p38 MAPK在机械通气所致肺损伤中的作用

目的 研究P38丝裂原激活蛋白激酶（P38 MAPK）在机械通气所致肺损伤中的作用。方法 15只普通健康80日龄家猪,随机分为3组:A组（VT=16ml/kg,PEEP=0）,B组（VT=6Ml/kg,PEEP=16cm H2O）和 C组（VT=6 ml/kg,PEEP=8cm H2O）。机械通气3h后在光镜下观察肺组织的病理学改变,并采用免疫组化检测肺组织ICAM-1的表达水平、Western Blot法测定肺组织p38MAPK及磷酸化p38MAPK的含量。结果 光镜下A、B两组有明显肺组织损伤,C组则无明显肺损伤表现。A、B两组肺泡上皮、肺间质及肺血管内皮细胞ICAM-1表达均呈阳性,C组肺组织ICAM-1表达阴性。三组间肺组织中未磷酸化P38MAPK含量无显著性差异（P>0.05）,而A、B两组肺组织的磷酸化p38 MAPK含量显著高于C组（P<0.05）。结论 大VT或小VT高PEEP可导致急性肺损伤,P38 MAPK介导了炎症反应所致的急性肺损伤。     

白细胞介素-15在心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 探讨白细胞介素-15（IL-15）在心脏移植排斥反应中的表达及其与排斥反应的关系。方法 采用小鼠颈部心脏移植模型，随机分为2组：同基因移植组，供、受体均为C57BL／6小鼠；异基因移植组，供、受体分别为BALB／C、C57BL／6小鼠。以pactin作内参照，分别于术后第1、3、5、7天取移植心脏，用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）法观察IL-15的表达情况。结果 随着术后天数的增加，异基因移植组IL-15表达逐渐升高，第5天达高峰（与同基因移植组相比，P〈0．01）。结论 IL-15的表达与心脏移植急性排斥反应的发生发展密切相关，可作为心脏移植急性排斥反应的监测指标，对急性排斥反应的早期诊断和移植物的预后估计具有重要的临床意义。     

超声心动图在原位心脏移植后监测急性排斥反应上的应用

原位心脏移植术后对供心的排斥反应是不可避免的,而心脏的急性排斥常是造成病人突然死亡的最重要的原因,因此早期发现,及时处理,终止急性排斥反应于早期阶段是提高术后成活率的重要保证。当前对心脏排斥反应的诊断最可靠方法是心内膜活检,但由于此项技术有一定的难度和要求一定     

心血管磁共振诊断和监测心脏移植后急性排斥反应

心脏移植是挽救终末期心脏病患者最有效的方法,而心脏移植后移植物的急性排斥反应是威胁患者术后长期生存最大的问题。心内膜活检是目前公认诊断急性排斥反应的金标准,但这种有创检查可能由于样本大小受限以及取材部位的差异而带来抽样误差,使活检诊断结果与实际发生排斥反应的严重程度产生显著差异。因此,我们需要一种无创的可反复施行的方法来准确诊断和监测心脏移植后移植物的急性排斥反应。心血管磁共振不但可以从成像上直接观察到排斥反应发生的组织变化,还能通过评估T2弛豫时间和细胞标记技术、心脏功能性参数变化以及形态学变化等多角度监测和诊断急性排斥反应。     

小鼠心脏移植急性排斥反应体外模型的建立

我们在成功建立大鼠腹部、颈部及小鼠颈部心脏移植模型的基础上,建立了小鼠心脏移植急性排斥反应体外模型,现将结果报道如下。 一、材料与方法 1.实验动物:健康雄性BALB/c和C57小鼠,体重20～25 g,由华中科技大学同济医学院器官移植研究所提供。 2.心肌细胞的分离:采用离体心脏Langendorff灌注法分离小鼠心肌细胞,取BALB/c小鼠心脏,用37℃氧含的含有胰蛋白酶和胶原酶的消化液灌注,30min左右心脏变软,颜色呈粉红半透明状,取下心脏,剪取心室肌,将之剪成1     

