糖皮质激素在烧伤脓毒症骨骼肌蛋白代谢中作用的研究

目的　探讨糖皮质激素在烧伤脓毒症骨骼肌蛋白代谢中的作用及其机制。　方法　大鼠随机分为 4组 ,每组 1 5只 :B组大鼠 30 %Ⅲ度烫伤后立即腹腔注射内毒素 6mg/kg,模拟烧伤脓毒症 ;C组于伤前 2h ,D组于伤后 2h分别使用糖皮质激素受体拮抗剂RU38486灌胃 (1 0mg/kg) ,余处理同B组 ;A组为假伤组 ,并使用等量的生理盐水替代内毒素。伤后 1 2h ,测定血浆皮质醇浓度 ,称重和离体有氧孵育伸趾长肌 ,高效液相色谱法测定肌组织蛋白降解率 ,Northern杂交检测伸趾长肌泛素、E2 1 4kDa和C2mRNA的表达变化。　结果　伸趾长肌重量 ,B组较A组明显降低 ,差异有显著意义 (t=9 0 3 ,P <0 0 1 ) ;而C组和D组虽然低于A组 ,但显著高于B组 ,差异有显著意义 (t=2 2 6 ,6 42 ,P <0 0 5或P <0 0 1 )。血浆皮质醇浓度 ,B ,C和D组都明显高于A组 ,差异有显著意义 (t=9 0 3 ,2 2 94,P <0 0 1 )。蛋白降解率 ,B组总蛋白和肌纤维蛋白降解率较A组分别升高 58 8% (2 1 0 / 357)和335 5 % (4 1 6/ 1 2 4 ) ,差异有显著意义 (t=36 99和t=46 1 9,P <0 0 1 ) ;C组总蛋白和肌纤维蛋白降解率较B组分别减少 2 8 3 % (1 61 / 567)和 49 6 % (2 68/ 5 40 ) ,D组较B组分别减少 1 8 9% (1 0 8/ 567)和2 3 2 % (1 2 5/ 5 40 ) ,差异有显著     

糖皮质激素受体、激素抵抗与重度脓毒症

糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)在临床上广泛用于炎症性疾病的治疗,同时具有抗休克、抗感染、免疫调节等作用。GCs通过糖皮质激素受体(glucocortieoid receptor,GR)的介导起作用。重度脓毒症是一种典型的全身性炎症反应,机体对儿茶酚胺类(CA)反应低下,静脉给予应激剂量GCs时,能改变病情。本文就GR的功能及Gcs应用于脓毒症治疗的利弊进行综述。     

盲肠结扎穿孔法脓毒症大鼠的骨骼肌蛋白代谢规律研究

目的:观察盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法建模脓毒症大鼠的骨骼肌蛋白代谢规律,寻求适合脓毒症高代谢状态的研究方法。方法:用CLP法建立稳定的脓毒症大鼠模型,于各观察时间点(0、2、4、8、12、24 h)离体培养大鼠伸趾长肌,高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)测定总蛋白和肌纤维蛋白降解率。结果:CLP术后大鼠一般状态恶化,体重减低,代谢性酸中毒,内毒素水平进行性增高(P<0.01);病理检查显示肝脏、肾脏细胞坏死,骨骼肌细胞断裂;CLP术后大鼠总蛋白、骨骼肌蛋白代谢率随时间延长进行性增高(P     

高迁移率蛋白-1在脓毒症大鼠肺中的表达

目的探讨脓毒症大鼠肺组织中高迁移率蛋白-1(HMG-1)的表达。方法 50只SD 大鼠随机分为对照组(10只)和试验组(40只),使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺与空肠组织HMG-1 mRNA的表达,采用Western blot法检测HMG-1蛋白的表达。结果试验组肺、空肠组织中HMG-1 mRNA表达量明显高于对照组(0．866±0．026 vs 0．232±0．009和0．859±0．053 vs 0．227±0．025,P<0．05),试验组肺组织中HMG-1蛋白表达量明显高于对照组(1．060±0．036 vs 0．360±0．006,P<0．05),但各亚组之间差异无统计学意义(P>0．05);空肠组织中HMG-1蛋白表达量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0．05)。结论 HMG-1可能是炎症反应的重要介质,在炎症反应的持续发展过程中起一定作用。     

