口腔鳞癌组织CK19蛋白质与mRNA水平的关系及其临床意义

目的：探讨口腔鳞癌组织中细胞角蛋白19（CK19）的蛋白质表达与基因转录之间的关系及其临床意义。方法：采用免疫组织化学和荧光实时定量RT—PCR方法，对33例口腔鳞癌患者的癌组织及癌旁组织中CK19的蛋白质表达和mRNA水平进行检测，采用SPSS10.0软件包对数据进行配对t检验和相关分析。结果：口腔鳞癌组织中，CK19蛋白质和mRNA表达呈正相关，且均显著高于癌旁组织。癌组织CK19蛋白质表达阳性率为90，91％（30／33），mRNA水平是癌旁组织的2．21倍。CK19蛋白质和mRNA表达均与肿瘤的恶性程度显著相关。恶性程度越高，两者的表达水平也越高。结论：口腔鳞癌组织中CK19蛋白质和mRNA表达上升，并且与肿瘤恶性程度相关．CK19免疫组织化学和荧光实时定量RT—PCR技术在鉴别组织恶性程度上具有潜在的临床价值。     

线粒体促凋亡因子Omi/HtrA2在口腔鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨Omi/HtrA2在口腔鳞癌组织中的表达及其在口腔鳞癌发生发展中的作用及意义.方法 采用RT-PCR与免疫组织化学方法,检测20例低分化口腔鳞状细胞癌、20例高分化口腔鳞状细胞癌、20例口腔乳头状瘤、20例癌旁组织切除标本中Omi/HtrA2 mRNA与蛋白的表达情况,并与口腔正常组织标本中Omi/HtrA2mRNA与蛋白的表达情况作比较.结果 Omi/HtrA2蛋白在正常组织和癌旁组织中未检测到表达,在口腔鳞癌组(高、低分化)与口腔乳头状瘤组织中均有表达.Omi/HtrA2蛋白表达在高分化鳞癌组织中的表达水平高于低分化鳞癌组织、口腔乳头状瘤组织和癌旁组织(P＜0.05).Omi/HtrA2基因在高分化口腔鳞癌组织中的表达水平高于低分化口腔鳞癌组织、口腔乳头状瘤组织以及癌旁和正常组织(P＜0.05).结论 Omi/HtrA2在口腔鳞状细胞癌组织中有表达,表明Omi/HtrA2可能参与口腔鳞癌的发生发展过程.     

荧光实时定量RT-PCR在口腔鳞癌细胞角蛋白19表达研究中的应用

目的探讨荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）在口腔鳞癌组织中细胞角蛋白19（CK19）相对表达量研究中的应用。方法用CK19mRNA的荧光定量RT—PCR检测31例口腔鳞癌患者的癌组织和癌旁组织，用2^-△△Ct公式计算癌组织相对癌旁组织CK19mRNA相对表达的倍数。结果口腔鳞癌癌组织CK19mRNA水平是癌旁组织的2．21倍，扩增片段特异，CK19mRNA水平与病理分化程度相关，分化越差，水平越高。结论荧光实时定量RT—PCR在口腔鳞癌组织CK19相对表达量研究中具有一定的临床价值。     

口腔扁平苔藓中细胞角蛋白19的表达及意义

目的:探讨细胞角蛋白19(keratin 19,CK19)在口腔扁平苔藓(OLP)中的表达以及其病理意义.方法:采用免疫组化法检测17例OLP和14例正常颊黏膜中CK19的表达,采用RT-PCR方法分别在OLP患者和正常人颊黏膜中比较CK19 mRNA的表达.结果:正常颊黏膜中CK19均在基底细胞胞浆内呈强阳性表达,只有5例(29.4%)OLP基底细胞呈弱阳性表达,其余为阴性表达;RT-PCR结果显示在OLP组织中CK19 mRNA表达显著高于正常黏膜(P＜0.05).结论:CK19的表达下调与颊部OLP黏膜上皮更新能力下降密切相关.     

侧群细胞相关分子标志物在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:口腔鳞癌中的侧群细胞(side population,SP)具有干细胞样生物学特性,且有一些特定的细胞表面标志物表达,本研究旨在探讨SP细胞相关分子在口腔鳞癌中的表达及临床意义。方法:将101例口腔鳞状细胞癌和10例正常口腔上皮制备成组织芯片。利用免疫组化方法检测SP相关分子CD44、CK19、ABCG2和MDR1的表达,对染色结果的阳性率和阳性强度进行评分,采用SPSS15.0软件包分析其表达水平与临床病理参数的关系。结果:CD44、CK19、ABCG2和MDR1在大部分口腔鳞癌组织中表达升高。CK19表达升高与口腔鳞癌病理分级显著相关。ABCG2表达升高与口腔鳞癌TNM分期、病理分级和肿瘤体积相关。MDR1表达升高与口腔鳞癌病理分级密切相关。结论:SP相关分子CD44、CK19、ABCG2和MDR1表达与口腔鳞癌的临床关系密切。     