细辛脂素对心脏移植急性排斥反应的作用研究

心脏移植是治疗终末期心脏病的有效方法，而现有的免疫抑制剂具有较强的毒副作用，并且价格昂贵，所以国内外众多学者把研究开发新型免疫抑制剂的重点转向了资源丰富、价格低廉的中草药。细辛是一种比较常用的中药，具有免疫抑制作用，但目前其抗排斥作用还鲜有报道，本研究证明其具有抗排斥反应的作用，对临床有重要的理论和实际意义。     

原位心脏移植一例抗排斥反应的经验与教训

我科于１９９４年３月为１例晚期扩张型心肌病患者成功地进行了原位心脏移植，术后存活２８天，死于第二次急性排斥反应，现就抗排斥反应的经验与教训进行讨论。一、临床资料：患者，女，１３岁，体重３４ｋｇ，心功能４级，心胸比例０．８，诊断为扩张型心肌病。于１９９４年３月１８日进行了原位心脏移植手术。供者为脑死亡的１９岁男性，体重５７ｋｇ，ＡＢＯ血型与受者相同，淋巴细胞毒试验阳性率＜１０％。手术在中低温体外循环下进行。主动脉阻断时间为９０分钟，体外循环时间为１２５分钟，电击一次心脏复跳，无低心排，术后血压偏高…     

白介素10在心脏移植排斥反应中的表达及机制

目的　研究白介素10(IL-10)在大白鼠心脏移植排斥反应中心脏局部的表达变化情况，并探讨其参与排斥反应的可能机制。方法　实验动物分5组，A组(对照组)、B组(供体特异性全血输注组)、C组(Anti-IL-2Mab组)、D组(Anti-IL-4Mab组)、E组(Anti-IL-2Mab+环孢霉素A组)，处理受体。将大鼠移植心移植到受体的颈部，观察移植心存活时间、动态病理变化。并于移植术后第1、3、5、7、9、11、14d分别取移植心置于液氮中待测。应用半定量的RT-PCR法动态检测移植心IL-10的表达情况。结果　各组移植心存活时间分别为(8.3±1.7)d、(29.2±7.1)d、(26.4±5.7)d、(10.2±1.9)d、(55.0±10.6)d。其中B组、C组与A组比较差异有显著意义，E组与A组及C组比较分别有极显著意义和显著意义。IL-10在B组、C组及E组均有较强的表达，在A组及D组表达微弱，并与移植物的存活时间密切相关。结论　IL-10参与调节移植排斥反应，其机制可能为Th类细胞因子的免疫偏离。应用Th1类细胞因子单克隆抗体并联用免疫抑制剂可以有效的抑制移植排斥反应，从而延长移植物的存活期。     

小鼠心脏移植模型及IL-12抗体抗排斥反应作用初步观察

大鼠异位心脏移植模型是目前器官移植实验研究中最常用的模型。由于移植免疫研究对供受体间种系纯化程度要求越来越高，而纯种小鼠易于得到，因而异位小鼠心脏移植模型有其优点。笔者于１９９５～１９９６年在德国基尔大学器官移植中心研究室工作期间，探索了小鼠心脏移植...     

补体抑制治疗与心脏移植超急性排斥反应

心脏移植超急性排斥反应(hyperacute rejection,HAR)与补体系统激活有关,迅速导致移植心脏功能丧失.动物实验中使用眼睛蛇毒因子、可溶性补体受体1、补体调节蛋白以及C5单克隆抗体等补体抑制剂,可以从补体级联反应的不同水平抑制同种或异种心脏移植HAR的发生.抑制补体激活将在临床心脏移植HAR的预防及治疗中显示出重要的作用.     

