早期死亡时间推断的法医学研究现状

精确的早期死亡时间推断在法医学领域中是一个非常重要但迄今仍未能完全解决的问题之一。本文笔者综述了近年来国内外学者采用较先进的技术与方法从不同角度对此问题的法医学研究现状。如何将这些研究成果变成可供早期死亡时间推断精确量化的标准与指标，还有待于今后国内外法医学者进一步的努力研究。     

不同环境中应用猪眼玻璃体液成分浓度变化推断死亡时间的研究

目的 研究在不同环境中大出血死亡猪眼玻璃体液成分变化及其与死亡时间(postmorteminterval,PMI)的关系。方法 放血处死家猪后取192只猪眼随机分为A、B两组,分别在避光、温度(15±2)℃、湿度(50±5)%的空气中以及浸没于环境温度为(15±2)℃双蒸水的条件下放置2～96 h,采集玻璃体液,运用全自动生化检测仪、超高效液相色谱分析仪(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)检测K+、Na+、Cl–及次黄嘌呤(hypoxanthine,Hx)浓度;采用SPSS13.0统计软件对检测数据进行回归分析。结果 眼球置于空气中时,玻璃体液中K+、Hx与PMI相关性较高,回归方程为:PMI=-11.467+1.954[K+]-0.017[K+]2+0.511[Hx](R2=0.858);眼球置于双蒸水时,玻璃体液中Na+、Cl–与PMI相关性较高,回归方程为:PMI=144.439-1.636[Na+]+0.007[Na+]2-0.961[Cl-]+0.005[Cl-]2(R2=0.622)。结论 玻璃体液K+、Hx浓度变化可作为推断死后位于空气中的尸体较为稳定的指标;玻璃体液Na+、Cl–浓度变化可能对死后抛入淡水尸体的PMI推断具有参考价值。     

损伤时间推断研究进展

损伤时间的推断一直是法医病理学研究的重要课题之一.损伤时间推断有两个重要内容,一是生前受伤与死后伤的鉴别,二是伤后存活时间的推断.     

早期死亡经过时间的推断

死亡时间的推断是法医病理学家面临的一个重要问题,由于脑死亡在我国尚未立法,因此仍以心脏停止为死亡标准进行死亡时间推断。目前研究最多的是早期死亡经过时间研究的意义最大,本文对早期死后时间的推断的研究及进展,从早期死后现象、尸体化学、超生反应以及法医昆虫学等方面进行综述。     

死亡时间推断的研究进展

死亡时间又称死后时间间隔(postmortem interval,PMI),准确推断PMI一直是法医学的重点与难点。随着计算机技术和分子生物学检测手段在法医学领域的应用,PMI的研究从根据传统的尸体现象已深入到细胞分子水平,且有了很大的进展。本文从尸体现象(如尸温等)、眼组织的变化(如玻璃体液、房水等)、蛋白质的变化、核酸(如DNA、RNA)的降解等方面作一综述,以期为法医学PMI推断研究提供新的思路。更多还原     

大鼠死后脑组织GAPDH mRNA多位点降解与晚期死亡时间的关系研究

目的 探讨看家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) mRNA上不同位点降解速率的规律性及其用于晚期死亡时间推断的可行性.方法 选取在死后较长时间内仍能检测出扩增产物的大鼠脑顶叶皮质,对GAPDH mRNA的6个不同位点进行不同时间点(死后即刻、1 d、5 d、9 d、12 d)的实时荧光定量RT-PCR监测,这些位点依次分布于GAPDH mRNA的5′～ 3′端.结果 用Ct值表示,并将所得数据及其比值(GAPDH mRNA 1～GAPDH mRNA 5与GAPDH mRNA 6的比值)与死亡时间(PMI)进行线性回归分析. 结果各位点GAPDH mRNA均与死后经过时间有相关性,但不同位点的mRNA降解速率不同.GAPDH mRNA 1～GAPDH mRNA 3的斜率为1.577、1.596、1.553,这3个位点的降解速率基本相同.GAPDH mRNA 4～GAPDH mRNA 6的斜率为0.936、0.892、0.829,这3个位点的降解速率基本相同.但后3个位点mRNA的降解速率要慢于前3个位点(P<0 05).以GAPDH mRNA 6作为外标,GAPDH mRNA 1～GAPDH mRNA 3与其的比值同PMI之间有相关性(R2=0 898,0 871,0 879),而GAPDH mRNA 4和GAPDH mRNA 5与其的比值同PMI之间无相关性.结论 同一组织中看家基因GAPDH的不同位点存在降解速率的差异性.选取降解速率慢的靠近3′端的位点作为引物,可能更适于研究晚期死亡时间的推断.     

