三亚市儿童地中海贫血筛查及基因分析

目的调查三亚市儿童地中海贫血的发病率和基因突变类型。方法对938例儿童进行血常规、CRP检测和血红蛋白电泳试验,筛查地中海贫血发生情况及其所属类型;对α-地中海贫血患儿用gap-PCR法、β-地中海贫血患儿用PCR-RDB法进行基因诊断。结果地中海贫血筛查阳性率为13.65%(128/938),基因诊断阳性率为11.41%(107/938)。在107例经基因诊断确诊为地中海贫血的患儿中,α-地中海贫血59例,β-地中海贫血46例,α合并β地中海贫血2例。59例α-地中海贫血患儿中,-SEA/αα型31例,-α4.2/αα型13例,Hb H病为6例;46例β-地中海贫血患儿中共检出6个基因位点发生突变,突变频率依次为CD41-42(-CTTT)21例,TATAbox-28(A→G)13例,CDs14/15(+G)5例,IVS-Int 654(C→T)4例,CD17(A→T)2例,27-28(+C)1例。结论三亚市儿童地中海贫血发病率较高,开展遗传咨询、婚前检查及产前诊断等对优生优育十分必要。     

应用PCR结合反向斑点杂交技术检测β-地中海贫血

目的探讨一种简便、高效可同时检测β-地中海贫血多基因位点突变的基因诊断技术。方法采用多聚酶链反应(PCR)结合反向斑点杂交(RDB)技术。结果486例疑诊患者共检测出175例为β-地中海贫血,检出9种基因突变类型22种组合形式,包括纯合子、杂合子以及双重杂合子。结论β-地中海贫血基因突变类型多样,基因组合形式复杂,多聚酶链反应结合反向斑点杂交技术(PCR/RDB)简便、高效、准确可靠,适于β-地中海贫血的基因诊断和实验研究,可作为常规方法推广用于临床标本的检测和产前诊断。     

儿童 β 地中海贫血 11 例家系分析

目的探讨河南地区β地中海贫血患儿的临床特点。方法回顾分析11例河南籍β地中海贫血患儿及家系成员的临床资料。结果 11例患儿中,HbE病2例,轻型β地中海贫血合并遗传性椭圆形红细胞增多症1例,轻型β地中海贫血复合缺铁性贫血1例,其余7例单纯为轻型β地中海贫血。11例患儿血红蛋白电泳均有异常,其中HbA2和/或HbF增高9例,出现HbE条带2例。共检测到3种β基因突变类型,分别为IVS-II-654(CT)突变7例,CD17(AT)和CD26(GA)突变各2例。11例患儿家系中,6例祖籍河南,5例父母中一方来自地中海贫血高发区。结论β地中海贫血是一种常见的单基因遗传病,河南地区存在β基因突变。家系调查、红细胞参数、血红蛋白电泳等有助于诊断和发现新病例。     