糖皮质激素性骨质疏松症骨代谢特征分析

目的 探讨糖皮质激素性骨质疏松症（glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP）患者的骨代谢特点,为继发性骨质疏松症鉴别诊断及GIOP治疗药物选择提供依据。方法 选取2019年6月至2021年6月收住福建省立医院的研究对象共88例,分为GIOP组（48例）和正常对照组（40例）。收集两组一般临床资料、骨代谢生化指标、钙调激素及骨密度,分析两组间各项指标的差异有无统计学意义,分析GIOP组生化指标、钙调激素与骨代谢的相关性。结果 GIOP组患者的骨形成指标总I型胶原氨基酸延长肽（tPINP）水平较正常对照组更低,具有显著性差异。GIOP组中,Pearson相关分析显示,tPINP分别与β-胶原特殊系列（r=0.509,P＜0.01）、骨钙素(r=0.750,P＜0.01)、磷（r=0.294,P＜0.05）呈正相关;骨钙素分别与β-胶原特殊系列 (r=0.524,P＜0.01)、磷（r=0.403,P＜0.01）呈正相关;甲状旁腺素与磷（r=-0.439,P＜0.01）呈负相关。结论 骨形成减少可能是GIOP的重要发病机制之一,选择促进成骨细胞活性或者抗成骨细胞凋亡药物可能会提高GIOP患者的疗效。     

脓毒症大鼠高迁移率族蛋白-1基因表达及其与内毒素血症的关系

目的观察脓毒症时高迁移率族蛋白 1(HMG 1)基因表达的变化及其与内毒素血症的关系。方法采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)造成脓毒症模型。 10 0只动物随机分为正常对照组 (10只 )、假手术组 (10只 )、CLP组 (6 0只 )及重组杀菌 /通透性增加蛋白 (rBPI2 1)治疗组 (2 0只 )。留取肝、肺及肾组织标本分别检测HMG 1mRNA表达及内毒素水平。结果CLP术后 6～ 72h肝、肺及肾组织HMG 1mRNA表达均不同程度增强 (P <0 0 5 )。rBPI2 1治疗后 12h肝、肺及肾组织内毒素水平分别为3 1± 0 8、2 6± 0 3、2 4± 0 4EU/g ,均明显低于CLP组 (5 2± 0 8、5 0± 0 8、14 2± 4 0EU/g ,P <0 0 5 ) ;同时 ,12h肝、肺、肾组织和 2 4h肝组织HMG 1mRNA表达明显受抑制 (P <0 0 5 )。CLP后肝、肺、肾组织HMG 1mRNA表达分别与相应组织内毒素水平呈显著正相关 (r =0 2 90 ,P <0 0 5 ;r =0 4 5 5 ,P <0 0 5 ;r=0 2 87,P <0 0 5 )。结论脓毒症时细菌内毒素持续侵入血循环 ,并蓄积于局部组织 ,参与了HMG 1的诱生 ,并可在基因水平调控其表达     

用糖皮质激素治疗脓毒症要把握正确的时期

最近,重新提出应用糖皮质激素(GC)治疗重症脓毒症、感染性休克和ARDS的问题。采用双盲随机应用GC治疗感染性休克和未好转的ARDS病人,这三组延长用药的病人均获得迅速和显著的临床效果。与过去的GC治疗进行比较,有3个主要的不同:①最近的试验表明,若自发病的2～10d投药,则无疗效;②过去给药的每日剂量,是近日试验剂量的5～140倍;③过去给药是每6h,1～4次;现在为了达到疾病消退,需要时可延长给药5～32d。虽然,这次随机研究的病人例数较少,但与过去大人群的疗效对比,已达到统计学上的显著性,足以反映这种疗法是有效的。尽管小样本还不能就此良好的结果作出肯定的评价。     

