硫化氢在大鼠急性腹腔感染早期中的作用

目的探讨硫化氢(H2S)在大鼠急性腹腔感染早期中的抗炎作用。方法以硫氢化钠(NaHS)作为H2S供体,将72只SD大鼠随机分为空白对照组、盲肠结扎穿刺(CLP)+生理盐水(NS 1 ml/kg)组、CLP+NaHS组和CLP+炔丙基甘氨酸(PAG,一种抑制体内产生H2S的酶的试剂)组,每组各18只。模型制作成功后经大鼠尾静脉注射给药,每组分别于给药后2、6和12 h各随机选取6只大鼠,检测血清中TNF-α和H2S的含量以及造模6 h回肠组织中髓过氧化物酶(MPO)的含量,并观察回肠组织的病理学改变。结果 H2S能明显减轻CLP模型组中的炎症反应,降低炎症反应时血清TNF-α的含量,减轻中性粒细胞在小肠组织中的浸润。结论 H2S在大鼠急性腹腔感染早期具有抗炎作用。     

精氨酸加压素对脓毒症大鼠动脉压力反射的影响

目的：观察精氨酸加压素（AVP）通过中枢及外周给药对脓毒症大鼠动脉压力反射（ABR）的影响。
方法:采用盲肠结扎穿刺术（CLP）制作大鼠脓毒症模型。（1）分别于大鼠造模后4、8和12 h检测两组大鼠压力反射（ABR）功能以及下丘脑视上核（SON）和室旁核（PVN）精氨酸加压素（AVP）的表达，以假手术大鼠为对照；（2）大鼠造模后8 h侧脑室注射AVP（50 ng），以等体积的人工脑脊液（aCSF）为对照，于给药后5 min和30 min测ABR功能；（3）大鼠造模后6 h静脉持续泵入AVP［2 ng/（kg·h）］，以等体积的生理盐水为对照，分别于给药后5 min和30 min测ABR功能。
结果:CLP术后，大鼠ABR功能以及SON和PVN中的AVP阳性细胞表达随时间呈进行性降低和减少。侧脑室注射AVP或静脉持续输入AVP均能明显改善脓毒症大鼠的ABR功能，与各自的对照组相比差异有统计学意义（均P<0.05）。
结论:脓毒症发病过程中存在中枢AVP的减少和ABR功能降低，可能是脓毒症进展的关键因素。脓毒症早期给予外源性的AVP可改善大鼠的ABR，延缓脓毒症的进展。

     

减阻聚合物芦荟多糖对脓毒症大鼠肾功能的保护作用

目的探讨新的减阻聚合物芦荟多糖较传统减阻聚合物聚环氧乙烷(PEO)对盲肠结扎-穿刺(CLP)脓毒症模型大鼠肾功能的保护作用。方法 64只SD雄性大鼠随机均分为四组:假手术+生理盐水组(S组)、CLP+生理盐水组(NS组)、CLP+聚环氧乙烷组(PEO组)和CLP+芦荟多糖组(Aloe组)。CLP造模后24h制备脊斜方肌微循环活体标本,随后分别给予生理盐水20ml/kg(S组和NS组)和等容积的芦荟多糖(PEO组和Aloe组)。记录给药前和给药后2h微动脉红细胞流速和管径的变化。每组取8只大鼠放回笼子观察48h存活时间,剩余8只大鼠24h采取安乐死法处死,取血标本检测肾功能和血清炎症因子水平,取肾脏组织行病理检查和评分。结果与NS组比较,PEO组和Aloe组微动脉红细胞流速提高,肾功能改善,炎症反应减轻,存活时间均明显延长(P0.05或P0.01)。但Aloe组大鼠血清尿素氮(Bun)、肌酐(Cr)和肾脏病理评分明显低于PEO组(P0.05)。结论芦荟多糖减阻剂能够减轻CLP脓毒症大鼠肾损伤,其机制与改善微循环和抑制炎症反应有关。     

硫化氢在兔离体心脏保存中的保护作用

目的 研究硫化氢(H2S)在兔离体心脏低温保存中的作用,并探讨其作用机制.方法 获取40只大白兔的离体心脏,应用Langendorff灌注装置对兔离体心脏分别进行灌注后保存.根据离体兔心灌注和保存液的不同,分为5组,每组8只.对照组:单纯Krebs-Henseleit(K-H)液;硫氢化钠(NariS)组:K-H液中加入1 μmol/L的NariS(H2S的供体);NariS+格列本脲(G1i)组:K-H液中加入1 μmol/L的NariS和10 μmol/L的Gli;G1i组:K-H液中加入10 μmol/L的Gli;STH组:单纯St.Thomas液.各组心脏在灌注和保存6 h后,留取心脏标本,检测各组兔离体心脏低温保存6 h后心功能恢复率、心脏复跳时间、心肌三磷酸腺苷(ATP)含量和含水量变化,使用电子显微镜观察心尖部组织的结构变化.结果 心脏保存6 h后,NariS组心脏复跳时间最短、心功能恢复率、心肌ATP含量最高,均优于STH组,但差异无统计学意义(P＞0.05);与NariS+Gli组、Gli组和对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).NariS组左心室功能和结构损伤较轻,其次是STH组,NariS+Gli组、Gli组及对照组的左心室功能及心肌组织结构损伤严重.结论 硫化氢在兔离体心脏低温保存6 h内具有良好的保护作用.开放KATP通道可能是硫化氢发挥保护作用的重要机制.     

