T-钙黏蛋白对小鼠皮下氮烯咪胺耐药黑素瘤B16F10细胞株的影响

目的观察T-钙黏蛋白(cadherin)对小鼠皮下氮烯咪胺(dacarbazine,DTIC)耐药黑素瘤B16F10细胞株的影响。方法通过体外分步诱导法诱导B16F10氮烯咪胺耐药细胞株(DTIC-R B16F10)。采用CCK-8法检测DTIC-R B16F10细胞的增殖情况。将T-cadherin基因转染至DTIC-R B16F10细胞。免疫组织化学检测转染后T-cadherin的表达情况。培养DTIC-R B16F10细胞,分为6组:对照组、pEGFP-N1组、T-cadherin组、DTIC组、pEGFP-N1联合DTIC组和T-cadherin联合DTIC组。通过CCK-8法和Transwell小室实验检测T-cadherin与氮烯咪胺联合对DTIC-R B16F10细胞活性和迁移的影响。建立荷瘤小鼠模型,观察T-cadherin对小鼠皮下注射DTIC-R B16F10细胞后肿瘤生长的影响。采用析因分析法评价T-cadherin联合氮烯咪胺对细胞活性、迁移和小鼠皮下瘤生长的影响。结果DTIC-R B16F10组、B16F10组与DTIC-R B16F10+DTIC组A值差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学检测表明细胞表达T-cadherin。T-cadherin联合DTIC组细胞活性、迁移细胞数及肿瘤重量均显著低于其他组(P<0.05)。析因分析显示,T-cadherin联合氮烯咪胺对DTIC-R B16F10的细胞活性、迁移和小鼠皮下瘤生长的抑制有协同作用。结论T-cadherin可抑制黑素瘤小鼠皮下瘤的生长,增加黑素瘤对氮烯咪胺的敏感性。     

S100A4蛋白和上皮钙黏蛋白-E在黑素瘤中的表达及意义

目的探讨黑素瘤的发生和侵袭转移机制,检测S100A4蛋白、上皮钙黏蛋白-E(E-cadherin)在黑素瘤的表达水平。方法应用免疫组织化学SP法检测30例黑素瘤、30例黑素细胞痣和20例正常皮肤组织中S100A4和E-cadherin蛋白的表达。结果 S100A4在黑素瘤组织中表达的阳性率为66.67%,明显高于其在黑素细胞痣中的表达(13.33%),在正常皮肤组织中基本不表达,两者比较差异有统计学意义(P0.05);E-cadherin在正常皮肤组织表达率为100%,与在黑素细胞痣中的表达(83.3%)差异无统计学意义,在黑素瘤组织中表达率为43.33%,与正常皮肤组织比较有统计学意义(P0.05)。在有淋巴转移和无淋巴转移的黑素瘤中S100A4和E-cadherin的表达差异均有统计学意义(P0.05)。结论 S100A4和E-cadherin与黑素瘤的转移可能有关,提示黑素瘤组织中S100A4和E-cadherin的检测可作为预测肿瘤转移的指标之一。     

恶性黑素瘤中T-钙粘蛋白的表达

目的:探讨恶性黑素瘤组织中T-钙粘蛋白(T-cadherin)的表达.方法:采用免疫组化SP法对18例恶性黑素瘤组织标本和40例皮肤色素痣组织标本及同一标本的正常表皮、黑素瘤细胞系M14和A375进行T-cadherin的检测.结果:正常表皮均表达T-cadherin,恶性黑素瘤组织中11.1%检测到T-cadherin,皮肤色素痣组织中97.5%检测到T-cadherin(P<0.001),差异有统计学意义;黑素瘤细胞系M14、A375中T-cadherin均呈弱阳性表达.结论:T-cadherin在恶性黑素瘤组织、细胞的表达明显降低或缺失,提示T-cadherin在皮肤恶性黑素瘤的发生、发展中可能起重要作用.     

