氧化苦参碱对内毒素作用的人牙周膜细胞增殖和分泌肿瘤坏死因子-α的影响

目的观察氧化苦参碱(OMT)对内毒素(LPS)作用下的人牙周膜细胞(HPDLC)增殖和分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法体外原代培养HPDLC,采用MTT法观察OMT对LPS作用的HPDLC增殖活性的影响,采用酶联免疫方法检测培养上清液中的TNF-α水平。结果 100μg/mL LPS可抑制HPDLC的增殖活性并刺激其分泌TNF-α,而在加入LPS同时分别给予1～25μg/mL OMT能在一定程度上恢复HPDLC的增殖活性并抑制LPS刺激的HPDLC TNF-α的分泌。结论 OMT对LPS作用的HPDLC具有保护作用。     

苦参碱与氧化苦参碱抑制HepG2细胞增殖的对比研究

目的比较研究苦参碱与氧化苦参碱体外抑制肝癌HepG2细胞增殖的效果并初步探讨其机制。方法不同剂量苦参碱与氧化苦参碱注射液处理细胞 ,细胞计数及溴化四唑蓝实验观察细胞增殖抑制 ;光镜观察细胞形态改变 ;流式细胞仪和Tunnel实验观察细胞凋亡并检测细胞周期 ;免疫组化观察凋亡相关基因Bax与Bcl 2的表达。结果 0 .8g/L苦参碱处理细胞 3d即可明显抑制HepG2细胞增殖 ,细胞存活率为 5 1% ;1.5g/L苦参碱可明显诱导细胞凋亡 ,用药后大量细胞被阻滞于S期 ;1.5g/L的苦参碱使HepG2细胞凋亡相关基因Bax表达增强 ,Bcl 2的表达减弱。与苦参碱同浓度的氧化苦参碱不能抑制细胞增殖 ,1.5g/L氧化苦参碱处理细胞 3d ,细胞存活率仍为84 .2 % ;氧化苦参碱的浓度增至 8.0g/L时才出现明显凋亡峰。结论体外苦参碱诱导HepG2细胞凋亡能力强于氧化苦参碱 ,并调控了凋亡相关基因的表达 ,而氧化苦参碱浓度 6倍于苦参碱时细胞才出现凋亡。     

苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇对HERG钾通道表达的影响

由于HERG钾通道在心律失常的发生与治疗中具有双重作用，因此成为近年来研究的热点。本文主要通过免疫荧光化学染色法、激光共聚焦显微镜及Western blotting法分别定性、定量地检测不同浓度的苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇对稳定转染在HEK-293细胞中HERG钾通道表达的影响。研究发现，苦参碱(1 μmol·L^-1)和氧化苦参碱(1 μmol·L^-1)均能够促进定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道的表达(n=5，P<0.05)，苦参碱(100 μmol·L^-1)能够抑制定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道表达(n=5，P<0.05)，氧化苦参碱(100 μmol·L^-1)对HERG钾通道表达没有影响，白藜芦醇不影响HERG-HEK细胞中HERG钾通道表达。结果表明，低浓度的苦参碱促进HERG钾通道表达，高浓度的苦参碱抑制HERG钾通道表达，低浓度的氧化苦参碱促进HERG钾通道表达，白藜芦醇不影响HERG钾通道表达。这为苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇抗心律失常作用机制及安全性提供了理论依据。     

苦参碱和氧化苦参碱对霉菌性和滴虫性阴道炎临床药理作用的研究进展

苦参碱和氧化苦参碱均具有广泛的生物活性,如保护心、肝、肺、肾、脑、血管的作用,其对心脏有正性肌力、负性频率、抗心律失常的作用,还具有升高白细胞、平喘、抗溃疡、抗纤维化及镇静、催眠、镇痛等中枢神经药理作用,以及抗肿瘤、免疫调节、抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗炎等药理作用;在妇科治疗领域,苦参碱和氧化苦参碱具有抗妇科肿瘤的作用,能保护乳腺上皮细胞、子宫内膜上皮细胞和阴道上皮细胞,也能对抗各种致病因子引起的上皮细胞炎性病变.临床上已被用于治疗各种宫颈炎、阴道炎,也被试用于乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌和子宫内膜癌的治疗.本文中综述了苦参碱和氧化苦参碱对霉菌性和滴虫性阴道炎临床治疗的药理作用文献,并对其研究进展做了分析.     

