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目的 探讨芹菜素(apigenin,Api)对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响.方法 选情前期成年雌性SD大鼠20只,取卵巢颗粒细胞进行原代细菌培养,贴壁后随机分为4组(对照组、Api 10-4M组、Api 10-5M组、Api 10-6M组),加入处理因素.培养结束后,收集各组培养卵巢颗粒细胞,经苏木精-伊红染色和吖啶橙染色观察颗粒细胞形态,经MTT法及流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡率,观察Api对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响.结果 MTT法检测对照组,Api 10-4M组、Api 10-5M组、Api 10-6M组A值分别为(0.87±0.059)、(0.29±0.057)(0.49±0.03)、(0.63±0.035);实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),提示实验组颗粒细胞数量减少,出现凋亡细胞;流式细胞仪检测对月强组、Api 10-4M组、Api 10-5M组、Api 10-6M组的颗粒细胞凋亡率分别为(3.63±0.37)%、(36.37±2.28)%、(34.67±1.96)%、(30.92±1.65)%,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),提示实验组颗粒细胞凋亡率明显增高.结论 Api能抑制卵巢颗粒细胞的增殖,并促进其凋亡. 相似文献
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目的探讨米非司酮对体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法体外培养SD雌性大鼠的卵巢颗粒细胞,采用流式细胞术及荧光染色观察并分别了解加入米非司酮后细胞的凋亡情况。结果颗粒细胞凋亡数量随米非司酮剂量增加而增多,凋亡率在米非司酮低剂量组与对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05),中剂量组、高剂量组高于对照组(P<0.05),各处理组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论米非司酮可诱导颗粒细胞发生凋亡,离体颗粒细胞凋亡率随米非司酮剂量增加而增高,可能是米非司酮抑制卵泡发育的机制之一。 相似文献
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目的研究镉对大鼠卵巢颗粒细胞孕激素合成的影响,并探讨其机制。方法未成年Wistar大鼠皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG)100IU,48h后,取出卵巢颗粒细胞体外培养,备用。①取备用细胞随机分成4组,染镉剂量分别为0、10、20、40μmol/L,孵化30min,测孕酮、cAMP含量。②取备用细胞,随机分为3组,分别为空白对照组、40μmol/LCdCl2、1mmol/L8-Br-cAMP(cAMP类似物) 40μmol/LCdCl2,培养2h,测量孕酮含量。结果各剂量组与对照组比较孕酮含量差异有统计学意义(P<0.01),且随着染镉剂量的增加孕酮含量明显下降;8-Br-cAMP 40μmol/LCdCl2组与单纯40μmol/LCdCl2比较,孕酮含量明显升高(P<0.01);高剂量(40μmol/L)、中剂量(20μmol/L)组镉抑制细胞内cAMP的含量(P<0.01)。结论在本实验的条件下,镉可抑制大鼠颗粒细胞孕酮的合成;8-Br-cAMP可增加孕酮含量,且可逆转镉所导致的孕酮降低;镉对cAMP的抑制作用可能是其抑制孕酮合成的机制之一。 相似文献
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为探讨铅对小鼠卵巢颗粒细胞凋亡率的影响,本研究将72只25日龄SPF级ICR雌性小鼠随机分为1和2mg/kg乙酸铅染毒组和对照组(生理盐水),每组24只.预饲2 d后,每只小鼠腹腔注射8 IU囊泡包埋的促卵泡素(FSH).48 h后,腹腔注射染毒乙酸铅,染毒剂量为0.2 ml/只.分别于染毒后48和96 h用流式细胞仪测定卵巢颗粒细胞凋亡率.结果 显示.染毒48 h后,对照组和1、2mg/kg乙酸铅染毒组颗粒细胞凋亡率分别为(7.6666±1.9675)%,(6.1000±0.435 9)%,(6.833 3±1.238 7)%,3者间比较,差异无统计学意义(P>0.05).染毒96 h后,1、2 mg/kg乙酸铅染毒组颗粒细胞凋亡率分别为(16.9000±2.433 8)%和(22.933 3±4.543 3)%.均高于对照组[(8.2000±1.50444)%1,差异有统计学意义(P<0.05).与染毒48 h比较.染毒96 h后各乙酸铅染毒组的细胞凋亡率均较高,差异有统计学意义(P<0.05).表明铅对卵巢颗粒细胞凋亡的促进作用具有时间依赖性和一定的剂量相关性. 相似文献
