大花红景天化学成分的研究

从大花红景天中分离得到5个结晶，经光谱及理化性质鉴定为：草质素-7-O-α-L-鼠李糖甙（rhodionin，Ⅰ），草质素-7-O-（3"-β-D-葡萄糖基）-α-L-鼠李糖甙（rhodiosin，Ⅱ），酪醇（tyrosol，Ⅲ），红景天甙（salidroside，Ⅳ），没食子酸（gallicacid，Ⅴ）。     

大花红景天对大白鼠SOD及LPO水平的影响

大花红景天醇提出物能提高大鼠红细胞、肝脏SOD的活性,降低血浆、心肌、脑组织中LPO的含量。     

大花红景天中红景天苷的含量测定

目的:对大花红景天中红景天苷进行含量测定。方法:采用HPLC法测定红景天苷的含量。结果:大花红景天中红景天苷在1.68~10.08μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.03%,RSD为1.62%。结论:西藏地区产的大花红景天药材中的红景天苷含量均大于1.0%,药材质量比较稳定,用该方法对大花红景天进行检验及鉴别简便准确,重现性好,专属性强,可作为大花红景天药材的质量控制。     

高效液相色谱法测定大花红景天中没食子酸、红景天苷及儿茶素的含量

目的 建立大花红景天中没食子酸、红景天苷及儿茶素的含量测定方法.方法 采用反相高效液相色谱法,色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-水(含0.1%磷酸),梯度洗脱,流速为1 ml·min-1,检测波长为280 nm,柱温为室温,按外标法定量.结果 没食子酸的加样回收率平均为98.4%,RSD＝2.78%;红景天苷的加样回收率平均为99.2%,RSD＝2.35%;儿茶素的加样回收率平均为98.7%,RSD＝2.43%.结论 所建立方法简便快速,结果准确,稳定,可以作为红景天药材的质量评价方法.     

大花红景天的抗氧化性溶血作用研究

目的：研究大花红景天正丁醇提取物（W）的抗氧化作用及其机制。方法：测定对FeSO4/Cys氧化体系致肝微粒体脂质过氧化的抑制率、对H2O2引起红细胞溶血的抑制效果和清除DPPH自由基实验。结果：50μg/ml W对肝微粒体脂质过氧化的产物MDA生成有明显的抑制作用；对过氧化氢引起氧化溶血有抑制作用；对DPPH自由基也有一定的清除作用。结论：大花红景天具有一定的抗氧化能力。     

大花红景天药材的HPLC指纹图谱研究

目的：利用高效液相色谱法建立了大花红景天的色谱指纹图谱。方法：固定相采用C18反相色谱柱,流动相为甲醇-0.04%三氟乙酸水溶液梯度洗脱,检测波长280nm,流速为1.0mL/min。结果：通过比较发现大花红景天样品的6个共有峰,可作为鉴定大花红景天药材的主要依据。结论：方法简便快速,为大花红景天药材的鉴定和质量控制提供了较全面的信息。     

响应面法优化超声辅助碱提大花红景天多糖

目的采用响应面法优化超声辅助碱提大花红景天多糖。方法以大花红景天多糖得率为指标,以Na OH溶液浓度、超声时间和超声温度为因素,按照Box-Benhnken组合试验设计来优化提取工艺。结果最佳条件为Na OH溶液浓度0.25 mol/L,超声温度47.15℃,超声时间27.28 min,得率达29.41%,较水提法和超声波辅助水提法分别增加了1.50倍和0.73倍。结论该方法可提高大花红景天多糖的得率。     

RP-HPLC同时测定大花红景天中3种活性成分的含量

目的用RP-HPLC-ELSD同时测定大花红景天中红景天苷、大花红天素、紫丁香苷的含量。方法采用Phenomenex C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 m L/min,雾化温度36℃,漂移管温度60℃,增益10。结果红景天苷、大花红天素、紫丁香苷在73.59~1471.8 ng、81.52~1630.4 ng、78.73~1574.6 ng范围内的线性关系良好。平均回收率(%)分别为98.65、99.33、99.67。结论该方法灵敏、准确,分离效果较好,无干扰,可作为完善大花红景天质量标准评价提供依据,为临床合理用药提供科学依据。     

