胆汁泡蛋白酶联免疫吸附检测法的建立与初步临床应用

目的　建立胆汁泡蛋白快速检测法 ,作为防治胆石症临床研究的指标。方法　提取 3 3 .5kd胆汁泡蛋白 ,建立酶联免疫吸附检测法 (ELISA)标准曲线 ,并应用ELISA药盒测定正常人、胆石症患者胆汁和血清中泡蛋白含量 ,同时观察利胆冲剂、胆通胶囊等对泡蛋白的影响。结果　ELISA曲线方程为Y =0 .0 3 5X(r=0 .99) ;胆固醇性结石组胆囊胆汁和血清 3 3 .5kd泡蛋白含量分别为 (2 13 .4± 70 .1)mg/L、(179.8± 97.9)mg/L ,明显高于胆色素性结石症、非胆石症胆道疾病组以及正常人组 (P <0 .0 5) ,而后三者之间没有显著差异 (P >0 .0 5) ;利胆冲剂治疗两周后 ,胆汁和血清泡蛋白含量显著降低 ,而对照组和胆通胶囊治疗组未见明显变化。结论　胆汁泡蛋白的含量在不同人群差异显著 ;利胆冲剂等药物能降低胆汁和血清 3 3 .5kd泡蛋白含量 ,改变胆汁致石性     

胆宁片对胆石症患者胆汁成分和成石趋势的影响

目的研究胆宁片对胆石症患者胆汁成分和胆汁成石趋势的影响。方法将60例胆石症患者随机分成胆宁片组、熊去氧胆酸(UDCA)组及对照组,测定术中、术后胆汁总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、胆固醇(CH)、磷脂(PHL)和总胆盐(TBS)含量,并计算出各组应用成石指数(L.I.)、间接胆红素百分比(UCB%)和胆汁成石趋势综合值(Z值)的变化。结果术后第5天,3组间胆汁各成分及L.I.、UCB%、Z值的差异均无统计学意义(P值均>0.05),且Z值始终>临界值(44.7)。UDCA组、对照组术后第5天与术后第19天的胆汁各成分含量及UCB%、L.I.、Z值的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。与术后第5天相比,胆宁片组术后第12天胆汁中CH含量明显下降(P<0.05),TBS和PHL的含量明显升高(P值均<0.05),UCB%明显降低(P<0.05);术后第19天,胆宁片组的UCB%、L.I.和Z值均明显下降(P值均<0.05),其中Z值<临界值。结论胆宁片具有调节胆汁成分的作用,从而抑制胆石形成的趋势。     

胆石症患者与正常人胆汁33500泡蛋白成核活性的比较

目的比较胆石症患者与正常人的胆汁33 500泡蛋白成核活性。方法利用超速离心法从正常人及胆石症患者胆汁中纯化33 500泡蛋白,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定其纯化效果。通过Holan法测定成核时间,计算成核活性。结果胆石症患者的33 500泡蛋白平均成核时间为(3.8±0.7)d,成核活性中位数达0.303,具有强促成核作用,能显著缩短成核时间,促进胆固醇结晶形成。而正常人促成核作用较弱,平均成核时间为(8.4±0.9)d,成核活性中位数仅为0.667。胆石症患者与正常人胆汁33 500泡蛋白平均成核时间及促成核活性的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论与正常人相比,胆石症患者的胆汁33 500泡蛋白促成核活性明显增强。     

胆宁片调节肠道菌群移位消除胆道炎症及预防胆石形成的临床评价

目的 探究胆宁片对肠道菌群移位消除胆道炎症及预防胆石形成的机制.方法 收集2016年1月至2016年12月西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科收治的胆石症住院患者104例, 均因胆总管结石行但总管切开取石并T管引流术, 术前1个月内未服用利胆药物.随机分为胆宁片组和对照组, 胆宁片组除按胆道术后常规处理外, 于术后第2天开始进食流质后按说明书剂量给以口服胆宁片;对照组仅给予胆道术后常规护理, 避免服用利胆类药物.所有患者分别于术后第7天和第14天, 收集清晨空腹T管胆汁约100 m L.注意收集胆汁前1 d预先夹闭T管, 以防T管引流影响胆汁肝肠循环.检测胆汁中的菌群成分, 观察手术前后菌群差异.长期随访胆石症复发状况.结果 各组分在治疗前后的变化:第7天治疗组在HS和UCB%两项均高于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) .第14天治疗组在TBS、UCB%、HS三项均高于对照组, 但CH、LI和Z三项均低于对照组, 差异有统计学意义 (P<0.05) .治疗前后成石趋势:对照组组内比较UCB%、LI和Z均无明显变化, 但HS值下降, 差异有统计学意义 (P<0.05) .治疗组组内HS、UCB%均无明显变化, 但LI和Z值下降, 差异有统计学意义 (P<0.05) .结论 胆宁片可以在术后短期内通过调节肠道菌群, 影响胆汁中胆固醇含量, 从而抑制胆石成石趋势, 起到预防胆固醇结石的作用.     

