MMP-1、TIMP-1在肝纤维化组织中的表达及其病理意义

目的 研究MMP-1和TIMP-1在肝纤维化发展的不同时期的表达情况及病理学意义,为肝纤维化的防治提供理论依据.方法 采用免疫组织化学S-P法.分别检测MMP-1和TIMP-1在57例肝纤维化发展不同时期的组织中的表达情况,应用SPSS10.0统计软件分析它们在病变不同时期的表达差异及二者之间的相关性和其意义.结果 ①MMP-1在各组间的表达无显著性差异(P＞0.05);②TIMP-1的阳性表达随肝组织炎症及纤维化程度增加而增强(P＜0.05);③MMP-1/TIMP-1比值与肝纤维化程度呈负相关.结论 MMP-1/TIMP-1系统在肝纤维化形成过程中起着重要的调控作用.     

PDGFR-β在肝纤维化过程中表达的实验研究

为了研究肝星形细胞(HSC)中血小板源性生长因子受体β(PDGFR-β)的变化与肝纤维化形成的关系，本实验采用Wistar雄性大鼠40只，体重140-160g，分成正常组、肝纤维化模型组。模型组采用大鼠腹腔注射猪血清(0．5ml／只，每周2次)，按造模时间分成3、5、7、9周组，各组动物8只，     

CCl4肝纤维化过程中肝组织金属硫蛋白与肝星状细胞MMP-2表达及活性之间相关性研究

目的： 研究金属硫蛋白（MT）在体内及体外与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达、活性之间的相关性。方法: 昆明种雄性成年小鼠50只,其中实验鼠 40只,对照鼠10只,用CCl4诱导小鼠肝纤维化模型。向肝星状细胞（HSCs）条件培养基（含有MMP-2）中加不同浓度MT,使之与MMP-2酶学共浴,检测MMP-2活性。制作小鼠肝组织芯片,天狼猩红染色判断肝纤维化程度。免疫组化法测肝组织MMP-2、MT蛋白表达,酶图法测鼠肝组织匀浆和培养基中MMP-2活性。结果: ①模型组小鼠肝组织MMP-2和MT蛋白表达水平均随纤维化进展而呈波浪式交替升高,但二者时相变化相反。 ②模型组小鼠肝组织MMP-2活性随实验时间的增加而逐渐升高,亦有波动。除个别时点外,酶活性与MT表达呈负相关。③肝星状细胞条件培养基与不同浓度的MT直接作用后,MMP-2活性随MT浓度增加活性逐渐降低(P＜0.01)。结论: 在小鼠肝纤维化发生发展过程中,肝组织MT蛋白和MMP-2蛋白表达均有上升趋势,二者间可能存在相互作用;MT蛋白和MMP-2活性呈负相关,前者对后者可能起抑制作用。     

大肠癌及其转移灶中MMP-2和TIMP-2的表达和意义

目的研究基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其抑制物组织基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）在大肠癌进展中的作用及其临床意义。方法通过免疫组化的方法检测104例大肠癌组织及其转移灶中MMP-2和TIMP-2的表达。结果MMP-2在转移灶中的阳性率（72．1％）显著高于原发灶中的阳性率（53．8％）（P〈0．05）,而TIMP-2在转移灶中的阳性率（35．6％）显著低于原发灶中的阳性率（66．3％）（P〈0．05）;MMP-2和TIMP-2在大肠癌原发及转移灶中表达均具有相关性,且呈负相关。结论MMP-2和TIMP-2的表达与大肠癌转移密切相关,而且转移灶癌细胞MMP-2的表达明显增强,TIMP-2的表达明显下降,可作为临床判断大肠癌恶性程度、转移及预后的重要参考指标。     