苦参碱和氧化苦参碱对细菌性阴道炎的临床药理作用研究进展

苦参碱和氧化苦参碱具有广泛的生物活性,如保护心、肝、肺、肾、脑和血管的作用,对心脏有正性肌力、负性频率、抗心律失常的作用,其还有升高白细胞、平喘、抗溃疡、抗纤维、中枢神经药理作用(镇静、催眠、镇痛等),以及抗肿瘤、免疫调节、抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗炎等药理作用.在妇科治疗领域中,苦参碱和氧化苦参碱具有抗妇科肿瘤作用,能保护乳腺上皮细胞、子宫内膜上皮细胞和阴道上皮细胞的功能,还能对抗各种致病因子引起的上皮细胞炎性病变.临床上已将其用于治疗各种宫颈炎、阴道炎,也被试用于治疗乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌和子宫内膜癌.文中综述苦参碱和氧化苦参碱防治细菌性阴道炎临床药理作用的文献资料,并对其研究进展做了分析.     

氧化苦参碱与抗肿瘤药物联合作用对HNE-1、HNE-1(200)细胞增殖抑制的影响

目的了解天然有效成分氧化苦参碱联合常用抗肿瘤药物(长春新碱、平阳霉素、5-Fu、顺铂)对HNE-1、HNE-1 (200)细胞的增殖抑制作用。方法本研究以鼻咽癌HNE-1细胞株以及由放射线照射诱导的耐药细胞株HNE-1(200)为研究对象,采用氧化苦参碱与低毒剂量的常用抗肿瘤药物联合应用,用MTT法测定其对实验细胞的增殖抑制率。结果对试验细胞抑制率低于20%的低毒浓度的长春新碱、平阳霉素、5-Fu、顺铂加入低毒浓度(0.5mg/mL)的氧化苦参碱后,使4种药物对细胞的抑制率增加,浓度越低,增幅越大。结论低浓度的天然药物与抗肿瘤药物联合应用对肿瘤细胞有明显的增殖抑制作用,并且时放射线照射诱导的耐药细胞株有一定的逆转作用。     

苦参碱和氧化苦参碱对预防口腔疾病的临床药理作用研究进展

氧化苦参碱能保护牙周膜细胞免遭内毒素伤害,能抑制牙周炎症和牙槽骨吸收,还能治疗化学性烧灼引起的兔口腔溃疡和流行性腮腺炎,也能阻滞白假丝酵母黏附于人口腔黏膜上皮细胞.这些作用均与苦参碱和氧化苦参碱具有广谱的抗菌、抗病毒、抗炎和免疫调节作用有关.苦参碱和氧化苦参碱还具有抗头颈部肿瘤的作用.临床上已将复方苦参注射液(苦参碱和...     

氧化苦参碱对环磷酰胺抗癌活性和毒性的影响

氧化苦参碱能够诱导小鼠肝细胞微粒体细胞色素P-450。氧化苦参碱与环磷酰胺合用对艾氏癌实体型有协同抑制作用,机制之一为氧化苦参碱提高了环磷酰胺的代谢激活,并使环磷酰胺减少剂量1/2,其抑瘤作用仍相当于原剂量,而环磷酰胺引起白细胞降低的毒性明显减轻。     

苦参碱和氧化苦参碱对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌作用的影响

目的　研究苦参碱和氧化苦参碱对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌作用的影响。方法　采用二乙基亚硝胺法诱发大鼠肝癌 ,观察腹腔注射苦参碱 2 5mg·kg-1和氧化苦参碱10 5mg·kg-130d后 ,大鼠肝表面癌结节数、肝 /体重比和血清中丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、γ 谷氨酰转肽酶 (γ GT)、碱性磷酸酶 (ALP)的变化。结果　氧化苦参碱组大鼠肝表面癌结节数、肝 /体重比和血清ALT、γ GT明显低于模型组 (P<0 0 5 ) ;苦参碱组大鼠肝表面癌结节数和血清γ GT明显低于模型组 (P <0 0 5 )。结论　苦参碱和氧化苦参碱 ,尤其是氧化苦参碱 ,不仅能保护肝细胞免受损伤 ,而且能抑制肿瘤细胞增长     

