NF-κB在腹部火器伤肠管穿透后肝细胞凋亡中的作用

目的:探讨腹部火器伤肠管穿透后NF-κB在肝细胞凋亡信号转导中的作用,了解腹部火器伤肠管穿透后继发性肝损伤机制。方法:健康长白仔猪42头随机等分为对照组和伤后1、2、4、8、12和24h组,建立腹部火器伤肠管穿透模型,用免疫组化图像分析法测定各组肝内NF-κB活性,观察肝细胞凋亡和肝功能变化情况。结果:伤后各组肝内NF-κB活性明显高于对照组,并于伤后1h和8h出现2个高峰(P<0.05)。肝细胞凋亡指数和血清ALT水平于伤后显著增高(P<0.05),并与NF-κB活性变化基本一致。结论:腹部火器伤肠管穿透后肝内NF-κB活性增强,肝细胞凋亡增多,导致肝损伤。     

核转录因子NF-κB在TRAIL诱导肝癌细胞凋亡中作用的研究

目的初步探讨核转录因子NF-κB在TRAIL诱导肝癌细胞发生凋亡过程中的作用和可能机制。方法应用流式细胞仪技术检测经TRAIL和(或)MG-132处理后,肝癌细胞SMMC-7721凋亡发生情况;采用蛋白印渍技术检测TRAIL处理后SMMC-7721细胞凋亡相关蛋白表达情况;并用ELISA法检测NF-κB活性变化。结果单独使用TRAIL后,肝癌细胞发生凋亡,其凋亡指数为15．1％;若联合应用NF-κB抑制剂-MG-132后,则凋亡指数达27．4％,明显高于前者(P<0．01);同时,两者均高于对照组(P<0．01)。SMMC-7721细胞经TRAIL处理后,抗凋亡蛋白表达增加,而促凋亡蛋白表达下降。另外,经TRAIL单独处理后,细胞的NF-κB活性(0．49±0．02)明显高于其余各组(P<0．01)。结论NF-κB在TRAIL诱导的肝癌细胞凋亡过程中被激活,而NF-κB又可能通过促进抗凋亡蛋白的表达、抑制促凋亡蛋白的表达,从而抑制肿瘤细胞的凋亡。     

NF-κB在永生化神经前体细胞凋亡中的作用

目的 探讨NF-κB在永生化神经前体细胞凋亡中的作用.方法 永生化神经前体细胞接种于6孔板,随机分为5组,每组6孔,INPC组不进行基因转染,INPC/CMV组转染表达质粒ReCMV;INPC/p50组、INPC/p65组分别转染含p50基因和p65基因的表达质粒RcCMV,转染后2 d,加入200 μg/ml G418筛选12～14 d,进行阳性克隆扩大培养3～4周,检测p50 mRNA、p65 mRNA表达、NF-κB活性和细胞凋亡情况.INPC/p50p65组转染含p65基因的表达质粒ReCMV,加入200 μg/ml G418筛选12～14 d,进行阳性克隆扩大培养3～4周,转染含p50基因的表达质粒ReCMV,2 d后进行上述指标的检测.结果 INPC/p50组和INPC/p50p65组p50 mRNA表达高于其他组(P<0.05),INPC/p65组和INPC/p50p65组p65 mRNA表达、NF-κB活性及细胞凋亡率高于其他组(P<0.05).结论 NF-κB活性升高可促进永生化神经前体细胞的凋亡.     

NF-κB、Caspase-3在腺苷诱导人HepG2细胞凋亡中的作用

目的 研究NF-κB、Caspase-3在腺苷(ADO)体外诱导人肝癌HepG2细胞凋亡中的作用.方法 将不同浓度的ADO(0.1～5 mmol/L)作用于HepG2细胞,采用MTT法测定ADO抑制细胞增殖的时间效应和剂量效应.2.0 mmol/L ADO单用或联合NF-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC,100 μmol/L)作用HepG2细胞12 h、24 h,采用Hoechst 33342荧光染色法及流式细胞术(FCM)观察细胞凋亡及细胞周期,Western blot技术检测NF-κB蛋白表达;荧光比色法测定Caspase-3酶活性.结果 ADO对HepG2细胞生长具有显著抑制作用,并呈一定的量效和时效关系.药物作用24 h、48 h的IC50分别为2.52 mmol/L和1.89 mmol/L.ADO单独处理HepG2细胞12 h和24 h或联合PDTC处理后,细胞凋亡率分别为8.30%、22.32%;20.18%、30.89%,均显著高于对照组(0.81%,P<0.001);ADO作用HepG2细胞后荧光显微镜观察到细胞凋亡的形态学改变,FCM分析药物处理组显示典型特征性的亚二倍体凋亡峰(sub-G1),细胞生长周期阻滞于G0/G1期;同时伴有Caspase-3活性显著升高(P<0.05).ADO处理后显著增加了NF-κB蛋白表达(P<0.05);PDTC有效抑制了NF-κB表达,同时增加了 Caspase-3活性及ADO的细胞毒作用(P<0.05).结论 ADO诱导了HepG2细胞凋亡并活化Caspase-3.抑制NF-κB活性可通过Caspase-3途径增强ADO的细胞毒作用.     

