DNA疫苗免疫效果影响因素的分析

DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗 ,能够在体内引起特异性细胞免疫应答和体液免疫应答 ,但免疫应答的水平受多种因素的影响 ,本文就影响免疫效果的若干因素作一综述     

DNA疫苗免疫效果影响因素的分析

DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，能够在体内引起特异性细胞免疫应答和体液免疫应答，但免疫应答的水平受多种因素的影响，本就影响免疫效果的若干因素作一综述。     

乙型及丙型肝炎DNA疫苗联合重复接种小鼠的免疫应答

目的 :观察由编码 HBs Ag与 HCV- CE2 抗原的两种重组真核细胞表达质粒制备的 DNA疫苗重复联合接种 BAL B/c小鼠后 ,其诱生的特异性免疫应答反应。方法 :应用上述两种 NDA疫苗重复联合免疫小鼠 ,动态观察血中特异性抗体水平、特异性细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL )体外杀伤活性 ,并进行 CTL杀伤活性活体诱生实验。结果 :两种 DNA疫苗联合重复免疫小鼠 ,能够诱生机体特异性体液免疫及细胞免疫完全应答。其小鼠荷瘤表达目的抗原的靶细胞后 ,生存率明显高于未免疫鼠 (P <0 .0 5 )。结论 :乙型及丙型肝炎联合 DNA疫苗的重复接种 ,可有效地诱生小鼠机体特异性免疫应答反应。 DNA疫苗诱生的 CTL应答可与体液免疫应答分离存在 ,可能是 DNA疫苗免疫保护的更重要方面。     

日本血吸虫97kDa DNA疫苗与致弱尾蚴疫苗诱导免疫应答特征的比较研究

目的　对比观察日本血吸虫大陆株副肌球蛋白基因疫苗(Sjc97DNA)与紫外线致弱尾蚴(UVC)疫苗免疫C57BL6小鼠诱导的抗感染保护力及免疫应答特征。　方法　以Sjc97DNA核酸疫苗经后腿胫前肌免疫C57BL6小鼠共2次,每次间隔3wk,末次免疫后3wk攻击感染日本血吸虫尾蚴;UVC疫苗接种同种小鼠后5wk攻击感染上述等量尾蚴。均于攻击感染后7wk计数虫负荷及肝卵负荷。并设空质粒对照及感染对照组。用ELISA分析免疫鼠攻击感染前后血清特异性IgG、IgA及亚型抗体水平,以及脾淋巴细胞体外诱生的细胞因子水平。　结果　Sjc97DNA疫苗及UVC疫苗免疫小鼠均诱生出以Th1型免疫应答为主的IL2、IFNγ及特异性抗AWA、SEAIgG2a、IgG2b亚型及IgA抗体,UVC疫苗组小鼠各细胞因子及抗体水平均显著高于Sjc97DNA疫苗组,但两疫苗组均未测及IL4。攻击感染后,Sjc97DNA疫苗组的减虫率36.3%、减卵率42.4%,明显低于UVC疫苗组的66.9%和75.6%。攻击感染后7wk,两疫苗组小鼠Th2型免疫应答虽有所增强,但仍以Th1型免疫应答占优势;而空质粒对照组和感染对照组小鼠则以Th2型免疫应答为主。　结论　核酸疫苗与紫外线致弱尾蚴疫苗均能诱导产生抗感染免疫保护力,致弱尾蚴疫苗的免疫保护力高于Sjc97DNA。两疫苗诱导的抗感染     

细菌菌蜕DNA疫苗递送系统研究进展

核酸疫苗又称DNA疫苗,因制备简便,免疫应答有效持久等优越性而引起关注。然而,免疫应答水平较低且免疫剂量较大是制约核酸疫苗临床应用的关键因素。高效、特异地将DNA导人到抗原递呈细胞（Antigen—presenting cells,APCs）中并使其得到高效表达是提高核酸疫苗免疫活性的重要途径。以细菌菌蜕作为DNA疫苗的递送载体,     

GM-CSF增强免疫调节作用的研究进展

DNA疫苗免疫哺乳动物存在免疫原性差和免疫效果不理想的诸多问题,因而影响DNA疫苗的免疫效果和应用性。如果要获得效力更持久、反应强度更优化的免疫应答,需要进一步改善DNA疫苗的免疫效果。根据目前的研究,     