尸体肛温与死亡时间推断

介绍Henssge发展的推断死亡时间的肛温法以及环温变化对尸体肛温影响的研究进展;基于R函数法,模拟计算环温脉冲对肛温的影响,它近似可以用环温变化量与持续时间的乘积来衡量。     

核酸降解与死亡时间推断的研究进展

死亡时间的推断一直是法医实践中的难题.迄今为止仍没有一种推断死亡时间的准确方法.随着分子生物学和检测技术的发展,对DNA和RNA降解量进行检测将成为死亡时间推断研究的主要方法之一.本文将对DNA、RNA的降解及与死亡时间的进行综述.     

荧光标记RT-PCR技术在实验动物死亡时间推断中的应用

目的 探讨荧光标记逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)在死亡时间(PMI)推断中的应用.方法 44只大鼠断颈处死后置于20℃温度控制系统内,利用荧光标记RT-PCR技术检测大鼠脑及肝组织GAPDH mRNA在死后即刻至8 d的相对表达量的变化.结果 在大鼠死后即刻至7 d脑组织、2 d肝组织内均可检测到GAPDH mRNA,其扩增产物的降解呈现出一定的规律性.结论 荧光RT-PCR技术检测大鼠死后脑及肝GAPDH mRNA,可为PMI推断提供一种新的方法.     

大鼠死后肾上腺突触素含量变化与死亡时间关系的研究

目的探讨大鼠死后肾上腺内突触素含量变化与死亡时间的关系。方法建立大鼠死亡模型，在死后不同时间取出肾上腺。应用免疫组织化学方法检测肾上腺内突触素含量变化，采用图像分析系统测定突触素阳性反应物的平均灰度值，分析其随死亡时间变化的规律。结果大鼠死亡后12h内突触素含量变化不明显，随着死后时间的延长，肾上腺内突触素含量逐渐下降。结论大鼠死亡后肾上腺内突触素含量变化具有一定时间规律性，突触素可作为推测死亡时间的参考指标。     

大鼠死后心肌肌红蛋白mRNA的含量变化与死亡时间的相关性研究

目的:研究大鼠心肌肌红蛋白(Myoglobin,Mb)mRNA 的降解规律,探讨其与死亡时间(Postmonem interval,PMI)的关系.方法:在25℃±1 ℃,65%～70%温度控制系统下,通过采用RT-PCR技术检测大鼠死后心肌Mb mRNA在体保存和离体保存条件下各相应时间段的含量变化,用SPSS 17.0软件对数据进行分析.结果:大鼠死后心肌Mb mRNA随死亡(离体)时间延长而逐渐降低,且与死亡(离体)时间呈线性关系,但在体保存要比离体保存降解慢.结论:Mb mRNA的降解呈时间相关性,在体与离体条件下的降解规律并不完全一致;Mb mRNA有望用于推断较早期死后经过时间.     

荧光原位杂交技术在推断皮肤损伤时间中的应用研究

目的应用荧光原位杂交技术检测大鼠皮肤挫伤后细胞间粘附因子-1（ICAM-1）mRNA表达,分析其与损伤时间的关系。方法建立大鼠皮肤挫伤模型,分别取挫伤后0．5h、1h、6h、12h、18h、24h、30h、36h皮肤组织及正常对照组皮肤。冰冻切片后进行荧光原位杂交,激光共聚焦显微镜观察、拍照,采用Image—pro plus进行结果分析。结果大鼠皮肤挫伤后I—CAM-1 mRNA在真皮层可见绿色荧光杂交点,其表达量在损伤后0．5h达到峰值,24h下降至正常对照组的2．25倍,随后又开始升高。结论FISH技术检测大鼠皮肤挫伤后36h内ICAM-1 mRNA的表达有一定时间规律性,可望作为推断皮肤早期损伤时间的指标之一。     

遗传物质降解规律与死亡时间推断的研究进展

死亡时间的推断具有重要意义,一直是法医学实践中的难题,也是法医学研究的重点。随着分子生物学及各种分析技术的发展,对死亡时间推断的研究已深入到细胞和分子水平,其中,死后机体内遗传物质DNA和RNA变化规律应用于死亡时间推断受到高度关注,新技术、新方法、新论点不断涌现,尽管大部分仍处于实验阶段,但仍有实际应用阶值。本文就遗传物质的检测应用于死亡时间推断研究以及发展前景概况进行简要综述。     

不同死亡方式大鼠骨骼肌羟脯氨酸含量比较

目的 探讨不同死亡方式大鼠骨骼肌羟脯氨酸(HYP)含量变化与死亡时间(PMI)的关系.方法 126只SD大鼠随机分为电击组、窒息组和失血组,用电击、窒息、失血分别将其致死,MRK3型酶标仪测定死后不同时间点(0,24,48,72,96,120 h和168 h)骨骼肌HYP含量.结果 以各组0 h作为对照进行组内t检验,各个时间点HYP含量差异均有统计学意义(P<0.05),随着死亡时间的延长,HYP含量逐渐减少.用死后168 h占0 h骨骼肌HYP含量的百分比表示HYP的分解速度,对上述三个实验组进行x2检验,三组问168 h占0 h骨骼肌HYP含量的百分比差异具有统计学意义(P<0.05),其中电击组最快(45.2%),其次为窒息组(49.7%),失血组最慢(54.9%).结论 不同死亡方式大鼠骨骼肌HYP含量变化与PMI有关.     