p38 MAPK在心脏移植排斥反应中的作用

移植排斥反应是器官移植的核心问题。近来发现 ,ｐ3 8丝裂原激活蛋白激酶 (ｐ3 8ＭＡＰＫ)转导通路参与其中。本研究旨在探讨移植心脏心肌细胞ｐ3 8ＭＡＰＫ和ＴＮＦ α的表达及它们与心肌损伤和心肌细胞凋亡的关系 ,探讨ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ(ＦＫ5 0 6)对ｐ3 8ＭＡＰＫ的作用。1 材料和方法 :(1)ＳＤ大鼠、Ｗｉｓｔｅｒ大鼠均为雄性 ,体重 2 2 0～ 2 80ｇ。采用改良Ｏｎｏ术式施行大鼠异位心脏移植。实验分 3组 :同系对照组 (ＳＤ大鼠间移植 )、同种移植组 (Ｗｉｓｔｅｒ大鼠到ＳＤ大鼠的心脏移植 )和ＦＫ5 0 6治疗组 (Ｗｉｓｔｅｒ大鼠到…     

细胞因子在心脏移植急性排斥反应中的表达及其作用机理

目的观察同种大鼠心脏移植急性排斥反应中,局部细胞因子网络的变化及其机理.方法健康雄性Wistar大鼠(受体)和SD大鼠各48只,将接受移植心脏的Wistar大鼠分4组,每组12只.A组对照组;B组抗白介素2单克隆抗体(IL-2Mab)组;C组环孢菌素A(CsA)组;D组IL-2Mab加CsA组.4组大鼠分别静脉给予生理盐水、抗白介素2单克隆抗体及口服CsA、静脉给予抗白介素2单克隆抗体加口服CsA,采用改良的移植术式建立移植模型.常规监测排斥反应发生情况.应用RT-PCR的方法于术后第1、3、5、7、9、11、14天动态检测移植物局部细胞因子IL-1β、IL-2、CD25、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、TNFα、IFNγ的表达水平.结果移植心脏存活时间,A组为(8.3±1.7)d;B组为(29.2±7.1)d;C组为(26.4±5.7)d;D组为(55.0±11.6)d.B、C、D组移植心脏存活时间显著延长,与A组相比,差异有极显著性意义(P＜0.01).存活时间较长的移植心脏的淋巴细胞浸润和心肌坏死的程度比存活时间较短的心脏明显减轻.IL-1β的表达在各组均较高;IL-4、IL-5、IL-6、IL-10的表达水平在移植心脏存活时间较长的组较高;而IL-2、CD25、IFN-γ、TNFα的表达则相对较低;4组相比差异有显著性意义(P＜0.05).结论细胞因子网络在心脏移植排斥反应中发生了相应的变化,并与干预的因素及移植物存活时间有密切的关系.IL-2Mab、CsA联合用药促使TH1类细胞因子向TH2类细胞因子整体偏离,这种免疫偏离使移植心脏存活时间显著延长.     

茯苓醇提取物抗心脏移植急性排斥反应的实验研究

目的　研究茯苓醇提取物对心脏移植急性排斥反应的抑制作用。方法　以Wistar大鼠为供者、SD大鼠为受者 ,建立异位 (腹腔 )心脏移植模型 ,移植前按组分别以橄榄油、茯苓醇提取物及环孢素A灌胃 ,并设SD大鼠空白对照组。术后观察移植心的存活时间 ,测定各组术后第 7d外周血中白细胞介素 2 (IL 2 )和γ干扰素 (IFN γ)含量以及CD3+、CD4 +、CD8+细胞和CD4 +细胞与CD8+细胞的比值 (CD4 +/CD8+) ,并观察移植心的病理变化。结果　接受茯苓醇提取物 2 5mg·kg-1·d-1或 5 0mg·kg-1·d-1灌胃的大鼠 ,移植心存活时间显著延长 ,病理损害程度减轻 ,外周血IL 2及IFN γ的含量以及CD3+、CD4 +、CD8+细胞百分比和CD4 +/CD8+比值降低 ,与环孢素A 5mg·kg-1·d-1灌胃的结果相当。结论　茯苓醇提取物对心脏移植急性排斥反应具有明显的抑制作用。     