结核分枝杆菌MPT64抗原DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答

目的研究结核分枝杆菌MPT64抗原DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答。方法用表达MPT64的真核表达质粒pcDNA-M免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的特异性抗体滴度和抗体亚类。分离免疫小鼠的脾淋巴细胞,检测淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-12产生水平、流式细胞仪计CD4+细胞和CD8+细胞数、脾淋巴细胞特异性CTL杀伤效应。结果MPT64基因免疫可诱导小鼠高水平的体液免疫应答,免疫小鼠脾淋巴增殖显著,IFN-γ和IL-12含量增加,CD4+细胞和CD8+细胞百分比明显增加,CTL杀伤效应明显。结论MPT64 DNA疫苗可诱导小鼠有效的体液和细胞免疫应答,有可能作为新型TB疫苗的组分。     

日本血吸虫Rho GTPase DNA疫苗及重组蛋白疫苗免疫保护机制初探

目的 初步探讨日本血吸虫中国大陆株pcDNA3．1-SjRho GTPase DNA疫苗、重组蛋白疫苗以及联合疫苗免疫的保护机制。方法 将pcDNA3．1-SjRho GTPase DNA疫苗、重组蛋白疫苗分别及联合疫苗免疫昆明鼠后，分不同时间采集血清，以ELISA法测定总抗体及IgG亚类。结果 重组蛋白疫苗及联合疫苗诱导产生的抗体效价较高，DNA疫苗及联合疫苗诱导产生的抗体以IgG2a为主，重组蛋白疫苗诱导产生的抗体以IgG1为主。结论 Sj-Rho GTPase基因DNA疫苗及联合疫苗主要诱生Th1型细胞免疫应答，重组蛋白疫苗主要诱生Th2型体液免疫应答。     

恶性疟原虫CSP基因重组蛋白及DNA免疫诱导小鼠体液免疫应答比较

本文利用恶性疟原虫FCC1/HN株环子孢子蛋白 (PfCSP)基因DNA质粒通过不同途径、不同剂量免疫小鼠 ,观察其产生的体液免疫应答反应 ,并将其与相应的重组表达蛋白疫苗进行比较。结果显示 :DNA免疫刺激机体产生抗体反应强度的免疫途径依次为肌肉、静脉和皮下 ;宿主对DNA免疫存在一定的剂量依赖性 ;ELISA和Dot -ELISA检测免疫后 4周和 7周 ,DNA质粒组刺激机体产生抗体的滴度均显著低于相应的重组蛋白组。表明PfCSPDNA疫苗与重组表达蛋白疫苗均可刺激小鼠产生特异性体液免疫应答 ,但前者诱导高滴度的抗体反应需要更长的时间     

日本血吸虫Rho GTPase DNA疫苗及重组蛋白疫苗免疫保护机制初探

目的　初步探讨日本血吸虫中国大陆株pcDNA3 .1 SjRhoGTPaseDNA疫苗、重组蛋白疫苗以及联合疫苗免疫的保护机制。　方法　将 pcDNA3 .1 SjRhoGTPaseDNA疫苗、重组蛋白疫苗分别及联合疫苗免疫昆明鼠后 ,分不同时间采集血清 ,以ELISA法测定总抗体及IgG亚类。　 结果　重组蛋白疫苗及联合疫苗诱导产生的抗体效价较高 ,DNA疫苗及联合疫苗诱导产生的抗体以IgG2a为主 ,重组蛋白疫苗诱导产生的抗体以IgG1为主。　 结论　Sj RhoGTPase基因DNA疫苗及联合疫苗主要诱生Th1型细胞免疫应答 ,重组蛋白疫苗主要诱生Th2型体液免疫应答     

乙型肝炎疫苗免疫接种现状及对无(弱)应答的探索

乙型肝炎疫苗接种在预防和控制乙型肝炎流行方面具有重要意义。本文综述乙型肝炎疫苗免疫接种现状,试从机体免疫、遗传等因素分析乙型肝炎疫苗接种后无(弱)应答发生的原因,并阐述目前对乙型肝炎疫苗无(弱)应答解决方法的研究。     

新疆阜康市GAVI项目乙肝疫苗免疫接种效果评价

目的了解阜康市全球疫苗免疫联盟（GAVI）项目的进展情况,分析阜康市项目实施至2007年6月以来,4年的乙肝疫苗的免疫接种情况。方法收集阜康市各乡、镇、厂矿、办事处常规免疫接种月报表。结果GAVI项目实施4年来,乙肝疫苗接种率年间有显著性差异;全程接种率也有统计学差异（χ^2=38.26,P〈0.05）,4年的GAVI项目及时接种率分别为88.3%,91.4%,92.9%和94.9%,经分析无显著统计学差异（χ^2=1.88,P〉0.05）。结论根据4年HepB3全程接种、HepB1、HepB2、儿童免疫接种率,可知免疫接种率有逐年提高的趋势,而提高新生儿及时接种率是关键。     