细胞角蛋白CK19在口腔粘膜癌变过程中的变化

目的：探讨口腔粘膜癌变过程中CK19的变化。方法：收集正常口腔粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和口腔鳞癌活检标本共53例，用免疫组化、电泳和Western杂交方法研究上皮中CK19的表达。结果：CK19表达于有上皮异常增生的复层鳞状上层和口腔鳞癌尤其是低分化鳞癌的癌细胞中。随病变程度加重，CK19表达的阳性率，表达强度和占细胞角蛋白构成比显著增加。结论：CK19表达于粘膜上皮的基底上层可作为口腔癌前病变的辅助标志，CK19表达增加是 口腔粘膜病变过程中的早期事件。     

口腔鳞癌组织CK17蛋白与mRNA水平的表达及其临床意义

目的：探讨口腔鳞癌组织标本中细胞角蛋白17（cytokeratin 17,CKl7）的蛋白与基因水平的表达及其临床意义。方法：在30例口腔鳞癌患者的癌组织及癌旁组织标本中,分别采用免疫组织化学和荧光实时定量RT—PCR方法,检测CKl7的蛋白表达和mRNA水平,并与各临床病理指标进行统计学分析,采用SPSSIO．0软件包对数据结果进行统计分析。结果：口腔鳞癌组织标本中CKl7蛋白和mRNA表达水平均显著高于癌旁组织（P〈0．01）。CKl7的表达水平与烟酒嗜好、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、病理分化程度无显著相关性。结论：口腔鳞癌组织中CKl7蛋白质和mRNA表达上升,提示其与肿瘤的发生、发展具有一定关系。     

组织蛋白酶B在口腔黏膜上皮癌变过程中的表达及意义

目的：探讨组织蛋白酶B（Cathepsin B,CB）在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法：以口腔黏膜上皮永生化细胞系（human immortalized oral epithelia cell line,HIOEC）及经过苯丙芘[benzo（a）pyrene,B（a）P]诱导产生鳞状细胞癌细胞（HB）而形成的口腔鳞癌体外癌变模型为研究对象,通过双向凝胶电泳（2-DE）和质谱分析（LC-MS/MS）筛选和鉴定出差异蛋白质CB。采用实时定量PCR、Western印迹和免疫组化方法,检测口腔鳞癌细胞和30例原发口腔鳞癌标本中的mRNA及蛋白质表达水平。采用SPSS10.0软件包对数据进行非参数检验。结果：与永生化HIOEC相比,HB和CAL27细胞中CB的mRNA水平显著升高,HB、Tca8113、TSCC、CAL27和OSC细胞中CB蛋白表达水平明显升高。30例口腔鳞癌患者癌组织中CB的mRNA和蛋白表达水平均较癌旁组织升高（P〈0.01）。CB的表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、病理分化程度无显著相关性。结论：CB在口腔鳞癌中的表达明显升高,提示其与肿瘤的发生、发展具有一定关系。     

口腔鳞癌患者唾液cyfra 21-1含量与癌组织CK19表达的相关性研究

目的：检测口腔鳞癌患者唾液中cyfra21-1含量、组织中CK19蛋白质表达和基因转录水平,探讨其相互关系。方法：对30例口腔鳞癌患者和30例正常人的唾液采用ELISA法检测cyfra21-1含量,其中6例口腔鳞癌患者的癌组织和癌旁组织分别采用免疫组织化学和实时定量RT-PCR法检测CK19蛋白质表达强度和CK19mRNA水平,采用SPSS10.0软件包进行统计学分析。结果：口腔鳞癌患者唾液cyfra21-1含量为（85.95±78.00）μg/L,显著高于对照组的（42.27±40.84）μg/L;口腔鳞癌癌组织CK19蛋白质表达强度和CK19mRNA水平显著高于癌旁组织。CK19mRNA水平与CK19蛋白质表达强度呈显著正相关,癌组织CK19蛋白质与唾液cyfra21-1含量也显著相关。结论：口腔鳞癌患者唾液cyfra21-1含量和组织CK19蛋白表达及基因转录水平显著升高,组织CK19表达升高,对唾液cyfra21-1含量的上升起着重要作用。     