线粒体在脓毒症期间的代谢特点

目的 阐述线粒体在脓毒症期间的代谢特点并综述其细胞机制,为脓毒症的治疗提供新的思路。方法 对脓毒症期间线粒体代谢情况的既往文献和最新研究结果进行综述。结果 目前研究者们对于脓毒症的关注已不仅局限于炎症反应,还包括其导致的全身性代谢紊乱。目前观点认为,脓毒症导致的线粒体损伤是患者细胞代谢紊乱的主要原因之一。在脓毒症期间,患者的物质代谢发生改变,包括有氧糖酵解增加、乳酸堆积、血中脂肪酸和甘油三酯水平升高等。结论 脓毒症期间的代谢改变与线粒体息息相关,这可为脓毒症的治疗提供新的思路。     

高迁移率族蛋白B1 mRNA在脓毒症大鼠脾脏中的表达

目的：探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）mRNA在脓毒症大鼠外周免疫器官脾脏的表达规律及其与血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的关系。方法：采用盲肠结扎穿孔（CLP）方法制备大鼠脓毒症模型。83只大鼠随机分为正常对照组（10只）、盲肠结扎穿孔组（38只）,盲肠结扎穿孔丙酮酸乙酯治疗组（35只）。分别于CLP术后4、12、24、48、72h或CLP术后丙酮酸乙酯治疗12、24、48、72h活杀动物,留取脾脏组织和血清标本,用半定量逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测脾脏组织HMGB1mRNA的表达规律,用放射性免疫方法检测血清TNF-α和IL-6的浓度。结果：HMGB1mRNA在正常大鼠脾脏组织有轻度表达,CLP术后表达显著增强（P〈0.05）。CLP术后24h和72h分别出现两个高峰。丙酮酸乙酯液治疗可显著降低CLP术后大鼠脾脏组织HMGB1mRNA的表达（P〈0.05）。CLP术后大鼠血清TNF-α和IL-6浓度显著增高（P〈0.05）,丙酮酸乙酯治疗可显著降低CLP术后大鼠TNF-α和IL-6的浓度（P〈0.05）。结论：HMGB1在脓毒症大鼠外周免疫器官脾脏的表达显著增高,并与血清TNF-α和IL-6等炎症因子的增高有重要关系;HMGB1参与了失控性炎症反应的发展过程。     

脓毒症大鼠肾脏AQPs动态变化与水代谢的关系

目的：探讨肾脏AQPs的表达与肾损伤水代谢紊乱的关系。方法：Wistar大鼠采用盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症大鼠模型。观测尿量、尿渗透压和肾功能。免疫组化方法检测AQP1、AQP2蛋白水平,实时荧光定量PCR方法检测AQP1mRNA、AQP2mRNA水平。结果：手术组大鼠肾脏AQP1蛋白及AQP1mRNA表达随着CPL术后时间的延长呈下降趋势,6h开始下降,24h达最低;AQP2蛋白及AQP2-mRNA表达均在术后3h增高、12h、24h明显降低,较假手术组差异有统计学意义（P〈0.05）。大鼠肾脏AQP1、AQP2分别与尿量呈负相关（P〈0.05）,与尿渗透压呈正相关（P〈0.05）。结论：AQP1和AQP2基因通过调节AQP1、AQP2蛋白的表达,参与肾脏水代谢的调节;AQP1、AQP2蛋白及基因的表达异常是导致脓毒症肾损伤水代谢紊乱的重要原因。     