幽门螺杆菌靶向核酸疫苗的构建及免疫学评价

目的:为了提高幽门螺杆菌DNA疫苗的免疫原性,构建具有靶向作用于APC细胞的核酸疫苗.方法:利用基因工程技术,将靶向基因片段和过氧化氢酶基因融合构建了核酸疫苗.体外转染293T细胞,间接免疫荧光和ELISA检测其基因表达情况.用该核酸疫苗肌肉免疫注射BALB/c小鼠后,测定其血清IgG、IgG1和IgG2a水平.结果:间接免疫荧光检测转染DNA疫苗的293T细胞,表明该疫苗能在真核细胞中表达目的抗原,通过ELISA方法测定表明其仍具有IgG抗体结合能力.BALB/c小鼠免疫后血清测定结果表明,该靶向核酸疫苗诱导的抗体水平高于对照质粒pDNAkat,抗体分型实验显示靶向核酸疫苗pcDNAkathIgz和pcDNAkat,促进了免疫反应类型由Th2向Th1的部分偏转.结论:成功构建了靶向APC细胞的幽门螺杆菌核酸疫苗,并在小鼠体内诱导了较高的抗体水平.     

抗口蹄疫蛋白疫苗与DNA疫苗混合物的免疫原性研究

目的 研究抗口蹄疫蛋白及DNA疫苗混合物免疫原性。方法 以O型口蹄疫病毒（FMDV）VP1免疫活性肽基因串连片段取代猪IgG H链基因可变区的CDR3区构成融合基因。然后分别与原核表达载体pET28b及真核表达载体pCDM－8构建抗口蹄疫蛋白疫苗pET28b-FH及DNA疫苗PCDM－FH。用蛋白疫苗pET28b-FH和DNA疫苗pCDM-FH及其混合物免疫猪后,用攻毒实验检测其效果。结果 攻毒后,抗口蹄疫蛋白疫苗pET28b-FH及DNA疫苗pCDM-FH单猪免疫能分别使猪发病推迟10天和1天,症状减轻;而混合疫苗免疫效果比阴性对照好而不及这两个疫苗单独免疫效果。结论 抗口蹄疫蛋白疫苗pET28b-FH及DNA疫苗pCDM-FH单独免疫能使猪发病推迟,症状减轻,而混合疫苗免疫效果较差,免疫方法仍需改进。     

Recent advances in DNA vaccine of hepatitis virus

Nucleic acid vaccine or DNA vaccine is a hopeful vaccine to prevent and treat viral hepatitis. Problems exist in different DNA vaccines for HBV or HCV. Optimal animal model should be established study vaccine against hepatitis. Apart from the strategy to enhance the efficiency of DNA vaccine, combined use of cytokines or chemokines, different routes of inoculation, design of optimal vector, ISS insertion in the plasmid vectors, etc to enhance the efficiency of DNA vaccine are reviewed.     

Elicitation of strong immune responses by a DNA vaccine expressing a secreted form of hepatitis C virus envelope protein E2 in murine and porcine animal models

INTRODUCTION Hepatitis C continues to be a severe health threat to a large population with about 123 million people being affected globally[1]. The etiologic agent, hepatitis C virus (HCV)[2] is able to establish persistent infections in up to 85% of infe…     

狂犬病病毒糖/核蛋白基因疫苗和IL-18在犬的免疫试验研究

目的　检测狂犬病病毒糖 /核蛋白“二价”基因疫苗及IL - 18在犬体内的免疫效果 ,并确定不同包裹剂对基因疫苗免疫效果的影响。方法　本试验以 pIRES1neo和人用灭活苗分别作为阴、阳性对照 ,以糖 /核蛋白双基因共表达载体 pIGN单独或与IL - 18的真核表达载体pIIL18混合 ,以司苯 -甘油混合或以生理盐水溶液形式 ,按每条犬 2 0 0 μgDNA/ml,接种 3次 (其中 1组第 3次加强免疫时采用浓缩的狂犬病灭活苗 ) ,间隔 2周的免疫程序 ,经股四头肌进行注射免疫。通过间接ELISA、细胞中和试验及淋巴细胞转化试验分别检测体液和细胞免疫水平。结果与结论　结果显示 ,1.所有试验组在第 3次加强免疫后特异性抗体和中和抗体水平显著高于阴性对照组 ;pIGN pIIL18组诱导的细胞免疫水平高于无 pIIL18的 pIGN免疫组 ;2 .以司苯 -甘油作为包裹剂的基因疫苗诱导产生的免疫应答水平与裸质粒 (生理盐水溶液 )形式的基因疫苗间无显著差异 ;3.以糖 /核蛋白二价基因疫苗pIGN作为基础免疫 ,再以狂犬病浓缩灭活苗加强免疫后 ,能迅速诱导较高的体液免疫应答水平。以上结果说明 ,狂犬病病毒糖 /核蛋白“二价”DNA疫苗具有实际应用于免疫预防的潜力。     

