常压氧疗对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响

目的观察解毒活血中药(虎杖、山楂)配伍干预载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠腹腔巨噬细胞源性泡沫细胞Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达变化,从炎症方面探讨其干预动脉粥样硬化(As)泡沫细胞形成的可能机制。方法培养apoE-/-小鼠腹腔巨噬细胞,分为空白组、解毒组(加虎杖苷)、活血组(加山楂提取物)、解毒活血配伍组(加虎杖苷及山楂提取物)、洛伐他汀组(加洛伐他汀)、?...     

中药虎杖和山楂提取物对载脂蛋白E基因敲除小鼠巨噬细胞PPARγ、ABCA1及CD36 mRNA表达的影响

目的 观察中药虎杖、山楂配伍对栽脂蛋白E基因敲除小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内过氧化体增殖物激活型受体γ、三磷酸腺苷结合盒转运子A1及cD36 mRNA表达的影响,从基因水平探讨虎杖和山楂配伍对动脉粥样硬化泡沫细胞形成的干预机制.方法 培养载脂蛋白E基因敲除小鼠腹腔巨噬细胞,分为空白组、虎杖苷组、山楂提取物组、虎杖苷+山楂提取物组、洛伐他汀组、罗格列酮组及模型组.除空白组外,其他各组均同时加入氧化型低密度脂蛋白及脂多糖.各组细胞在培养箱内共孵育(泡沫化)2天,以逆转录聚合酶链反应法检测0 h、24 h和48 h各组细胞内过氧化体增殖物激活型受体γ、三磷酸腺苷结合盒转运子A1及CD36的mRNA表达.结果与空白组比较,干预24 h和48 h后,模型组及各用药组三个指标的表达均显著增高(P<0.01);与模型组比较,干预24 h后,虎杖苷+山楂提取物组和罗格列酮组过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA表达显著增高,虎杖苷组、虎杖苷+山楂提取物组和罗格列酮组三磷酸腺苷结合盒转运子A1 mRNA表达显著增高(P<0.05或P<0.01),各用药组CD36 mRNA表达无显著差异(P>0.05);干预48 h后,各用药组过氧化体增殖物激活型受体γ和三磷酸腺苷结合盒转运子A1 mRNA表达均显著增高,CD36 mRNA表达显著降低,且虎杖苷+山楂提取物组优于虎杖苷组、山楂提取物组及洛伐他汀组(P<0.05或P<0.01).结论 虎杖和山楂配伍可能具有与罗格列酮相似的过氧化体增殖物激活型受体γ激动作用,通过上调栽脂蛋白E基因敲除小鼠巨噬细胞过氧化体增殖物激活型受体γ和三磷酸腺苷结合盒转运子A1 mRNA表迭、下调CD36 mRNA表达的调控途径显著抑制巨噬细胞泡沫化过程,阻止动脉粥样硬化进程.     

活血解毒中药有效部位对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块炎症反应的影响

目的观察活血(三七总皂苷)、解毒(黄连提取物)、活血解毒中药有效部位(虎杖提取物、大黄醇提物)对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块炎症反应的影响。方法70只(6~8)周龄小鼠ApoE基因敲除小鼠予高脂饮食喂养13周后,待其形成成熟的AS斑块后,随机分为活血解毒组(虎杖提取物组、大黄醇提物组)、活血对照组(三七总皂苷组)、解毒对照组(黄连提取物组)、模型组、阳性对照组(辛伐他汀组)。继续高脂喂养并按体重比折算的临床推荐剂量给予相应药物治疗13周后,处死动物,检测血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)及可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)水平,并取主动脉根部4个切面,分别行HE染色和Movat染色,用免疫组化染色法观察小鼠主动脉根部斑块内过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测主动脉内PPAR-γ及核转录因子κB(NF-κB)mRNA的表达。结果与模型组比较,大黄醇提物组及虎杖提取物组血清hs-CRP和sCD40L水平均明显降低(P<0.01或P<0.05)。解毒对照组黄连提取物主动脉斑块内PPAR-γ蛋白及基因表达均明显增多(P<0.01),而中药各组小鼠主动脉斑块内NF-κBmRNA的表达与模型组比较均无统计学意义(P<0.05)。结论采用临床推荐剂量治疗的活血解毒中药有效部位中,虎杖提取物和大黄醇提物可明显降低ApoE基因敲除小鼠血清炎症标志物hs-CRP及sCD40L水平,其效果优于单纯活血或解毒组,但对PPAR-γ和NF-κB的作用并不明显。而黄连提取物却可明显增加具有抗AS炎症作用的保护性受体PPAR-γ的蛋白和基因表达,提示其作用环节有所不同,值得深入研究。     

