多药耐药基因与细胞凋亡基因产物在非小细胞肺癌中的表达及其意义

 目的　检测非小细胞肺癌 (NSCLC)多药耐药相关基因及细胞凋亡基因的表达 ,探讨其表达的相关性及临床病理意义。方法　采用SP免疫组化法检测 113例NSCLC中多药耐药相关蛋白 (MRP)、谷胱甘肽巯基转移酶π(GST π)、肺耐药相关蛋白 (LRP)、突变型 p5 3和bcl 2的表达。 结果　NSCLC中MRP、GST π、LRP、p5 3和bcl 2的检出率分别为79.6 5 %、75 .2 2 %、80 .5 3%、6 1.95 %、5 9.2 9%。MRP、LRP和bcl 2的表达与组织学类型有关 (P <0 .0 5 )。p5 3与肿瘤细胞的分化程度有关 (P <0 .0 5 ) ,随着肿瘤细胞分化的恶性程度增加呈递增趋势。MRP与GST π、LRP表达之间 ,p5 3和bcl 2表达之间相关性有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　不同组织学类型NSCLC的多药耐药性各不相同 ,且其耐药性之间还存在一定的相关性。检测NSCLC的多药耐药性有助于指导肺癌的化疗。     

肺癌组织中耐药相关基因的表达水平及其临床意义

目的 探讨肺癌组织耐药相关基因产物的表达水平及其临床意义。方法 采用免疫组化法S－P对60例肺癌组织及30例癌旁肺组织中Pgp,MRP,GST-π，TopoⅡ进行检测。结果 肺癌组织中Pgp,MRP,GST- π，TopoⅡ表达阳性率分别为40．0％（24／60）、61．7％（37／60）、45．0％（27／60）、81．7％（49／60），均明显高于癌旁肺组织（P＜0．01），上述耐药相关基因表达阳性率与肺癌TNM分期、病理类型、细胞分化程度、淋巴结转移状态均无显著关系（P＞0．05）。结论 肺癌在癌变发生过程中其耐药相关基因均有不同程度的过度表达，联合检测这些基因的表达水平有助于指导化疗。     

肺癌组织多药耐药因子表达与临床病理的相关性研究

背景与目的 多药耐药是肺癌化疗失败的主要原因，也是化疗不能提高肺癌生存率的最大障碍。肺癌耐药机制复杂，其形成与多种耐药基因有关，联合检测多种耐药基因表达具有重要临床意义。本研究旨在探讨肺癌组织中五种多药耐药因子的表达、共表达及与患者临床病理特征的相关性。方法 采用微波EnVision免疫组化法联合检测72例肺癌患者癌组织中肺耐药蛋白（LRP）、P-糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽-S转移酶π（GST-π）、拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）及多药耐药相关蛋白（MRP）的表达水平。结果 LRP、P-gp、GST-π、TopoⅡ、MRP在肺癌组织中的阳性表达率分别为79．2％、86．1％、54．2％、29．2％、30．6％。不同性别的LRP、TopoⅡ表达明显不同（X^2-11．460、4．877，P-0．001、0．027）。非小细胞肺癌与小细胞肺癌的LRP、GST-π、TopoⅡ表达明显不同（X^2=15．104、14．076、9．409，P=0．001、0．001、0．009）。不同细胞分化程度的Gsrr-π表达明显不同（X^2=8．933，P=0．011）。不同T分期的TopoⅡ表达明显不同（X^2=3．963，P=0．049）。Spearman等级相关分析显示：LRP、TopoⅡ表达与性别相关（r=0．464、-0．205，P=0．000、0．027）；LRP、GST-Ⅱ、TopoⅡ表达与病理类型相关，非小细胞肺癌LRP、GSTⅡ表达高于小细胞肺癌（r=-0．390、-0．262，P=0．000、0．018），腺癌LRP表达高于鳞癌（r-0．604，P=0．000），鳞癌GST-π、TopoⅡ表达高于腺癌（r=-0．257、-0．264，P=0．015、0．012）；Gsrr-π表达仅与分化程度呈负相关，低分化或未分化者Gsrr-π表达率低于中高分化者（r=0．232，P=0．012）；TopoⅡ表达与T分期呈正相关（r=0．200，P=0．031），GST-π表达与T分期近似负相关（r=0．182，P=0．050）。耐药因子共表达的Spearman等级相关分析显示：LRP与P-gP、LRP与MRP、P-gp与GST-π、P-gP与MRP、GST-π与MRP呈正相关（r=0．283、0．234、0．453、0．204、0．323，P=0．002、0．011、0．000、0．027、0．000），共表达率分别为70．8％、27．8％、52．8％、29．2％、23．6％；LRP与TopoⅡ呈负相关（r=0．183，P-0．048），共表达率为19．4％。结论 肺癌组织表达多种耐药因子，各耐药因子间共表达具有明显相关性。多数耐药因子与T、N、M分期及临床分期无关，部分与性别、病理类型、分化程度相关。肺癌耐药由多种耐药基因共同参与，联合检测多项耐药因子有重要的临床意义。     