30 417例儿童地中海贫血基因类型分析

目的 了解广西地区儿童地中海贫血基因类型及其分布。 方法 2011年1月至2019年12月对广西壮族自治区妇幼保健院30 417例地中海贫血筛查阳性患儿采用单管多重PCR后经琼脂糖凝胶电泳和反向点杂交技术进行常见α、β地中海贫血基因检测。对2 703例疑似罕见地中海贫血患儿进行跨越断裂点PCR检测和/或基因序列分析。 结果 30 417例地中海贫血筛查阳性患儿中,确诊地中海贫血23 214例（76.32%）,其中α、β及α合并β地中海贫血检出率分别为47.77%、23.75%和4.80%。检出13种α地中海贫血等位基因共计18 480个,以--^SEA为主（54.98%）,包括7种罕见等位基因：--^THAI（0.43%）、HKαα（0.02%）、-α³⁰（0.01%）、-α^1.0（0.01%）、-α^2.4（0.01%）、-α^21.9（0.01%）和HBA₂:C272-279 del（0.01%）;检出17种β地中海贫血等位基因共计9 168个,主要为CD41-42（47.79%）,其次是CD17（25.53%）,包括3种罕见等位基因：IVS-Ⅱ-5（0.02%）、IVS-I-2（0.01%）和^Gγ(^Aγδβ)⁰（0.01%）。14 531例α地中海贫血患儿中检出37种基因类型,6种主要类型为--^SEA/αα（52.20%）、-α^3.7/αα（13.24%）、α^CSα/αα（7.52%）、-α^4.2/αα（6.06%）、--^SEA/-α^3.7（5.91%）和α^WSα/αα（3.41%）,共占88.34%。7 223例β地中海贫血患儿中检出49种基因类型,6种主要类型为CD41-42/β^N（45.81%）、CD17/β^N（24.30%）、IVS-Ⅱ-654/β^N（7.49%）、-28/β^N（5.62%）、CD71-72/β^N（4.42%）和CD26/β^N（3.94%）,共占91.13%。1 460例α合并β地中海贫血患儿中检出137种基因类型,主要为--^SEA/αα合并CD41-42/β^N（14.17%）、CD17/β^N（8.35%）。HbH病（α⁰/α⁺）2 050例,包括合并β地中海贫血杂合子134例;巴氏水肿胎（--^SEA/--^SEA）12例;β地中海贫双重杂合子355例、纯合子128例,包括合并α地中海贫血93例。 结论 广西地区儿童地中海贫血基因突变多样,基因类型丰富;以α地中海贫血为主,--^SEA/αα是主要基因类型;α合并β地中海贫血比例较高,β地中海贫血双重杂合子和纯合子（中重型）患儿出生较多。     

儿童β地中海贫血的分子基础和治疗

研究目的 研究儿童β地中海贫血的基因突变类型、发生率，马利兰、补肾生血药物对β地中海贫血的治疗效果。研究方法 经临床确诊重型β地中海贫血３０例的５６例染色体，用聚合酶链反应技术和寡核苷酸斑点杂交方法分析该病的基因突变类型和发生率。用马利兰治疗重型β－地贫１３例，中药补肾生血药物治疗６例。研究结果 本组基因突变类型的染色体数为Ｃｏｄｏｎ４１－４２（－ＴＴＣＴ）２３，Ｃｏｄｏｎ１７（Ａ－Ｔ）１４，Ｃｏ     

广西地区地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿G6PD基因突变型的初步研究

目的 了解广西地区地中海贫血合并葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症患儿G6PD基因突变的类型。方法 采用自然或错配引物介导的聚合酶链反应（PCR）／限制性内切酶分析,检测11例地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿G1388A、G1376T和A95G三种G6PD基因突变类型。结果 11例地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿中,检出G1388A突变4例,G1376T突变3例,A95G突变1例,未定型3例。结论 广西地区地中海贫血合并G6PD缺乏症与单纯的G6PD缺乏症的基因突变型比较差异不明显,推测地中海贫血患儿的G6PD缺陷可能是原发性改变。婚前检查及产前诊断对减少地中海贫血合并G6PD缺乏症患儿的出生具有十分重要的意义。     

重型珠蛋白生成障碍性贫血患儿基因突变及免疫紊乱的特点

目的探讨重型珠蛋白生成障碍性贫血(β地中海贫血)患儿的基因突变类型及免疫紊乱的特点。方法多重等位基因特异聚合酶链反应(MASPCR)分析其基因类型。采用ELISA方法检测血浆IL6、IFNγ水平;采用免疫比浊法检测血浆IgG、IgA、IgM水平。结果重型β地中海贫血25例患儿中最常见的3种基因突变是CD17(A→T)、CD4142(-TTCT)、IVSⅡ654(C→T),占总数的94%。血浆IL6、IFNγ水平均明显高于正常对照(P均<0.05),IgG也明显高于正常对照组(P=0),而IgA、IgM则无明显变化(P>0.05)。结论MASPCR法进行基因诊断,具有操作简单、快速准确,一次可检测多种突变基因型,提高了基因诊断率。重型β地中海贫血患儿免疫系统中存在多种成分的免疫缺陷。     