JAZF1基因过表达对ApoE~(-/-)小鼠脂代谢及动脉粥样硬化的影响

目的探讨JAZF1基因过表达对ApoE-/-小鼠脂代谢及动脉粥样硬化(AS)的影响。方法将48只雄性ApoE-/-小鼠随机分为:高脂+空载(GF组)及高脂+JAZF1质粒组(JAZF1组)、高脂+生理盐水组(HF组)。检测各组血脂、生化指标、组织脂质含量、粪便胆汁酸及主动脉内膜粥样硬化病变。采用[1-14 C]醋酸盐腹腔注射,免疫荧光观察JAZF1基因过表达对ApoE-/-小鼠肝脏TC合成代谢及斑块巨噬细胞聚集的影响。结果JAZF1组肝脏JAZF1表达以及HDL-C/TC高于HF、GF组(P均0.05),而FBG、FIns、TC、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、动脉粥样硬化指数(AI)、血脂综合指数(LCI)和肝脏TC含量低于HF、GF组(P均0.05);与HF组和GF组比较,JAZF1组血管内膜脂质堆积减少,主动脉内斑块泡沫细胞聚集较少,斑块面积、斑块面积/管腔面积、主动脉粥样斑块内巨噬细胞CD68表达、肝脏14 C标记TC放射活性及肝和小肠14 C标记TC放射活性降低(P0.05或P0.01)。结论 JAZF1基因过表达可减少ApoE-/-小鼠肝脏TC含量,并抑制TC合成,改善脂代谢,抑制巨噬细胞在斑块内的聚集,减轻和延缓AS的形成。     

GLP-1通过调节巨噬细胞泡沫化抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的作用机制研究

目的 研究胰高血糖素样肽1(GLP-1)是否能抑制高脂饮食喂养的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)进程,从巨噬细胞泡沫化角度探讨相关作用机制.方法 选择6周龄雄性ApoE-/-小鼠40只,随机分为对照组(普通饮食)、模型组(高脂饮食)、GLP-1组(高脂饮食+GLP-1)和GLP-1阻断组(高...     

Toll样受体4在泡沫细胞形成中的作用及中医药干预研究

泡沫细胞是早期动脉粥样硬化的标志.内皮损伤所致的炎症反应,是泡沫细胞形成的一个重要始动因素.近年的研究发现,Toll样受体4(TLR4)在血管内皮细胞参与的免疫炎症反应中表达,并在血管内皮损伤以及内皮细胞相关疾病中起着重要作用,可能从多种途径参与了泡沫细胞的形成与发展.氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、脂多糖(LPS)可以诱导巨噬细胞向泡沫细胞转化,且细胞内TLR4的表达显著升高;而用中药虎杖苷、山楂提取物及其配伍干预,则可以不同程度的抑制TLR4的表达.本文就TLR4在泡沫细胞形成中的作用及中医药干预研究作一综述,以期对进一步TLR4的机制研究及以TLR4为靶点的药物干预研究提供新的思路.     

