-PA分泌的影响。方法:H2O2损伤ECV304细胞,随机分为正常组、模型组、血清对照组、加减清营汤组,血清药理学方法给药,MTT法观察细胞活力,同时检测NO和t-PA含量。结果:加减清营汤含药血清能明显提高H2O2损伤的ECV304细胞活力和NO、t-PA分泌。结论:加减清营汤对H2O2造成的ECV304细胞损伤具有保护和修复作用。     

加味犀角地黄汤含药血清对人微血管内皮细胞增殖的影响

目的:探讨加味犀角地黄汤含药血清对人微血管内皮细胞(h MVECs)增殖的影响。方法:利用CCK-8检测h MVECs细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的改变。结果:加味犀角地黄汤含药血清能够抑制人微血管内皮细胞的增殖,随着浓度的增加抑制作用逐渐明显,加味犀角地黄汤含药血清能使人微血管内皮细胞阻滞在S期,含药血清组明显高于正常对照组;且能够促进其细胞的凋亡。结论:加味犀角地黄汤含药血清可以抑制人血管微内皮细胞的增殖,且能够引起细胞周期的改变,诱导细胞凋亡。     

加减清营汤对H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞ECV304 VEGF表达的影响

目的:观察加减清营汤对H2O2损伤的人脐静脉内皮细胞(ECV304)VEGF表达的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(ECV304),随机分成正常组、模型组、血清对照组、阳性药物对照组、加减清营汤含药血清组。加减清营汤含药血清组用加减清营汤含药血清进行干预。用380μmol/L H2O2损伤细胞,培养24h后收集细胞总蛋白,用Western-blotting法检测VEGF表达水平。结果:氧化应激状态下ECV304 VEGF的表达有所增加,加减清营汤含药血清则能显著提高VEGF的表达以有效应对氧化损伤。结论:加减清营汤能促进H2O2氧化损伤的血管内皮细胞的代偿性修复。     

加味四妙勇安油治疗大鼠急性放射性皮肤损伤机制

目的:探讨加味四妙勇安油在治疗放疗导致的急性放射性皮肤损伤过程中的抗炎、保护胶原纤维及促血管新生作用。方法:将75只大鼠随机分为对照组、B12组、四妙勇安组,每组25只,暴露于直线加速器下,经6MeV-X电子射线照后产生10%Ⅱ度放射性皮炎模型,观察照射野皮肤淋巴细胞浸润、胶原纤维排列和完整性,血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)、血小板源性生长因子-α(PDGF-α)、血小板源性生长因子-α受体(PDGF-αR)的表达。结果:形态学染色显示,皮损急性期,四妙勇安组皮损区淋巴细胞浸润较其他组明显减少,胶原纤维排列较其他组整齐,外形更加完整。免疫组化显示,四妙勇安组VEGF、VEGFR、PDGF-α、PDGF-αR反应点均多于其他两组,其中PDGF-αR、VEGF表达在第15天之后差异显著,PDGF-α在第30天之后差异显著。VEGFR表达前期显著增加,第45天开始四妙勇安组与B12组的差异逐渐消失,以上差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:加味四妙勇安油在治疗放疗导致的急性放射性皮肤损伤时能有效减轻炎症反应,保护胶原纤维,促进血管及成纤维细胞生成,加快损伤的愈合。     

四妙勇安汤抑制中性粒细胞-内皮细胞黏附的实验研究

目的： 探讨四妙勇安汤对于凝血酶处理的内皮细胞与中性粒细胞黏附及内皮细胞P-选择素表达的影响。方法： MTT法检测四妙勇安汤以生药22.5 g·kg^-1·d^-1,ig 7 d制备含药血清对于内皮细胞活力的影响,EA.hy926细胞加入0.2 U·mL^-1凝血酶、中性粒细胞作为模型组,2.5%,5%,10%,20%四妙勇安汤含药血清预处理内皮细胞24 h后造模为干预组。虎红法检测细胞黏附率,流式细胞术、ELISA检测内皮细胞P-选择素的表达。结果： 空白组与空白对照组在各项检测中均无显著性差异;10%,20%含药血清组对黏附率有抑制作用,10%组效果较好;ELISA结果显示10%含药血清组预处理组能抑制P-选择素的表达,其他3个干预组则无差异;流式细胞术检测10%,20%含药血清组对于细胞表面P-选择素有抑制作用,10%含药血清组效果最好。结论： 四妙勇安汤能抑制中性粒细胞、内皮细胞的黏附,这一作用可能是通过抑制内皮细胞P-选择素的表达来实现的。     