1097例0~7岁β地中海贫血患儿不同基因型及表型关联分析

目的探讨1097例南宁地区0~7岁儿童β地中海贫血不同基因型和表型血液学特征。方法于2010—2012年于广西壮族自治区妇幼保健院就诊的不同程度贫血的0~7岁患儿,采用RDB-PCR技术检测β-地中海贫血和GAP-PCR技术检测α-地中海贫血基因类型,因经常规基因检测未能确诊的未知突变或缺失,采用直接DNA测序或是MLPA法。结果发现892例常见β地中海贫血突变和155例合并不同类型α地中海贫血的β地中海贫血。共检出11种常见β基因型,以CD41-42(-CTTT)和CD17(A-T)为主。β+基因型合并其他α地中海贫血基因的缺失与合并αα/αα血液学参数表现出没有多大区别。单纯β0与β0/α+和β+/α0基因型比较各指标差别有显著性差异(P0.05),单纯β+与β+/α+和β+/α0基因型比较各指标差别均无显著性差异(P0.05)结论 1097例南宁地区0-7岁儿童的β0或β+合并不同形式的α基因的发病率高,并且血液学特点与单纯的β地中海贫血临床表型相似,无法通过血液学指标鉴别复合型与单纯性的个体,需要依赖分子基因诊断技术,更好完善地中海贫血基因诊断流程和为临床遗传咨询提供参考。     

β-地中海贫血基因突变型与益髓生血颗粒疗效相关性

目的探讨β-地中海贫血基因突变型与益髓生血颗粒疗效的相关性。方法收集β-地中海贫血47例。男28例,女19例;年龄3~15岁。其中重型β-地中海贫血34例,中间型13例。均检查血液学指标及行血红蛋白电泳,基因分析采用PCR反向斑点杂交技术,治疗采用益髓生血颗粒10g/次,3次/d,3个月为1个疗程,疗程结束进行疗效评价。结果47例β-地中海贫血中有7种β基因突变类型。其中复合血红蛋白E(HbE)占18例;中药治疗后43例临床症状明显改善,Hb、RBC、网织红细胞(Ret)及胎儿血红蛋白(HbF)值均增高,治疗前后比较差异显著(Pa<0.01)。其中β0-纯合子21例中17例有效,β0与β 双重杂合子7例、β-地中海贫血与HbE杂合子18例、1例β 纯合子均有效。结论益髓生血灵颗粒治疗β-地中海贫血有较好疗效。     

多重等位基因特异多聚合酶链反应产前基因在诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血中的应用

目的 探讨多重等位基因特异多聚合酶链反应（PCR）产前基因诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血的临床应用价值。方法 在B超监视下对21名孕妇行羊膜腔穿刺，抽取羊水20ml，常规酚-氯仿法提取DNA，应用多重等位基因特异PCR检测其羊水的细胞的β-珠蛋白的5种基因突变类型（CD17，CD41-42，IVS-Ⅱ654，ht-28,nt-29）。结果 检测的21例中，4例双重杂合子及1例纯合子，均选择流产。16例为正常或单个突变的杂合子，胎儿出生后取脐验证并随访观察，现小儿9个月-3.2岁，均健康。结论 多重等位基因特异PCR可用于β-珠蛋白生成障碍性贫血高风险胎儿的产前基因诊断，在指导β-珠蛋白生成障碍性贫血阳性家系的选择性具有一定的临床意义。     

