雷公藤内酯醇对EAE大鼠外周血CD_4~+/CD_8~+及IL~(-6)的影响

目的探讨雷公藤内酯醇对急性实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠外周血CD4+/CD8+及IL-6的影响。方法模型组采用豚鼠髓鞘蛋白和福氏完全佐剂诱发大鼠急性EAE;治疗组在模型组的基础上予以不同剂量雷公藤内酯醇(Tri),采用流式细胞仪检测外周血CD4+/CD8+,ELISA法检测IL-6水平;HE染色和Loyez氏髓鞘染色观察病理和髓鞘改变。结果与模型组和低剂量Tri组比较,高剂量Tri组CD4+/CD8+和IL-6明显降低(P<0.05,P<0.05);脑和脊髓炎症细胞浸润明显减少;髓鞘结构完整。结论雷公藤内酯醇对EAE的治疗有剂量相关性,其作用机制与其降低CD4+/CD8+和IL-6有关。     

HPLC法测定雷公藤内酯醇生物贴中雷公藤内酯醇

目的建立雷公藤内酯醇生物贴的质量标准,雷公藤内酯醇生物贴中雷公藤内酯醇的定量测定方法。方法雷公藤内酯醇生物贴经甲醇超声提取。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(3∶7),检测波长为220 nm。结果雷公藤内酯醇在5~120μg/mL,线性关系良好(r=0.9981)。平均回收率96.5%(n=9)。RSD3%。结论本方法重现性好,灵敏度高。     

雷公藤红素对肝星状细胞增殖及其α-SMA表达的影响

目的:探讨雷公藤红素抗肝纤维化的作用机制。方法:活化的HSC-T6细胞分别加不同浓度的雷公藤红素进行培养,采用MTT法检测HSC-T6细胞的增殖情况,采用免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达变化。结果:雷公藤红素作用HSC-T6细胞24小时后,2.5、25、50μg/ml浓度雷公藤红素对肝星状细胞HST-T6增殖的抑制率分别为6.97%、13.01%、18.23%,显著高于对照组,与药物浓度呈正相关。雷公藤红素2.5、25、50μg/ml浓度培养的HSC-T6细胞的α-SMA阳性表达率明显下降,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:雷公藤红素能够抑制肝星状细胞活化及增殖,抑制α-SMA表达。     

雷公藤氯内酯醇研究进展

雷公藤氯内酯醇是从雷公藤值物中分离得到的环氧二萜内酯化合物，足雷公藤中的主要活性物质，本文从生源、半合成、药理等三个方面对该化合物进行全面介绍。     

雷公藤内酯醇研究进展

雷公藤内酯醇具有抗肿瘤,抗炎,免疫调节,抗生育等活性,广泛用于治疗肿瘤,肾炎,哮喘等疾病,但是在运用过程中也存在多种不良反应.综述了近几年来雷公藤内酯醇的药理研究,含量测定方法及不良反应的研究概况.     

雷公藤擦剂的抗炎和镇痛作用

雷公藤(Tripiterygium wilfordii HOOR.f.)系卫矛科雷公藤属木质藤本植物,据《福建药物志》记载,其性味卒温,有大毒,具有祛风活络,破淤镇痛的功能,三十多年来临床上应用于治疗类风湿性关节炎,系统性红斑狼疮,银屑病等均有较好疗效,引起医药界的广泛重视,对其进行大量的药理,毒理及有效成分等研究并取得了进展。为了进一步提高疗效,降低毒副作用,我们制成主要含有雷公藤内酯醇的擦剂作为皮肤给药,观察其抗炎、止痛作用,现报道如下:     

雷公藤内酯醇对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨雷公藤内酯醇对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响及作用机制。方法　体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞 ,通过3 H -TdR掺入试验 ,观察雷公藤内酯醇对血清诱导的细胞增殖的影响 ;采用流式细胞技术 ,观察该药对细胞增殖周期的影响。结果　雷公藤内酯醇在 (0 .5～ 4 )× 10 -5g/L的浓度范围内 ,以一种剂量依赖性的方式抑制了血清诱导的VSMC增殖 ;雷公藤内酯醇可显著增加细胞周期中G0 /G1期细胞百分含量 ,减少S期细胞的百分含量 ,阻断细胞由G0 /G1期向DNA合成的S期转化 ,作用呈剂量依赖性。结论　雷公藤内酯醇可能通过影响细胞周期的转化而抑制VSMC的增殖。     