脓毒症大鼠多器官高迁移率族蛋白B1基因表达的信号机制与意义

目的探讨Janus激酶／信号转导和转录激活因子（JAK／STAT）通路对盲肠结扎穿孔术（CLP）所致脓毒症大鼠多器官高迁移率族蛋白B1（HMGBl）基因表达的影响及其意义。方法采用CLP模型,大鼠随机分为正常对照组（10只）、假手术组（10只）、CLP组（60只）、JAK2抑制剂AG490干预组（24只）、STAT抑制剂雷帕霉素（RPM）干预组（24只）。留取肝、肺、肾、肠组织测定HMGB1mRNA表达和STAT1／3的DNA结合活性。结果CLP后,肝、肺、肾、肠组织中STATl在脓毒症早期即迅速活化,6-12h后活化达高峰。肝、肺组织中STAT3的活化特点与STAT1相似,但相对较弱;在肾、肠组织中未探测到STAT3的活化。同时,CLP组除肾组织HMGB1mRNA表达改变不明显外,肝、肺、肠组织其表达均明显增强（P＜0．05或P＜0．01）。AG490早期处理后24—48h,肝、肠组织HMGB1mRNA表达显著低于CLP组（P＜0．05或P＜0．01）;RPM干预组肝、肺、肠组织HMGB1mRNA表达均呈现不同程度地抑制,其中以肺组织下降幅度尤为明显。结论严重腹腔感染可导致机体主要脏器JAK／STAT通路迅速活化,该信号途径参与了HMGB1mRNA的表达调控过程。     

脓毒症大鼠肾脏高迁移率族蛋白-1与肿瘤坏死因子表达的关系

新近的研究提示 ,高迁移率族蛋白 1(highmobilitygroup 1protein ,HMG 1)作为晚期炎症介质 ,可能参与了脓毒症及其介导急性肝、肺损害的病理生理过程[1-3 ] 。本实验采用盲肠结扎穿孔法 (CLP)造成大鼠脓毒症模型 ,对肾组织HMG 1mRNA表达的改变及其与肿瘤坏死因子 (TNF)的关系进行了初步探讨。一、材料与方法1.动物分组及模型 :雄性Wistar大鼠随机分为 3组 :(1)正常对照组 (10只 ) ;(2 )盲肠结扎穿孔组 (2 0只 ) :动物麻醉后 ,沿腹正中线切开 ,在盲肠根部结扎盲肠。用 18号针穿刺盲肠 3次 ,并留置一条宽 2mm的橡皮片贯通盲肠 ,防止针…     

高迁移率族-1 蛋白在烫伤后金葡菌脓毒症中的改变与意义

目的 探讨高迁移率族－1（HMG－1）蛋白在烫伤后金黄色葡萄球菌（简称金葡菌)脓毒症中的变化规律及其调控机制。方法 采用大鼠20％体表面积Ⅲ度烫伤复合金葡菌攻击所致脓毒症模型。70只动物随机分为正常对照组（n=10）、烫伤对照组（n＝10）和烫伤后金葡菌感染组（n＝50）,留取肝、肺组织检测HMG－1及脂多糖结合蛋白（LBP）mRNA表达 ,同时测定组织中金葡菌肠毒素B（SEB）和内毒素含量。结果 烫伤后金葡菌感染可导致动物肝、肺组织HMG－1基因表达明显升高,于伤后6－12h达峰值（P＜0．05－0．01）,至24h仍持续于较高水平。相关分析显示,肝、肺组织LBP基因表达与相应脏器HMG－1mRNA表达呈显著正相关（分别为r＝0．800,P＝0．031和r＝0．942,P＝0．002）,但内毒素与之无明显相关性。结论 烫伤后金葡菌感染可导致动物体内HMG－1基因表达上调,后者作为“晚期炎症介质”可能参与了脓毒症的发病过程。     