胎膜中MMP-2/TIMP-2表达与胎膜早破关系的研究

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其抑制因子-2（TIMP-2）在自发性胎膜早破孕妇的胎膜中的变化及其意义。方法收集胎膜早破确诊病例30例,同期收集正常妊娠择期剖宫产30例。采用免疫组织化学PV9000法检测MMP-2及TIMP-2在胎膜中的表达。结果1.所选两组标本感染率比较差别无统计学意义（χ^2=2.857,P=0.091）;2.PROM组胎膜组织结构明显疏松,羊膜与绒毛膜之间的区域普遍较对照组增宽;3.早破组与正常组在HE染色后着色深浅有异,早破组略显淡;4.MMP-2在胎膜早破产妇胎膜中的表达高于正常妊娠剖宫产组阳性率分别为100%,46.67%差异有显著性（U=5.849,P=0.000）;5.TIMP-2在胎膜早破产妇胎膜中的表达低于正常妊娠剖宫产组,差异无显著性（U=1.690,P=0.091）。结论胎膜早破的发生可能与MMP-2的表达上调有关。     

鼻咽癌组织中巨噬细胞移动抑制因子和MMP-2、MMP-9表达的关系

目的　研究巨噬细胞移动抑制因子 (macrophagemigrationinhibitoryfactor,MIF)和MMP 2、MMP 9在鼻咽癌组织中的表达水平及相互关系 ,探讨鼻咽癌细胞早期侵袭转移的机制。方法　收集 4 5例确诊的鼻咽原发癌活检组织标本 ,采用免疫组化LSAB法检测鼻咽癌组织中MIF和MMP 2、MMP 9的表达 ,并分析患者的临床参数的关系。结果　在 4 5例鼻咽原发癌组织中 ,MIF、MMP 2和MMP 9的阳性表达率分别为 77 8% (35 / 4 5 )、6 4 4 % (2 9/ 4 5 )和 71 1% (32 / 4 5 )。其中 ,癌细胞MIF和MMP 9的表达水平均显示与淋巴结转移有关 ,伴有淋巴结转移的癌组织中二者表达水平均高于无淋巴结转移的癌组织 (P值均 <0 0 5 )。MIF阳性组的癌细胞MMP 9的表达 (5 0 2 %± 33 5 % )明显高于MIF阴性病例 (11 7%± 2 2 7% ) ,两者差异有显著性 (P <0 0 1) ,且MIF的表达与MMP 9的表达亦呈正相关 (rs=0 .4 92 ,P <0 0 1) ,但癌细胞MMP 2的表达与MIF、MMP 9的表达以及是否有淋巴结转移则均未显示相关性。以Schmincke型生长方式分布的癌细胞MIF表达水平 (6 7 4 %±35 2 % )也高于以Regaud型方式分布的癌细胞 (32 9%± 2 9 7% ) ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　鼻咽癌组织中癌细胞的MIF和MMP 9同步过表达 ,可能在鼻咽癌细胞的转移     

FRNK高表达诱导HSC凋亡后MMP-2及TIMP-2的变化

目的 探讨黏着斑激酶相关非激酶（FRNK）诱导肝星状细胞（HSC）凋亡后基质金属蛋白酶-2及其抑制剂的变化。方法 在体外,以纤维连接蛋白（FN）刺激HSC增殖,在脂质体介导下用FRNK表达质粒瞬时转染HSC,应用膜联蛋白/碘化丙啶双标记流式细胞术和透射电镜检测细胞的凋亡,Western blot检测FRNK、FAK、p-FAK（Tyr397）、MMP-2、TIMP-2蛋白表达。结果 FRNK表达质粒成功转染HSC,在翻译后水平抑制FAK磷酸化。与空质粒组比较,FRNK表达质粒转染HSC 48 h后,HSC凋亡率由9.28%±1.05%增加至25.37%±1.92%（P<0.01）;同时,FRNK在翻译水平上调MMP-2表达、抑制TIMP-2表达。结论 在脂质体介导下瞬时转染FRNK表达质粒可诱导HSC发生凋亡,MMP-2/TIMP-2比值上调可能参与了该调节过程。     

乙肝散逆转肝纤维化过程中α-SMA阳性HSC变化的实验研究

应用尾静脉注射人血白蛋白制造大鼠实验性免疫性肝纤维化模型，通过分组加用不同浓度中药乙肝散饲料喂养12周，探讨中药乙肝散逆转实验性肝纤维化过程中活化HSC的变化。     

CD147、MMP-2和TIMP-2在皮肤鳞状细胞癌中的表达

皮肤鳞状细胞癌（cutaneous squamous cell carcinoma SCC）是最常见的皮肤癌之一。近年来对细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（Extracellular matrix metalloprotease inducer factor）,基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2．MMP-2）和基质金属蛋白酶抑制剂-2（Tissue inhibitor of metalloprotease-2,TIMP-2）在肿瘤中作用的研究已成为肿瘤研究热点之一。     