雷公藤内酯醇对雄性大鼠的生殖毒性及其机制研究

评价雷公藤内酯醇的雄性生殖毒性,观察染毒后雄性大鼠精子的畸形率、睾丸组织脂质过氧化物、睾丸组织标志酶活力和血清中激素水平的改变。设阴性和阳性对照组,以低(0.025 mg·kg^-1)、中(0.05 mg·kg^-1)、高剂量(0.1 mg·kg^-1)的雷公藤内酯醇混悬液对健康雄性Wistar大鼠连续灌胃染毒30 d,1次/d,于末次染毒24 h后处死大鼠,测定睾丸组织和血清中各项指标,并考察附睾精子畸形率。结果显示阳性对照组相比阴性对照组,各组具有显著性差异。中剂量染毒组的大鼠睾丸组织SOD,LDH,G-6-PD,Na⁺-K⁺-ATPase,Ca⁺-Mg⁺-ATPase含量较阴性对照组显著降低,并随着染毒达到高剂量,以上各指标的下调更加明显。大鼠睾丸组织GSH-Px和β-G水平只在染毒高剂量时,表现出明显的下降。而各染毒组的MDA,FSH,LH水平均表现差异无统计学意义。雷公藤内酯醇染毒中、高剂量组精子畸形率高于阴性对照组。提示在该实验染毒和剂量范围内,雷公藤内酯醇对睾丸组织具有脂质过氧化作用,导致生精细胞、支持细胞和间质细胞的损伤;同时伴有睾丸标志酶活力的下降,阻碍睾丸组织的有氧代谢和细胞对能量的利用,形成了一条对雄性生殖系统的损伤链。     

雷公藤内酯醇衍生物对肝癌细胞增殖、凋亡的作用研究

目的研究新型雷公藤内酯醇（Triptolide,TPL）衍生物对正常肝细胞的毒性以及对肝癌细胞的增殖、凋 亡作用。方法通过对TPL 进行化学修饰,获得2 种新型衍生物：雷公藤内酯三醇（TP-3-OH）和丙烯酸雷公 藤甲素酯（TPO）。通过体外培养人胚胎肝细胞LO2 和肝癌细胞HepG2、Hep3B、SMMC-7721,分为DMSO 对 照组, TPL/TP-3-OH/TPO 低、中、高浓度组（25、50、100 nmol·L-1）。通过检测培养上清中乳酸脱氢酶（LDH） 的活性来评价TP-3-OH、TPO 对肝细胞的毒性;采用MTT 实验检测细胞增殖情况;采用流式细胞术及 Western Blot 法检测细胞凋亡及凋亡通路相关蛋白表达情况;采用划痕实验检测细胞迁移能力。结果与TPL 组比较,50、100 nmol·L-1 浓度条件下TP-3-OH、TPO 组的LO2 细胞培养上清中的LDH 活性明显降低（P＜ 0.05,P＜0.01）。与DMSO 对照组比较,TPO 中、高浓度（50、100 nmol·L-1）组的LO2 细胞增殖抑制率明显升 高（P＜0.05,P＜0.01）,TPO 低、中、高浓度（25、50、100 nmol·L-1）组的HepG2、Hep3B、SMMC-7721 肝癌 细胞增殖抑制率均明显升高（P＜0.05,P＜0.01）;TPO 高浓度（100 nmol·L-1）组的LO2、HepG2 和SMMC-7721 细胞的早期、晚期细胞凋亡率均明显升高（P＜0.05,P＜0.01）;TPO 中、高浓度（50、100 nmol·L-1）组SMMC- 7721、HepG2 细胞的cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP 蛋白表达显著上调（P＜0.01）;TPO 中浓度（50 nmol·L-1） 组SMMC-7721 细胞的24 h 迁移率明显降低（P＜0.05）。结论经化学修饰获得的2 种新型TPL 衍生物对肝细 胞的毒性降低,其中TPO 具有抑制肝癌细胞增殖、促进肝癌细胞凋亡的作用。     

