富血小板纤维蛋白运用于直接盖髓术的研究进展

<正>直接盖髓术是保存活髓的有效手段,将盖髓材料覆盖于暴露的牙髓组织上,隔绝外界刺激,诱导牙髓细胞向成牙本质细胞分化,并为牙髓细胞提供附着空间,最终在穿髓孔处形成管状修复性牙本质,这是直接盖髓术理想的组织学表现。牙髓细胞可在各种细胞生长因子作用下向成牙本质细胞分化,而富血小板纤维蛋白(Platelet-rich fibrin,PRF)可缓慢持续释放生长因子,进一步影响和引导牙髓细胞的增殖、分化过程。PRF膜已广泛应用于口腔领域,应用于直接盖髓     

不同脱钙方式观察牙髓组织切片的效果比较

目的比较乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetra-acetic acid,EDTA)脱钙法和复合酸脱钙法处理的牙齿石蜡切片的牙髓组织学形态特点。方法选用10%EDTA及复合酸(Plank-Rychlo)脱钙液,分别用于牙齿石蜡切片脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20～28℃)2种不同脱钙液对切片制作的影响。结果 EDTA脱钙液处理的石蜡切片牙髓细胞、成牙本质细胞、牙本质小管结构清晰,色泽对比鲜明,但脱钙时间较长;Plank-Rychlo脱钙液脱钙速度相对较快,但染色较EDTA脱钙液稍显模糊。结论在制作牙齿石蜡切片观察牙髓组织学形态时,EDTA脱钙液和Plank-Rychlo脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果。     

牙体脱钙法和劈牙取髓法观察牙髓组织中VEGF表达的效果比较

目的:对牙体脱钙和劈牙取髓法在牙髓血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)免疫组织化学研究中的染色效果进行比较,初步探讨牙体脱钙技术在牙髓免疫组织化学研究中的应用.方法:取因正畸治疗需要而拔除根尖孔完全闭合的健康下颌前磨牙30颗,分别通过牙体脱钙和劈牙取髓制作牙体牙髓联合切片和牙髓切片,进行VEGF免疫组织化学染色,在显微镜下观察两者的染色效果和组织结构特点.结果:牙体脱钙法制得的牙体牙髓联合切片组织染色效果良好,牙髓细胞、成牙本质细胞、牙本质小管结构清晰,VEGF阳性染色空间分布定位明确;劈牙取髓法制得的牙髓切片成牙本质细胞残缺不全,组织厚薄不一,染色对比度差.结论:牙体脱钙技术应用于牙髓免疫组织化学研究的组织染色效果良好、结构清晰,能够保全牙髓组织.     

牙髓牙本质复合体的nNOS阳性神经纤维

目的:研究神经型一氧化氮合酶（nNOS）在牙髓牙本质复合体中的表达,探讨其分布与功能的关系。方法:收集新鲜健康人前磨牙60颗,经固定、脱钙、石蜡包埋、切片,nNOS免疫组织化学染色。结果:在根髓nNOS阳性神经纤维呈粗大束状,向颈部逐渐变细,分支少;在颈部,束状纤维呈放射状至冠髓;在冠髓束状纤维大量分支呈网状,部分围绕于血管,部分止于牙髓基质,部分经成牙本质细胞层进入前期牙本质和成熟牙本质近髓1/3牙本质小管。结论:nNOS阳性神经纤维存在于人牙髓牙本质复合体中,部分围绕于血管周围,可能与血管功能调节有关,部分止于牙髓基质、前期本质和牙本质小管内,可能与牙内因素和牙外因素引起的感觉有关。     

过量氟对大鼠牙髓成牙本质细胞显微和亚显微结构的影响

目的:观察过量氟作用下大鼠牙髓成牙本质细胞显微、亚显微结构的改变。方法:选择30只Wister大鼠,随机分为两组,每组15只。Ⅰ组为对照组,蒸馏水灌胃。Ⅱ组为实验组,20 mg/(kg.d)氟化钠水灌胃。8周后处死动物,利用磨片、HE染色、透射电镜技术观察过量氟对大鼠切牙形态、成牙本质细胞显微和亚显微结构的影响。结果:实验组切牙牙釉质牙本质厚度明显变薄,髓腔内侧前期牙本质宽于对照组,球间牙本质增多。釉质生长线、釉柱横纹明显,牙本质生长线明显。透射电镜观察实验组大鼠牙髓成牙本质细胞体积较小,细胞器减少,一些细胞呈现凋亡迹象。结论:过量的氟作用下大鼠牙髓成牙本质细胞分化和分泌基质都受一定程度的阻遏,成牙本质细胞细胞器减少,细胞凋亡。     