大花红景天尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因组DNA的克隆及分析

目的 克隆大花红景天Rhodiola crenulata尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因组DNA,并利用生物信息学对其编码区与启动子进行分析.方法 以大花红景天为样品,采用优化的CTAB法提取大花红景天基因组DNA,并利用hiTAIR-PCR 技术经过3次步移获得大花红景天UDPGT (RcUDPGT)基因DNA序列,并利用生物信息学对其进行分析.结果 克隆得到RcUDPGT基因的DNA序列2 977 bp,其中包含1 499 bp的编码区域(包括82 bp的内含子序列)和1500 bp的编码区5,上游侧翼域序列(包括启动子区域).生物信息学分析证明该序列为UDPGT基因且与其他植物UDPGT同源,具有亲水性且定位于细胞质中,三级结构预测表明该基因编码的蛋白具有UDPGT功能结合位点.启动子分析表明其存在光响应、厌氧响应、热响应、低温响应、压力与防御响应和花色素苷合成响应元件等.结论 克隆的RcUDPGT基因结构完整,具有典型的功能结合位点,为红景天分子生物学与代谢工程研究提供参考.     

UPLC测定大花红景天中5种化学成分的含量

目的:建立UPLC法同时测定大花红景天中没食子酸、红景天苷、酪醇、没食子酸乙酯、对香豆酸5种成分的含量,运用主成分分析法对38批不同来源的商品药材和自采药材进行对比分析。方法:采用ACQUITY UPLCHSS T3色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速:0.2 m L/min;柱温:40℃;进样量:2μL;检测波长:没食子酸、红景天苷、酪醇、没食子酸乙酯为275 nm,对香豆酸为308 nm。结果:各指标成分之间分离度良好,在选定的浓度范围内线性关系良好(r≥0.9995),平均加样回收率(n=6)为96.54%~102.15%,RSD为1.95%~2.95%,表明该法快速、准确,具有良好的重复性和稳定性。主成分分析结果表明,商品药材与自采药材中上述几种成分存在一定的差异。结论:建立的UPLC检测方法可用于快速测定大花红景天中5种成分的含量,能够为红景天药材标准的提高和完善提供依据。     

HPLC法同时测定不同产地大花红景天中6种活性成分

目的对青藏高原不同产地大花红景天Rhodiola crenulata中没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸进行分析研究,建立定量分析方法,为其进一步利用提供依据。方法采用30%乙醇提取样品;Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱;检测波长275 nm,柱温25℃。结果没食子酸、红景天苷、酪醇、儿茶素、没食子酸乙酯、对香豆酸分别在38.2~382.0 ng/m L(r=0.999 8)、301.0~3 010.0μg/m L(r=0.999 9)、19.8~198.0 ng/m L(r=0.999 6)、17.1~171.0 ng/m L(r=0.999 6)、4.5~45.0 ng/m L(r=0.999 8)、6.38~63.80 ng/m L(r=0.999 4)呈良好的线性关系,加样回收率均符合定量测定要求。结论该方法简便,快速,准确,可用于同时对青藏高原大花红景天中6种活性成分的测定。     

四裂红景天与大花红景天红景天的NMR指纹图谱与化学模式识别方法研究

目的建立基于核磁共振技术~1H-NMR指纹图谱-化学模式识别的四裂红景天和大花红景天的品种分类和鉴别方法。方法采用高分辨(600 MHz)的核磁共振(NMR)指纹图谱技术,测定四裂红景天和大花红景天的全成分信息~1H-NMR指纹图谱,结合相似性分析、层次聚类分析、主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)进行化学模式识别分析。结果 ~1H-NMR指纹图谱-化学模式识别方法是一种有效的区分、鉴别四裂红景天和大花红景天的方法。四裂红景天和大花红景天的~1H-NMR指纹图谱差异性较明显,能够真实、全面地反映红景天中的特征性成分和内在品质,四裂红景天和大花红景天主要差异成分为萜类、黄酮类,尤其萜类成分大花红天素是鉴别四裂红景天和大花红景天的特征性成分,可作为四裂红景天和大花红景天的分类和鉴别指标。结论 ~1H-NMR指纹图谱-化学模式识别方法是一种有效的红景天品种分类和鉴别方法,为红景天属药用植物的品种鉴别和品质评价奠定基础。     