非小细胞肺癌中survivin、bcl-2和bax蛋白与多药耐药基因的表达及其相关性

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)中凋亡蛋白survivin、bcl2、bax与多药耐药有关基因MDR1mRNA和MRPmRNA的表达,探讨其相互关系及意义。方法选取113例NSCLC病例,采用原位分子杂交检测MDR1和MRP基因mRNA的表达,SP免疫组化法检测survivin、bcl2、bax蛋白的表达。结果113例NSCLC中,MDR1mRNA、MRPmRNA及survivin、bcl2、bax蛋白的检出率分别为51.3%、80.5%、79.6%、59.3%、54.9%。survivin和bax的表达与肿瘤分化程度有关(P<0.05),bcl2的表达与肿瘤组织学类型有关(P<0.01)。MDR1mRNA与MRPmRNA(P<0.01)、survivin与MDR1mRNA(P<0.05)、bcl2与MRPmRNA(P<0.05)表达之间存在明显相关性。结论凋亡抑制蛋白survivin的高表达和bcl2的过表达可能是导致NSCLC原发耐药的重要因素,检测survivin和bcl2对临床逆转NSCLC多药耐药性具有指导意义     

应用组织芯片研究肺癌多药耐药相关基因的表达及临床意义

背景与目的:肺癌的耐药性是影响肺癌化疗效果的重要因素,但是到目前为止,尚无有效的解决办法.本研究旨在通过检测耐药基因蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP),谷胱甘肽硫转酶(GST-π)在肺癌组织中的表达,探讨耐药基因间的相互关系及在临床中对肺癌诊断、治疗及患者预后的意义.方法:采用组织芯片技术制作226例肺癌组织及23例正常肺组织芯片,并用S-P法免疫组化检测组织芯片中耐药基因蛋白P-gp、MRP、LRP和GST-π的表达.结果:在226例肺癌组织中P-gp、MRP、LRP和GST-π表达的阳性率分别为46.O%、42.0%、54.4%、62.4%,正常肺组织中分别为17.4%、13.0%、17.4%、21.7%,两组间差异有显著性(P＜0.001);中高分化非小细胞癌与低分化非小细胞癌、非小细胞癌(NSCLC)与小细胞癌(SCLC)相比,差异有显著性(P＜0.05),其中中高分化非小细胞癌的阳性表达分别为59.7%、58.1%、73.6%、79.1%,低分化非小细胞癌分别为33.3%、22.8%、33.3%、47.4%,非小细胞癌分别为51.6%、47.3%、61.3%、69.4%,小细胞癌分别为20.0%、17.5%、22.5%、30.0%;P-gp、MRP、GST-π的阳性率由高到低依次为腺癌、鳞癌、小细胞癌,相对应临床化疗敏感性由低到高:术前化疗病例(84.1%、61.9%、69.8%、93.7%)高于未化疗者(31.3%、34.4%、48.5%、50.3%),两组间差异有显著性(P＜0.05);术后复发转移的P-gp和GST-π阳性率(55.7%、71.1%)高于无复发转移者(31.4%、47.1%),MRP、LRP虽然也高于后者,但差异无显著性(分别X2=3.08及1.37,P＞0.05).结论:肺癌耐药由多基因及多途径参与发生,联合检测肺癌组织中耐药相关基因的表达有助于判断化疗疗效及预后.应用组织芯片大规模高效检测肺癌组织样本是可行的.     