贵阳地区重症β-地中海贫血患儿及双亲基因突变型的分析

目的 对15例贵阳地区重症β－地中海贫血患儿及其双亲进行基因突变分析，以探讨其突变基因的类型和频率的特点，为诊断和预防重症胎儿的出生提供线索。方法 采用一管法进行红细胞渗透休克实验测定红细胞渗透脆性、一分钟碱变性法测定抗碱血红蛋白（HbF）和醋酸纤维薄膜电泳洗脱比色法测定血红蛋白A2（HbA2）、氰化高铁血红蛋白法测定Hb等进行β－地中海贫血血液学检查。用常规法抽提外周血白细胞DNA，用聚合酶链反应－反向点杂交法（PCR－RDB）扩增目的的基因片段和 分析其基因类型。结果 15例重症β－地中海贫血患儿及其双亲共45例标本中检出中国人常见的11种突变中的5种：CD41－42（－TTCT）、IVSⅡnt654（C→T）、CD17（A→T）、β^E（G→A）和Nt-28（A→G）的基因突变类型，前3种占总数的89．99％。结论 采用PCR－RDB法进行基因诊断，具有操作简单、快速准确，仅需一次杂交就可确定样品中是否存在11种中国人常见的β－地中海贫血突变基因型，提高了基因诊断率，这对防止重症β－地中海贫血患儿的出生、提高人口素质具有重要意义。     

应用聚合酶链反应技术检测广西儿童β地中海贫血基因突变类型

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术及特异性寡核苷酸探针斑点杂交方法，检测广西地区９５例临床诊断为β地中海贫血患儿的１９０条染色体ＤＮＡ。结果表明，有１０种β地中海贫血珠蛋白基因突变类型和２８种β珠蛋白突变基因的组合形式。其中有２例患儿分别为密码子（Ｃｏｄｏｎｓ）１４－１５（＋Ｇ）／－２９（Ａ→Ｇ）双重杂合子和密码子４１－４２（－ＴＴＣＴ）／ＩＶＳ－ＩＬ－５（Ｇ→Ｃ）双重杂合子，均属首次报道的β地中海贫血双重杂合子新类型。这一研究结果对该地区β地中海贫血的产前诊断有实用价值。     

448例β-地中海贫血的基因型与临床分析

目的 　探讨β -地中海贫血基因突变与临床病情的关系。方法 　应用PCR-RDB技术对 4 48例β -地中海贫血患儿进行基因诊断。结果 　检测出 1 2种基突变类型 ,有 2 4种基因组合形式。结论 　β。 纯合子及β° β°双重杂合子临床表现重 ,发病年龄、输血年龄均较早 ,β° β+双重杂合子表现为中间型或重型 ,发病年龄及输血年龄均较晚。     

四川东部地区β地中海贫血分子基础及产前基因诊断11例

本文采用聚合酶链反应（PCR）及斑点杂交技术，对临床确诊的42例β地中海贫血病人的63条染色体进行基因突变分析，发现本地区有7种基因突变类型。介绍了它们的发生频率及重症β地中海贫血的基因型组成。并对11例β地中海贫血高危胎儿完成产前基因诊断。     

四川东部地区β地中海贫血分子基础及产前基因诊断11例

本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交技术，对临床确诊的４２例β地中海贫血病人的６３条染色体进行基因突变分析，发现本地区有７种基因突变类型。介绍了它们的发生频率及重症β地中海贫血的基因型组成。并对１１例β地中海贫血高危胎儿完成产前基因诊断。     

南宁地区14096例儿童地中海贫血筛查与基因诊断分析

目的了解南宁地区儿童地中海贫血（TM）发生情况、基因突变类型及频率。方法通过全血细胞分析、血清铁蛋白检测对南宁地区14096例儿童进行TM初步筛查,对筛查结果阳性者进行α—TM或（和）β—TM基因突变检测。结果初步筛查阳性2594例,阳性率18．40％,进一步经基因分析确诊TM1878例,检出率13．32％,其中α—TM和β-TM分别为1161例（8．24％）和855例（6．07％）,其中包括α—TM合并β—TM138例（0．98％）,中间型、重型TM334例（2．37％）。检出α-TM基因型共22种,以- -．＊^sea／αα为主,占49．79％;β—TM基因型共28种,以CD41-42（-TCTT）／N和CD17（A→T）／N为主,分别占40．70％和25．73％。6种α-等位基因1410个,以--^sea为主,突变率为2．84％;10种β-突变位点967个,以CD41-42（-TCTT）和CD17（A→T）为主,突变率为1．59％和0．98％。结论南宁地区儿童TM发生率高,TM基因突变类型多,应加强育龄人群及新生儿期TM筛查,以降低TM相关出生缺陷率,早期干预治疗。     