HPLC法检测雷公藤药材中雷公藤内酯醇的含量

目的：建立测定雷公藤药材中雷公藤内酯醇含量的方法。方法：雷公藤醇提物经中性氧化铝层析柱洗脱,采用HPLC法检测雷公藤内酯醇含量。色谱柱：PhenomenexLunaC18（4．6mm×250mm,5m）;流动相：甲醇-水;梯度洗脱：0min（甲醇40％）-30min（甲醇50％）;流速1．0mL·min^-1;检测波长218nm;柱温：35℃。结果：雷公藤内酯醇与其他成分分离效果良好,25～400μg·ml^-1范围内有良好的线性关系,平均回收率为98．17％。结论：该方法准确、灵敏,可作为雷公藤药材中雷公藤内酯醇的定量分析方法。     

清热中药对高糖培养下肾小球系膜细胞增殖的影响

为研究清热中药治疗糖尿病肾病的作用机理,验证中医理论对糖尿病发病机制的认识,并为临床用药提供依据。采用MTF比色法,观察具有清热作用的中药知母、生地、胡黄连和地骨皮水提物对体外高糖条件下培养的牛肾小球系膜细胞增殖的影响。结果显示,知母、生地和胡黄连对系膜细胞增殖有抑制作用,而地骨皮无明显作用。提示清热中药可能通过抑制系膜细胞的增殖从而对糖尿病肾病的发生产生一定的影响。     

护肾固精方对大鼠系膜细胞增殖周期的影响

目的探讨中药复方护肾固精方对大鼠系膜细胞(MC)生物学行为的影响。方法采用体外培养大鼠MC和血清药理学方法,分为护肾固精方血清组、脂多糖(LPS)病理组及正常对照组,将不同浓度的作用物加入MC共同培养,培养后的MC制成单细胞悬液,经流式细胞仪检测后,计算出细胞周期中的G0/G1期、S期、G2/M期各时期的百分比及S期抑制百分比、细胞PI。结果不同浓度的作用物对MC增殖周期有不同影响。LPS血清能明显刺激MC增殖,表现为G0/G1期细胞百分比减以及S期细胞增加;细胞的S期抑制百分比明显下降,而细胞的PI则显著增高;中、高浓度的中药血清明显抑制MC增殖,表现为G0/G1期细胞百分比增加及S期细胞减以,细胞的S期抑制百分比明显增加,而细胞的PI则显著降低。并且使大量MC阻滞在G0/G1期,能诱导MC发生凋亡。结论护肾固精方治疗系膜增殖性肾炎等肾小球疾病的作用机理之一,可能与抑制MC增殖和促其细胞凋亡有关。     

川芎嗪对人胎肾小球系膜细胞增殖的影响及其机理探讨

在人胎肾小球系膜细胞培养体系中加入川芎嗪后能抑制ＭＣ生长数量。川芎嗪０．６ｍｍｏｌ，１．２ｍｍｏｌ加入ＭＣ培养系６天后，ＭＣ数量分别为：３７５８０±３４７５，２７３５０±３４１８，明显低于对照组７１８５０±５１０８（Ｐ＜０．０５）；ＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ摄取量对照组为３５７５±３０６，加入川芎嗪０．６ｍｍｏｌ，１．２ｍｍｏｌ后分别为１０１７±２０，５８３±２７１（Ｐ＜０．０１）；加入川芎嗪１ｍｍｏｌ于     

葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨葛根素对大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增殖的影响。方法：体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分空白对照组和葛根素组。葛根素组采用MTT法,观察12h、24h、48h和72h后GMcs的增殖水平。结果：随着葛根素浓度的提高及作用时间的延长,GMCs细胞的生长抑制率呈现上升趋势。结论：葛根素能抑制GMCs增殖,并与药物的浓度和作用时间呈明显正相关。     