O-GlcNAc修饰在谷氨酰胺减轻脓毒症大鼠脑损伤中的作用

目的 评价O-GlcNAc修饰在谷氨酰胺减轻脓毒症大鼠脑损伤中的作用.方法 健康清洁级4周龄SD雄性大鼠60只,体重180-240 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组:假手术组(S组,n=12)、脓毒症组(CLP组,n=16)、谷氨酰胺组(G组,n=16)及谷氨酰胺+四氧嘧啶组(G+A组,n=1 6).采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立大鼠脓毒症模型,G组术毕静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg,G+A组术毕静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg及腹腔注射四氧嘧啶90 mg/kg,CLP组和S组注射等容量生理盐水.术后24h时记录神经反射评分,断颈处死,测定脑组织含水量,采用Western-blot法测定脑组 织O-GlcNAc表达水平,观察脑组织病理学结果.结果 与S组比较,CLP组、G组及G+A组大鼠脑组织含水量、神经反射评分升高(P＜0.05);与CLP组比较,G组和G+A组大鼠脑组织含水量、神经反射评分降低,G组大鼠脑组织蛋白质O-GlcNAc表达上调(P＜0.05);与G组比较,G+A组大鼠脑组织含水量、神经反射评分升高,脑组织蛋白质O-GlcNAc表达下调(P＜0.05);S组、CLP组及G+A组大鼠间脑组织蛋白质O-GlcNAc表达差异无统计学意义(P＞0.05).G组病理学损伤较CLP组及G+A组轻.结论 O-GlcNAc修饰参与了谷氨酰胺减轻脓毒症大鼠脑损伤的过程.     

脓毒症时枯否细胞介质在脾免疫抑制机制中的主要作用

本实验通过小鼠脓毒症模型,在脓毒症发生之前减少枯否细胞以了解能否保护脾淋巴细胞的功能。实验组小鼠于48h前静脉注射氯化钆(GdCl_2,10mg/kg),使肝脏的枯否细胞数下降40％;对照组小鼠注射生理盐水(NS)。用盲肠结扎和穿刺模型(CLP)造成多细菌脓毒症,并给     

瓜氨酸对脓毒症大鼠肠道的保护作用及高迁移率族蛋白B1释放水平影响的研究

目的探讨瓜氨酸对脓毒症大鼠肠道结构的保护作用以及对晚期炎症因子高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放水平的影响。方法将大鼠分为正常空白对照组(Normal)、假手术组(sham)、脓毒症组(CLP)、瓜氨酸治疗组(CLP+Cit),采用最经典的盲肠结扎穿孔术(CLP)造成大鼠发生脓毒症以制作脓毒症大鼠模型,CLP+Cit组大鼠术前给予瓜氨酸连续灌胃给药1 w,剂量为200mg/(kg·d),设定CLP造模后大鼠取样时间点为6 h、12 h、24 h、48 h。采用ELISA试剂盒检测大鼠血清中HMGB1水平,并行HE染色观察结肠组织病理情况。结果 24 h及48 h时CLP组大鼠腹腔内脓毒症症状较CLP+Cit组更严重,以24 h时更为明显,结肠组织病理切片HE染色镜下可见CLP+Cit组大鼠结肠组织炎症细胞浸润情况较CLP组轻。在6 h、12 h、24 h、48 h四个时点,CLP组与CLP+Cit组大鼠生存率差异均无统计学意义(均P0.05)。CLP组和CLP+Cit组的大鼠血清HMGB1水平均在24 h时测到最高值,且在12 h、24 h、48 h三个时点CLP+Cit组显著低于CLP组(P0.05)。结论补充外源性瓜氨酸可以缓解大鼠的脓毒症症状,减轻结肠炎症反应,对脓毒症大鼠结肠起到了保护作用,并对HMGB1的释放有一定的抑制作用。     