体外组织培养模式的构建及转化生长因子促进牙髓细胞向成牙本质细胞诱导分化的研究

目的通过构建体外组织培养模式,观察牙髓细胞向成牙本质细胞诱导分化的潜力及转化生长因子-β1(TGF-β1)的促进作用。方法获取人第三磨牙牙髓组织,剪碎后与牙本质陶瓷粉(CDP)及2μg/mL TGF-β1混合,将混合物以骨基质明胶(BMG)为载体构建牙髓组织培养模型,在培养3、7、14和21 d后,通过HE和组织特异性染色鉴定有无骨-牙本质基质成分形成,免疫组化检测细胞有无牙本质特异性蛋白——牙本质涎蛋白(DSP)的表达。结果牙髓组织经TGF-β1诱导培养后可进一步矿化,甲苯胺蓝和Mallory染色表明在牙髓组织的中心出现骨-牙本质样基质的沉积,免疫组化检测牙髓细胞开始出现DSP的表达。结论成功构建体外牙髓组织培养模型,该模型能维持牙髓细胞的生长和存活,可用于体外对牙髓细胞的诱导分化观察;该模型模式下TGF-β1可明显促进牙髓细胞向成牙本质细胞的分化诱导潜能。     

体外组织培养模式的构建及转化生长因子促进牙髓细胞向成牙本质细胞诱导分化的研究

目的通过构建体外组织培养模式，观察牙髓细胞向成牙本质细胞诱导分化的潜力及转化生长因子-β1（TGF-β1）的促进作用。方法获取人第三磨牙牙髓组织，剪碎后与牙本质陶瓷粉（CDP）及2μg／mL TGF-β1混合，将混合物以骨基质明胶（BMG）为载体构建牙髓组织培养模型，在培养3、7、14和21d后，通过HE和组织特异性染色鉴定有无骨-牙本质基质成分形成，免疫组化检测细胞有无牙本质特异性蛋白——牙本质涎蛋白（DSP）的表达。结果牙髓组织经TGF-β1诱导培养后可进一步矿化，甲苯胺蓝和Mallory染色表明在牙髓组织的中心出现骨-牙本质样基质的沉积，免疫组化检测牙髓细胞开始出现DSP的表达。结论成功构建体外牙髓组织培养模型，该模型能维持牙髓细胞的生长和存活，可用于体外对牙髓细胞的诱导分化观察；该模型模式下TGF-β1可明显促进牙髓细胞向成牙本质细胞的分化诱导潜能。     

脱钙牙本质基质填充颌骨囊肿术后残留骨腔的临床应用

目的观察脱钙牙本质基质植入治疗颌骨囊肿刮治术后骨腔的疗效。方法对32例颌骨囊肿刮治术后骨腔范围为2～5cm的病例采用脱钙牙本质基质进行填充。结果所有切口均愈合良好,无1例出现术后感染和排异反应。患者X线片显示术后1个月后囊腔内已有骨小梁影像,3个月后新生骨小梁与周围骨质无明显区别。结论脱钙牙本质基质用于充填颌骨囊肿刮治术后残留骨腔有较好疗效。     

脱钙牙本质基质充填颌骨囊腔的疗效观察

目的 观察脱钙牙本质基质植入治疗颌骨囊肿刮治术后骨腔的疗效。方法 对32例颌骨囊肿刮治术后骨腔范围为2～5cm的病例采用脱钙牙本质基质进行填充。结果 所有切口均愈合良好，无一例出现术后感染和排异反应。患者X线片显示术后1个月后囊腔内已有骨小梁影像，3个月时新生骨小梁与周围骨质无明显区别。结论 脱钙牙本质基质用于充填颌骨囊肿刮治术后残留骨腔有较好疗效。     

EDTA对牙本质内层龋表面处理效果的临床研究

本文以含3％三氯化铁的10％枸椽酸(10—3液)作为对照,观察10％EDTA对牙本质内层龋表面玷污层的清除效果的临床疗效,以期寻找一种安全可靠的牙本质内层龋表面处理剂,为龋病保存治疗寻找一个新途径。本研究证明:除近髓处点状垫底外,10％EDTA处理牙本质内层龋后,用磷酸脂类粘结剂/CC—3型后牙复合树脂充填,近期临床观察,对牙髓无明显的损害。     