肺癌多种肿瘤耐药因子的表达及其临床意义

目的:探讨多种肿瘤耐药因子在肺癌的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法检测66例肺癌标本各种肿瘤耐药因子的表达水平。结果:1)突变型P53蛋白、P-糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱ1(TOPOⅡ1)的表达率分别为74.24%、45.45%、51.52%、81.82%、81.82%、83.33%。2)不同耐药因子在不同肺癌的表达具有不同的特点,特别是在表达强度方面NSCLC(非小细胞肺癌)与SCLC(小细胞肺癌)存在显著差异性(P<0.05);且表达强阳性与不同的病理类型、TNM分期、分化程度、淋巴结转移及预后方面均存在显著差异性(P<0.05)。3)各耐药因子之间的相关性分析表明:P53蛋白、Pgp、MRP、GST-π的表达之间存在着显著相关性,而LRP、TOPOⅡ1可能是相对独立的耐药因素。结论:肺癌组织肿瘤耐药因子的表达可能在一定程度上提示肺癌的化疗效果和预后。     

肺癌多药耐药因子共表达相关性及临床意义的研究

目的　探讨多药耐药因子在肺癌中表达与共表达的水平、相关性及临床意义。方法　采用免疫组化SABC技术检测 60例肺癌患者病理组织中P 糖蛋白 (P glycoprotein ,P gp)、多药耐药相关蛋白 (mul tidrug resistance associatedprotein ,MRP)、肺耐药蛋白 (lungresistanceprotein ,LRP)、谷胱甘肽 S转移酶π(GlutathioneS transferase ,GST π)等多药耐药因子的表达水平。结果　①P gp、MRP、LRP、GST π阳性表达率分别为 5 3 .3 %( 3 2 /60 ) ,63 .3 %( 3 8/60 ) ,70 .0 %( 4 2 /60 ) ,80 .0 %( 4 8/60 )。②耐药因子在不同病理类型中表达有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,在NSCLC中表达高于SCLC ;在不同TNM分期、不同分化程度间表达无显著性差异 (P >0 .0 5 )。③各耐药因子之间阳性共表达的结果分别为P gp +MRP :41.6%,P gp +LRP :3 5 .0 %,MRP +LRP :5 3 .3 %,MRP +GST π :5 0 .0 %,LRP +GST π :5 8.3 %,P gp +GST π :45 .0 %,P gp +MRP +LRP+GST π :2 0 .0 %。其中P gp与MRP间具有相关性 (rs=0 .75 6,P <0 .0 1) ,P gp与LRP间具有相关性 (rs=0 .689,P <0 .0 1) ,MRP与LRP间具有相关性 (rs=0 .669,P <0 .0 1) ,MRP与GST π间具有相关性 (rs=0 .5 46,P <0 .0 1) ,LRP与GST π间具有相关性 (rs=0 .848,P <0     

胃癌多药耐药表达与凋亡指数相关性

目的：研究多药耐药（multidrug resistance,MDR)基因表达与凋亡指数（apoptosis index,AI)在胃癌中的表达及与预后的关系,探讨它们之间相关性。方法：应用抗鼠抗人P-gp。GST-π和拓扑异构酶Ⅱ（topoisomeraseⅡ,ToPoⅡ）单克隆抗体对80例胃癌进行免疫组化研究,用Tunel法测定细胞凋亡指数。结果：AI、P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp)表达与临床分期呈正相关（P＜0.05),谷胱甘肽转移酶π（glutathione-s-transferase-π,GST-π）表达强度与生存期相关（P＜0.05),ToPoⅡ表达与组织分化程度相关（P＜0.05),其中P-gp表达与GST-π高度相关（P＞0.01)。GST-π与ToPoⅡ表达相关（P＜0.05),而细胞凋亡指数与MDR表达不相关（P＞0.05)。结论：MDR基因产物表达（P-gp,GST-π和ToPoⅡ）具相关性,但与Al不相关。MDR表达可能由一系列相同基因组调控,而细胞凋亡则可能属于不同基因调控系列。     