苦参碱、氧化苦参碱对小鼠的毒性研究

目的观察苦参碱和氧化苦参碱对昆明小鼠的急性毒性反应。方法通过一次性向昆明小鼠尾静脉注射不同剂量的苦参碱及氧化苦参碱,观察并记录苦参碱和氧化苦参碱对小鼠的毒性反应。运用SPSS17.0统计软件计算苦参碱及氧化苦参碱对小鼠的半数致死量(LD50)。结果昆明小鼠对苦参碱及氧化苦参碱的LD50分别为83.206、214.216 mg.kg-1,其95%可信区间分别为71.022～95.087、186.886～254.175 mg.kg-1。结论苦参碱和氧化苦参碱对小鼠具有一定的毒性,氧化苦参碱的毒性要明显弱于苦参碱。     

虎杖苷对LPS感染大鼠心功能和心肌超微结构的影响

目的观察虎杖苷（polydatin,PD）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）感染大鼠心功能下降的改善效果及心肌纤维电镜下超微结构的改变。方法正常Wistar大鼠18只,随机平均分为3组,分别为正常对照组（0.9%生理盐水）,LPS组（10mg/kg LPS）和LPS＋PD组（10mg/kg LPS＋10mg/kg PD）,分别观察其心功能指标（LVSP,LVEDP,±dp/dtmax）的改变,7h后取心脏,透射电镜观察不同处理对心肌微结构的影响。结果LPS作用于大鼠7h左右大鼠心功能指标有显著降低（P〈0.05）,而LPS＋PD组心功能指标此时尚维持在正常水平。电镜观察发现LPS刺激7h后心肌微结构较正常组有显著的破坏,而LPS＋PD组破坏程度较轻。结论LPS对大鼠心肌纤维有破坏作用并导致心肌功能的下降,PD有保护心肌纤维的作用。     

苦参素对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用

目的研究苦参素(OM)对大鼠佐剂型关节炎(AA)的影响,并探讨部分作用机制。方法弗氏完全佐剂(FCA)诱导AA大鼠模型,检测大鼠足爪肿胀度、多发性关节炎指数(AI),HE染色观察关节病理学改变,放免法检测血清IL-1β、TNF-α水平。结果 OM(60、120 mg.kg-1)剂量组能明显抑制AA大鼠继发性足肿胀,改善膝关节的病理学病变,使AA大鼠血清IL-1β、TNF-α水平显著下降。结论 OM对AA大鼠有治疗作用,调节体内细胞因子IL-1β、TNF-α的水平可能是其治疗AA的作用机制之一。     

Anti-inflammatory effects of apigenin on nicotine- and lipopolysaccharide-stimulated human periodontal ligament cells via heme oxygenase-1

Background and objectivesAlthough apigenin exhibits various biological effects, its anti-inflammatory role in the periodontal field remains unknown. We examined the anti-inflammatory effects of apigenin and the underlying mechanism in nicotine- and lipopolysaccharide (LPS)-stimulated human periodontal ligament (hPDL) cells.Materials and methodsWestern blotting was used to examine the effect of apigenin (10–40 µM) on the LPS- and nicotine-induced expression of cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible nitric oxide synthase (iNOS), and heme oxygenase-1 (HO-1), as well as the phosphorylation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs), in hPDL cells. Pro-inflammatory mediators, including nitric oxide (NO), prostaglandin E₂ (PGE₂), interleukin-1β (IL-1β), tumor necrosis factor-α (TNF-α), IL-6, and IL-12 were monitored using Griess reagents and ELISA.ResultsIncubation of hPDL cells with apigenin decreased LPS- and nicotine-induced HO-1 protein expression and activity. Apigenin significantly inhibited the nicotine- and LPS-induced production of NO, PGE₂, IL-1β, TNF-α, IL-6, and IL-12, and the upregulation of iNOS and COX-2 in hPDL cells. Hemin, a selective HO-1 inducer, reversed the apigenin-mediated suppression of nicotine- and LPS-induced NO, PGE₂ and cytokine production. Treatment with inhibitors of the phosphoinositide 3-kinase, MAPKs, p38, and JNK, as well as a protein kinase C inhibitor, blocked the anti-inflammatory effects of apigenin in nicotine- and LPS-treated cells.ConclusionsApigenin possesses anti-inflammatory activity in hPDL cells and works through a novel mechanism involving the action of HO-1. Thus, apigenin may have potential benefits as a host modulatory agent in the prevention and treatment of periodontal disease associated with smoking and dental plaque.     

