STAT1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1和Smad4表达的影响

目的：观察信号转导子与转录活化子1（STAT1）反义寡核苷酸雾化吸入对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1和Smad4表达的影响。方法：将45只雌性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和干预组,每组15只,对照组大鼠气管内灌注生理盐水、模型组和干预组大鼠气管内灌注博来霉素。于气管内灌注药物后0、2、4、6天对照组和模型组大鼠给予雾化吸入生理盐水,而干预组大鼠则雾化吸入STAT1反义寡核苷酸/DOTAP复合物。分别于气管内灌注药物后第7天、第14天和第28天每组各处死5只大鼠。肺组织HE染色和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化改变,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）行细胞总分数测定、ELISA测定BALF中TGF-β1的浓度、免疫组织化学SP法测定肺组织中TGF-β1、Smad4表达。结果：（1）干预组大鼠各时间点的肺泡炎和肺纤维化程度均较模型组明显减轻。（2）干预组大鼠各时间点的细胞总数和中性粒细胞比例较模型组减少,巨噬细胞比例增加。（3）模型组大鼠BALF的TGF-1水平在第7d表达明显升高,14d、28d仍持续高于对照组。干预组大鼠各时间点BALF中TGF-β1含量均低于模型组。（4）模型组和干预组大鼠肺组织中TGF-β1、Smad4表达水平均明显高于对照组,模型组和干预组大鼠第7天TGF-β1、Smad4的表达值明显高于对照组,随后下降,第28天时仍高于对照组;干预组大鼠各时间点肺组织TGF-β1、Smad4表达水平均低于模型组。（5）干预组大鼠肺组织中羟脯氨酸含量明显低于模型组。（6）BALF中TGF-β1蛋白浓度、肺组织中TGF-β1蛋白表达、Smad4蛋白表达均与肺组织匀浆中羟脯氨酸含量呈正相关。结论：STAT1反义寡核苷酸雾化吸入能减轻博来霉素致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,其机制可能与抑制TGFβ-Smads信号转导通路中的TGF-β1和Smad4有关。     

星形细胞肿瘤组织MMP-2与TIMP-1、TIMP-2的表达

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-2和金属蛋白酶抑制剂TIMP-1、TIMP-2在人脑星形细胞肿瘤组织中的表达及其与肿瘤临床生物学行为的关系.方法采用免疫组织化学SP法检测52例星形细胞肿瘤组织中MMP-2、TIMP-1和TIMP-2的表达情况.结果 MMP-2、TIMP-1、TIMP-2在星形细胞瘤（WHO Ⅱ级）、间变性星形细胞瘤（WHO Ⅲ级）与胶质母细胞瘤（WHO Ⅳ级）中的表达水平,差别具有统计学意义（Hc=7.966～10.353,P〈0.05）.结论 MMP-2、TIMP-1和TIMP-2在星形细胞肿瘤组织中的表达与星形细胞肿瘤的侵袭性生物学行为的演进密切相关.     

HBV感染者血尿转化生长因子-β1的变化及意义

目的探讨转化生长因子-β1在乙肝患者发生肝纤维化的早期诊断及判断病情严重程度中的临床价值。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）同时测定确诊的80例乙肝患者及8例健康志愿献血者血、尿中TGF—β1的浓度。结果与健康对照相比,随着病情的进展,乙肝患者血、尿中TGF-β1的含量逐渐升高,三者之间具有统计学意义,肝硬化患者血、尿中TGF—β1的含量升高最明显。同时发现血液与尿液中的TGF—β1水平呈中度正相关。结论尿液中的TGF—β1能反映肝纤维化程度,可作为评估乙肝患者早期肝纤维化程度的有意义指标。     