Er：YAG 激光用于比格犬牙髓切断术

目的：通过比格犬动物试验,观察铒钇铝石榴石(erbium:yttrium aluminium garnet,Er:YAG)激光去除比格犬冠髓后剩余牙髓的变化及牙本质桥形成情况,探索Er:YAG激光照射与牙髓反应及牙本桥形成的关系。方法： 选取2只12月龄雄性比格犬前磨牙为试验牙,共24颗,分别应用200 mJ/20 Hz Er:YAG激光、100 mJ/20 Hz Er:YAG激光及传统机械方法去除冠髓,三氧化矿物凝聚体( mineral trioxide aggregate,MTA)盖髓后充填。通过临床检查试验牙的动度和牙龈情况评价临床效果,拍摄试验牙平行投照X线根尖片评价影像学效果。试验术后1 d、2周、4周、8周拔牙,苏木精 伊红染色（Hematoxylin Eosin staining,HE）下观察根髓情况及牙本质桥形成情况。结果： 牙髓切断术后1 d、2周、4周、8周后机械去髓组和激光去髓组试验牙均无松动,牙龈无红肿瘘管等异常;X线片发现机械去髓组和激光去髓组试验牙均未见牙周膜增宽、根尖周低密度影、牙根内外吸收等影像学异常表现;HE染色组织学切片检查发现术后1 d、2周、4周、8周机械去髓组和激光去髓组试验牙根髓均未见明显炎症反应,2周时可见激光去髓组牙本质桥完全覆盖牙髓断面,而机械切髓组未见完整牙本质桥。结论： 100 mJ/20 Hz和200 mJ/20 Hz Er:YAG激光去髓对剩余根髓未见影响。     

Carisolv化学机械去龋后牙本质表面的扫描电镜观察

目的:观察Carisolv化学机械去龋和慢速球钻去龋后窝洞洞底表面形态学改变。方法:收集近期拔除的有龋坏的乳磨牙20例,实验组用Carisolv去龋,对照组用慢速球钻去龋,然后分别用扫描电镜观察。结果:去龋后两组牙本质表面形态有明显不同,Carisolv在去龋过程中能够清除玷污层,洞底牙本质表面粗糙不平,呈密集、不规则的凹凸状结构。结论:Carisolv去龋后产生表面形态学的改变有利于应用复合树脂的粘接修复。     

Carisolv去龋效果的牙本质表面扫描电镜观察

目的 利用扫描电镜技术观察Carisolv和传统高速车针去龋后窝洞表面的微观形态,评价Carisolv去龋的效果.方法 选取龋坏到牙本质的离体乳牙32颗,随机分为实验组和对照组(各16颗),分别采用Carisolv去龋和传统高速车针去龋.用扫描电镜观察窝洞表面形态.结果 对照组的牙本质表面平坦,有较多玷污层形成,牙本质小管口堵塞;实验组的牙本质表面粗糙不平,呈密集、不规则的凸凹状结构,无玷污层形成,牙本质小管口清晰可见.结论 Carisolv去龋后产生的牙本质表面形态学的改变对粘接修复性材料可产生更强的粘结力,更有利于粘接性修复材料与牙齿的粘结.     

比较矿物三氧化物凝聚体及山东蜂胶乙醇提取物对牙髓成纤维细胞生物学性能的影响

目的 比较矿物三氧化物凝聚体(mineral trioxide aggregate,MTA)与山东蜂胶乙醇提取物对牙髓成纤维细胞活性、矿化和趋化能力以及抗炎效应的影响。方法 利用CCK-8法检测山东蜂胶提取物和MTA浸出液作用牙髓成纤维细胞1、5、7、9 d时的细胞毒性,各组同时作用15 h,Transwell法检测不同组的迁移细胞数目。矿化诱导21 d后,各组进行茜素红染色比较诱导硬组织沉积能力。按照1 mg/L浓度将脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)加入两种材料后刺激细胞3 h,采用实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法检测不同组细胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)三种炎症因子的表达量。采用单因素方差分析及非参数检验对组间差异进行分析(P<0.05)。结果 蜂胶的细胞毒性大于MTA,蜂胶组迁移细胞数目(26.67±2.52)明显少于对照组(61.33±4.93)及MTA组(80.00±2.65),茜素红染色显示蜂胶组相较MTA组的钙沉积更多。LPS刺激细胞3 h后,蜂胶相比MTA可以显著降低IL-1β和IL-6的表达量。结论 山东蜂胶相比MTA对牙髓细胞有一定的细胞毒性,对细胞迁移的促进作用不明显,但蜂胶具有良好的抗炎效果及诱导牙髓细胞成牙本质分化的能力,经处理后有望应用于感染牙髓的活髓保存治疗。     