中西医结合治疗热毒血瘀型糖尿病足20例疗效观察

目的：观察加味四妙勇安汤配合西药治疗糖尿病足热毒血瘀型的临床疗效。方法：选择糖尿病足符合热毒血瘀型20例,用西药控制血糖、感染、常规消毒清创及药物湿敷,配合加味四妙勇安汤治疗,观察治疗后症状体征变化,并设立对照组对比。结果：观察组疗总有效率高于对照组,两组疗效比较有统计学意义,（P〈0.05,）且治疗后局部征积分情况优于对照组,（P〈0.05。）结论：在西医治疗基础上,结合加味四妙勇安汤治疗热毒血瘀型糖尿病足疗效显著。     

四妙勇安汤加味治疗下肢闭塞性动脉硬化症30例

目的：观察四妙勇安汤治疗下肢闭塞性动脉硬化症的临床效果。方法：对30例下肢闭塞性动脉硬化症患者用四妙勇安汤加味治疗。结果：治愈20例,特效1例,显效3例,好转2例,无效4例。结论：四妙勇安汤治疗下肢闭塞性动脉硬化症效果显著。     

四妙勇安汤治疗痛风性关节炎疗效观察

[目的]观察四妙勇安汤治疗痛风性关节炎的疗效。[方法]治疗组应用加味四妙勇安汤治疗。对照组口服别嘌呤醇0.1g,外用吲哚美辛栓0.1g,塞肛门治疗。[结果]治疗组总有效率92.50%,对照组总有效率80.00%,临床疗效治疗组优于对照组(P<0.05)。[结论]加味四妙勇安汤治疗痛风性关节炎效果理想,值得临床推广应用。     

四妙勇安汤对血栓闭塞性脉管炎大鼠的保护作用

目的:探讨四妙勇安汤(SMYA)对血栓闭塞性脉管炎(TAO)大鼠血脂、血液流变学的影响.方法:将实验大鼠随机分成6组:假手术组、模型组、脉络宁阳性对照组(2.7 g,kg-1),SMYA高、中、低剂量组(24.3,16.2,8.1 g·kg-1).采用大鼠股动脉注射月桂酸钠法建立TAO大鼠模型,造模后24 h灌胃给予相应药物15 d后,观察SMYA对TAO大鼠血脂、血液流变学指标的影响.结果:SM YA可显著降低TAO模型大鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL),升高高密度脂蛋白(HDL),其中SMYA高剂量组HDL含量为(0.50±0.08) mmol· L-1,组间比较差异有显著性(P ＜0.05,P＜0.01和P＜0.001);SMYA显著降低TAO模型大鼠全血黏度(高、中、低切)及血沉值,组间比较差异有显著性(P ＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论:SMYA可改善TAO大鼠血脂水平和血液流变学,对TAO具有一定的防治作用.     

溃结灵含药血清对Caco-2细胞损伤模型细胞增殖的影响

目的:观察溃结灵含药血清对Caco-2细胞损伤模型细胞增殖的影响.方法:应用三硝基苯磺酸灌肠法复制溃疡性结肠炎大鼠模型,3d后采集血液,分离血清,作为损伤剂作用于Caco-2细胞一段时间,模拟细胞炎性损伤模型,MTT法观察不同浓度溃结灵含药血清对Caco-2细胞损伤模型细胞增殖的影响.结果:与模型血清组比较,10％,5％,2.5％,1.25％,0.625％溃结灵含药血清作用Caco-2细胞损伤模型24h后,有促进其增殖的作用,尤以10％溃结灵含药血清效果最佳(P＜0.05).结论:溃结灵含药血清可促进Caco-2细胞炎性损伤后细胞增殖.     

四妙勇安汤加味治疗血栓性浅静脉炎82例

目的:观察中药复方四妙勇安汤加味对血栓性浅静脉炎患者炎性因子的影响及临床疗效。方法:82例血栓性浅静脉炎患者随机分为治疗组(42例)及对照组(40例),治疗组口服中药复方,对照组口服穿王消炎片。结果:治疗后治疗组TNF-α水平低于对照组(P0.05),IL-10水平高于对照组(P0.05);治疗组治愈率52.38%,总有效率100%,对照组治愈率25.00%,总有效率90.00%,两组治愈率和总有效率比较,均有统计学意义,P0.05。结论:四妙勇安汤加味可以抑制炎症反应,治疗血栓性浅静脉炎具有较好疗效。