外源性雌激素对人牙周膜干细胞骨分化能力影响的实验研究

目的：检测外源性雌激素对人牙周膜干细胞( PDLSCs )骨分化能力的影响。方法将体外培养的PDLSCs加入无酚红成骨诱导培养液和不同浓度的17β-E2[分为E10-7、E10-8、E10-9组和对照组(成骨诱导培养液+无水乙醇(0.01%)]-雌二醇[分为E10-7、E10-8、E10-9组、ICI组(成骨诱导培养液+ICI182780)、E10-7+ICI组(成骨诱导培养液+1×10-717β-E2+1×10-7ICI182780)],观察各组细胞形态、测定其增值水平、碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原合成能力。结果添加外源性雌激素后,细胞增殖加快,生长密集,呈螺旋状排列。 PDLSCs的增殖发生变化,与对照组相比,第3、5天雌激素干扰组细胞增殖受到抑制( P <0.05),此后雌激素干扰组细胞增殖高于对照组( P <0.05),在不同药物浓度组间,E10-7组对细胞增殖影响最为明显,其细胞增殖水平高于E10-8、E10-9组( P <0.05)。 ALP表达显示动态变化,自第3天开始,各组ALP表达均升高,而雌激素干扰组ALP表达量高于对照组( P <0.05),在不同药物浓度组间E10-7组ALP表达增加高于E10-8、E10-9组( P <0.05),与ICI组、E10-7+ICI组比较,差异无统计学意义( P >0.05);PDLSCsⅠ型胶原合成表达与对照组相比有增加趋势,且与药物浓度有剂量依赖关系。结论雌激素对PDLSCs成骨分化过程有促进作用,该作用与雌激素浓度密切相关。     

The protective effects of the combination of sodium ferulate and oxymatrine on ethanol-induced liver damage in mice

The aim of this study was to investigate the effects of the combination of SF and OMT on ethanol-induced liver damage in mice. The animal liver wet/dry weight (W/D) ratio and liver tissue histopathology, alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), triglyceride (TG), malondialdehyde (MDA), superoxidase dismutase (SOD), C-reactive protein (CRP), interleukin-6 (IL-6), and nuclear factor κB (NF-κB) levels were measured. The data indicated that the levels of ALT, AST, TG, CRP, IL-6, NF-κB and MDA significantly decreased and that SOD activity improved after treatment with the combination of SF and OMT; the same effects were not observed with the same dose of SF or OMT when used alone. These results indicated that the combination of SF and OMT had a protective effect on ethanol-induced liver damage in mice and that antioxidation and anti-inflammatory effects might be involved in this protective mechanism.     

氧化苦参碱磷脂复合物的制备及其体外抗乙肝病毒活性的研究

目的制备苦参素磷脂复合物并对其体外抗乙肝病毒活性进行评价。方法利用四氢呋喃作为反应溶剂,苦参素及磷脂溶于溶媒中,真空除去有机溶剂得苦参素磷脂复合物。并以2.2.15 cell line为细胞模型,分别对苦参素磷脂复合物的细胞毒性值和乙型肝炎表面抗原,乙型肝炎e抗原,乙型肝炎病毒DNA的抑制率进行了研究。结果制得的苦参素磷脂复合物中苦参素的含量为24.86%。苦参素磷脂复合物的细胞毒性值为250μg·mL^-1与苦参素相比,苦参素磷脂复合物对2.2.15细胞的HBsAg,HBeAg,HBV-DNA值明显降低。结论苦参素磷脂复合物能够产生更有效的抗乙肝病毒活性。因此乙肝治疗中苦参素磷脂复合物有很强的抗病毒活性潜力。     

茶多酚对人鼻咽癌细胞株CNE_2细胞DNA损伤和细胞周期的影响

目的　观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ, ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用;用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮＥ２ 细胞周期的变化及其诱导凋亡。结果　ＴＰ可引起ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 断裂、其断裂程度随剂量的增加和作用时间的延长而增强。ＴＰ不同浓度和不同作用时间可干扰ＣＮＥ２ 细胞在周期中的进程,使Ｇ１ 期细胞明显增多,Ｓ期细胞减少,细胞分裂增殖指数（ＰＩ）亦随之降低。同时,ＴＰ可诱导ＣＮＥ２ 细胞凋亡,其凋亡率随ＴＰ浓度的增加和作用时间的延长在逐渐增加。结论　ＴＰ１９９８ １２ ０４ 收稿,１９９９ ０７ ３１ 修回＊ 国家自然科学基金资助课题,Ｎｏ ３９３７０８００作者简介：谢冰芬,女,副研究员,硕士生导师,研究方向为肿瘤药理可引起人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞的ＤＮＡ 断裂,使细胞停滞于Ｇ１ 期,阻止Ｇ１ 期细胞进入Ｓ期;同时亦可诱导细胞凋亡,这些结果可能为ＴＰ的抗瘤作用提供理论依据     