三七体细胞胚发生及植株再生过程中主要皂苷成分的累积

目的 分析以栽培三七Panax notoginseng根为外植体诱导体细胞胚发生及植株再生过程中总皂苷及3种人参皂苷（人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁）的累积规律。方法 采用分光光度法分析体细胞胚发生发育过程中不同时期的总皂苷累积量;采用高效液相色谱法测定3种人参皂苷（人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁）的累积量。结果 体胚苗中的总皂苷质量分数最高,为7.79 %,占栽培三七根（8.61%）的90.48%,质量分数最低的为胚性愈伤组织,为2.47%。因材料的比生长速率存在差异,总皂苷累积效率的顺序为体胚苗＞前期体胚＞后期体胚＞胚性愈伤。对3种人参皂苷单体物质的分析显示：后期体胚中3种人参皂苷的量总和最大,为7.05 mg/g,胚性愈伤组织的最低,为2.78 mg/g;人参皂苷Rg₁在前期体胚时质量分数达到最高,为2.24 mg/g;人参皂苷Rb₁在后期体胚中的质量分数达到最高,为4.03 mg/g;人参皂苷Re在胚性愈伤组织中的量最高,为1.21 mg/g。3种人参皂苷的总累积效率在前期体胚中达到最大,为5.022 5 mg/(g·周),在体胚苗中最低,为1.947 4 mg/(g·周)。结论 总皂苷质量分数及累计效率均在体胚苗中达到最大值;3种人参皂苷总量及总累计效率分别在后期体胚和前期体胚中达到最大值。     

云南常见药用红景天的RAPD分析

目的研究云南常见药用植物红景天的遗传背景。方法采用RAPD技术对3种6个居群59个红景天样品进行了遗传关系研究。结果大花红景天3个居群的多态位点百分率(PPB)分别为37.97%、46.15%、39.45%,Nei's基因多样性(h)分别为0.1103、0.1437、0.1371,Shannon's信息指数(I)分别为0.1736、0.2221、0.2067,物种水平的PPB为70.47%,I为0.2583,基因分化系数Gst为0.2630;长鞭红景天2个居群的PPB分别为43.67%、44.42%,I分别为0.2153、0.2174,物种水平的PPB为65.51%,Gst为0.3132,I为0.3139;云南红景天的PPB为36.97%,I为0.1881。结论RAPD分子标记可很好地用于红景天物种的分子鉴定和遗传背景研究。     

党参微卫星引物筛选及群体遗传多样性研究

目的 利用筛选的党参多态性微卫星引物进行党参群体遗传多样性研究.方法 利用磁珠富集法分离党参核基因组微卫星引物,并选取党参4个野生居群48个样品进行遗传多样性分析.结果 筛选出了10个能成功扩增党参样品的微卫星引物;这些引物扩增产物的等位基因数目为5～14个,观察杂合度范围为0.446～0.833,期望杂合度范围为0.697～0.895;使用4个党参近缘物种(轮叶党参、球花党参、鸡蛋参和长叶党参)进行引物通用性检测,发现有5对引物(Cpi01、Cpi04、Cpi06、Cpi07和Cpi08)能同时在4个物种中成功扩增.结论 筛选出的多态性微卫星引物能用于党参的遗传多样性和群体遗传结构研究,同时也能够用于党参属其他近缘物种的群体遗传学研究.     

五味子中内生拮抗活性细菌的分离与筛选

目的 从不同地区采集五味子植株,分离内生细菌,并进行菌群密度、拮抗菌筛选和抑菌活性研究。方法 采用平板分离法分离内生细菌并纯化典型菌株;平板对峙法测定体外拮抗活性;生长速率法测定抑菌活性。结果 不同种植地、五味子不同器官中内生细菌的菌群密度差异较大,野生的较栽培的大;五味子各器官中,根中的内生细菌最多,其次为茎,叶片中最少。从分得的大量内生细菌中共纯化出302株内生细菌,拮抗菌比率平均为24.19%。从中选出了12株对五味子茎基腐病菌、人参根腐病菌、棉花枯萎病菌、番茄灰霉病菌、人参黑斑病菌具有较好拮抗作用的菌株。12株菌株的发酵产物对供试病原菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其中JYg-2对人参根腐病的抑制率最高,达80.02%。结论 五味子植株体内存在大量内生细菌,并且含有一定比率的拮抗菌,拮抗活性稳定。因此五味子内生细菌可以成为开发拮抗菌资源的重要途径,并具有较大潜能。     