膜联蛋白A1表达下降在口腔鳞癌中的意义

目的：研究膜联蛋白A1（ANXA1）在口腔鳞癌中的表达及其与临床病理的关系。方法：应用实时定量PCR、Western印迹方法和免疫组化方法检测ANXA1在口腔鳞癌细胞株和30例原发口腔鳞癌中的表达，采用SPSS10．0软件包对数据进行非参数检验。结果：与人永生化口腔黏膜上皮细胞（HIOEC）相比，Tca8113、TSCC、OSC和NT细胞中ANXA1的mRNA表达降低；Tca8113、TSCC、CAL-27、OSC和NT细胞中ANXA1的蛋白表达降低。30例口腔鳞癌组织标本中，ANXA1的mRNA和蛋白表达均较癌旁组织降低（p〈0．001）。ANXA1的表达水平与肿瘤的病理分化程度有关（mRNA：P=0．007；蛋白：P=0．006），与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移无关。结论：ANXA1在口腔鳞癌中表达降低，可能与肿瘤的发生、发展和组织分化有关。     

细胞角蛋白19mRNA在口腔鳞状细胞癌中表达的研究

目的探讨口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者癌组织中细胞角蛋白（CK）19 mRNA的变化和其发生的可能机制以及CK19 mRNA检测的临床应用价值。方法收集未接受过放疗和化疗的20例OSCC患者的手术标本（包括癌组织20块、癌旁组织20块和颈清扫的淋巴结43枚）,采用荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）法检测组织内CK19 mRNA的表达,比较CK19 mRNA在上述组织中的相对表达量。结果CK19 mRNA在OSCC癌组织内表达比其在正常口腔黏膜内表达高1.85倍,比其在癌旁组织内表达高1.66倍。9例患者颈清扫淋巴结内CK19 mRNA表达阳性,阳性率为45%（9/20）,而9例患者的22枚淋巴结中CK19 mRNA表达阳性率是81.8%（18/22）,占20例患者43枚淋巴结的41.9%（18/43）。淋巴结CK19 mRNA阳性患者的癌组织与癌旁组织和正常口腔黏膜的表达量比CK19 mRNA阴性患者低。结论CK19 mRNA在OSCC癌组织中的表达高于其在癌旁组织和正常口腔黏膜内的表达,可能是由于癌组织中CK19的合成明显增加所致。淋巴结中CK19 mRNA的表达可以作为检测OSCC淋巴结微转移的指标之一,运用FQPCR法检测淋巴结中CK19 mRNA的表达来检测OSCC的淋巴结微转移比普通病理法检测更灵敏。     

Increased Cyfra 21-1 concentration in saliva from primary oral squamous cell carcinoma patients

BACKGROUND: Saliva is the body fluid in the oral cavity and contacts directly with oral mucosa. As a detective media, it is acceptable and non-traumatic. Cyfra 21-1, being the soluble fragment of cytokeratin 19(CK19), correlates well with oral squamous cell carcinoma (OSCC). OBJECTIVE: To investigate the saliva Cyfra 21-1 concentrations in OSCC patients and healthy persons, and the correlation between the Cyfra 21-1 concentration in saliva and the CK19 expression in tissue from OSCC patients. DESIGN: Saliva Cyfra 21-1 concentration was detected by ELISA in 30 OSCC patients and 30 healthy persons; CK19 protein expression and CK19 mRNA level were, respectively, detected by immunohistochemistry and fluorescent real-time RT-PCR in cancerous and paracancerous tissues from 33 OSCC patients. RESULTS: Saliva Cyfra 21-1 concentration in OSCC patients (85.95+/-78.00 microg/L) was significantly higher than that in healthy persons (42.27+/-40.84 microg/L) (P=0.009); it was also significantly higher in the patients suffering later tumour recurrence (130.95+/-66.38 microg/L) than that in the patients without tumour recurrence (74.84+/-63.45 microg/L) (P=0.023). CK19 protein expression increased significantly in OSCC tissues (P<0.001) with positive rate of 90.9%, CK19 mRNA level in cancerous tissues was 2.21 folds higher than that in paracancerous tissues (P=0.020); significant correlation was found between tissue CK19 protein expression and tissue CK19 mRNA level (P=0.003), and great correlation was found between tissue CK19 protein expression and saliva Cyfra 21-1 concentration (P=0.051). CONCLUSIONS: The increased CK19 expression in OSCC tissues plays an important role in the increase of saliva Cyfra 21-1 concentration. Potential clinical value of saliva Cyfra 21-1 detection is suggested for OSCC. Further studies are encouraged to reveal the real diagnostic and prognostic value of detecting saliva Cyfra 21-1 concentration for OSCC.     