大鼠硅肺纤维化中NF-κB和MMP-9的表达

目的 研究核转录因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达在硅肺纤维化发生发展中的作用。方法 应用免疫组化SP法观察NF-κB和MMP-9在大鼠硅肺组织中的表达。结果 对照组支气管上皮细胞、肺巨噬细胞和肺间质细胞均可表达NF-κB和MMP-9，肺泡上皮细胞和血管内皮细胞未见表达。实验组的支气管上皮细胞、肺巨噬细胞、间质细胞和肺泡上皮细胞NF-κB、MMP-9表达均明显增加。在实验的每一个时间点，肺巨噬细胞、肺间质细胞中NF-κB和MMP-9的半定量表达基本同步，呈明显正相关。支气管上皮细胞NF-κB在1～28d均呈持续高水平表达，但MMP-9在14d后开始减少；肺泡上皮细胞NF-κB在114d呈较高水平表达，以后下降，而MMP-9仅于第3～7天时有阳性表达。结论 矽尘作用下肺内多种细胞NF-κB和MMP-9表达增加，并可能通过NF-κB介导调控MMP-9表达而影响硅肺的发生发展。     

缺氧、高氧对肝星形细胞基质金属蛋白酶Ⅱ表达及活性的影响

目的　研究缺氧、高氧对肝星形细胞基质金属蛋白酶Ⅱ (MMP 2 )表达及其活性影响。方法　分离大鼠肝星形细胞 ,在缺氧或高氧条件下培养 ,以免疫细胞化学标记链霉素卵白素生物素(LSAB)法及酶联免疫吸附 (ELISA)法分别检测细胞内MMP 2、基质金属蛋白酶组织抑制因子Ⅱ(TIMP 2 )、膜型基质金属蛋白酶Ⅰ (MT1 MMP)的表达 ,和培养上清中MMP 2、TIMP 2的相对含量 ,并以酶谱法测培养上清MMP 2活力。结果　 (1)缺氧培养 12h ,MMP 2表达增高 (缺氧组阳性指数 :5 7±2 0 ;对照组 :3 2± 1 0 ,;P <0 0 1) ,TIMP 2表达则降低 (缺氧组阳性指数 :2 5± 0 7;对照组 :3 6±1 0 ;P <0 0 5 ) ;培养上清中MMP 2酶活性明显降低 (缺氧组总吸光度值 :7 334± 1 92 2 ;对照组 :17 2 77± 7 4 2 4 ;P <0 0 1)。缺氧不同时段 (6、12、2 4h)比较 ,变化以 6h段最明显。 (2 )高氧培养 12h ,上清中MMP 2、TIMP 2蛋白相对含量均高于对照组 ,TIMP 2更明显 (高氧组A450 :0 0 5 0± 0 0 14 ;对照组 :0 0 2 2± 0 0 10 ;P <0 0 1) ,酶活性亦高于对照组 (高氧组总吸光度值 :5 2 5 2± 0 771;对照组 :4 30 4± 1 0 83;P <0 0 5 ) ,高氧组MT1 MMP表达增强。结论　肝星形细胞对氧敏感。缺氧使肝星形细胞MMP 2表达增加 ,该影响在     

A prognostic index in skin melanoma through the combination of matrix metalloproteinase-2, Ki67, and p53