MMP-2、TIMP-2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义

目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其在EMs发生、发展中的作用。方法将育龄妇女正常分泌晚期子宫内膜注入裸鼠盆腹腔，建立EMs裸鼠模型，光镜下观察异位病灶的形态学特点，并采用免疫组化方法（PV-6001／6002法）检测异位内膜MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白表达水平，与种植前子宫内膜比较。结果光镜下观察，异位病灶具有增生期特点；且异位内膜较正常内膜MMP-2／TIMP-2比值增高（t=12．919，P〈0．01），VEGF蛋白表达增强（t=2．647，P〈0．05）。结论裸鼠模型是EMs早期临床研究的理想模型；MMP-2／TIMP-2比值升高及VEGF表达增强与异位内膜的高侵袭性和高血管新生能力有关，在EMs的发生发展中起重要作用。     

人正常和退变腰椎间盘中TIMP1的表达及其意义

目的 探讨金属蛋白酶组织抑制因子1 (TIMP1)mRNA在正常与退变椎间盘中表达的差别及意义.方法 利用荧光定量PCR技术检测TIMP1 mRNA在正常椎间盘(9个)与退变椎间盘(30个)组织的含量,结合年龄、病程、病理类型进行分析.结果 TIMP1在正常椎间盘组织表达量为0.900±0.289,退变椎间盘中TIMP1 mRNA表达量为0.340±0.241,两者差异有显著性(t=5.841,P<0.05).退变椎间盘中,不同年龄、病程及病理类型组间TIMP1 mRNA的表达量差异无统计学意义.结论 TIMP1 mRNA 的含量下降在腰椎间盘退变过程中起着重要作用,但未见与年龄、病程及病理类型有明显的关系.     

MMP-10、MMP-11及TIMP-2在胃癌组织中的表达

目的检测胃癌组织中基质金属蛋白酶-10（MMP-10）、基质金属蛋白酶-11（MMP-11）和基质金屑蛋白酶抑制因子-2（TIMP-2）的表达,探讨胃癌侵袭转移的分子机制。方法采用免疫组织化学方法检测MMP-10、MMP-11及TIMP-2在54例胃癌和20例癌周正常黏膜组织中的表达。结果胃癌组织中MMP-10、MMP-11及TIMP-2的表达与癌周正常黏膜组织比较,差异均有显著性（X^2=4．30～6．37,P〈0．05）。MMP-10和MMP-11的表达均与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（X^2=6．46—15．91,P〈0．05、0．01）;TIMP-2表达与淋巴结转移有关（X^2=4．91,P〈0．05）。MMP-10、MMP-11表达与TIMP-2表达呈正相关关系（r-0．29、0．34,P〈0．05）。结论MMP-10、MMP-11及TIMP-2的异常表达与胃癌的侵袭转移密切相关,可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要指标。     

P物质对大鼠成纤维细胞转化生长因子β-1表达的影响

目的探讨P物质 (substanceP ,SP)对大鼠肉芽组织成纤维细胞转化生长因子 β 1(transforminggrowthfactorβ 1,TGFβ 1)表达的影响。方法采用成纤维细胞培养和细胞定量ELISA技术 ,观察SP在不同浓度(1× 10 -9～ 1× 10 -5mol/L)及不同孵育时间 (0、8、16、2 4、36、4 8h)刺激成纤维细胞后 ,其TGFβ 1表达的改变。结果SP可增强大鼠成纤维细胞TGFβ 1表达 ,其量 效曲线呈双相分布 ,最大效应浓度为 1× 10 -8mol/L ;在最大效应浓度时 ,SP对大鼠成纤维细胞TGFβ 1表达的增强作用于刺激细胞后 2 4h达高峰。 结论SP对大鼠成纤维细胞TGFβ 1表达存在直接影响 ,其表现形式与SP的刺激浓度及孵育时间有关     

植入过程中转化生长因子β2、β3和转化生长因子βⅢ型受体在子宫的表达

探讨TGFβ2、TGFβ3和TβR-Ⅲ与胚胎植入的关系。方法取孕4～8d小鼠子宫，用免疫组化方法观察TGFβ2、TGFβ3，和TβR-Ⅲ的表达情况并以非孕小鼠子宫做对照。 结果TGFβ2于孕子宫各型细胞均有表达，表达程度以孕7d为最高；TGFβ3，和TβR-Ⅲ的表达主要集中于子宫腺和肌细胞。植入阶段, TGFβ2阳性细胞的数量明显高于TGFβ3。 结论TGFβ2、TGFβ3和TβR-Ⅲ参与植入过程的调节。     