拟缺香茶菜化学成分研究

目的对拟缺香茶菜Isodon excisoides全草的化学成分进行研究。方法采用多种柱色谱方法分离纯化,通过理化常数和光谱分析鉴定化合物的结构。结果从拟缺香茶菜全草95%乙醇提取物中分离得到24个化合物,分别鉴定为(E)-5-hydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-5-(4-hydroxyphenyl)pent-1-en-3-one(1)、2α,3α,24-三羟基-11-烯-乌苏-28,13β-内酯(2)、腺花香茶菜素(3)、2α,3α,24-三羟基乌苏酸(4)、2α,3α-二羟基乌苏酸(5)、2α,3β,24-三羟基乌苏酸(6)、3′,4′,5-三羟基-6,7-二甲氧基黄酮(7)、2α,3α-二羟基齐墩果酸(8)、2α,3α,24-三羟基齐墩果酸(9)、无羁萜(10)、尾叶香茶菜丙素(11)、鄂西香茶菜素(12)、大锥香茶菜甲素(13)、1α,14β,20-三羟基-7,20-环氧-对映-贝壳杉-16-烯-15-酮(14)、肾形香茶菜丙素(15)、kamebacetal A(16)、木犀草素(17)、胡麻素(18)、熊果酸(19)、β-谷甾醇(20)、阿魏酸(21)、3,4-二羟基桂皮醛(22)、3-吲哚甲醛(23)、十七烷酸(24)。结论化合物1为新化合物,命名为拟缺香茶菜酮,化合物3～16及22～24为首次从该种植物中分离得到,化合物2为首次从该属植物中分离得到。     

基于网络药理学的藏药红景天功效关联性质量标志物预测分析

目的 基于中药质量标志物（quality marker，Q-Marker）核心理论，结合文献研究与网络药理学分析，预测藏药红景天传统功效关联性Q-Marker。方法 通过文献整理、TCMID数据库收集构建红景天化学成分库，利用FAFDrugs4网站计算各成分吸收、分布、代谢、排泄和毒理性（ADMET）属性，筛选得到类药性化合物；采用BATMAN-TCM平台预测并收集红景天类药性化合物靶点，将靶点导入DAVID数据库和CTD平台富集分析得到红景天作用组织和疾病；根据Q-Marker定义，结合红景天类药性化合物与传统功效主治的关联性，分析红景天潜在的Q-Marker。结果 红景天中67个类药性化合物共作用407个靶点；主要靶向作用于肝、肺、肾、心、脑等组织，涉及癌症、高血压、脑缺血、心肌缺血、动脉粥样硬化、心衰、哮喘等1060种疾病；结合《晶珠本草》1986年版等典籍记载藏药红景天"归肺心经，清肺热，治脉病"的传统功效主治与现代文献研究，揭示了类药性成分没食子酸乙酯、没食子酸、红景天苷、草质素、咖啡酸、儿茶素、原儿茶酸、香草酸等可作为红景天传统功效关联性Q-Marker。结论 以Q-Marker"有效性"为核心要素，辅以其他原则分析，有效预测了红景天功效关联性Q-Marker。建议后期可开展功效相关药理学及病理状态下药动学等研究，进一步确定其Q-Marker，为制定全面科学的红景天质量控制标准提供参考。     

苗药冠盖藤的化学成分研究

目的 研究苗药冠盖藤Pileostegiaviburnoides藤茎的化学成分。方法 采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱及重结晶等方法进行分离纯化,利用波谱分析结合理化性质鉴定化合物的结构。结果 从苗药冠盖藤藤茎甲醇提取物中共分离得到13个化合物,分别鉴定为木栓酮（1）、3-氧代木栓烷-28-醛（2）、豆甾-4-烯-3-酮（3）、豆甾醇（4）、(24R)-5A-豆甾烷-3, 6-二酮（5）、二十四烷胺（6）、乌苏酸（7）、坡模酸（8）、齐墩果酸（9）、伞形花内酯（10）、4-hydroxymellein（11）、臭矢菜素A（12）、胡萝卜苷（13）。结论 化合物6为首次从天然产物中分离得到,化合物2～5、7～9、11、12均为首次从本属植物中分离得到,所有化合物均为首次从冠盖藤中分离得到。