bag-1、bcl-2和bax在非小细胞肺癌中的表达和意义及其与化疗多药耐药相关性的研究

背景与目的 bag-1、bcl-2和bax均为凋亡相关蛋白,在肿瘤诊断、病情进展、转移潜能和耐药性以及预后评价等方面具有潜在价值.本研究拟研究bag-1、bcl-2和bax蛋白在非小细胞肺癌中的表达以及与非小细胞肺癌发生发展的关系,并且探讨其与肺癌化疗耐药的相关性.方法 采用免疫组化SP法对140例非小细胞肺癌组织(其中40例为新辅助化疗1个-2个周期后手术的非小细胞肺癌患者组织)与15例支气管扩张组织的石蜡切片标本进行bag-1、bcl-2和bax蛋白表达的检测.结果 非小细胞肺癌组织中bag-1、bcl-2蛋白表达水平高于肺良性病变组织(P<0.05),bax蛋白的表达水平低于肺良性病变组织(P<0.05);bag-1、bcl-2和bax蛋白表达水平与非小细胞肺癌患者的年龄、性别、组织学分类、P-TNM分期及淋巴结转移等均无明显相关性(P>0.05),但是bag-1与肺癌细胞分化程度相关,分化越差,bag-1阳性表达率越高(P<0.05);非小细胞肺癌中bcl-2蛋白表达与bag-1蛋白表达明显止相关(r=0.371)(P<0.01),bcl-2与bax蛋白呈明显负相关(r=-0.225)(P<0.01);新辅助化疗使bag-1和bcl-2蛋白表达水平都有一定水平的增高,但bax蛋白表达水平没有显著变化.结论 非小细胞肺癌组织中存在bag-1、bcl-2蛋白的高表达和bax蛋白的低表达;bag-1蛋白表达水平与非小细胞肺癌的分化程度有密切关系;非小细胞肺癌组织中bag-1表达水平与bcl-2间存在非常显著止相关,bcl-2与bax间存在显著负相关;本研究未观察到bag-1、bcl-2和bax与肺癌多药耐药性间的相关性.     

多药耐药基因在人体肿瘤组织中的检测及其意义

目的：探讨多药耐药基因产物p170糖蛋白在人体肿瘤组织中的表达及意义。方法：采用免疫组化LSAB法，对人体144例肿瘤做了p170检测。结果：人体多数肿瘤表达p170，表达率为64．58％(93／144)。其中高表达的肿瘤有大肠癌(45／73)、乳腺癌(17／l9)、甲状腺癌(5／6)、胃癌(6／l3)、膀胱癌(3／3)、食管癌(3／4)、卵巢癌(2／2)等。表达率与性别、年龄、淋巴结转移无明显关系。结论：多数人体肿瘤组织内存在多药耐药基因。开展该项检测对化疗药物的选择、效果的判断及预后具有重要的意义。     

肺癌中p53及nm23与多药耐药基因表达的相关分析及预后意义

目的探讨肺癌中p53和nm23与GST-Pi、ToPoⅡ、P-gp表达的相关性及预后意义.方法用免疫组化法对76例肺癌进行p53、nm23、GST-Pi、ToPoⅡ和P-gp检测分析,并随访.结果 76例肺癌中p53、nm23、GST-Pi、ToPoⅡ、P-gp的阳性表达率依次为76.3%、17.1%、51.3%、25.0%和15.8%.p53和nm23表达与GST-Pi、ToPoⅡ、P-gp三种耐药基因表达无关(P>0.05),与淋巴结转移相关(P<0.01).三种耐药基因的阳性表达与肺癌的组织学类型相关(P<0.05),与淋巴结转移及临床分期相关(P≤0.01),与性别、年龄无关(P>0.05).结论部分肺癌患者体内存在多药耐药基因(MDR1)或对GST-Pi、ToPoⅡ、P-gp介导的抗癌药物已产生耐药.p53及nm23在肺癌中的表达与多药耐药无关;与淋巴结转移呈负相关,对判断肺癌的预后有重要意义.肺癌中多药耐药基因的表达与组织学类型、淋巴结转移、临床分期相关.     

非小细胞肺癌耐药相关蛋白与PCNA、p53表达的相关性及其临床意义

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）组织中耐药相关蛋白及增殖细胞核抗原（PCNA）、p53的表达,探讨耐药相关蛋白与PCNA、p53表达的相关性及其临床意义。方法：采用免疫组化S-P法检测70例NSCLC的PCNA、p53、P170蛋白、肺耐药相关蛋白（LRP）、拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）及谷胱甘肽S转移酶π（GST-π）的表达。结果：PCNA、p53、P170、LRP、TopoⅡ、GST-π在NSCLC中的总阳性表达率分别为75．7％、60．0％、72．9％、67．1％、27．1％、78．6％。PCNA与p53间表达存在相关性（r=0．354,P=0．003）。P170在N分期（P=0．016）及TNM分期（P=0．018）中的表达存在显著性差异。LRP在组织学分型（P=0．000）及N分期（P=0．048）中的表达存在显著性差异。GST-π与病灶大小（P=0．002）、T分期（P=0．008）及TNM分期（P=0．028）中的表达存在显著性差异。Spearman等级相关分析显示p53与P170（P=0．003）、GST-π（P=0．003）的表达呈正相关。PCNA与各耐药因子的表达之间均无相关性（P〉0．05）。结论：肺癌组织耐药相关蛋白的表达与p53蛋白表达存在明显的相关性,而与PCNA无相关性,联合检测肺癌耐药相关蛋白和p53蛋白表达对肺癌的耐药预测及预后有一定的临床意义。     

