酶联免疫吸附法测定黄曲霉毒素B1

目的　检测食品、饲料中黄曲霉毒素B1 。方法　采用先进的AgraQuantTM黄曲霉毒素检测试剂盒和StatFax 3 0 3Plus酶标读数仪 ,联合分析黄曲霉毒素B1 。结果　该方法与薄层层析法等各种方法相比具有灵敏度高、干扰少、测定步骤简便、快速、操作安全、设备投资少、测定结果准确可靠的优点。结论　该方法的测定结果令人满意 ,是目前测定黄曲霉毒素B1 较为理想的方法     

酶联免疫吸附法和薄层色谱法联合分析黄曲霉毒素B1的研究

目的 研究酶联免疫吸附法和薄层色谱法的特点，评价联合两种方法检测黄曲霉素B1的可行性。方法 应用酶联免疫吸附法进行初步筛选试验和最终定量分析，以薄层色谱法进行确证试验。结果 黄曲霉毒素B1含量为1．0～20．00μg／kg范围内，标准曲线r值为-0．993～-0．999，CV为0．4～2．6％，回收率92．0～105．0％，当酶联免疫吸附法测定结果为10.0～45．0μg／kg范围内，应用薄层色谱法进行确证试验，符合率达100％。常见的其它霉菌毒素干扰试验表明，该方法特异性反应好，无干扰现象。结论 酶联免疫吸附法是目前国际测定黄曲霉毒素B1的先进方法，灵敏度高，干扰少，测定步骤简便、快速、操作安全。薄层色谱法中的确证试验是利用三氟醋酸和黄曲霉毒素B1的特异性反应所生产的衍生物，确证黄曲霉毒素B1。结合国际先进酶联免疫吸附法和传统方法的优点，科学地实现了快速、可靠、准确测定黄曲霉毒素B1的目的。     

广州市市售粮油食品中黄曲霉毒素B1的污染调查分析

目的对2016-2017年广州市市售粮油食品中黄曲霉毒素B1进行监测,为广州市市售粮油食品黄曲霉毒素B1风险评估工作提供基础数据。方法在广州市11个区随机采集粮油样品五大类共550份,按照GB/T 18979-2003《食品中黄曲霉毒素B1的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法》进行检测。检测结果依据GB 2761-2017进行评价。结果 550份样品中共有74份检出黄曲霉毒素B1,检出率为13.4%,总体超标率为0.9%。结论广州市市售五大类粮油食品黄曲霉毒素B1污染水平不高,但花生油黄曲霉毒素B1检出率较高,非正规厂家生产的花生油黄曲霉毒素B1含量超标率比正规厂家生产的花生油高。     

UHPLC法测定食品中黄曲霉毒素的含量

目的建立一种同时测定食品中多种黄曲霉毒素含量的方法.方法采用UHPLC法同时测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1与G2,并建立回归方程,考察方法的准确度与精密度.结果在各自的线性范围中,黄曲霉毒素B1、B2、G1与G2的浓度c(μg/L)与峰面积A呈现良好的线性关系(r>0.999).食品样品的平均回收率为83.4%~107.5%.黄曲霉毒素B1、B2、G1与G2的相对标准偏差RSD为2.21%、2.79%、3.62%、2.57%(n=5).结论 UHPLC法操作简便、线性范围较广、灵敏度高、准确度和精密度良好,是实用的黄曲霉毒素检测方法.     

黄曲霉毒素B_1加合物检测方法研究进展

黄曲霉毒素B1污染是我国肝癌发生的主要危险因素之一,检测黄曲霉毒素B1暴露的生物标志物来研究黄曲霉毒素B1和肝癌之间的关系已成为趋势。随着多学科的交叉发展,现在已经具备多种试验方法检测黄曲霉毒素B1生物标志物,其中的一些检测方法具有高敏感度和精确度,对研究黄曲霉毒素B1早期低暴露具有重要价值。     