熊去氧胆酸联合胆宁片对胆石症患者胆汁成分和成石趋势的影响

目的:探讨熊去氧胆酸联合胆宁片对胆石症患者胆汁成分和成石趋势的影响。方法:选择60例胆石症患者随机分为对照组和观察组两组,对照组采用熊去氧胆酸(UDCA)治疗,观察组采用熊去氧胆酸片联合胆宁片治疗,分别测定两组患者术后第1天、7天和14天的总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、胆固醇(CH)、磷脂(PHL)和总胆盐(TBS)含量,计算和比较致石指数(L.I.)、间接胆红素百分比(UCB%)和胆汁成石趋势综合值(Z值)的变化情况。结果:术后第1天和第7天两组的L.I.、UCB%和Z值间差异均无统计学意义(P>0.05),且Z值均>临界值(44.7);术后第14 d,观察组胆汁L.I.、UCB%以及Z值均明显下降,且Z值<临界值,差异均具有统计学意义(P<0.05);随访6个月后,联合治疗组的胆石复发率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:熊去氧胆酸联合胆宁片可有效调节胆汁成分,抑制胆石形成,降低结石复发,值得临床推广。     

脾切除对大鼠肠黏膜屏障的影响

目的 探讨脾脏在肠黏膜屏障中的作用及其机制.方法 60只Wistar大鼠随机分6组,每组10只.正常对照组,假手术组,实验A、B、C、D组分别于脾切除术后7、30、60、90 d用乳果糖/甘露醇(L/M)比值检测肠黏膜通透性,采用免疫组织化学、Western blot法检测末端回肠紧密连接蛋白闭锁小带-1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)、壳牢素-1(C1audin-1)的表达,并利用图像分析系统对Western blot图像进行定量分析.结果 对照组的L/M比值为(0.308 ±0.082);脾切除术后7 d L/M比值降至(0.145±0.061)(P=0.003),术后30和60 d的L/M比值分别为(0.266±0.097)和(0.256±0.086),与对照组相比差异没有统计学意义;术后90 d L/M比值为(0.139±0.071)较对照组明显下降(P=0.001).免疫组化检测结果显示,术后7、30、60 d的ZO-1强阳性表达(5/10,6/9,6/10)与对照组(8/10)相比,差异均无统计学意义;术后90 d强阳性表达(2/8)下降明显(P=0.03).术后7、30、60 d的Occludin染色强阳性表达(4/10、4/9和5/10)与对照组(9/10)相比,差异无显著性意义;术后90 d组强阳性表达(3/8)下降明显(P=0.03).实验各组的Claudin-1染色强度与对照组相比差异均无统计学意义(均P＞0.05).对Western blot显影图像进行定量分析,ZO-1的灰度值术后90 d下降明显(P=0.03),Occludin的灰度值术后30、90 d下降明显(P=0.03和0.02),而C1audin-1的灰度值各组间差异均没有统计学意义(均P＞0.05).结论 脾切除短期内和一段时间后能降低大鼠肠黏膜通透性,术后90 d能明显降低紧密连接蛋白ZO-1、Occludin的表达,而对C1audin-1的表达没有影响.脾脏影响肠黏膜屏障与改变紧密连接蛋白有关.     

促成核泡相糖蛋白的分离、纯化及理化性质研究

目的提纯胆汁泡相糖蛋白并研究其理化性质。方法应用超速离心法结合高效液相层析(HPLC)分离纯化胆汁泡相糖蛋白,体外观察成核活性,并检测泡相糖蛋白的相对分子质量和化学组成。结果胆汁泡相糖蛋白Mr约为33500,具有较强的促成核功能,成核活性达0．31。泡相糖蛋白由多肽和寡糖组成,糖-肽键为N-连接方式,其中多肽Mr约为21000,含153个氨基酸,包括97个极性氨基酸和56个非极性氨基酸。糖链约占总蛋白含量的37．3％,为核心岩藻糖丰富的多天线复杂型聚糖。肽链N-末端氨基酸序列为H2N-天冬-天冬酰胺-丝-谷氨酰胺-组-精-酪-缬-苯丙-异亮氨酸。结论胆汁泡相糖蛋白是一种新的促成核活性因子,在胆固醇性结石的早期发生阶段可能起重要作用。     