紫杉醇对大鼠心脏移植物急性排斥反应的免疫抑制作用

目的探讨紫杉醇对大鼠心脏移植后急性排斥反应的免疫抑制作用。方法以W istar大鼠为供者,SD大鼠为受者,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型。70只SD大鼠随机分为5组,每组14只。对照组:术后不使用免疫抑制药;组Ⅰ:术后腹部注射紫杉醇(0.75 m g/kg.d);组Ⅱ:术后腹部注射紫杉醇(1.5 m g/kg.d);组Ⅲ:术后给环孢菌素A(C sA,5m g/kg.d)灌胃;组Ⅳ:术后腹部注射紫杉醇(0.75 m g/kg.d)+C sA(5m g/kg.d)灌胃。观察5组大鼠一般情况、移植心脏存活时间及术后7d病理学改变。结果组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ和组Ⅳ大鼠移植心脏存活时间均较对照组显著延长(P<0.05),组Ⅳ存活时间长于组Ⅰ和组Ⅲ(P<0.05)。术后第7d,对照组移植心脏明显肿胀,病理急性排斥反应分级为3级以上。组Ⅰ和组Ⅱ移植心脏搏动有力,颜色鲜红、质软,病理急性排斥反应分级为2~3级,与对照组比较,能明显减轻移植后心肌病理损害(P<0.05)。组Ⅲ移植心脏搏动良好,急性排斥反应分级大部分为2级。组Ⅳ移植心脏大小基本正常,无水肿,颜色鲜红、质软,搏动好,病理急性排斥反应分级<2级;对移植心心肌保护作用优于组Ⅰ和组Ⅱ(P<0.05)。结论紫杉醇能减轻大鼠心脏移植术后急性排斥反应,并能延长移植心脏的存活时间,具有免疫抑制作用。小剂量紫杉醇与C sA联用,在抗心脏移植物排斥反应中具有协同作用。     

鼠纤维介素在小鼠心脏移植急性排斥反应中的表达及其意义

目的　探讨小鼠同种心脏移植急性排斥反应期间鼠纤维介素 (mfgl2 )在移植心脏组织中的表达及其与组织病理学改变的关系。方法　采用BALB/c小鼠到C5 7BL/ 6小鼠的颈部异位心脏移植作为同种排斥反应模型 ,以抗mgfl2多克隆抗体干预 ,并设同系小鼠心脏移植对照组。采集移植心组织标本作病理学检查 ,以免疫组织化学方法测定mfgl2在移植心脏组织细胞上的表达 ,并对mgfl2的表达进行半定量分析。结果　同系移植对照组移植心脏组织结构正常 ,未见mfgl2表达 ;同种移植组移植心脏组织出现进行性坏死 ,大量单个核细胞浸润 ,并伴有mfgl2的表达 ,且血管内皮细胞表达mfgl2 ;抗mfgl2抗体干预组移植心脏组织损伤较轻 ,移植物的存活时间延长 (P <0 .0 1) ,巨噬细胞、淋巴细胞的浸润和mfgl2表达量也显著减少。结论　mfgl2表达水平与排斥反应所致移植心脏病理损害程度相关 ;抗mfgl2抗体干预能显著减少移植心脏巨噬细胞、淋巴细胞的浸润 ,明显延长移植心脏存活时间。     

IL-15在同种异体移植物急性排斥反应中的作用

目的：探讨非T细胞来源淋巴细胞活化因子IL-15在大鼠心、肝移植急性排斥反应模型中的作用。方法：LEW重组鼠系,1A(RT1^a)和LEW(RT1^1)分别作为供受体建立心、肝移植急性排斥反应模型为实验组;LEW→LEW作受体建立无排斥反应模型为同期对照组。术后1,3,5,7d各时点分别处死动物。采用Microarray、免疫组织化学及Western-blot技术分别检测移植物IL-15及其受体的表达部位,时间及程度,并与IL-2,IFN-γ的表达状况,淋巴细胞的浸润程度作对比。结果：实验组移植物术后3d开始发生急性排斥反应。Microarray示IL-15、IL-2,IL-2R升高了3-3.5倍。免疫组化及Western-bloting结果显示实验组IL-15术后第1天在血管内皮细胞上即有表达,至第7天开始减弱。第5天同时出现在移植实质细胞上。IL-2于术后第3天才开始出现,第5天表达最强。其表达部位均在移植物血管周围浸润的淋巴细胞上,而血管内皮细胞上无阳性表达。IFN-γ的表达与IL-2同步。结论：IL-15在大鼠心、肝移植物急性排斥反应中的表达时间早于IL-2和IFN-γ的表达,其表达部位也与之不同。IL-15的表达是急性排斥反应发生的早期事件,可能是存在于IL-2之外的参与急性排斥反应发生的另一途径。     