丹参联合川芎嗪对肺纤维化大鼠肺组织JAK1、STAT1、ICAM-1表达的影响

目的:观察丹参联合川芎嗪腹腔注射对博来霉素(bleomycin,BLM)致肺纤维化大鼠肺组织蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导与转录活化因子1(STAT1)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:将90只成年雄性SD大鼠随机分为以下6组:生理盐水(NS)组、BLM组、地塞米松(DM)组、小剂量中药(A)组、中剂量中药(B)组、大剂量中药(C)组,每组大鼠各15只。BLM组、DM组、A组、B组、C组气管内灌注BLM复制大鼠肺纤维化模型,NS组气管内灌注等体积的NS,造模成功24h后各组大鼠给予药物腹腔注射。NS组和BLM组每日给予腹腔注射NS,DM组每日给予腹腔注射DM,A组、B组及C组每日给予不同剂量丹参和川芎嗪复合制剂腹腔注射,分别于造模后第7天,第14天和第28天处死每组大鼠各5只,肺组织多聚甲醛固定后行HE染色和Masson染色观察肺泡炎及肺纤维化程度;免疫组织化学法测定肺组织中JAK1、STAT1、ICAM-1的表达;血清用于肝肾功能的检测以评价药物安全性。结果:①大鼠血清肝肾功能检测结果显示各组两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。②NS组大鼠各时间点肺组织未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润及纤维化的形成。BLM组大鼠第7天时肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润,第14天时炎性细胞减少,肺泡间隔内成纤维细胞显著增多,肺泡结构破坏,第28天时肺纤维化程度进一步加重,形成广泛纤维化。与BLM组比较,DM组大鼠各时间点肺泡炎及纤维化程度减轻(P<0.05)。A组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度与BLM组类似。B组、C组第14天肺泡炎及肺纤维化程度明显低于BLM组(P<0.05)。B组、C组第28天肺纤维化程度明显低于BLM组(P<0.05)。③与NS组比较,BLM组、DM组、A组、B组、C组肺组织中JAK1、STAT1、ICAM-1的表达水平明显升高(P<0.05)。④与BLM组比较,DM组及B组、C组肺组织中JAK1、STAT1、ICAM-1的表达水平明显降低(P<0.05)。⑤肺组织JAK1、STAT1、ICAM-1的表达与肺泡炎及肺纤维化评分呈正相关。结论:丹参联合川芎嗪腹腔注射能减轻BLM致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,其机制可能与抑制肺组织JAK1、STAT1、ICAM-1的表达有关。     

肺癌组织中血管内皮生长因子受体Flt1及KDR的表达及其与肿瘤转移和预后的关系

①目的　探讨肺癌中血管内皮生长因子受体Flt1、KDR的表达与其转移及预后的关系。②方法　应用免疫组织化学PowerVisionTM PV90 0 0法 ,测定 75例肺癌标本中Flt1、KDR的表达。③结果　肺癌组织中Flt1、KDR的表达较为广泛 ,主要位于肿瘤细胞胞浆及胞膜上 ,纤维母细胞和血管内皮细胞胞浆中亦有表达。Flt1、KDR在肿瘤细胞中的阳性率均显著高于在间质纤维母细胞中的表达 (χ2 =6 .0 7、5 .88,P <0 .0 5 )。肿瘤细胞及纤维母细胞中该两种受体的阳性率在不同年龄、不同性别及不同病理类型、不同病理分级之间差异均无显著性 (χ2 =0 .0 1～4 .84 ,P >0 .0 5 ;P =0 .2 9～ 0 .79)。肿瘤细胞中Flt1、KDR的阳性表达率在 3组不同大小的肿瘤间差异均有显著性(χ2 =1 0 .35、7.2 9,P <0 .0 5 ) ,而纤维母细胞中差异均无显著性 (χ2 =2 .86、2 .5 6 ,P >0 .0 5 ) ;肿瘤细胞及纤维母细胞中Flt1、KDR的阳性率在淋巴结有、无转移两组间的差异均有显著性 (χ2 =4 .72～ 9.32 ,P <0 .0 5 ) ,在 3组不同术后生存时间病人间亦均有显著性差异 (χ2 =8.81～ 1 9.1 9,P <0 .0 5 )。肿瘤细胞中Flt1、KDR的表达呈极显著性正相关 (r =0 .4 4 ,P <0 .0 1 )。④结论　肺癌的生长主要依赖自分泌机制 ,联合检测Flt1、KDR可能对肺癌转移     