骨巨细胞瘤中多核巨细胞的纯化及其性质的探讨

目的 :利用酶消化方法对骨巨细胞瘤中多核巨细胞进行纯化 ,以弥补破骨细胞获取量少的问题 ,为骨质疏松的体外研究提供丰富的细胞来源。并用免疫组化的方法对骨巨细胞瘤中多核巨细胞的性质和来源进行探讨。方法 :体外分离培养 8例骨巨细胞瘤的多核巨细胞 ,在培养 2 0h后 ,用 0 .5 g·L-1胰蛋白酶 / 0 .2 g·L-1EDTA联合消化的方法去除贴壁能力较弱的单核基质细胞。将分离培养的骨巨细胞瘤多核巨细胞与牙磨片共培养 ,观察骨巨细胞中多核巨细胞的噬骨能力。并用破骨细胞特异表达的空泡型质子泵、Ⅱ型碳酸酐酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶 9对多核巨细胞进行免疫组化染色和TRAP染色。结果 :利用酶联合消化的方法可以获得较高纯度的多核巨细胞 ,纯化率达 85 %。骨巨细胞瘤中的多核巨细胞对破骨细胞所特异表达的空泡型质子泵、Ⅱ型碳酸酐酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶 9呈强阳性表达 ,TRAP染色阳性 ,体外培养具有噬骨能力。结论 :利用 0 .5 g·L-1胰蛋白酶 / 0 .2g·L-1EDTA消化的方法可获得较高纯度的多核巨细胞 ,可为破骨细胞体外研究提供丰富的细胞来源。骨巨细胞瘤中的多核巨细胞在功能表达上与破骨细胞相似 ,它可能来源于病变中圆形单核基质细胞的融合     

猪主动脉组织工程瓣膜制备的初步研究

目的：初步探索猪主动脉组织工程瓣膜的制备方法。方法：经胰酶－EDTA、表面活性剂、核酸酶处理，去除猪主动脉瓣的细胞成分，测定瓣叶去细胞前、后的生物力学特性，并在其表面种植BAECs。结果：猪主动脉瓣膜中的细胞成分能完全被去除，获得完整无细胞的纤维网状支架，瓣叶去细胞前、后的断裂强度和断裂伸长率无明显变化，瓣膜近端存留的主动脉壁中的细胞一半被去除；种植的BAECs在去细胞瓣膜表面、主动脉内膜形成一连续的细胞层。结论：猪主动脉瓣膜去细胞后获得的纤维支架适宜血管内皮细胞的生长，可以用来构建组织工程瓣膜。     

激光用于深龋意外露髓的临床试验研究

目的研究利用Er,Cr：YSGG激光去腐质结合使用直接盖髓剂治疗深龋意外露髓,通过组织学方法观察修复性牙本质的形成及牙髓状况来判断保髓治疗效果。方法选取10例深龋患者,随机分为两组,均人为造成露髓。一组利用Er,Cr：YSGG激光去龋后施以直接盖髓术,一组常规直接盖髓,最后用组织学方法观察修复性牙本质的形成及牙髓状况以判断疗效。结果利用Er,Cr：YSGG激光去腐质,患牙术后30 d所形成的修复性牙本质更明显,牙髓无炎症表现。结论利用Er,Cr：YSGG激光去腐质结合直接盖髓剂治疗深龋意外露髓的效果明显高于传统的直接盖髓术。     

氟化钠在活髓烤瓷全冠牙体预备后的应用

目的评价氟化钠治疗烤瓷全冠牙体预备后敏感症的临床疗效。方法自身配对设计,将30例患者的96颗患牙随机分为两组,试验组用氟化钠涂擦处理,对照组用温蒸馏水安慰处理,采用可视分级评价法（visual analog scale,VAS）评价其临床疗效。结果氟化钠治疗后VAS值（3.56±1.56）与治疗前（6.24±1.18）、对照组治疗后（5.86±1.45）差异均有统计学意义（P〈0.05）,有效率为84.67%。结论氟化钠可有效缓解活髓牙全冠预备后的牙本质过敏症。     

牙本质过敏治疗前牙髓活力电测验的临床应用

目的：在牙本质过敏治疗前通过牙髓活力电测验来评估牙髓的状态进而确定治疗方案。方法：对322颗患牙及对照牙进行牙髓活力电测验,依据读数的不同分为A组和B组,常规进行脱敏治疗,观察疗效。结果：A组多愈后良好,B组多进行牙髓治疗。结论：牙髓活力电测验是检查牙髓生活状态的间接手段,通过此方法有助对患牙的治疗及愈后作出正确估测,从而降低临床工作中误诊误治的发生率。