NF-κB在氯胺酮诱导大鼠原代培养大脑皮层神经元凋亡中的作用

目的 评价NF-κB在氯胺酮诱导大鼠原代培养大脑皮层神经元凋亡中的作用.方法 体外培养6 d的大鼠大脑皮层神经元15孔,随机分为3组(n=5):对照组(C组)正常培养;氯胺酮组(K组)和氯胺酮+NF-κB抑制剂SN50组(KS组)分别加入1 mmol/L氯胺酮、1 mmol/L氯胺酮+2.5 μmol/L SN50,作用24 h.洗脱后24 h时采用凝胶迁移实验检测神经元NF-κB活性,采用Westernblot法测定凋亡相关蛋白Bcl-XL和Bax的表达,计算Bcl-XL/Bax,计数凋亡神经元,电镜下观察神经元的超微结构.结果 与C组相比,K组NF-κB活性、Bcl-XL/Bax、神经元凋亡率升高(P＜0.05),KS组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与K组相比,KS组NF-κB活性、Bcl-XL/Bax、神经元凋亡率降低(P＜0.05).电镜结果显示:KS组神经元损伤较K组明显减轻.结论 NF-κB参与了氯胺酮诱导大鼠原代培养大脑皮层神经元凋亡的过程.     

NF-κB在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨NF-κB基因在肝细胞癌组织中的表达及生物学意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western-blot免疫组织化学技术检测32例肝癌组织及癌旁肝组织中的NF-κB基因的mRNA和蛋白表达水平及蛋白定位。结果：NF-κB基因在肝癌组织中的表达较癌旁肝组织显著性增高(P<0.05)。免疫组化结果显示，NF-κB蛋白在肝癌细胞胞浆和胞核中均有表达，而在癌旁肝细胞中仅在胞浆中有表达。结论：NF-κB基因在肝癌组织中呈显著高表达，提示其可能参与了肝癌的发生发展。NF-κB表达定位在癌细胞和癌旁肝细胞中的差异，提示NF-κB活化后，进入胞核，通过调节下游基因的转录，促进肝癌的发生。     

核因子-κB在肝细胞增殖与凋亡中的研究进展

多种肝脏疾病过程中均伴随着肝细胞增殖与凋亡这一矛盾现象,且往往与疾病的发展和预后有着密切的关系.近年来的研究表明,NF-κB及其所调控的相关基因在细胞增殖与凋亡的调控中具有非常重要的作用,阐明NF-κB在肝脏增殖与凋亡中的具体作用机制,将对预防肝脏疾病的发生以及控制疾病的发展和预后具有重要意义.     

siRNA下调NF-κB p65基因表达影响人胆管癌QBC939细胞凋亡

目的运用RNA干扰技术下调胆管癌细胞株QBC939中核转录因子κB(NF-κB)p65基因表达对其肿瘤细胞生长的抑制作用。方法以阳离子脂质体Lipofectamine TM 2000作为转染试剂,将体外合成的人NF-κB p65的siRNA转染入胆管癌细胞QBC939。RT-PCR测定细胞内NF-κB p65 mRNA的表达。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测NF-κB亚单位p65的DNA结合活性的改变。运用免疫组化、流式细胞仪、激光共聚焦法检测p65基因表达下调对QBC939细胞凋亡的影响。结果体外合成的人NF-κB p65 siRNA有效抑制了QBC939细胞中NF-κB p65 mRNA的表达(P0.01),同时ELISA结果显示,靶向NF-κB p65 siRNA组的p65亚单位与DNA结合活性明显低于对照组(P0.05),免疫组化DAPI核染色、流式细胞仪及激光共聚焦检测观察显示下调p65基因表达能够诱导QBC939细胞凋亡。结论 NF-κB p65的siRNA在胆管癌细胞QBC939调控方面起重要作用,通过沉默其表达可诱导胆管癌细胞凋亡抑制其生长增殖。     

NF-κB与心肌缺血再灌注损伤

NF-κB是一组存在于细胞和病毒中调控许多基因表达的重要转录调节因子之一。充分认识NF-κB在心肌缺血再灌注损伤、心肌预处理及细胞凋亡中的重要作用，有助于为防治心肌缺血再灌注损伤提供新的研究方向。     