小干扰RNA 沉默Toll样受体4表达对慢性温和应激 ApoE-/-小鼠腹腔巨噬细胞TLR 4/ NF-κB途径基因表达的影响

目的 探讨小干扰RNA(siRNA)沉默Toll样受体4(TLR4)基因对慢性温和应激ApoE-/-小鼠腹腔巨噬细胞促炎症细胞因子表达的影响.方法 针对小鼠TLR4基因设计2条siRNA和一条无关序列,再据每一序列合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载体pRNAT-H1.1/Adeno相连,转染293A细胞,实时荧光PCR筛选有效的一条siRNA,经腺病毒颗粒包装与病毒扩增并感染293A细胞,G418筛选后,挑取单个阳性克隆放大培养,检测病毒滴度.120只雄性ApoE-/-小鼠随机分为三组:(1)慢性温和应激组;(2)慢性温和应激+siRNA组(10 μL/只,尾静脉注射,每5日一次);(3)慢性温和应激+腺病毒空载体组.每组ApoE-/-小鼠40只,实验动物都以高脂、高胆固醇饲料喂养,分别在接受慢性温和应激0、4、12周后3个时间点处死动物,收集小鼠腹腔单核巨噬细胞,以Western Blotting方法检测其TLR4和核因子κB(NF-κB)蛋白表达,ELISA法检测腹腔单核巨噬细胞培养上清液白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α表达.结果 转染siRNA1和siRNA2后的292A细胞中TLR4 mRNA表达水平较空白对照组分别下降56%和67%,逐孔稀释滴度测定法测定的病毒滴度为3.4×1014 TU/L;遭受4、12周慢性温和应激后,ApoE-/-小鼠血浆中皮质醇激素显著升高,但在同一时间点内,各组ApoE-/-小鼠血浆皮质酮激素浓度相比,差异没有统计学意义(P>0.05);与同一时期慢性温和应激组相比,siRNA组腹腔巨噬细胞TLR4和核因子κB蛋白表达水平明显降低 (均P<0.05),其培养细胞上清液中的白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α含量显著减少(P<0.01).结论 siRNA沉默TLR4基因能有效抑制TLR4 /NF-κB-IL-1β 和肿瘤坏死因子α的表达,提示TLR4/ NF-κB途径在慢性温和应激诱导的慢性炎症应答中可能有着重要作用.     

凝血因子V莱顿突变对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的 评价凝血因子V莱顿突变(FvL)对动脉粥样硬化的影响.方法 建立FvL与载脂蛋白E(ApoE)基因复合突变小鼠,并分析其动脉粥样硬化形成和纤维蛋白沉积情况.结果 小鼠52周龄时,FvL纯合子ApoE-/-(FvQ/Q APOE-/-)小鼠动脉粥样硬化范围明显大于野生型ApoE-/-(Fv+/+ApoE-/-),小鼠,FvQ/Q ApoE-/-比Fv+/+ApoE-/-为(5.0±1.1)%比(2.2±0.4)%,P＜0.005;FvL杂合子ApoE-/-(FvQ/+ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化范围位于FvQ/Q ApoE-/-小鼠和Fv+/+ApoE-/-小鼠之间,与两者的差异均无统计学意义,FvQ/+ApoE-/-比FvQ/QApoE-/-为(2.9±0.6)%比(5.0.±1.1)%,P＞0.05,FvQ/+ApoE-/-比Fv+/+ApoE-/-为(2.9±0.6)%比(2.2±0.4)%,P＞0.05.FvQ/Q ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块内的纤维蛋白沉积同样明显高于Fv+/+ApoE-/-小鼠,FvQ/Q ApoE-/-比Fv+/+ApoE-/-为(3.4±0.5)%比(1.8±0.4)%,P＜0.05.结论 FvL纯合子明显增加ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化程度及动脉粥样硬化斑块内的纤维蛋白沉积,提示FvL突变可能是重要的促进动脉粥样硬化形成的因素,临床上患者出现严重的动脉粥样硬化可能合并FvL遗传基因缺陷.     

麝香保心丸对小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响及相关机制探讨

目的 探讨麝香保心丸对小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响及相关机制.方法 20只载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠经高脂饲料喂养8周建立动脉粥样硬化模型,再随机分为ApoE-/-模型组10只(采用0.9％氯化钠溶液灌胃,1 mL/d)和麝香保心丸组10只(将麝香保心丸30 mg/kg溶于1 mL 0.9％氯化钠溶液灌...     

重组腺病毒载体敲减ApoE-/-小鼠血管平滑肌细胞Orai1基因模型的构建

目的:为探讨Orai1基因在动脉粥样硬化进展中的作用,通过重组腺病毒载体建立ApoE-/-小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs) Orai1基因的敲低模型,为深入相关研究奠定基础.方法:构建针对小鼠Orai1基因的重组腺病毒载体.高脂饲养ApoE-/-小鼠至16周龄后处死.取胸主动脉原代VSMCs改为体外培养,细胞分为三组,...     