Survivin、P53、Bcl-2蛋白与非小细胞肺癌临床病理因素的关系

目的探讨survivin、p53、Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理因素的关系。方法应用免疫组织化学法(SP)检测80例NSCLC肿瘤组织、20例肺良性病变组织中survivin、p53、Bcl-2蛋白表达情况。结果survivin、p53、Bcl-2蛋白在肺癌组织中的阳性表达率分别为61.3%(49/80)、55.0%(44/80)和50.0%(40/80),高于肺良性病变组织中的表达水平(P<0.05)。survivin蛋白的表达在不同的TNM分期之间有显著性差异,但与肺癌组织的细胞类型、分化程度及淋巴结转移无明显关系;P53蛋白的表达在不同的淋巴结转移情况之间以及在不同的TNM分期之间有显著性差异;Bcl-2蛋白的表达在不同的细胞类型之间有显著性差异(P<0.05)。肺癌组织中p53,Bcl-2蛋白与survivin蛋白表达显著相关(P<0.05)。结论survivin、P53、Bcl-2蛋白与肺癌的发生和发展密切相关,并可能起协同作用,其综合检测对肺癌的病情判断和预后评价具有一定价值。     

食管癌组织中P53、P-gp等蛋白的表达

目的检测食管癌组织中P53、多药耐药基因(mu ltidrug resistance gene1,MDR1)及其编码产物P-糖蛋白(p-glycoprote in,P-gp)、肺耐药蛋白(lung resistance prote in,LRP)、谷胱甘肽S-转移酶(glutath ione S-transferase,GST-π)、拓扑异构酶(topoisom eraseⅡ,TopoⅡ)的表达水平,探讨其与临床分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及病理分型的关系。方法采用免疫组织化学技术检测P53、MDR1、LRP、GST-π、TopoⅡ基因的表达水平。结果66例标本中,P53、MDR1、LRP、GST-π、TopoⅡ基因阳性表达率分别为65.2%(43/66)、97.0%(64/66)、84.8%(56/66)、60.6%(40/66)、37.9%(25/66)。食管癌不同组织学分级的TOPOⅡ表达率不同,高分化的表达率高于中低分化者,但不具显著性差异(P=0.05)。LRP的阳性表达率在不同浸润深度之间有显著性差异。P-gp的阳性表达率在溃疡型食管鳞状细胞癌中明显高于其他两种类型,有显著性差异,P=0.003。结论食管癌组织中P53、MDR1、LRP、GST-π、TopoⅡ基因存在高表达;肿瘤组织分化越高,TopoⅡ表达率越高;肿瘤浸润越深,LRP阳性表达率越高。这些检测对临床化疗药物选择可起一定指导作用。     

非小细胞肺癌非耐药蛋白基因表达与临床疗效关系的研究

目的探讨肺耐药蛋白（LRP）基因在非小细胞肺癌（NSCLC）气管镜活检组织或淋巴结活检组织中的表达与其临床疗效的关系。方法应用免疫组织化学S-P技术对19例非小细胞肺癌气管镜活检组织和28例肺癌转移的淋巴结活检组织进行LRP表达水平的检测,并观察其经NP方案化疗2个周期后的临床疗效。结果非小细胞肺癌LRP的表达阳性率为61.70%;在肺腺癌和肺鳞癌中的表达阳性率分别为76.92%和42.86%;LRP在两组间的表达有显著性差异（P〈0.05）。LRP表达水平在TNM分期中差异无显著性（P〉0.05）;经2个周期标准NP方案化疗后总有效率为42.55%,其中LRP表达阳性和阴性的临床有效率分别为24.14%和72.22%,两组间存在显著性差异（P〈0.05）。结论LRP在非小细胞肺癌中存在不同程度的表达,阳性者化疗疗效明显高于阴性者。     