NF-κB信号通路对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的作用

目的 研究高糖尤其是波动性高糖对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）凋亡的影响,以及NF-κB信号通路在高糖诱导HUVEC凋亡中的作用。 方法 构建针对NF-κBp65 mRNA序列1566位点的重组RNAi腺病毒表达载体,并利用RNAi腺病毒抑制HUVEC p65表达。应用流式细胞术及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）研究NF-κB信号通路在高糖诱导HUVEC凋亡的作用。 结果 高糖（20.5 mmol/L或30.5 mmol/L）可以促进HUVEC凋亡。NF-κBp65 特异腺病毒感染HUVEC后,可以明显抑制高糖刺激的NF-κBp65核蛋白转录,使核内p65蛋白表达处于基础水平。TUNEL结果示高糖作用后5 d,高糖组细胞凋亡率显著高于正常葡萄糖组（25.81％±1.77％比8.20％±0.63％,P < 0.05）,Ad-DEST＋高糖组（26.10％±0.98％）与单独高糖组的细胞凋亡率差异无统计学意义（P > 0.05）。Ad-1566＋高糖组的细胞凋亡率（11.49％±0.92％）比Ad-DEST＋高糖组显著下降（P < 0.01）。TUNEL法及流式细胞术检测结果均显示NF-κBp65 特异腺病毒可以降低高糖诱导的HUVEC凋亡。结论 高糖可以促进HUVEC凋亡。腺病毒感染HUVEC可以明显抑制高糖刺激的NF-κBp65核转录,从而保护高糖作用的HUVEC凋亡。     

NF-kB与肝细胞凋亡

NF-kB广泛存在于肝脏各种细胞中，通过调节众多基因的转录参与肝脏的生理、病理过程。近年来研究证明，NF-kB与肝细胞凋亡关系密切。本就NF-kB及其在肝细胞凋亡中的作用作一综述。     

感染大鼠骨骼肌细胞内核因子-κB在胰岛素信号转导障碍中的作用

状态下机体胰岛素抵抗产生的主要机制是IRS-1酪氨酸磷酸化水平降低而丝氨酸(Ser307)水平升高,这时骨骼肌细胞内虽无明显炎性细胞浸润,但NF-κB的活性明显增强,并与胰岛素信号转导障碍密切相关,可能在感染引起机体胰岛素抵抗中起重要作用.     

Pancreatic elastase activates pulmonary nuclear factor kappa B and inhibitory kappa B, mimicking pancreatitis-associated adult respiratory distress syndrome

BACKGROUND: Select pancreatic enzymes, primarily elastase, precipitate pulmonary injury similar to pancreatitis-associated adult respiratory distress syndrome and stimulate leukocyte cytokine production in vitro via nuclear factor kappa B (NF-kappaB) activation. This study explores the effect of systemic pancreatic enzymes on pulmonary NF-kappaB and inhibitory kappa B (IkappaB) proteins and their role in enzyme-induced pulmonary injury. METHODS: Mice received pancreatic elastase, amylase, lipase, or trypsin intraperitoneally. Bronchoalveolar lavage IkappaBalpha/IkappaBbeta proteins were measured by immunoblot. Pulmonary NF-kappaB activation, tumor necrosis factor (TNF) gene expression, and neutrophil infiltration (myeloperoxidase) were determined and myeloperoxidase experiments repeated in p55 TNF receptor-deficient (TNF KO) animals. Additional animals received pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC), an inhibitor of NF-kappaB activation, and TNF protein and pulmonary microvascular permeability were measured after elastase administration. RESULTS: Pancreatic elastase induced pulmonary IkappaBalpha/IkappaBbeta degradation (30 minutes), NF-kappaB activation (60 minutes), and TNF gene expression (60 minutes) with subsequent neutrophilic inflammation (4 hours) and microvascular leakage (24 hours), whereas amylase, lipase, and trypsin did not. Furthermore, lung injury was markedly reduced in TNF KO animals and PDTC significantly attenuated TNF production and pulmonary microvascular leakage. CONCLUSIONS: Pancreatic elastase induces cytokine-mediated lung injury and this pathway involves the NF-kappaB second messenger system, further supporting elastase as a factor linking pancreatic inflammation to systemic illness during severe acute pancreatitis.     

核转录因子调节心肌缺血预处理的研究

目的 研究核轨录因子（ＮＦ－ＫＢ）在心肌缺预处理中的作用。方法 将１８只新西兰白兔随机分为非预处理组、预处理组和预处理加脯氨酸二硫氨基甲酸脂（ＰｒｏＤＴＣ，特异性ＮＦ－ＫＢ抑制剂）组。阻断和开放左冠脉前降支各５ｍｉｎ，反复５次，造成预处理，第３组在预处理前、中使用ＰｒｏＤＴＣ）１５ｍｇ／ｋｇ体重）。电压力探头测定局部心功能，氧化三苯四唑啉（ＴＴＣ）法计算梗死面积，并作组织学检查。结果 预处理对心功