原发性乳房外Paget病中E钙黏蛋白的检测

目的观察乳房外Paget病中E钙黏蛋白的表达并分析其在肿瘤侵袭过程中的意义。方法应用免疫组化方法分别对28例原发性原位乳房外Paget病(A组)和17例原发性侵袭性乳房外Paget病(B组)标本中的E钙黏蛋白进行检测。结果原发性原位乳房外Paget病标本中E钙黏蛋白的表达较周边正常皮肤标本中表达下调,其中28例原发性原位乳房外Paget病标本中,E钙黏蛋白阴性表达的占28.6%(8/28),低表达的占46.4%(13/28),高表达的占25.0%(7/28),17例原发性侵袭性乳房外Paget病标本表达分别为17.6%(3/17),58.8%(10/17),23.6%(4/17),9例肿瘤边缘正常皮肤和2例正常阴囊皮肤中E钙黏蛋白全部高表达,正常皮肤组与两组乳房外Paget病中E钙黏蛋白的表达差异有显著性(P<0.01),而两组乳房外Paget病之间的表达差异无显著性(P>0.05)。结论E钙黏蛋白表达的下调与原发性乳房外Paget病的发病有关,但可能与侵袭过程没有必然的联系。     

甘草次酸对黑素瘤细胞侵袭力及明胶酶表达的影响

目的探讨甘草次酸(GA)对黑素瘤细胞侵袭能力和明胶酶表达的影响。方法体外培养黑素瘤细胞系SK-MEL-1,用MTT法检测不同浓度GA对细胞增殖的影响;采用Transwell小室基质胶侵袭实验观察GA对SK-MEL-1细胞株侵袭能力的影响;应用半定量RT-PCR检测GA对明胶酶A和B mRNA表达的影响;明胶酶谱法检测GA对SK-MEL-1细胞明胶酶活性的影响。结果SK-MEL-1细胞增殖抑制率与GA浓度及用药后培养时间呈正相关。GA对SK-MEL-1细胞侵袭能力的抑制与浓度相关,各浓度处理组与对照组差异均有显著性意义(P<0.01);GA能抑制SK-MEL-1细胞明胶酶A和B mRNA表达,与浓度呈正相关,各处理组与对照组差异有显著性意义(P<0.05);GA能够抑制SK-MEL-1细胞明胶酶活性,随浓度增高抑制作用增强,与对照组相比,120,240μmol/L浓度组差异具有显著性意义(P<0.05)。结论GA能够抑制黑素瘤细胞的增殖与侵袭能力,可能与抑制明胶酶的表达有关。     

白藜芦醇对黑素瘤细胞周期的影响

目的:研究白藜芦醇对黑素瘤细胞周期的影响并探讨其作用的分子机制.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测白藜芦醇对人黑素瘤A375细胞株增殖的影响;碘化丙啶(PI)单标流式细胞术测定白藜芦醇对A375细胞周期的影响:免疫印迹法(Western-blot)检测白藜芦醇对A375细胞周期素(cyclin)D1及p21蛋白表达的影响.结果:白藜芦醇对A375细胞具有明显抑制作用,其抑制增殖作用呈量效及时效关系;白藜芦醇处理组A375细胞周期明显发生改变,细胞周期被阻滞于G1期;白藜芦醇明显下调A375细胞周期素D1的表达,同时上调p21蛋白的表达水平.结论:白藜芦醇可通过调控细胞周期进程抑制黑素瘤细胞增殖,其调控细胞周期的机制与调节细胞周期素D1/p21的表达有关.     

T-钙黏蛋白基因逆转黑素瘤细胞顺铂耐药性的体外研究

目的探讨T-钙黏蛋白(T-cadherin)基因对黑素瘤顺铂(cisplatin,CDDP)耐药细胞株的逆转作用。方法采用大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法诱导B16F10顺铂耐药细胞株(CDDP-R B16F10)。将T-cadherin转染肿瘤细胞。分别采用RT-PCR和Western blot法检测转染后T-cadherin mRNA和蛋白的表达。将T-cadherin与CDDP联合作用于CDDP-R B16F10细胞,采用MTT法、流式细胞术和Transwell侵袭实验检测细胞的增殖、早期凋亡和侵袭力。结果 RT-PCR和Western blot法检测表明,细胞可转录和表达T-cadherin。MTT法显示,T-cadherin联合CDDP可抑制CDDP-R B16F10细胞的增殖(P0.05)。T-cadherin与CDDP联合对CDDP-R B16F10增殖的抑制有交互作用(P0.05)。流式细胞术显示,T-cadherin联合CDDP可促进CDDP-R B16F10细胞的早期凋亡(P0.05)。T-cadherin与CDDP联合对CDDP-R B16F10早期凋亡的促进有交互作用(P0.05)。transwell侵袭实验显示,T-cadherin联合CDDP可抑制CDDP-R B16F10细胞的侵袭能力(P0.05)。T-cadherin与CDDP联合对CDDP-R B16F10侵袭能力的抑制有交互作用(P0.05)。结论 T-cadherin可逆转CDDP-R B16F10对CDDP的耐药性。     

辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2、载脂蛋白A1、T-钙黏蛋白在早发型重度子痫前期期待治疗中的动态变化及其对终止妊娠的指导作用

目的 探讨辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2(Th1/Th2)、载脂蛋白A1(ApoA1)、T-钙黏蛋白(T-cadherin)在早发型重度子痫前期(S-PE)期待治疗中的动态变化及其对终止妊娠的指导作用.方法 选取2018年3月至2021年3月成都市双流区第一人民医院收治的88例早发型S-PE患者作为研究对象,根...     

E-钙黏蛋白和MMP-2在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨E-钙黏蛋白（E—cadherin）和MMP-2在皮肤鳞状细胞癌（CSCC）中的表达及与转移的关系。方法：应用免疫组化SP法检测E—cadherin和MMP-2在10例正常皮肤组织和43例CSCC组织中的表达。结果：43例CSCC中E—cadherin弱表达或无表达者30例（69．8％），其中31例无淋巴结转移的CSCC组织中19例（61．3％）和12例有淋巴结转移的CSCC组织中11例（91．7％）；43例CSCC中34例（79．1％）MMP-2呈阳性表达，其中31例无淋巴结转移的CSCC组织中23例（74．2％）和12例有淋巴结转移的CSCC组织中11例（91．7％）。结论：E—eadherin的表达下调和MMP-2的表达上调可能与CSCC的转移有关。     

胎盘型钙黏蛋白在寻常性银屑病患者血清和皮损中的表达及意义

目的探讨胎盘型钙黏蛋白（P-cadherin,P-cad）在寻常性银屑病发病中的作用和意义。方法选择寻常性银屑病患者40例,分别采用酶联免疫吸附法和免疫组化法检测患者血清和皮损中P-cad的表达,另40名正常人作为对照。结果寻常性银肩病患者血清中P-cad表达水平明显高于正常对照者（P〈0.01）,表达水平与病情严重程度呈正相关;寻常性银屑病患者皮损中P-cad在角质形成细胞（keratinocyte,KC）各层均有表达,而正常对照组仅在表皮基底层表达,表达水平差异有统计学意义,且与银屑病皮损严重程度指数（PASI）呈正相关。结论P-cad在寻常性银屑病呈高表达,且与疾病严重程度呈正相关。     

结缔组织增生性恶性黑素瘤

结缔组织增生性恶性黑素瘤是近年来提出的一种较少见的肿瘤.现报告58例,其特点为肿瘤细胞呈梭形,肉瘤样,背景富含胶原.部分病例见到亲神经现象,表皮内可见恶性雀斑样痣或发育不良痣中所见的异型黑素细胞,真皮常见日光照射变化.绝大部分病例S100蛋白强阳性.预后与普通恶性黑素瘤相似,为高度恶性.     

皮肤转移性黑素瘤1例

患者男,53岁。左大腿肿块伴瘙痒2月余。结合病史、皮损特点、实验室检查、皮损组织病理学改变、免疫组化检查结果,确诊为皮肤转移性黑素瘤。     

孕激素对无经典孕激素核受体黑素瘤细胞体外生长的影响

目的研究孕激素对黑素瘤体外生长的影响及信号传导机制。方法以间接免疫荧光法检测黑素瘤细胞系A375及A875孕激素受体表达;MTT法及流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡,Western blot法检测ERK1/2磷酸化水平。结果A375及A875均无细胞核内孕激素受体蛋白表达;低浓度孕激素对A375及A875表现为促生长效应,随浓度增高促增殖效应减弱并出现抑制效应;低浓度促生长效应可被MEK1/2抑制剂U0126抑制,但不受孕激素受体拮抗剂RU486影响;高孕激素浓度促进细胞凋亡;低浓度孕激素上调ERK1/2磷酸化水平,高浓度作用相反。结论孕激素可通过不依赖经典细胞核受体的非基因组机制调节黑素瘤细胞的生长及凋亡。     