糖皮质激素在脓毒症治疗中免疫调节机制的生物信息学探索

目的探索糖皮质激素用于脓毒症患者引起的差异表达基因。方法从GEO数据库下载基因芯片数据集,按照糖皮质激素治疗前后分为两组,通过数据处理后筛选出差异基因,再经过功能通路富集(GO、KEGG、GSEA)及蛋白相互作用网络(PPI)筛选出关键基因。结果两组数据共筛选出685个差异基因,GO、KEGG、GSEA与PPI主要富集到粒细胞活化及免疫应答通路等,基因FPR2、RETN、HMA1、UBB、TFRC、RUMX1参与广泛的基因间调节作用。结论生物信息学技术有助于对脓毒症免疫药物治疗机制的认识。     

脓毒症骨骼肌蛋白降解与泛素-蛋白酶体途径

脓毒症是严重创伤、烧伤及大手术后患者常见的严重并发症 ,进一步发展可导致脓毒性休克和多器官功能障碍综合征 (ＭＯＤＳ)等 ,是临床危重病患者的主要死亡原因。严重脓毒症时的代谢具有“自噬性”和强制性的特点 ,因为这种强烈的促进体内蛋白分解 ,抑制糖和脂类利用的高代谢反应 ,可使机体在短期内迅速陷入营养不良。由于骨骼肌细胞占机体细胞总重的 4 0 % 50 % ,骨骼肌的高分解代谢除导致肌肉的消耗和乏力外 ,对机体的整体代谢水平产生深远的影响 ,因此对脓毒症时骨骼肌蛋白分解途径的研究近来备受关注。在分解代谢性疾病状态下 ,骨骼肌蛋…     

肠源性高代谢与早期肠道营养研究──烧伤引发肠源性高代谢

烧（创）伤后高代谢消耗是创伤应激、炎症反应的重要组成部分。创面是烧伤高代谢的主要源由，这已是公认的事实。为了研究烧伤后是否存在肠源性高代谢，作者从８０年代末起，共用豚（大）鼠６００只、兔６０只、小香猪３０头，建立四种动物模型。在动物实验基础上，又观察了２１例严重烧伤患者（ＴＢ－ＳＡ４５±１２．６％，深度烧伤２９±８．９％）。实验随机至少分为两组即早期喂养组及延迟喂养组。研究结果发现严重烧伤后门脉、肠粘膜血流量下降，肠组织可发生缺血再灌注损伤，肠道结构以及吸收、分泌、运动、屏障功能均明显受影响，肠道细菌、内毒素易位增加，枯否细胞等巨噬系统活化，分解激素、ＴＮＦ、ＰＧＥ＿２、ＩＬ－８等炎症介质增加，以致代谢率增高。因此，可以认为烧伤后存在“肠源性高代谢”。     

脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1基因表达的信号转导机制

目的　探讨Janus激酶 (JAK ) /信号转导和转录激活因子 (STAT)通路对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达的调节作用及其意义。方法　采用大鼠盲肠结扎穿孔 (CLP)模型造成脓毒症 ,98只动物随机分为正常对照组、脓毒症组、JAK2抑制剂AG490处理组和STAT抑制剂雷帕霉素 (RPM )处理组。采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)测定肺组织HMGB1mRNA表达水平 ,同时测定髓过氧化物酶 (MPO )活性。结果　与正常对照组相比(0 .2 0 7± 0 .0 19) ,CLP组 2、6、2 4h肺组织HMGB1mRNA均显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,分别为0 .471± 0 .0 3 5、0 .3 69± 0 .0 2 8、0 .491± 0 .0 42。AG490处理组 2h肺组织HMGB1mRNA表达明显抑制 (P <0 .0 5 ) ,RPM处理组 2、6、2 4、48hHMGB1均显著下降 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。同时 ,AG490、RPM处理组 2 4、48h肺组织MPO活性显著降低 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。结论　JAK/STAT信号通路参与了脓毒症肺组织HMGB1mRNA表达的病理过程 ,抑制其活化有助于下调HMGB1mRNA表达并减轻肺损伤。