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多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞凋亡研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
多囊卵巢综合征(PCOS)是一种以内分泌紊乱为主、多种代谢异常导致的异质性临床综合征。PCOS患者双侧卵巢有大量窦卵泡存在,但是不能周期性产生成熟卵泡,其病理机制尚不清楚。目前认为原发性、内在性卵泡生长异常可能是引起PCOS不排卵及临床内分泌改变的病理基础。研究表明,内在性的卵泡发育异常可能与卵巢颗粒细胞的凋亡调控失常有关。通过对PCOS患者卵巢颗粒细胞凋亡的研究,为PCOS病理机制研究提供相关的理论依据,为临床治疗提供新的方向和途径。 相似文献
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多囊卵巢综合征(PCOS)是一种以内分泌紊乱为主、多种代谢异常导致的异质性临床综合征.PCOS患者双侧卵巢有大量窦卵泡存在,但是不能周期性产生成熟卵泡,其病理机制尚不清楚.目前认为原发性、内在性卵泡生长异常可能是引起PCOS不排卵及临床内分泌改变的病理基础.研究表明,内在性的卵泡发育异常可能与卵巢颗粒细胞的凋亡调控失常有关.通过对PCOS患者卵巢颗粒细胞凋亡的研究,为PCOS病理机制研究提供相关的理论依据,为临床治疗提供新的方向和途径. 相似文献
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目的通过对原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞进行邻苯二甲酸二乙基己酯(di-2-ethylhexylphthalate,DEHP)染毒,探讨DEHP在体外对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡通路Caspase-3和Caspase-9基因表达以及细胞凋亡的影响。方法分离和培养原代未成熟大鼠的卵巢颗粒细胞,用不同浓度的DEHP(0、10、50、100 nmol/L)染毒24 h。荧光定量PCR法检测颗粒细胞的Caspase-3和Caspase-9基因mRNA表达水平,Weastern blot检测颗粒细胞Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平,流式细胞术检测颗粒细胞凋亡率。结果与对照组相比,各DEHP处理组卵巢颗粒细胞Caspase-3基因mRNA和蛋白表达水平下降(P<0.05),Caspase-9基因mRNA和蛋白表达水平也降低(P<0.05),同时细胞凋亡率增加(P<0.05),呈浓度依赖关系。结论 DEHP可通过激活Caspase通路而诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡,进而影响卵巢功能。 相似文献
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目的动态观察燃煤型氟中毒对雌性大鼠卵巢颗粒细胞的影响。方法将清洁级SD雌性大鼠90只随机分为对照组、中氟组、高氟组,每组30只,对照组大鼠食用非病区玉米饲料(含氟量5.2 mg/kg),中氟组和高氟组分别在饲料中添加45%和75%的某病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料(含氟量分别为47.8、96.0 mg/kg)。每组分别于60、120、180 d动态观察雌鼠氟斑牙变化情况,测定尿氟、骨氟水平,采用透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构变化,末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果成功建立燃煤型氟中毒雌鼠模型。透射电镜下发现,对照组卵巢颗粒细胞形态结构正常;染氟组可见颗粒细胞核膜皱缩,内质网、核糖体逐渐减少,线粒体肿胀,胞浆内出现较多的脂滴,随染氟剂量的增加逐渐出现颗粒细胞凋亡特征。除中氟组染氟60 d时卵巢颗粒细胞凋亡率与对照组差异无统计学意义外(P0.05),各染氟组雌鼠颗粒细胞凋亡率均高于同期对照组(P0.05),且随染氟时间的延长和剂量的增加,颗粒细胞凋亡率逐渐增加。结论氟中毒可能通过影响大鼠卵巢颗粒细胞结构,诱导和促进卵巢颗粒细胞凋亡,且颗粒细胞超微结构的损伤程度和凋亡率与染氟时间及剂量有关。 相似文献
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研究表明颗粒细胞凋亡是导致卵泡闭锁的重要原因,PCD相关基因P53bcl-2WT-1Fas卵巢局部自分泌和旁分泌因子与颗粒细胞凋亡有着密切的关联。 相似文献