基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1和血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤组织中的表达

目的探讨视网膜母细胞瘤(RB)组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其与新生血管形成、视神经浸润和RB分化程度的关系。方法收集2010年1月至2014年3月在湖北医药学院附属襄阳医院接受治疗的RB患者的RB组织标本和癌旁正常组织标本各30例,采用免疫组织化学法测定VEGF、TIMP-1和MMP-9的表达。结果 RB组织中MMP-9和VEGF的阳性表达率显著高于癌旁正常组织(P<0.01);但RB组织与癌旁正常组织中TIMP-1的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。未分化型RB组织中MMP-9和VEGF的阳性表达率显著高于分化型RB(P<0.05,P<0.01);未分化型RB组织与分化型RB组织中TIMP-1的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。有视神经浸润的RB组织中MMP-9和VEGF的阳性表达率显著高于无视神经浸润的RB(P<0.01);有视神经浸润与无视神经浸润的RB组织中TIMP-1的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 VEGF和MMP-9可能与RB的发生发展、新生血管形成、视神经浸润及RB分化程度有关。     

病理性瘢痕组织中基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶组织抑制剂-1、血小板源性生长因子、增殖细胞核抗原的表达

目的:探讨病理性瘢痕组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、血小板源性生长因子(PDGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及意义.方法:采用免疫组织化学方法检测58例病理性瘢痕、16例正常皮肤及16例非病理性瘢痕组织中MMP-1、TIMP-1、PDGF及PCNA的表达情况.结果:病理性瘢痕组织中MMP-1、TIMP-1、PDGF阳性表达率及PCNA指数均高于非病理性瘢痕及正常皮肤组织(P均＜0.05).病理性瘢痕组织中TIMP-1与PDGF、MMP-1、PCNA及PDGF与PCNA表达均呈正相关(P均＜0.05).结论:病理性瘢痕的形成与MMP-1、TIMP-1、PDGF及PCNA相互作用失衡有关.     

先天性心脏病患儿血清MMP-9、TIMP-1及VEGF表达水平及变化分析

目的:探讨先天性心脏病患儿血清中的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)以及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平及变化.方法:临床纳入左向右分流型先天性心脏病患儿81例,根据治疗前肺动脉收缩压(SPAP)的不同分为4组:非肺动脉高压(PH)组16例,轻度PH组21例,中度PH组21例,重度PH组23例.患儿中,接受前列腺素E1(PGE1)治疗19例,接受手术治疗24例.同时纳入21例同年龄段的健康体检儿童作为对照组.检测先天性心脏病患儿以及健康体检儿童的血清MMP-9、TIMP-1以及VEGF水平,同时计算MMP-9/TIMP-1比值.结果:先天性心脏病患儿VEGF水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);在发生PH后,患儿MMP-9、TIMP-1均出现显著的升高(P＜0.05);中度PH组MMP-9/TIMP-1明显上升(P＜0.05);经过治疗,患儿MMP-9、TIMP-1以及VEGF水平均较治疗前有了明显降低(P＜0.05).结论:左向右分流型先天性心脏病合并PH患儿血清VEGF以及MMP-9可能协同参与了肺血管的重构;PGE1能够降低患儿VEGF、MMP-9以及TIMP-1的水平,这可能属于PGE1逆转肺血管重构的又一新发现;术后1周,先天性心脏病合并轻度PH、中度PH患儿VEGF、MMP 9以及TIMP 1水平出现显著的下降.