信号肽和辅助性T细胞表位以及GST表位增强猪带绦虫保护性抗原诱导免疫应答的初步研究

目的：研究信号肽和辅助性T细胞表位以及GST表位增强猪带绦虫保护性抗原诱导的免疫应答。方法：在猪绦虫融合抗原pCC27(本室从六钩蚴cDNA表达文库筛选的三个保护性抗原经拼接所得)基因片段5′末端引入人IL-2信号肽、一个通用型辅助性T淋巴细胞表位，谷胱甘肽还原酶的T和B淋巴细胞表位(TGG)，经pGEX4T-2表达鉴定，序列分析后构建成DNA疫苗，通过肌肉注射途径将这种DNA疫苗免疫小鼠。结果：这种含辅助表位的DNA疫苗诱导的免疫应答效果明显超过对照组，对绦虫卵攻击的保护率为90％。结论：构建了含绦虫融合抗原pCC27及TGG的核酸疫苗，动物试验结果表明．TGG表位既可提高IgG、IgG1、IgG2a的水平，又进一步增强Th1和Th2细胞间的平衡关系。免疫小鼠对绦虫卵的攻击具有很好的保护作用。     

铜绿假单胞菌二价组合DNA疫苗pOPRL+pOPRF最佳免疫剂量研究

目的 探讨铜绿假单胞菌二价组合DNA疫苗pOPRL+pOPRF在小鼠体内的最佳免疫剂量。方法 分别以25 μg, 50 μg, 100 μg和200 μg的pOPRL+pOPRF免疫BALB/c小鼠。对各剂量免疫后诱导的血清抗体水平、脾淋巴细胞增殖水平以及IFN-γ和Il-2分泌水平进行检测,强毒攻击后测定各组小鼠的存活时间及保护率。结果 100 μg和200 μg组小鼠的血清特异性抗体水平、SI值及IFN-γ和Il-2的分泌水平明显高于25 μg和50 μg组(F=8.414,P<0.05)。且三免后100 μg组小鼠脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和Il-2的量高于200 μg组(F=6.375,P<0.05)。攻毒后25 μg、50 μg、100 μg和200 μg组的保护率分别为35%、45%、85%和70%。结论 pOPRL+pOPRF二价组合DNA的免疫效果与免疫剂量有一定的相关性,在小鼠中的最佳免疫剂量为100 μg。     

Phase Ⅱb trial of in vivo electroporation mediated dualplasmid hepatitis B virus DNA vaccine in chronic hepatitis B patients under lamivudine therapy

AIM To assess the efficacy and safety of in vivo electroporation(EP)-mediated dual-plasmid hepatitis B virus(HBV) DNA vaccine vs placebo for sequential combination therapy with lamivudine(LAM) in patients with chronic hepatitis B. METHODS Two hundred and twenty-five patients were randomized to receive either LAM + vaccine(vaccine group, n = 109) or LAM + placebo(control group, n = 116). LAM treatment lasted 72 wk. Patients received the DNA vaccine or placebo by intramuscular injection mediated by EP at weeks 12(start of treatment with vaccine or placebo, SOT), 16, 24, and 36(end of treatment with vaccine or placebo, EOT). RESULTS In the modified intent-to-treat population, morepatients had a decrease in HBV DNA 2 log10 IU/m L in the vaccine group at week 12 after EOT compared with the control group. A trend toward a difference in the number of patients with undetectable HBV DNA at week 28 after EOT was obtained. Adverse events were similar. In the dynamic per-protocol set, which excluded adefovir(ADV) add-on cases at each time point instantly after ADV administration due to LAM antiviral failure, more patients had a decrease in HBV DNA 2 log10 IU/mL in the vaccine group at week 12 and 28 after EOT compared with the control group. More patients with undetectable HBV DNA at week 28 after EOT in the vaccine group were also observed. Among patients with a viral load 1000 copies/mL at week 12, more patients achieved HBeA g seroconversion in the vaccine group than among controls at week 36 after EOT, as well as less virological breakthrough and YMDD mutations. CONCLUSION The primary endpoint was not achieved using the HBV DNA vaccine. The HBV DNA vaccine could only be beneficial in subjects that have achieved initial virological response under LAM chemotherapy.