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乌头碱对大鼠卵巢颗粒细胞毒性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
[目的]研究乌头碱对体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞的毒性。[方法]对25~29日龄雌性SD大鼠皮下注射孕马血清促性腺激素(PMSG),无菌制备卵巢颗粒细胞悬液,采用透射电镜观察管嵴状线粒体进行细胞鉴定。试验设4个乌头碱浓度组(0、5×101、5×102、5×103、5×104μg·L-1)和1个溶剂对照组(二甲亚砜)。选用MTT法(四唑盐比色法)测定乌头碱对大鼠卵巢颗粒细胞活力的影响,用雌二醇和孕酮的放免分析药盒测定乌头碱对颗粒细胞激素分泌功能的影响,用丙二醛和超氧化物歧化酶试剂盒测定乌头碱对大鼠颗粒细胞的氧化损伤作用。[结果]与溶剂对照组相比,乌头碱作用24h后,高浓度和次高浓度组(5×103、5×104μg·L-1)可明显抑制大鼠颗粒细胞的增殖,差异有统计学意义(P﹤0.01);高剂量组(5×104μg·L-1)丙二醛含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]在本实验室条件下,乌头碱浓度高于5×103μg·L-1时,对雌性大鼠卵巢颗粒细胞有毒性作用,主要表现为抑制颗粒细胞的增殖及对细胞的氧化损伤作用。 相似文献
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米非司酮对卵巢颗粒细胞的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
郭庆云 《国外医学(计划生育.生殖健康分册)》2006,25(6):324-327
米非司酮作为一种高;枣的孕酮受体拮抗剂,通过阻断孕酮的生理效应而发挥其生育调节作用。卵巢颗粒细胞是成熟卵泡中最大的细胞群,对卵细胞的发育、成熟及胚胎形成有重要影响。米非司酮能通过不同信号传导途径诱导卵巢颗粒细胞发生凋亡,干扰卵泡成熟及排卵。黄体生成激素峰后卵巢颗粒细胞分泌孕酮并表达孕激素受体(PR),米非司酮能抑制颗粒细胞分泌孕酮,改变颗粒细胞PR的表达。另外,米非司酮还可影响颗粒细胞生成雌二醇和松弛素。 相似文献
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目的 观察正己烷对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡调控基因bcl-2、bax、bcl-x1、xiap mRNA表达的影响.方法 48只成年雌性Wistar大鼠按体重随机分为4组,分别给予浓度为0,3.01,9.03,27.1 g/m3正己烷静式吸入染毒;每天4 h,每周6 d,持续6周;染毒结束待大鼠进入动情期,处死并提取卵巢颗粒细胞,并采用实时荧光定量PCR法测定颗粒细胞bcl-2,ax、bcl-x1、xiap mRNA表达水平.结果 随着染毒剂量增加,各组bcl-2 mRNA表达呈下降趋势(2-△△CT值分别为1.069,0.762,0.698,0.690),bax mRNA表达呈上升趋势(2-△△CT值分别为1.039,1.242,1.317,1.895),各染毒组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).各染毒组bcl-x1 mRNA表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05);27.1g/m3染毒组xiap mRNA表达(0.694)低于对照组(0.999),差异有统计学意义(P<0.05).结论 正己烷上调大鼠卵巢颗粒细胞bax,下调bcl-2、xiap mRNA表达,可能是正己烷致使卵巢颗粒细胞凋亡的机制之一. 相似文献
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目的:研究人卵母细胞发育潜能与颗粒细胞凋亡之间的关系。方法:将卵子在体外经过28~30 h培养后,取其颗粒细胞,用TUNEL法进行凋亡率的分析,并与卵子的成熟情况和卵子的评分及形成胚胎结果进行对照。结果:培养后,随着卵母细胞成熟度的降低,凋亡率升高;而且随着卵母细胞评分和发育潜能的降低,颗粒细胞凋亡率逐渐升高。结论:卵子发育潜能与颗粒细胞凋亡之间关系密切,通过测定颗粒细胞的凋亡率可预测未成熟卵母细胞的发育潜能。 相似文献