广西地区~Gγ(~Aγδβ)~0-珠蛋白生成障碍性贫血的研究

目的探讨广西地区Gγ(Aγδβ)0-珠蛋白生成障碍性贫血(地贫)的基因突变和临床表型特点。方法对2010年12月-2012年3月在广西医科大学第一附属医院就诊的患者进行血常规检测;应用高效液相色谱法进行Hb分析;应用PCR和反向斑点杂交方法分析地贫基因突变类型。结果在胎儿血红蛋白(Hb F)增高的病例中检出6例中国型Gγ(Aγδβ)0地中海贫血杂合子,基因分析结果显示3例为中国型Gγ(Aγδβ)0-地贫杂合子,3例为Gγ(Aγδβ)0-地贫复合β-地贫CD41/42,CD71/72和-28基因突变的双重杂合子。血常规检测结果显示Gγ(Aγδβ)0-地贫杂合子Hb为94.8～128.0 g.L-1,平均红细胞容积(MCV)为72.0～79.1 fL,平均红细胞血红蛋白量(MCH)为23.00～25.87 pg。Gγ(Aγδβ)0-地贫复合β-地贫双重杂合子的Hb为84.7～88.0 g.L-1,MCV为61.9～66.9 fL,MCH为21.10～23.70 pg。血红蛋白分析结果显示Gγ(Aγδβ)0地贫杂合子HbA2为2.1%～2.6%,HbF为10.0%～18.0%。Gγ(Aγδβ)0-地贫复合β-地贫双重杂合子的HbA2为1.27%～3.70%,HbF为41.6%～98.8%。中国型Gγ(Aγδβ)0-地贫杂合子无贫血或轻度贫血,而复合β-地贫的双重杂合子临床表现为中度贫血,伴肝脾大。未检出其他类型的缺失型(δβ)0地贫。结论首次在广西地区检出中国型Gγ(Aγδβ)0地贫,其杂合子无临床症状或有轻度贫血,MCV、MCH降低,HbF升高。当复合β-地贫时有中度贫血,需依赖输血治疗。     

21例β－地中海贫血患儿的临床和基因诊断

目的探讨β－地中海贫血患儿的临床和基因类型的关系。方法用反向点杂交法（ＲＤＢ）诊断患儿的基因突变点。临床按表现和血生化分为重、中间、轻３型。结果１６例重型患儿中，３例基因表型为β°纯合子，β°或β°／β＋双重杂合子１３例。５例中间型者中，４例基因表型为β°／β＋双重杂合子，１例为非典型β地中海贫血杂合子。结论β－地中诲贫血的临床类型与基因突变点密切相关。     

21例β—地中海贫血患儿的临床和基因诊断

探讨β－地中海贫血患儿的临床和基因类型的关系。用反向点杂交法（ＲＤＢ）诊断患儿的基因突变点，临床按表现和血生化分为重，中间，轻３型。１６例重型患儿中，３例基因表型为β＾０纯合子，β＾０或β＾０／β＾＋双重杂合子１３例。５例中间型者中，４例基因表型为β＾０／β＾＋双重杂合子，１例为非典型β地中海贫血杂合子。β－地中海贫血的临床类型与基因突变点密切相关。     

广西地区β-地中海贫血的基因型与临床型的关系

我们分析４９例无亲缘关系的β－地中海贫血双重杂合子或纯合子的基因突变类型和临床表现。检出１０种突变类型，发现５例复合东南亚缺失型α－地中海贫血、６例复合Ｇｙ启动予－１５８ｎｔ（Ｃ→Ｔ）突变。根据这些患者的血红蛋白量，可将他们分成轻、中、重度贫血。２例β＋纯合子表现为轻度贫血；５例复合东南亚缺失型α－地中海贫血，６例复合Ｇｙ启动子－１５８ｎｔ（Ｃ→Ｔ）的患者均表现为中度贫血。这三种类型临床上表现为中间型β－地中海贫血，大多数单纯的Ｂ１与Ｂ０双重杂合子和β０纯合子表现为重型β－地中海贫血。