活血潜阳胶囊对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察活血潜阳胶囊对血管紧张素Ⅱ（ATⅡ）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响。方法：贴块法行SD大鼠胸主动脉VSMC分离培养。倒置相差显微镜，透射电镜，α-SM-actin鉴定，以血清药理学方法进行实验。采用通法采集药物血清，10^-6mol/LATⅡ为刺激因子，卡托普利（Captopril)为对照，活血潜阳胶囊药物血清分为10%，7.5%,5%,2.5%共4个浓度，采用结晶紫染色法观察细胞生长曲线，测定氚标-胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR)掺入量了解DNA合成的变化。并用透射电镜观察细胞超微结构的改变。结果：（1）经活血潜阳胶囊处理后。细胞增殖速度明显下降，生长曲线下移，^3H-TdR掺入量减少，DNA合成明显受到抑制，其作用与Captopril相当，且在一定范围内有剂量依赖性。（2）活血潜阳胶囊可以改善ATⅡ引起的细胞超微结构改变，使VSMC仍保持收缩型的特征，与Captopril的作用相似。结论：活血潜阳胶囊能抑制ATⅡ引起的VSMC增生和结构改变，从细胞水平初步探讨了活血潜阳胶囊改善高血压血管重构的机理。     

中药对高糖作用下牛肾小球系膜细胞增殖的影响

目的研究分别具有益气、养阴、清热、活血功效的中药对高糖作用下牛肾小球系膜细胞(GMC)增殖的影响.方法采用 MTT 比色法,观察黄芪、白芍、山楂、知母、当归对体外高糖培养的牛肾小球系膜细胞增殖的影响.结果黄芪、白芍、山楂、知母对系膜细胞增殖有抑制作用,而当归无抑制作用.结论养阴益气、清热活血中药是治疗糖尿病肾病的有效药物.     

防己茯苓汤加减对TNF-α诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及PAI-1含量的影响

目的观察防己茯苓汤加减方是否具有干预肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导后肾小球系膜细胞增殖的作用及对纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的影响。从而为临床运用此方治疗慢性肾脏病提供实验依据。方法采用大鼠肾小球系膜细胞培养进行体外研究,用TNF-α刺激系膜细胞增殖,再加入不同浓度防己茯苓汤加减方提取液对细胞进行干预,用MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,用ELISA法测定细胞培养液中肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的含量。结果加入防己茯苓汤加减方提取液后,系膜细胞的增殖程度受到显著抑制(P<0.05),流式细胞仪DNA图示S期细胞数显著减少(P<0.05)。细胞培养液中PAI-1的表达受到抑制(P<0.05)。结论防己茯苓汤加减方对TNF-α诱导后肾小球系膜细胞的增殖具有抑制作用,并可影响肾小球系膜细胞PAI-1的表达,进而调整细胞外基质(ECM)的合成与降解。     

黄芪皂苷和黄芪多糖对大鼠肾脏系膜细胞增殖的影响

目的 观察黄芪皂苷和黄芪多糖对体外培养的肾脏系膜细胞增殖的影响.方法 分离和培养大鼠肾脏系膜细胞,用MTT法研究不同浓度的皂苷和多糖对细胞增殖的影响,并计算抑制率.结果 黄芪多糖在低浓度时表现出一定的促进细胞增殖作用,在高浓度时有一定的抑制作用;黄芪皂苷在所考察的范围内均表现出一定的抑制作用.结论 黄芪皂苷和黄芪多糖在一定浓度时对肾脏系膜细胞增殖具有一定的抑制作用,为其在治疗肾小球肾炎中的作用提供了理论依据.     

熄风通络方对大鼠胶原诱导性关节炎的影响

目的:探讨熄风通络方治疗类风湿性关节炎的作用机理.方法:采用Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠为模型,观察高、中、低剂量熄风通络方对其的影响,并以疏风活络片做阳性对照,观察大鼠踝关节表面温度、关节炎症积分及关节通透性;并测定注射Ⅱ型胶原前后耳厚度,观察其对迟发性超敏反应的作用.结果:熄风通络方可明显降低Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎大鼠关节表面温度,减少炎症积分,改善关节通透性,对迟发性超敏反应有抑制作用.结论:熄风通络方对类风湿性关节炎有一定的治疗作用.     

紫草素对NIH小鼠肾系膜细胞增殖的影响

狼疮肾炎是系统性红斑狼疮(SLE)的常见表现,也是预后不良的重要征兆.