The objective of this immunohistochemical study was to explore the roles of Ki67 and p53 in conjunction with matrix metalloproteinase-2 and matrix metalloproteinase-9, tissue inhibitors of metalloproteinase-1 and tissue inhibitors of metalloproteinase-2 in a series of 157 cases of skin melanomas. Elevated Ki67 expression and positive staining for p53 correlated to the propensity to metastasize (P = .016) and to declined disease-specific survival, as well as to shortened recurrence-free survival. In patients with a high immunoreaction for Ki67, the 10-year disease-specific survival was 39% compared with 73% in patients with a low Ki67 expression (P = .03). In cases with a positive p53 expression in melanoma cells, the 10-year disease-specific survival was 59% compared with 76% in patients with a negative immunoreaction for p53 (P = .005). Overexpression of the matrix metalloproteinase 2 protein in conjunction with overexpression of Ki67 characterized melanomas with high metastatic potential and was associated with declined survival with a 10-year disease-specific survival of 33% compared with 85% in the cases with low matrix metalloproteinase-2 and low Ki-67 levels (P = .002). Similarly, in cases with overexpression of matrix metalloproteinase-2 and a positive immunoreaction for p53, the 10-year disease-specific survival was only 42% compared with 80% in patients with matrix metalloproteinase-2 less than 20% and a negative immunostaining for p53 (P < .001). The presence of all 3 adverse prognostic factors was prognostically more significant than any marker alone with a 10-year survival of only 28%. This combination of determining matrix metalloproteinase 2, Ki67, and p53 immunoreactive proteins could be beneficial in the selection of high-risk melanoma patients for future adjuvant trials.     

Expression of matrix metalloproteinase-1 mRNA related to eosinophilia and interleukin-5 gene expression in head and neck tumour tissue

 In situ hybridization (ISH) of the expression of matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) in areas of local invasion of head and neck tumours was performed. Expression of MMP-1 mRNA was found in stromal inflammatory cells adjacent to the tumour nests, apparently in eosinophils. MMP-1 mRNA expression was seen only in cases with moderate or greater stromal eosinophilia. MMP-1 mRNA was detected in benign papilloma and verrucous carcinoma. In squamous cell carcinomas, expression of the gene was detected only in well-differentiated cases. Expression of MMP-1 mRNA was not related to the grade of malignancy, and appeared in stromal eosinophils, suggesting to us that it is involved in a remodelling process in the reaction of the host to tumour invasion. ISH examination of the expression of interleukin-5 (IL-5), the activating factor for eosinophils, was also performed. In the tumour, its expression was consistent with the location of eosinophils, as with MMP-1 mRNA, suggesting an autocrine mechanism. Received: 28 February 1997 / Accepted: 29 April 1997     

Expression of cyclooxygenase-2, matrix metalloproteinase-2 and matrix metalloproteinase-9 in premenopausal and postmenopausal endometrial polyps

OBJECTIVES: Cyclooxygenase-2 (COX-2) and matrix metalloproteinase-2 and -9 (MMP-2 and MMP-9) are influenced by relative levels of estrogen and are involved in promoting cell proliferation and angiogenesis. The present study investigated expression of COX-2, MMP-2 and MMP-9 in endometrial polyps from premenopausal and postmenopausal women. METHODS: Premenopausal (n=18) and postmenopausal (n=22) endometrial polyps were included in the study. None of the women were using non-steroid anti-inflammatory drugs, hormone replacement therapy or any other estrogen containing pills. Immunohistochemical analysis for MMP-2, MMP-9 and COX-2 were performed on formalin fixed, paraffin-embedded tissue using the streptavidin-biotin-peroxidase technique. The cut-off value for positiviy was set to 10% and staining more than 50% was regarded as intense staining. Staining of 10-25% and 25-50% were recorded as mild and moderate, respectively. RESULTS: COX-2, MMP-2 and MMP-9 were stained in epithelial cells and stroma of premenopausal and postmenopausal endometrial polyps. Stromal expression of COX-2, MMP-2 and MMP-9 were found significantly higher in premenopausal polyps compared to postmenopausal polyps (p<0.05). There were no other significant differences in the immunohistochemical expressions in the epithelium of premenopausal and postmenopausal endometrial polyps except MMP-9. CONCLUSION: Polyps from both premenopausal and postmenopausal women express epithelial and stromal COX-2, MMP-2 and MMP-9, however immunohistochemical expression of these markers may be different due to menopausal status. This may suggest a shared pathogenesis for pre- and postmenopausal endometrial polyps.     