检测中草药提取物中黄曲霉毒素的高灵敏方法

目的建立中草药提取物中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的高灵敏测定方法。方法样品经提取和过滤后用免疫亲和柱净化和衍生,然后采用不同比例(15%~30%)乙腈/水梯度洗脱,用具荧光检测器的高效液相色谱仪检测。结果检出限:黄曲霉素G1为0.09 ppb;B2为0.02 ppb;B1为0.03 ppb;G2为0.04 ppb,均低于文献报道的检出限,样品加标回收率为90%~103.2%。结论该方法简单、快速、准确、灵敏度高,可用于中药中黄曲霉毒素含量的测定。     

黄曲霉毒素B1快速检测方法的研究进展

黄曲霉毒素B1是黄曲霉毒素系列中毒性、危害性、污染性最大的一种,且分布广,对世界范围内的大多数食品原料及成品均有不同程度的污染,严重威胁人类健康。目前,国内外对于黄曲霉毒素B1的检测要求越来越高,新发展起来的快速分析技术也逐渐应用于黄曲霉毒素B1的检测,除了常规的液相色谱法、薄层层析法、胶体金法、酶联免疫吸附法得到更充分的研究和应用外,时间分辨荧光免疫法等新兴免疫学快速检测方法以及具有创新意义的ELISA-TLC组合分析法也已初步建立,这些为实现快速筛查、现场快检,提高检测效率、降低检测成本提供了很好的思路;同时也为更好地维护人民群众饮食安全提供重要支撑。本文就黄曲霉毒素B1的快速检测方法做一综述,以期为进一步提高对黄曲霉毒素B1的监控水平和效率提供参考。     

面粉中黄曲霉毒素B1调查报告

黄曲霉毒素B1是强致癌物，我们采用薄层层析法进行分析测定，结果报告如下。     

免疫亲和柱净化-碘柱后衍生化-高效液相色谱荧光法检测斑蝥中黄曲霉毒素及其液质确证

目的:建立高效液相色谱-碘柱后衍生化-荧光检测器检测中药材斑蝥中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量,并采用液质联用法进行确证。方法:样品以70%甲醇溶液提取,经免疫亲和柱净化后,利用碘柱后衍生化-HPLC-FLD进行分析测定。并进一步采用LC-MS/MS对阳性样品进行确证。结果:在优化条件下,黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2分别在0~0.525、0~0.1125、0~0.1875、0~0.1125μg的范围内线性关系良好,r0.9996,回收率82.5%~107.3%,RSD8.1%。检测了21批样品并通过LC-MS/MS确证,在与对照品相同的保留时间处,样品与对照品有相同的特征离子碎片,排除了样品假阳性的可能。结论:该方法简便快速,灵敏度高,重复性好,适用于斑蝥中黄曲霉毒素的检测。     

解读致癌物黄曲霉素

<正>1.黄曲霉素是什么黄曲霉素是黄曲霉菌属黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的代谢物。黄曲霉毒素不是一种化合物,而是一组化学结构类似的化合物总称。至今已分离出的黄曲霉毒素及其衍生物有二十多种,包括B1、B2、G1、G2、M1等毒素和毒醇。在天然食物中以黄曲霉毒素B1最为多见,危害性也最强,而牛奶检测超标的黄曲霉M1 B1     

中药黄曲霉毒素检测方法学的改良研究

目的 对黄曲霉毒素检测方法中的参数进行优化,完善2010 版药典的黄曲霉毒素检测方法.方法 本实验改用70% 的甲醇作为溶剂,调整流动相的比例及样品提取中离心机转速.结果 被测各组分之间有很好的分离度,有很好的峰型.B2 和G2 的最低检出限为0.07g/kg,B1 和G1 的最低检出限为0.10g/kg,回收率83.1%-94.6%,RSD3%-5%.结论 采用此方法检测常用中药材中的黄曲霉毒素无干扰性杂峰,结果准确可靠.     