小鼠胃和阑尾组织中h-CD降解规律与死亡时间的相关性研究

目的：观察小鼠死亡后不同时间胃和阑尾组织中h-CD含量的变化,探讨不同温度条件下h-CD的降解规律与死亡时间的关系及其组织差异性。方法：选取72只健康成年昆明小鼠,采用机械性窒息致死后,随机分为两组,分别置于4℃冰箱和25℃人工气候箱中,并于死后0、24、48、72、96、120 h提取胃及阑尾组织,采用免疫印记及计算机图像分析技术检测上述组织中h-CD的含量,应用SPSS 16.0软件对数据进行统计学分析。结果：①h-CD的含量随死亡时间的延长而降低,与死亡时间具有相关性;②不同温度条件下,胃和阑尾组织中h-CD的降解速度均存在明显差异（P〈0.05）,h-CD在25℃组降解速度快于4℃组（P〈0.05）;③h-CD的降解速度在胃和阑尾组织中存在组织差异性,在阑尾组织中的降解速度较快（P〈0.05）。结论：h-CD的含量随死亡时间延长而降低,其降解速度受环境温度影响,温度升高,降解速度加快,且胃和阑尾组织中h-CD的降解速度具有组织差异性,其在阑尾组织中的降解速度快于胃组织中的降解速度。     

死亡时间推断方法的研究进展

准确的推断死亡时间,一直是法医实践工作中的重点和难点,本文就目前常用的傅立叶变换红外光谱技术、彗星试验、显微分光光度术及流式细胞技术在死亡时间推断中的应用作一综述,旨在为死亡时间推断的研究提供参考。     

含铁血黄素巨噬细胞与损伤时间的相关性研究

目的 研究小鼠皮肤损伤愈合过程中含铁血黄素巨噬细胞数量变化与损伤时间的关系,寻找推断损伤时间的病理形态学方法.方法 建立小鼠钝器创(挫裂创)和锐器创(切创)动物模型,应用普鲁士蓝染色法观察150只不同损伤时间小鼠伤后损伤区组织中的含铁血黄素巨噬细胞数量变化,同时以5只正常小鼠皮肤组织作对照.结果 在皮肤损伤区创缘组织中可见数量不等的含铁血黄素巨噬细胞,并随损伤时间的延长,呈现逐渐上升→高峰→逐渐下降的规律性变化.结论 应用普鲁士蓝染色法观察皮肤损伤区创缘组织中的含铁血黄素巨噬细胞数量变化,有望成为一种简便易行、经济实用的推断损伤时间的病理形态学方法.     

酶学检测在法医学领域中的应用进展

近年来,随着免疫组织化学等技术的改进与发展,酶学检测逐渐在法医学实验室中开展起来。在法医学研究和实践中,酶学检测技术正展现出越来越广泛的应用前景。大量研究资料表明,酶学检测在推断死亡时间、损伤形成时间、致死原因、体液分析、种属鉴别等领域发挥着重要作用。该文对近几十年来国内外相关文献进行综述,以期为相关研究提供参考。     

尸体眼玻璃体液钾、钡离子浓度与死亡时间的关系

目的寻找一种准确推断死亡时间（postmortem interval,PMI）的方法。方法将20例交通事故尸体按PMI分为13组:死后1h组（2例）、死后2h组（2例）、死后3h组（2例）、死后4h组（2例）、死后5h组（2例）、死后8h组（1例）、死后9h组（1例）、死后10h组（2例）、死后12h组（1例）、死后13h组（1例）、死后14h组（1例）、死后15h组（1例）和死后16h组（2例）。分别检测各组尸体眼玻璃体液中钾离子（K⁺）、钡离子(Ba²⁺)的浓度,并分析其与PMI的相关性。结果死后16h内尸体玻璃体液K⁺、Ba²⁺浓度与PMI相关,其中钾的回归方程为y=4.611+0.141x（R2=0.362,F=10.234）,钡的回归方程为y=-0.001+0.003x-0.000 44x2+0.000 019 2x3（R²=0.498,F=5.301）,其中y为K⁺、Ba²⁺浓度,x为PMI。结论尸体玻璃体液中K⁺、Ba²⁺浓度变化有望作为早期PMI推断的参考指标。