MIA基因-RNAi对人黑素瘤A375细胞增殖的影响

目的探讨RNA干扰技术抑制恶性黑素瘤细胞株A375MIA基因表达后,对A375细胞增殖的影响。方法构建针对人黑素瘤A375细胞(MIA)基因3个不同靶序列的RNAi真核表达载体pLTE-hMIA-RNAi,用磷酸钙细胞转染法把构建的载体分别转染HEK293细胞,采用Western技术和RT-PCR技术分别检测MIA基因蛋白的表达和mRNA水平。选择对MIA基因表达抑制作用最强的RNAi载体转染A375细胞后,用细胞计数检测细胞增殖的变化。结果构建的3个RNAi质粒和对照组相比,pLTE-hMIA-RNAi352质粒对MIA的表达减少量>80%,hMIA的mRNA水平下降约83%,与对照组比较差异有显著性意义。而pLTE-hMIA-RNAi203、pLTE-hMIA-RNAi343质粒对MIA的表达及mRNA水平的影响,与对照组比较差异无显著性意义。转染pLTE-hMIA-RNAi352质粒的A375细胞增殖能力较对照组显著下降。结论构建的针对人MIA基因352位靶序列的RNAi质粒pLTE-hMIA-RNAi352可显著抑制MIA的表达及A375细胞增殖。     

Pigmented Mammary Paget Disease Misdiagnosed as Malignant Melanoma

Pigmented mammary Paget disease is a very rare clinicopathologic variant of mammary Paget disease. Diagnosis is often difficult because its clinical and histological features are very similar to those of malignant melanoma. Herein, we report a case of pigmented mammary Paget disease misdiagnosed as malignant melanoma.     

A Malignant Melanoma Associated with a Blue Nevus of the Lip

Blue nevi are characterized by a collection of pigment-producing melanocytes in the dermis. These lesions clinically present as well demarcated cerulean-blue or bluish black colored papules or plaques that usually measure less than 1 cm in diameter. They are typically found on the dorsal surface of the hands and feet or in the head and neck region; however, they are rarely found in the oral cavity. These lesions are usually benign and stable over time. However, malignant melanomas developing in or associated with a blue nevus (which is also called malignant blue nevus) have been only rarely reported. A malignant blue nevus might develop in a common blue or cellular blue nevus, a giant congenital nevus or in a nevus of Ota, or it may be malignant from the start. Malignant blue nevi most commonly are found on the scalp. A malignant blue nevus of the lip has not been previously reported in the medical literature. We report here on a patient with a malignant melanoma associated with a blue nevus of the lip. The malignant melanoma was presumed to have developed from a blue nevus that was present on the upper lip of a 50-year-old male.     

黑素瘤的分子发病机制和靶向治疗新进展

黑素瘤是一种皮肤恶性肿瘤,晚期患者预后不良,目前尚无有效的治疗方法。在黑素瘤中可以通过多种途径激活RAS/RAF/MEK/ERK(MAPK)和PI3K/AKT(AKT)两个信号传导通路。本文总结与黑素瘤发病机制最相关的信号传导通路及新的治疗策略。     

生存素反义寡核苷酸对人恶性黑素瘤A375细胞生物学行为的影响

目的研究生存素反义寡核苷酸(AS-ODN)经脂质体介导转染对A375细胞增殖、凋亡的影响。方法合成生存素硫代反义寡核苷酸(AS-ODN),脂质体携带转染人恶性黑素瘤A375细胞。采用台盼蓝计数、软琼脂克隆形成试验、电镜、流式细胞仪检测AS-ODN对A375细胞增殖及凋亡的影响。通过裸鼠致瘤实验观察AS-ODN对A375细胞动物体内增殖的抑制作用。结果生存素反义寡核苷酸能降低G2/M期细胞百分比,诱导细胞凋亡发生,明显抑制A375细胞的生长和克隆形成,裸鼠体内A375细胞恶性增殖潜力下降。结论脂质体介导生存素AS-ODN能有效抑制A375细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡。     

足底恶性黑色素瘤的整形外科治疗

目的探讨手术治疗足底恶性黑色素瘤的技术及效果。方法应用病灶切除,创面植皮或皮瓣修复的方法。结果5例患者,术后皮片、皮瓣全部成活,随访3个月～4年,无1例复发,患足功能正常。结论对足底恶性黑色素瘤的治疗,应用皮瓣修复可取得满意的临床效果。