门静脉供体活细胞输注对大鼠心脏移植慢性排斥反应的影响

目的探讨经门静脉注射供体活细胞对移植物慢性排斥反应(CR)及长期存活质量的影响。方法建立大鼠心脏移植模型,随机分成5组A组为对照组,B组给予环孢霉素A(CsA)每日15mg/kg体重灌胃,C组于术中经门静脉注射供体脾细胞1×108个,D组注射脾细胞和骨髓细胞各1×108个,E组在D组基础上加注肝细胞1×108个。观察生存时间,对长期存活的移植物进行组织形态学分析及半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测。结果D组和E组移植心长期存活(>90d),功能(2.3±0.5)级,受累的血管数<50%,血管评分1期,与B组及C组比差异有统计学意义(P<0.05),血管病变和纤维化相关因子表达明显减低。结论经门静脉注射两种或两种以上供体活细胞可明显减轻慢性排斥反应并改善移植物长期生存质量。     

p38 MAPK在LPS诱导内皮细胞表达ICAM-1中的作用

目的 研究p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达细胞间粘附分子-1(ICAM—1)中的作用。方法 脐静脉内皮细胞培养后分为两组：(1)刺激组,设不同时相点分别用LPS刺激内皮细胞;(2)预处理组,在LPS刺激前2h,用SB203580预处理内皮细胞。观察ICAM—1蛋白和mRNA表达的变化,检测内皮细胞p38MAPK活性变化。结果 LPS刺激后,内皮细胞表面ICAM—1分子在8～36h显增加,胞浆中mRNA在2h即有显增加;LPS刺激HUVEC后15min,p38MAPK活性即有升高,30～60min达高峰。p38抑制剂SB203580可显抑制LPS的诱导作用。结论 LPS可能通过激活p38MAPK信号转导通路,调节HUVEC的ICAM—1基因和蛋白表达。     

MAPK级联反应与缺血性脑损伤

缺血性脑损伤是一复杂病理生理过程,涉及到多途径、多机制的变化,具体发生机制尚未阐明。MAPK级联反应是近来发现的细胞质和细胞核联系的枢纽,其在接受不同通路的上游信号后,激发即早基因和转录因子的表达和活化.并通过相应的靶基因、靶蛋白等的表达与合成来完成对各种胞外刺激的反应。今介绍该级联反应在缺血性脑损伤中的改变和作用。     

Th2细胞因子在大鼠心脏移植排斥反应中的变化

目的：探讨Th2细胞因子在移植排斥反应中的作用及意义。方法：用酶联免疫法（ELISA）检测大鼠异位心脏移植术后不同时间外周血中白细胞介素4（IL－4）及白细胞介素10（IL－10）的变化。结果：术后IL－4及IL－10的变化与排斥反应的进程有关,两者的峰值均出现于术后第5d,其中IL－10升高则更为明显,此时移植物排斥反应表现为2－3级。当排斥反应加重,出现明显组织坏死时（4级）,血清IL－4及IL－10水平下降。应用环孢素（A（CsA)后,延援了排斥反应的发生及IL－4、IL－10水平的升高。结论：IL－4及IL－10在排斥反应的较早阶段可能发挥重要作用,动态监测外周血IL－4及IL－10可能有助于对临床移植排斥反应 状态的评价。