ApN/TNF-α信号途径在有氧运动防治ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化过程中的抗炎症作用

目的观察有氧运动对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)的防治效果,探讨脂联素(ApN)/肿瘤坏死因子(TNF)-α信号途径的抗炎症作用。方法 8周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为对照组(C,10只)和运动组(E,10只)。14 w运动干预结束后取材观察主动脉管壁的病理变化,检测脂肪组织ApN mRNA表达和血清ApN水平及主动脉脂联素受体(AdipoR)1、TNF-α蛋白表达水平。结果 C组小鼠主动脉血管壁纤维板断裂,可见大量泡沫细胞浸润和纤维斑块,E组小鼠较C组主动脉病变有所延缓;E组小鼠ApN mRNA表达及血清水平显著高于C组(P0.05);E组小鼠主动脉AdipoR1蛋白表达显著高于C组(P0.05),主动脉TNF-α蛋白表达显著低于C组(P0.05)。结论有氧运动通过增强ApoE-/-小鼠ApN信号途径,抑制主动脉TNF-α蛋白表达,发挥防治AS的抗炎症作用。     

丹参多酚酸盐对ApoE基因敲除小鼠血清脂质的干预作用

目的:观察中药丹参多酚酸盐对高脂饮食ApoE-/-小鼠脂质代谢的影响,探讨丹参多酚酸盐抗动脉粥样硬化作用机制。方法:将4周龄雄性C57BL/6J ApoE-/-小鼠喂食高脂饮食,随机分为4组。模型组腹腔注射生理盐水、丹参多酚酸盐干预分为低剂量组(60 mg/kg)、中剂量组(120 mg/kg)和高剂量组(240 mg/kg)腹腔注射丹参多酚酸,另设C57BL/6J野生型小鼠为对照组。于24周末时处死各组小鼠,留取血清,检测各组小鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。结果:与对照组比较,ApoE-/-鼠血清TC、LDL-C均明显升高(P<0.05),表明敲除ApoE基因能导致血脂代谢紊乱。应用丹参多酚酸盐后,各干预组TC、LDL-C水平均明显降低(P<0.05),但TG和HDL-C水平无明显改变,中、高剂量组尤为显著。结论:丹参多酚酸盐可降低ApoE-/-小鼠血清TC和LDL-C水平,可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一。     

阿托伐他汀对ApoE-/-小鼠主动脉粥样硬化和钙化的影响

目的 探讨阿托伐他汀对ApoE-/-小鼠主动脉粥样硬化及钙化的影响.方法 12只6周龄ApoE-/-小鼠,予以高脂饮食喂养8周后,随机分为高脂组(n=6)和高脂加阿托伐他汀组(n=6),连续灌胃干预8周,于22周龄时处死,测定血清血脂、IL-6及A-SAA水平;HE染色观察主动脉粥样硬化及Von Kossa染色观察主动脉钙化;免疫组织化学染色法分析比较两组VCAM-1、MCP-1、BMP-2表达;阿托伐他汀干预人主动脉内皮细胞,测定细胞内钙含量及AKP活力,并用Western blot法测定BMP-2蛋白表达水平.结果 高脂加阿托伐他汀组ApoE-/-小鼠血清TG、TC及LDLC水平显著低于高脂组(P＜0.05);且血清IL-6及A-SAA水平较高脂组亦显著降低(P＜0.05);高脂组ApoE-/-小鼠主动脉内膜出现典型粥样硬化斑块,管腔面积缩小,高脂加阿托伐他汀组的病变程度较轻;但高脂加阿托伐他汀组ApoE-/-小鼠主动脉内膜钙盐沉积量显著高于高脂组(P＜0.05).高脂加阿托伐他汀组ApoE-/-小鼠主动脉血管壁VCAM-1、MCP-1的表达显著低于高脂组(P＜0.01),而BMP-2的表达显著高于高脂组(P＜0.01).阿托伐他汀处理人主动脉内皮细胞后,高剂量阿托伐他汀可使细胞内BMP-2蛋白表达水平显著高于对照组(P＜0.05),并使钙含量及AKP活力比低剂量组和对照组显著增加(P＜0.01,P＜0.05).结论 阿托伐他汀可降低高脂喂养的ApoE一小鼠血清TG、TC、LDL-C及IL-6、A-SAA水平,减少主动脉血管壁VCAM-1、MCP-1的表达,同时减轻主动脉粥样硬化的病变程度;但增加ApoE-/-小鼠主动脉内膜BMP-2表达,促进钙盐沉积,增加人主动脉内皮细胞BMP-2蛋白表达、钙含量及碱性磷酸酶活力,加重主动脉内膜的钙化.     