乳腺癌C-erbB-2、P16基因蛋白表达与多药耐药的相关分析

目的 探讨乳腺癌中c—erhB-2、P16与GST-Pi、TOPOⅡ、PgP耐药基因表达的相关性。方法 采用即用型微波加热免疫组化法，对57例乳腺癌C—erbB-2、P16、GST-Pi、TOPOⅡ、PgP进行检测分析。结果 57例乳腺癌中c—erbB-2、P16、GST—Pi、TOPOⅡ、PgP阳性表达率分别为61．40％、36．84％、52．63％、24．56％、15．79％。浸润性导管癌对3种耐药基因有不同程度的阳性表达，较其它组织学类型的乳腺癌的耐药基因更为广基。乳腺癌C—erbB-2、P16、GST-Pi、TOPOⅡ、PgP阳性表达与年龄、临床分期、腋下淋巴结转移无明显关系。结论 乳腺癌产生多药耐药性可能与c—erbB-2、P16异常表达相关。C—erbB-2、P16异常表达可能是乳腺癌产生多药耐药的因素之。部分乳腺癌患者体内存在多项耐药基因或癌细胞内原发存在对GST-Pi、TOPOⅡ、PgP介导的抗癌药物已产生耐药性。     

Bcl-2及端粒酶在非小细胞肺癌组织中的表达

目的研究Bcl-2及端粒酶异常在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及相互关系并探讨其与NSCLC临床病理特征的关系。方法用改良的端粒重复扩增法(telomericrepeatamplificationprotocol,TRAP)方法(TRAP-PCR-ELISA)检测NSCLC组织端粒酶表达,用免疫组织化学法检测NSCLC组织Bcl-2蛋白表达。结果在84例NSCLC中,Bcl-2蛋白阳性表达率为44.5%。无淋巴结转移者Bcl-2表达明显高于有淋巴结转移者(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ期Bcl-2表达阳性率高于Ⅲ期(P<0.05)。端粒酶活性阳性率为86.7%,端粒酶活性与肿瘤大小、淋巴结有无转移显著相关(P<0.01和P<0.05))。此外,不同组织学分级、不同TNM分期端粒酶活性阳性率差异有显著性。端粒酶活性与Bcl-2表达无相关性(P>0.05)。结论对NSCLC组织中Bcl-2及端粒酶同时进行检测,对临床早期诊断及判断预后有重要意义。     

肺癌细胞中survivin与P53的相关性

目的：观察survivin特异性小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）对P53野生型和乃3缺失型肺癌细胞株的生长抑制作用，分析肺癌细胞中survivin与乃3的相关性。方法：以化学合成的survivinsiRNA转染丹3野生型肺癌细胞株A549和P53缺失型肺癌细胞株H1299，用MTF法检测转染前后肺癌细胞的增殖情况，流式细胞术分析细胞周期和凋亡的改变，半定量RT—PCR检测转染对survivinmRNA表达的影响，Westernblotting检测survivin、PARP、P21、P53等蛋白表达的变化。结果：siRNA转染前A549细胞中survivin表达量明显低于H1299细胞（P〈0．05）。SurvivinsiRNA转染组两种细胞survivin蛋白及RNA表达水平均显著低于对照组和无关干扰组（P〈0．01）。SurvivinsiRNA对A549和H1299细胞生长抑制作用均呈浓度依赖性（P〈0．05），但对H1299细胞的抑制起效晚于A549，且抑制程度低于A549细胞。转染后A549和H1299细胞均有G1期比例增加和S期比例相应地减少，H1299细胞的变化更为显著。A549细胞有一定比例出现凋亡，PARP发生了裂解，P53、P21蛋白表达增加，而H1299细胞中上述指标的变化却不明显。结论：P53野生型A549细胞内源性survivin表达明显低于P53缺失型H1299细胞；抑制survivin能上调P53蛋白表达，其对A549细胞的生长、凋亡和P21等蛋白表达的影响明显强于H1299细胞；提示survivin与P53之间可能存在着相互抑制作用。     

VEGF、Ki-67和P53在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的 检测VEGF、Ki-67和P53在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及临床意义。方法 采用免疫组化方法检测78例NSCLC组织中VEGF、Ki-67和P53的表达情况,并结合肺癌的临床病理特征进行分析。结果 VEGF在NSCLC中的阳性表达率为67%(52/78),Ki-67在NSCLC中的阳性表达率为71%(55/78),P53在NSCLC中的阳性表达率为50%(39/78),它们的表达情况均与肿瘤组织的分化程度及临床分期有关(P＜0.05),与肺癌的组织学分型、有无淋巴结转移及年龄无关(P＞0.05),肿瘤组织分化越差、临床分期越晚者三者表达的阳性率越高。VEGF、Ki-67和P53表达阳性者总生存时间明显差于阴性表达者(P＜0.05)。结论 VEGF、Ki-67和P53与肺癌的发生、发展有关,对于判断非小细胞肺癌的预后及指导治疗有重要的参考意义。