丙泊酚对脓毒症大鼠肝损伤的保护作用

目的研究丙泊酚对脓毒症大鼠细胞因子的影响和细胞因子对肝线粒体呼吸功能的影响及其机制。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)制作脓毒症模型,将大鼠随机分为假手术组(C组)、盐水组(NS组)和丙泊酚组(P组),模型制作12h后NS组和P组分别给予生理盐水丙泊酚。在给药前和给药4 h后分别取静脉血,并在给药4h后取肝制备肝线粒体和组织匀浆,分别采用Clark氧电极技术测定线粒体呼吸功能,ELISA法检测IL-1β和IL-6,分光光度法测定NO水平。结果NS组的RCR和ADP/O明显低于C组,丙泊酚能改善其呼吸功能;NS组给药前后IL-1β和IL-6水平明显高于C组,而P组给药4 h后的IL-1β和IL-6水平较NS组明显降低,且NS组NO较C组和P组显著升高。结论丙泊酚能通过降低IL-1β和IL-6水平,减少肝组织NO的产生,从而保护线粒体呼吸功能,改善细胞能量代谢。     

雷帕霉素联合罗格列酮对脓毒症大鼠肺损伤的影响

目的 评价雷帕霉素联合罗格列酮对脓毒症大鼠肺损伤的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠120只,2月龄,体重250～ 300 g,采用随机数字表法,将其分为5组(n=24):假手术组(S组)、盲肠结扎穿孔组(CLP组)、雷帕霉素组(RPM组)、罗格列酮组(RGZ组)和雷帕霉素+罗格列酮组(RPM+ RGZ组).CLP组、RPM组、RGZ组和RPM+ RGZ组采用盲肠结扎穿孔术法制备大鼠脓毒症模型.术前30 min RPM组于皮下注射雷帕霉素0.4 mg/kg,RGZ组股静脉注射罗格列酮0.3 mg/kg,RPM+ RGZ组皮下注射雷帕霉素0.4 mg/kg联合股静脉注射罗格列酮0.3 mg/kg,CLP组给予等容量生理盐水.于术后2、6、24和48 h时分别处死6只大鼠,取肺组织,行HE染色,光镜下观察,进行肺损伤评分;采用分光光度法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;采用凝胶阻滞电泳分析法检测肺组织信号转导和转录激活因子3(STAT3) DNA结合活性.结果 与S组比较,CLP组、RPM组、RGZ组和RPM+ RGZ组肺损伤评分、肺组织MPO活性和STAT3 DNA结合活性升高(P＜0.05);与CLP组比较,RPM组、RGZ组和RPM+ RGZ组肺损伤评分、肺组织MPO活性及STAT3 DNA结合活性降低(P＜0.05);与RPM组及RGZ组比较,RPM+ RGZ组肺损伤评分、肺组织MPO活性及STAT3 DNA结合活性降低(P＜0.05).结论 与雷帕霉素或罗格列酮单独用药比较,二者联合应用减轻脓毒症大鼠肺损伤的效应更明显,其机制与抑制STAT3信号通路激活有关.     

ω-3多不饱和脂肪酸对梗阻性黄疸大鼠炎症反应和肝功能的影响

目的:探讨ω-3多不饱和脂肪酸对梗阻性黄疸大鼠炎症反应和肝功能的影响。方法:将72只成年雌性Wisar大鼠随机分成4组(n=18):OJ+ω-3组、OJ+NS组、SO+ω-3组、SO+NS组。OJ+ω-3组、OJ+NS组采用双重结扎胆总管方法构建梗阻性黄疸大鼠模型;SO+ω-3组、SO+NS组只行开腹手术。OJ+ω-3组、SO+ω-3组给予ω-3鱼油脂肪乳尾静脉注射[5 mL/(kg·d),1次/d],OJ+NS组与SO+NS组大鼠给予同等体积生理盐水尾静脉注射。建模成功后4组研究对象于2、5、和9 d各处死大鼠6只,应用ELISA法检测大鼠血清脂多糖结合蛋白(LBP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和Toll样受体4(TLR4)的表达;HE染色观察肝脏病理学改变并进行肝组织学活动指数(HAI)评分。结果:建模成功后2、5和9 d,OJ+NS组TNF-α、IL-6、TLR4、LBP水平均显著高于OJ+ω-3组,差异有统计学意义(P0.05);OJ+NS组TLR4、TNF-α、IL-6水平显著高于SO+NS组,差异有统计学意义(P0.05)。建模成功后2、5、9 d,根据HE染色及HAI评分,与OJ+NS组相比,OJ+ω-3组大鼠肝脏组织炎症状况改善,HAI评分明显降低(P0.05)。结论:ω-3多不饱和脂肪酸可抑制梗阻性大鼠血清中LBP、TLR4、TNF-a、IL-6的表达,改善梗阻性黄疸大鼠炎症状况,从而达到调控炎症反应、保护肝脏的作用。