胰高血糖素样肽-1对脂质合成关键酶CD_(36)、ACAT1影响的研究

目的探索胰高血糖素样肽-1[GLP-1(7-36)]对巨噬细胞源性泡沫细胞内CD_(36)、 ACAT1基因及蛋白表达的影响。方法培养巨噬细胞,用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导传代培养的巨噬细胞泡沫化。实验分为8组:巨噬细胞组,泡沫细胞组,不同浓度0 nmol/L、1.5 nmol/L、3.0 nmol/L、5.0 nmol/L、10.0 nmol/LGLP-1(7-36)干预组,GLP-1(7-36)5.0 nmol/L联合GLP-1抑制剂Exendin(9-39)50 nmol/L组。结果与巨噬细胞组比较,泡沫细胞组CD_(36)、ACAT1mRNA和蛋白表达水平较高(P0.05);与泡沫细胞组比较,GLP-1组CD_(36)、ACAT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P0.05);与不同浓度GLP-1干预组比较,GLP-1抑制剂Exendin组CD_(36)、ACAT1mRNA和蛋白表达水平较高(P0.05)。结论 GLP-1干预浓度的增加与CD_(36)、ACAT1基因及蛋白表达呈负相关。当GLP-1(7-36)浓度为5 nmol/L时,抑制效果达到最大。     

2-羟基苄胺改善衰老相关动脉粥样硬化的机制研究

目的探索不同浓度2-羟基苄胺(2-HOBA)对动脉粥样硬化和血管平滑肌细胞衰老的影响及相关作用机制。方法使用载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)小鼠14只建立动脉粥样硬化模型, ApoE-/-小鼠数字抽签法分为2组(每组7只):高脂饮食(HD)组和高脂饮食加2-HOBA(1 mg/ml)饮水喂药(HD+HOBA)组。脉搏波传导速度检测血管硬度, 同时使用跑步机检测运动耐力, 油红O染色法检测动脉粥样斑块的大小及数量, Masson染色检测斑块内部胶原纤维、弹力纤维的形态, 斑块核心坏死区域的大小及纤维帽的厚度。小鼠平滑肌细胞分别使用不同浓度的2-HOBA(100 μmol/L、250 μmol/L和500 μmol/L)干预过氧化氢诱导的应激衰老模型, 衰老相关β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老程度, 应用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测衰老相关分泌表型因子的mRNA表达水平, 同时使用免疫印迹法检测衰老相关信号蛋白表达水平。结果与高HD组小鼠比较, HD+HOBA组小鼠在2-HOBA的干预下主动脉粥样斑块面积与数量减小, 同时稳定粥样斑块。此外, 与HD组小鼠主动脉血管硬...     

黄芩苷对ApoE基因敲除小鼠高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α及脂联素的影响

目的观察黄芩苷对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠的血脂、脂联素、高敏C反应蛋白(hs-CRP)与肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响,探讨黄芩苷对动脉粥样硬化(AS)的保护机制。方法野生型C57BL/6J雄性小鼠10只为正常对照组,ApoE-/-雄性小鼠20只,随机分为模型组和黄芩苷治疗组,每组10只。正常对照组给予普通饲料,其余两组给予高脂饲料,喂养12 w后,黄芩苷治疗组给予黄芩苷溶液30 mg·kg-1·d-1,模型组给予同等剂量的生理盐水。实验第20周后,采用全自动生化分析仪分别检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),ELISA方法检测hs-CRP、TNF-α及脂联素水平。结果与正常对照组相比,模型组和治疗组TC、TG、LDL-C、hs-CRP、TNF-α水平明显升高(P<0.01或P<0.05),HDL-C、脂联素水平明显降低(P<0.01或P<0.05);与模型组相比,黄芩苷治疗组TC、TG、LDL-C、hs-CRP、TNF-α明显降低(P<0.01或P<0.05),HDL-C、脂联素水平明显升高(P<0.05)。结论黄芩苷可以下调hs-CRP、TNF-α水平,进而升高脂联素表达水平,可能通过抗炎抑制hs-CRP、TNF-α的表达及促进脂联素表达起到抗AS的作用。     