巨细胞病毒感染对人内皮细胞金属基质蛋白酶-2表达的影响

目的观察巨细胞病毒感染对人内皮细胞金属基质蛋白酶-2表达的影响。方法原代培养人脐静脉内皮细胞并传代,以巨细胞病毒感染3～6代细胞。逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测金属基质蛋白酶-2mRNA表达,凝胶酶谱法检测金属基质蛋白酶-2活性。结果巨细胞病毒感染6h人脐静脉内皮细胞金属基质蛋白酶-2mRNA表达及其活性与对照相似,感染12、24h与对照比明显增强。结论巨细胞病毒感染上调人内皮细胞金属基质蛋白酶-2表达,这可能是巨细胞病毒参与动脉粥样硬化的机制之一。     

Immunohistochemical expression of matrix metalloproteinases 1, 2, and 9 in odontogenic myxoma and dental germ papilla

The aim of this study was to compare the immunohistochemical expression of matrix metalloproteinases (MMPs) 1, 2, and 9 in odontogenic myxomas and dental germ papillae.     

实验性肝纤维化模型肝组织MMP-2基因表达与酶活性及中药复方"861"的作用

目的：探讨肝纤维化发生后MMP－2的基因表达与酶活性的变化及复方“861”的影响。方法：45只雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、胆管阻塞性肝纤维化模型组和复方“861”治疗组。术后第7天开始治疗，49d后，采用半定量RT－PCR法检测肝组织中MMP－2 mRNA，应用酶谱法检测肝组织中MMP-2酶活性。结果：模型组肝组织中MMP－2mRNA的表达比正常组高，差异有非常显著性（P＜0．001）；而中药复方“861”治疗组肝组织中MMP－2 mRNA的表达，与正常组比较差异无显著性，比模型组低，差异有非常显著性（P＜0．002）。正常组肝组织中未测到MMP－2酶活性；模型组肝组织中显示出一定MMP－2酶活性；而中药复方“861”治疗组肝组织中MMP－2酶活性比模型组显著升高（P＜0．01）。结论：中药复方“861”能抑制MMP－2的基因表达，但又因可能解除MMP－2的抑制因素而提高其活性，以降解沉积的纤维性胶原而参与肝纤维化的逆转过程。     

基质金属蛋白酶-2、3及其组织抑制剂TIMP-1在子宫内膜异位症中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-3)及其抑制剂(TIMP-1)在子宫内膜异位症发生及发展中的作用.方法采用免疫组化SP法分别测定MMP-2、MMP-3 、TIMP-1在卵巢子宫内膜异位症异位内膜60例(A组),子宫腺肌症异位内膜40例(B组),子宫肌瘤子宫内膜30例(对照组C)的表达强度.结果 A、B组中MMP-2、MMP-3的表达强度明显高于对照组(P<0.05)而TIMP-1的表达明显低于对照组(P<0.05);A、B组间MMP-2、MMP-3 、TIMP-1 的表达无明显差异(P>0.05).结论在子宫内膜异位症中MMP-2、MMP-3的过度表达及TIMP-1的低表达可能与内异症的发生与发展有关.     

PTEN在肝纤维化大鼠肝组织中的动态表达

目的： 探讨大鼠肝纤维化过程中肝组织PTEN的动态表达。方法: 采用胆总管结扎法建立大鼠肝纤维化模型,HE及Masson三色染色检测肝脏组织学变化,免疫组织化学染色、Western blotting及实时荧光定量PCR技术检测大鼠肝组织的PTEN蛋白及mRNA表达。结果: 大鼠肝纤维化模型成功建立,随着造模时间延长,肝纤维化程度逐渐加重,造模不同时间均可见不同程度的肝细胞变性坏死而导致正常肝细胞逐渐减少;免疫组织化学染色显示正常大鼠肝组织中PTEN广泛表达,主要表达于细胞浆,随着肝纤维化的进展,PTEN阳性表达细胞逐渐减少（P<0.01）;Western blotting及实时荧光定量PCR显示造模1周、2周、3周及4周不同时间大鼠纤维化肝组织中PTEN蛋白及mRNA表达均显著低于假手术组（P<0.01）,并随着肝纤维化的进展逐渐降低（P<0.01）。结论: 大鼠纤维化肝组织中PTEN蛋白及mRNA表达均随着肝纤维化的进展逐渐降低,其下降程度与肝纤维化程度一致。