自噬对肝癌HepG2细胞增殖及对细胞周期影响的研究

目的研究用诱导肝癌HepG2细胞自噬与抑制肝癌HepG2细胞自噬的方法检测自噬对肝癌HepG2细胞增殖的影响,阐明细胞自噬的发生与细胞周期的关系。方法常规培养肝癌HepG2细胞,应用MTT比色法和流式细胞仪检测肝癌HepG2细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化。结果自噬诱导剂雷帕霉素组的肝癌HepG2细胞抑制率明显高于对照组（P〈0.05）,对照组的肝癌HepG2细胞抑制率明显高于自噬抑制剂3-MA组（P〈0.05）;流式细胞仪分析示自噬诱导剂雷帕霉素组细胞周期中G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多（P〈0.05）。自噬抑制剂3-MA组细胞周期中G1期细胞减少,S期细胞增多,G2/M期细胞相对减少（P〈0.05）。结论自噬对肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用,自噬不利于肝癌HepG2细胞成活。肝癌HepG2细胞自噬的发生多停留在细胞周期的G1期。     

LPS诱导小胶质细胞活化模型的建立及评价

目的探讨不同浓度脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)对小胶质细胞活化作用,建立小胶质细胞活化的模型。方法不同浓度LPS(0.01,0.1,1,10,100mg·L-1)刺激原代纯化的小胶质细胞及BV2细胞株,采用MTT法检测细胞活力;采用细胞免疫化学法观察细胞形态变化。结果 LPS(1mg·L-1)可以明显激活原代小胶质细胞,但不影响细胞活力,OX-42染色显示小胶质细胞胞体变大,轴突变短变多,形似"阿米巴状";LPS(10mg·L-1)可以激活BV2细胞,且不降低细胞活力,镜下观察发现BV2细胞胞体明显增大。结论采用LPS(1mg·L-1)刺激原代小胶质细胞,LPS(10mg·L-1)刺激BV2细胞株,可以建立稳定的小胶质细胞活化模型。     

Rho激酶在氢气保护LPS诱导的Caco-2细胞上皮屏障功能障碍中的机制研究

目的 探讨Rho激酶（ROCK）在氢气改善离体脓毒症肠屏障功能中的作用。方法 常规培养人结肠上皮细胞Caco-2,随机分为6组（n=3）：对照组、富氢培养基组、LPS处理组、富氢培养基+LPS组、Rho激酶抑制剂组、Rho激酶抑制剂+LPS组。富氢培养基组给予0.6mmol/L富氢培养基;LPS 和Y-27632处理浓度分别为100μg/ml、25μmol/L。建立Transwell小室模型,定期检测跨上皮电阻值（TEER）,当TEER达到800Ω?cm2后给予处理,于6h、12h、24h检测TEER值,24h时检测FITC-右旋糖苷通过率。细胞接种于6孔板,融合达80%~90%后给予处理,实时聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测ZO-1 mRNA和ROCK mRNA表达情况;蛋白免疫印迹技术（Western Blot）检测ZO-1蛋白和ROCK蛋白表达水平。结果 与对照组比较,富氢培养基组12h、24h TEER值升高（P＜0.05）,FITC-右旋糖苷通过率、ZO-1和ROCK mRNA及蛋白表达水平无显著变化（P＞0.05）;ROCK抑制剂组各时间点TEER值升高（P＜0.05）,FITC-右旋糖苷通过率无显著变化（P＞0.05）,ZO-1 mRNA表达增加,ROCK mRNA表达减少（均P＜0.05）;LPS处理组各时间点TEER值降低,FITC-右旋糖苷通过率增高,ZO-1 mRNA和蛋白表达均下降,ROCK mRNA和蛋白表达均增加（P＜0.05）。与LPS处理组比较ROCK抑制剂+LPS组TEER值增高,FITC-右旋糖苷率降低,ZO-1 mRNA表达增加（P＜0.05）。与LPS处理组比较,富氢培养基+LPS组各时间点TEER值增高,FITC-右旋糖苷通过率降低,各时间点ZO-1蛋白表达上升,ROCK蛋白表达下降（均P＜0.05）。结论 氢气可保护脓毒症肠屏障功能,改善肠上皮屏障完整性,减少肠壁通透性,增加肠细胞间紧密连接蛋白表达,这些保护机制可能与氢气抑制LPS诱导的Rho激酶过度表达有关。