黄连解毒汤通过抑制ApoE-/-小鼠巨噬细胞极化和炎症减轻高脂饮食诱导的动脉粥样硬化

目的 探讨黄连解毒汤(HLJDD)抑制巨噬细胞极化和炎症对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)的影响及作用机制。方法 构建ApoE-/-小鼠AS模型,随机分为模型组、黄连解毒汤高剂量(HLJDD-H)组和黄连解毒汤低剂量(HLJDD-L)组,另设C57BL/6J小鼠为正常(Control)组,每组6只,分别给予相应浓度药物及生理盐水灌胃,每日1次,连续6 w。给药结束后,收集小鼠血清和主动脉组织,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察主动脉组织病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定小鼠血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-4和IL-10水平;荧光染色和免疫组化检测主动脉M1、M2型巨噬细胞标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD197和CD206分子的表达。结果 与Model组比较,HLJDD不同剂量组主动脉斑块面积和脂滴明显减少,血清TC、TG、LDL-C、hs-CRP、TNF-α和IL-6...     

晚期糖基化终产物受体阻断剂FPS-ZM1减缓ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化进展的作用

目的 研究晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)阻断剂FPS-ZM1对ApoE-/-小鼠高脂喂养后动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)进展的干预作用.方法 ApoE-/-小鼠随机分成对照组(普通喂养),AS模型组(高脂喂...     

超声生物显微镜在ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变与C反应蛋白的相关性研究

目的:探讨超声生物显微镜(UBM)在监测ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化(As)进程中的作用及As病变与C反应蛋白(CRP)的关系。方法:选用8,16,24及32w共32只ApoE-/-小鼠作为研究对象,并选用相同周龄C57BL/6小鼠作为对照,应用UBM追踪观察各周龄ApoE-/-小鼠主动脉根部内中膜厚度(IMT),检测血清CRP水平。结果:①UBM显示ApoE-/-组主动脉根部IMT厚度随着周龄增长而增长,各周龄ApoE-/-小鼠IMT厚度组间差异有统计学意义(P0.01)。对照组小鼠各周龄IMT差异无统计学意义。②UBM测量的各周龄ApoE-/-小鼠主动脉根部收缩期最大IMT值和对应血管部位横切面病理测值有明显相关性(r=0.81,P0.0001)。③ApoE-/-小鼠血清CRP水平较同周龄对照组升高(P0.01),且随着周龄增长,血清CRP水平呈逐渐升高趋势。ApoE-/-小鼠血清CRP水平和UBM测量的主动脉根部IMT值呈正相关(r=0.626,P0.001)。结论:①UBM可以监测ApoE-/-小鼠的As进程,IMT测量可作为判断和监测As病变的一个准确有效的指标。②血清炎症反应标志物CRP的增高与As有关,且与As的严重程度相关。     

白藜芦醇在高脂饮食诱导ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化形成中的作用及其相关机制研究

目的:探讨白藜芦醇对高脂饮食诱导载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化形成的影响及其相关机制。方法:本实验分为4组,正常对照组为ApoE-/-小鼠给予普通饲料喂养。此外,高脂饲料喂养ApoE-/-小鼠16周,构建动脉粥样硬化小鼠模型,并随机分为模型组(Vehicle组,灌胃给予1ml/d 0.9%氯化钠溶液)、白藜芦醇低剂量组(灌胃给予白藜芦醇20mg·kg~(-1)·d~(-1))、高剂量组(灌胃给予白藜芦醇40mg·kg-1·d~(-1)白藜芦醇)。灌胃8周后造模完成,采集血清,分离主动脉。油红O染色检测小鼠主动脉粥样硬化斑块大小;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中IL-8/CXCL8的水平;实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别检测主动脉组织中CXCR2的mRNA表达水平以及PCNA、MEF2a的蛋白表达水平。结果:与正常组相比,给予高脂饮食后,模型组小鼠体重明显增加,而白藜芦醇处理可明显抑制小鼠体重的增加;与模型组小鼠比较,白藜芦醇处理能降低小鼠的动脉粥样硬化斑块面积大小,降低血清中IL-8/CXCL8的水平、CXCR2的mRNA表达水平以及PCNA、MEF2a的蛋白表达水平,且与白藜芦醇的剂量呈正相关。结论:白藜芦醇可有效缓解动脉粥样硬化的形成,可能与调控ApoE-/-小鼠的CXCR2的mRNA和PCNA、MEF2a蛋白的表达有关。