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目的:探讨卵巢颗粒细胞高尔基体磷酸化蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)表达对颗粒细胞凋亡及卵母细胞发育潜能的影响。方法:收集2016年5月—2017年4月因输卵管性不孕行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的80例患者的卵巢颗粒细胞,根据妊娠结局分为临床妊娠组40例、未妊娠组40例。采用免疫细胞化学、蛋白质印迹(Western blotting)方法检测2组患者颗粒细胞GOLPH3、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,采用实时聚合酶链反应(real-time PCR)方法检测2组患者GOLPH3、Bcl-2、Bax、Caspase-3基因表达,并进行相关性分析。结果:GOLPH3、Bcl-2、Bax、Caspase-3在2组颗粒细胞中均有表达,其中临床妊娠组GOLPH3、Bcl-2的表达高于未妊娠组(P0.05),而Bax、Caspase-3的表达低于未妊娠组(P0.05)。相关性分析显示,GOLPH3表达与Bcl-2表达呈显著正相关(P0.001),与Bax、Caspase-3表达呈显著负相关(均P0.001),与优质胚胎数、优质囊胚数、可利用胚胎数呈显著正相关(均P0.001)。结论:卵巢颗粒细胞中GOLPH3表达水平可能通过Bcl-2、Bax、Caspase-3凋亡信号转导通路调控颗粒细胞凋亡作用,并进而对卵母细胞的发育潜能产生影响。 相似文献
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目的研究邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)对大鼠卵巢颗粒细胞中细胞凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响。方法体外培养25 d雌性SD大鼠卵巢颗粒细胞,分别加入DBP使终浓度分别(0、5、20、80μmol/L),培养24 h。采用放射免疫方法测定雌二醇(estradiol,E2)和孕酮(progestone,P)的水平;采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测卵巢颗粒细胞中Bcl-2、Bax mRNA和蛋白的表达。结果 DBP染毒后颗粒细胞分泌的E2及P水平下降,各剂量DBP均可降低颗粒细胞中Bcl-2 mRNA和蛋白的表达(P0.05),且表达量与DBP剂量呈反比,同时,DBP可以增加颗粒细胞中Bax mRNA和蛋白的表达(P0.05),且表达量与DBP剂量呈正比。结论 DBP可导致大鼠卵巢颗粒细胞凋亡,且Bcl-2/Bax比例失调可能是导致其凋亡的机制。 相似文献
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卵泡发育和闭锁与卵巢细胞凋亡的研究进展 总被引:7,自引:0,他引:7
近年来对卵巢细胞凋亡的胞内机制研究取得了很大的进展,已知卵巢体细胞和生殖细胞的凋亡参与了卵泡的发育和闭锁,体细胞(主要指颗粒细胞)的凋亡决定于Bcl-2家族,Caspases家族和Apaf-1三大类基因表达产物的相互作用与平衡,其中Bcl-2家族又分为三个亚家族,对凋亡分别有着抑制或促进的作用,它们之间亦保持着平衡,Caspases家族成员又有不同的分工,分别在凋亡的起始和效应阶段发挥作用,Apaf-1则是连接上游调控因子(如Bcl-2家族)和下游效应分子(如Caspases家族)的重要的中间蛋白质,颗粒细胞的凋亡主要在发育晚期的卵泡闭锁中起主导作用,而卵细胞的凋亡主要在发育早期的卵泡闭锁中起主导作用。 相似文献
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《中国妇幼保健》2017,(12)
目的研究在体外条件下葛根素对顺铂引发的大鼠卵巢颗粒细胞损伤的影响。方法分离获取21~25日龄Wistar雌性大鼠的卵巢颗粒细胞,建立稳定的生长和传代体系,鉴定获取颗粒细胞纯度,以MTT法绘制细胞生长曲线。取对数生长期细胞,以浓度分别为1、2.5、5、10、20μg/ml的顺铂作用于细胞,继续培养48 h后行MTT法检测,并由吸光度计算出细胞相对活力。描述顺铂药物浓度和颗粒细胞相对活力之间的关系。选定5、10、20μg/ml三组浓度的顺铂致颗粒细胞损伤,各组均加入0.1、0.5、1 mg/ml不同浓度的葛根素稀释液培养,MTT法检测。判断葛根素对颗粒细胞相对活力的回复能力,以及浓度与效应之间的关系。结果顺铂可以抑制颗粒细胞的生长,并且抑制效应具有剂量依赖性。当顺铂浓度为1μg/ml时,可抑制颗粒细胞的生长,与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05);当顺铂浓度≥2.5μg/ml时,明显抑制颗粒细胞的生长,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),抑制效果呈剂量依赖性。当顺铂浓度达到20μg/ml,颗粒细胞生长的相对活力较对照组下降近30%。选用5、10、20μg/ml三种浓度顺铂引发卵巢颗粒细胞损伤,在三种条件下分别加入0.1、0.5及1 mg/ml葛根素三种药物浓度共同作用。实验结果显示,葛根素对于3种浓度顺铂引发的卵巢颗粒细胞损伤均有一定程度的抑制作用,且抑制效用具有剂量依赖性。当顺铂浓度升高而导致细胞活力明显下降时,葛根素的保护效应并不发生明显改变。结论三种浓度的葛根素均能够在体外条件下对顺铂引发的大鼠卵巢颗粒细胞损伤起到抑制作用,作用效应具有剂量依赖性;当顺铂浓度升高导致卵巢颗粒细胞损伤增加明显时,葛根素的保护作用未被减弱。 相似文献