测定粮食和饲料中伏马毒素的方法应用研究

目的探讨以ELISA法检测粮食、饲料中伏马毒素的可行性。方法采用先进的竞争酶联免疫吸附法检测盒（ROMER美国）和Stat Fax303酶标读数仪（美国），联合分析伏马毒素。结果该方法与HPLC法和GC-Ms法相比，具有灵敏度高、干扰少，测定步骤简便、快速，操作安全，设备投资少，测定结果准确可靠的优点。结论该方法的测定结果令人满意，是目前国内外测定粮食、饲料中伏马毒素的科学而理想的方法。     

超高效液相色谱法检测食品黄曲霉毒素

目的 建立一种快速、灵敏、简便的超高效液相色谱法(UPLC)同时测定食品中黄曲霉毒素B1(AFB1)、B2(AFB2)、G1(AFG1)、G2(AFG2)水平的方法.方法 样品用乙腈水(84:16)提取液提取后过滤,滤液经黄曲霉毒素多功能净化柱(MFC)净化,纯化液经浓缩挥干后,加三氟乙酸(TFA)衍生后,用带有荧光检测器的超高效液相色谱仪测定.结果 4种黄曲霉毒素5min完全分离,线性范围质量浓度分别为0.10～100.00μg/L(AFB1、AFG1)、0.05～50.00μg/L(AFB2、AFG2),最低检出质量分数分别为0.04μg/kg(AFB1、AFG1)、0.02μg/kg(AFB2、AFG2),大米、玉米、花生、油炸面点回收率为80.0%～101.2%,相对标准偏差＜5%,r≥0.999.结论 该方法简单、快速、灵敏度高,适用于食品中4种黄曲霉毒素水平的同时测定.     

抗抗总黄曲霉毒素单抗F(ab’)2多克隆抗体的制备及特性

目的:以抗总黄曲霉毒素单抗2G2株F(ab’)2片段作为免疫原制备抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体。方法:制备抗总黄曲霉毒素单抗2G2株F(ab’)2片段,分别用F(ab’)2片段和F(ab’)2-KLH免疫日本大耳白兔,制备抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体。采用ELISA检测该抗体替代黄曲霉毒素B1(AFB1)的情况,并分析与其他单克隆抗体的交叉反应情况。用该多克隆抗体免疫BALB/C小鼠,采用间接非竞争ELISA检测小鼠血清,鉴定该抗体的亚型。结果:由2G2株F(ab’)2片段所得的抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体纯化后,替代游离AFB1达到20%、50%和80%竞争抑制时的质量浓度分别为1、4和25mg/L,分别相当于0.47、2.74和16.00μg/L游离AFB1;该抗体替代AFB1包被抗原达到20%、50%和80%竞争抑制时的质量浓度分别为1、4和19mg/L,分别相当于0.33、1.35和5.45μg/L游离AFB1。小鼠生物鉴定显示该多克隆抗体为Ab2β型。结论:成功制备了抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体,为研制AFB1无毒检测试剂盒提供了依据。     

ELISA法测定部分种子和果实类中药黄曲霉毒素B1含量

目的 间接竞争酶联免疫吸附法(ELISA)法测定部分种子果实类黄曲霉毒素B1的含量.方法 间接竞争酶联免疫吸附法(ELISA法).结果 样品均有不同程度的污染黄曲霉毒素B1(AFB1),并且在贮藏过程中有发霉现象者含量较高.结论 建立黄曲霉毒素B1含量限度标准非常必要.     

高效液相色谱法测定食品中黄曲霉毒素

目的建立HPLC测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量的方法。方法采用ALLSPHERE ODSLENGTH250×4·6mm色谱柱,分析时间18min左右,流动相为乙腈/水(梯度洗脱),流速:1·2ml/min,荧光检测器:激发波长360nm,发射波长440nm。结果线性关系良好,4种黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的回收率在87·8%~102·1%之间,变异系数2·33%~3·48%,最低检出浓度B1、B2、G1、G2分别为0·20μg/kg,0·05μg/kg,0·20μg/kg,0·05μg/kg。结论应用高效液相色谱仪检测食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,操作安全、快速、准确度高、精密度好。     