参附注射液辅助治疗重型颅脑损伤行开颅手术患者的效果

目的：探讨参附注射液辅助治疗重型颅脑损伤(SCI)行开颅手术患者的效果。方法：按随机数字表法将内江市第一人民医院2018年1月-2019年12月收治的行开颅手术治疗的60例SCI患者分为对照组30例(术后常规治疗)与参附组30例(在对照组基础上加用参附注射液)。对比两组格拉斯哥昏迷指数(GCS)及甘露醇使用天数、血清S100β蛋白及神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平、并发症、术后6个月预后情况。结果：参附组甘露醇使用天数及术后意识觉醒时间均短于对照组(P<0.05);术后7、14、28 d,两组GCS评分均升高,且参附组均高于对照组(P<0.05)。术前,两组血清S100β蛋白、NSE水平对比,差异均无统计学意义(P>0.05);术后24、48、72 h,两组S100β蛋白、NSE水平均降低,且参附组均低于对照组(P<0.05)。两组并发症发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。参附组格拉斯哥预后(GOS)评分高于对照组(P<0.05)。结论：参附注射液辅助治疗SCI可有效减轻脑组织损伤,促进患者术后意识恢复,改善短期预后,并能减少甘露醇的使用...     

Ad-CTLA-4Ig基因导入对胰十二指肠移植大鼠免疫耐受的实验研究

目的 研究基因转导法导入细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4融合蛋白基因(CTLA-4Ig)对诱导大鼠胰腺移植免疫耐受的作用.方法 采用链脲霉素60 mg/kg尾静脉一次性注射法诱导建立Wistar大鼠Ⅰ型糖尿病模型.以SD大鼠为供体,糖尿病Wistar大鼠为受体,用体外低温保存状态下对供器官行腺病毒介导CTLA-4Ig基因转导制作异基因大鼠胰十二指肠移植动物模型.术后监测血糖,记录大鼠功能性存活期.术后3、10、17、28d经大鼠眶后静脉取血,应用ELISA法检测血清IL-2表达,Western blot检测人CTLA-4Ig的蛋白表达.结果 对照组大鼠功能性存活期为(11±1)d,转导组功能性存活期为(33±4)d(P＜0.01);对照组大鼠术后血清中未检测到人CTLA-4Ig蛋白表达,所有转导组存活病例,第10d血清中均有人CTLA-4Ig表达;转导组术后第3d、第10d血清IL-2分别为(33.710±7.803) pg/mL、(47.846±14.050) pg/mL,小于对照组(P＜0.01).结论 体外低温保存状态下对供器官行腺病毒介导人CTLA-4Ig基因转导,可以延长大鼠胰十二指肠移植术后功能性存活期,诱导免疫耐受.     

高糖通过ERK1/2途径调节足细胞产生明胶酶B

目的探讨高糖持续刺激对足细胞培养上清液明胶酶活性、Ⅳ型胶原的影响及可能的信号途径.方法小鼠足细胞系分为正常糖组、高糖组和甘露醇高渗对照组.应用明胶酶谱法观察三组细胞培养液上清明胶酶活性的动态变化,Western印迹分析法检测细胞培养液上清中Ⅳ型胶原α5链蛋白水平及足细胞ERK信号途径活化的变化.RT-PCR方法检测MMP-9 mRNA的表达.结果正常糖组和甘露醇高渗对照组培养液上清MMP-2和MMP-9活性在10天实验时间内无明显变化.高糖组细胞培养液上清MMP-2的活性没有明显变化;MMP-9活性于第2天开始升高,第3天达高峰为正常糖组的144.2±18.7%(P=0.006),第5天下降,第7天回到基础水平为正常糖组的76.6%±16.4%(P=0.218),直至第10天.足细胞培养上清中有较高基础水平的Ⅳ型胶原α5链蛋白;高糖组细胞培养上清Ⅳ型胶原α5链蛋白表达第2天开始下降,第3天达最低水平41.9%±25.5%(P=0.047),第5天回升到基础水平持续至第7天.上清MMP-9的活性与Ⅳ型胶原α5链蛋白的表达量呈负相关(r=-0.577,P=0.006).正常糖组和甘露醇高渗对照组细胞培养上清Ⅳ型胶原α5链蛋白无变化.高糖刺激足细胞2天MMP-9 mRNA水平增加为正常糖组的199.8%±40.2%(P=0.003),刺激5天时为正常糖组的90.9±8.8%(P=0.411).高糖刺激足细胞30 min可以活化ERK1/2,6 h达高峰,持续至24 h,48 h降至基础水平;在足细胞上未能检测到p38和JNK活化.ERK活化特异抑制剂PD98059预处理细胞后,能阻断高糖引起的MMP-9的活性和MMP-9 mRNA增加及Ⅳ型胶原α5链蛋白的下降.结论ERK信号传导途径介导了高糖刺激足细胞MMP-9生成及相应的Ⅳ型胶原α5链蛋白动态反向改变.     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用

目的观察芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用。方法30只Long-Evans大鼠用动脉结扎法造成视网膜缺血模型,其中治疗组20只腹腔注射芹黄素,对照组10只注射溶媒二甲基亚酚。用视觉电生理仪检查视网膜功能恢复情况。结果芹黄素治疗组视网膜功能恢复明显好于对照组(P<0.05)。结论芹黄素能促进大鼠缺血视网膜的功能恢复。      

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。