Overexpression of cytokeratin 17 protein in oral squamous cell carcinoma in vitro and in vivo

Objective:  To determine the cytokeratin 17 (CK17) expression in oral squamous cell carcinoma (OSCC) both in vitro and in vivo .
Methods:  Comparative proteomic analysis of an in vitro cellular carcinogenesis model of OSCC (including a line of human immortalized oral epithelia cells (HIOECs), a line of cancerous HB96 cells and another kind of cells (HB56 cells) at the early stage of carcinogenesis was performed to identify differentially expressed proteins. CK17 was further validated in vitro (cellular carcinogenesis model and other three OSCC lines) and in vivo (tissues from six healthy persons and 30 primary OSCC patients) by Western blotting and immunohistochemistry respectively.
Results:  Increased CK17 expression was identified by two-dimensional gel electrophoresis and liquid chromatography–tandem mass chromatography in the HB56 and HB96 cells over HIOECs. Western blotting confirmed the increased CK17 expression in the HB56, HB96 cells and other three OSCC lines. Immunohistochemistry confirmed the increased CK17 expression in the cancerous tissues from OSCC patients compared with the paired adjacent non-malignant epithelia.
Conclusion:  Increased CK17 expression may play an important role in the carcinogenesis progression of OSCC; however, further studies on the molecular function of CK17 are encouraged to clear the precise mechanism of CK17 in OSCC.     

口腔鳞癌与正常黏膜中细胞角蛋白基因13的表达

目的:研究细胞角蛋白基因13(cytokeratin13,CK13)在口腔鳞状细胞癌(oralsquamouscellcarcinoma,OSCC)组织中的表达及意义。方法:用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常黏膜中CK13mRNA的表达,同时用免疫组化方法检测CK13蛋白在OSCC及正常黏膜标本中的表达。所得数据采用Fisher确切概率计算法进行统计学处理。结果:RT-PCR检测结果表明,CK13mRNA在27例OSCC中的表达较其对照黏膜表达下调,平均下调4.2倍;免疫组化染色结果显示,CK13蛋白在正常口腔黏膜与肿瘤组织之间、高分化OSCC与中、低分化OSCC之间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在OSCC的发生、发展中,CK13基因的转录和表达水平发生明显变化,可能存在转录后水平的表达调控。CK13在OSCC分类诊断中有应用价值。     

口腔鳞癌组织中nm23—H1基因的mRNA表达及临床意义

目的 研究口腔鳞癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况及其与口腔鳞癌颈淋巴结转移的关系。方法 采用斑点杂交的方法检测８例口腔鳞癌，２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达情况。结果 ２例正常口腔粘膜中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达水平均较高；４例手术时无颈淋巴结转移的口腔鳞癌组织中３例ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ呈相对高表达，１例表达水平较低；而伴有颈淋巴结转移的４例口腔鳞癌组织中ｎｍ２３     

口腔鳞状细胞癌Fas基因表达与细胞凋亡关系的研究

目的　探讨Fas基因mRNA及蛋白表达水平与人口腔鳞状细胞癌细胞凋亡的关系。方法　应用Northern 杂交、双参数流式术(TUNEL法)检测人口腔鳞状细胞癌中Fas mRNA及蛋白的表达,鳞癌细胞的细胞周期与凋亡水平。结果　5例正常口腔黏膜标本中均有Fas mRNA及蛋白的表达。在口腔鳞癌组织中,Fas mRNA及蛋白的表达与口腔鳞癌组织病理学分级有关(P<0·005),与口腔鳞癌组织分化程度和凋亡指数呈正相关。结论　口腔鳞癌中 Fas基因的表达与组织病理学分级及细胞凋亡之间关系密切。     

半乳凝素1在口腔黏膜上皮癌变过程中的表达及意义

目的 探讨半乳凝素1( galectin-1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及临床意义,旨作为OSCC早期诊断的检测指标。方法分别采用实时定量聚合酶链反应(PCR)、蛋白质印迹法和免疫组化方法检测口腔黏膜上皮体外癌变模型、OSCC细胞系及30例原发OSCC标本中的半乳凝素1 mRNA及蛋白质的表达。结果半乳凝素1在永生化细胞系(humanimmortalized oral epithelia cell,HIOEC)中mRNA和蛋白相对表达量平均为0.071±0.023和0.118±0.046,与永生化细胞系HIOEC相比,半乳凝素1在所有检测的体外癌变模型和OSCC细胞系中mRNA和蛋白相对表达水平均升高,分别为0.141±0.049和0.504±0.33（P＜0.01）。30例OSCC组织中半乳凝素1 mRNA和蛋白相对表达量(0.059±0.034、1.5±0.68)均显著高于癌旁组织(0.029±0.012、0.4±0.56) (P＜O.01)。结论半乳凝素1在口腔黏膜上皮癌变过程中表达上调可能与OSCC的发生、发展有关,可作为OSCC早期诊断的检测指标。