氮化碳纳米片耦合适配体的赭曲霉毒素荧光检测新方法研究

目的建立快速测定药材外源性有害成分赭曲霉毒素（OTA）的含量,为药材快速质控技术提供前期基础。方法制定一段一端标记有羧基荧光素（FAM）荧光团的赭曲霉毒素DNA适配体序列片段:5’-GAT-CGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA-FAM-3’,在20 mM Tris-HCl缓冲液（包含100 mM NaCl、5.0mM KCl、5.0 mM MgCl2,pH 7.4）中,以氮化碳纳米片（g-C3N4nanosheets,CNNS）为荧光淬灭基质,利用CNNS对游离态DNA和OTA-DNA复合态的吸附差异和其对FAM的荧光淬灭作用,实现对OTA的检测。结果该传感器对OTA的检测线性范围为1～100 nM,检测限为0.7 nM,且10倍浓度的赭曲霉毒素B和黄曲霉毒素B1均不会对检测结果有明显影响。结论氮化碳纳米片耦合OTA适配体的荧光检测方法具有较高的选择性和灵敏度,且操作简单,有望成为中药材中赭曲霉毒素含量测定的新方法。     

黄曲霉毒素诱发大鼠肝细胞癌过程中P38 mRNA表达水平的动态变化

目的：了解P38 mRNA在黄曲霉毒素相关肝细胞癌发生发展过程中的变化情况。方法：取雄性4周龄SD大鼠77只为研究对象,随机分为实验组66只,对照组11只。实验组应用黄曲霉毒素B1诱发肝细胞癌,对照组按正常饲养方法饲养,两组大鼠分别于实验第12、20、36、46周进行肝组织活检,第58周时处死取肝。所有组织标本均进行常规病理组织学检测,并应用RT-PCR检测P38 mRNA的表达水平。结果：实验组存活至实验结束并发生肝细胞癌的大鼠共24只（出癌组）,6只无任何肿瘤发生（未出癌组）,对照组11例均未发生肿瘤。各组大鼠均可检出不同程度的P38 mRNA表达,其表达水平与黄曲霉毒素B1作用时间无明显关系,但肝癌组织较癌旁组织及其正常肝组织明显增强（P〈0.05）。结论：黄曲霉毒素B1诱发大鼠肝细胞癌组织P38 mRNA的表达水平明显上调,P38 MAPK通路在黄曲霉毒素B1相关肝细胞癌发生时可能处于异常激活状态。     

免疫亲和柱-HPLC柱后光化学衍生法测定中药饮片中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量

目的：建立中药饮片中黄曲霉毒素（ AF）B1、B2、G1、G2含量测定的方法。方法：收集中药饮片87批,用免疫亲和柱进行AF的分离处理,采用高液相色谱（ HPLC）柱后光化学衍生化法测定中药饮片中AFB1、AFB2、AFG1、AFG2含量并进行方法学分析。结果：被测定的AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的检出限分别为0.7、0.3、0.6和0.3μg/kg,在选定的范围内线性关系良好（ r≥0.999）,精密度试验、重复性试验、准确度试验及标准样品验证试验结果均良好,87批中药饮片均未检出黄曲霉毒素。结论：免疫亲和柱-HPLC柱后光化学衍生化法操作简便,专属性强、灵敏度高,检测中药饮片中AFB1、AFB2、AFG1及AFG2的含量准确可靠。     

中药黄曲霉毒素检测方法学的改良研究

目的探究改良黄曲霉毒素检测方法的应用价值。方法本研究应用的溶剂为70.0%的甲醇,对流动相的比例进行调整,并对样品提取中离心机转速进行相应的调整。结果所得出的分离度很好,所形成峰型理想。不管是B2,还是G2,它们的最低检出限为0.074g/kg。不管是B1,还是G1,它们的最低检出限为0.107 g/kg。回收率均值最大为94.6%,最小为83.1%。结论对黄曲霉毒素检测方法进行如此改良,可以将经常使用的中药中的黄曲霉毒素无干扰性杂峰识别出来,获得的结果既具有很好的准确性,又具有很好的可靠性,具有应用和推广的价值。