肺癌组织中胞浆型磷脂酶A2和前列腺素E2合酶-1的表达及其与临床病理参数的关系

目的探讨肺癌组织中胞浆型磷脂酶(c PL)A2和前列腺素E2合酶(m PGES)-1的表达及其与临床病理参数的关系。方法选择58份肺癌组织标本(肺癌组)及其周边正常组织(距离所切肺癌组织超过5 cm,癌旁组),采用RT-PCR和免疫组化方法检测样本中c PLA2和m PGES-1 m RNA和蛋白的表达,分析其在肺癌组及不同临床病理参数中的差异。结果肺癌组m PGES-1和c PLA2 m RNA表达水平显著高于癌旁组(P0.05);肺癌组m PGES-1和c PLA2蛋白的总表达阳性率,均显著高于癌旁组(P0.05)。肿瘤分化程度较低、存在淋巴结转移以及临床分期越高,m PGES-1蛋白表达阳性率越高(P0.05),而不同肿瘤直径、病理类型、分化程度、临床分期以及是否存在淋巴结转移与肺癌组织的c PLA2蛋白的表达阳性率无统计学意义(P0.05)。结论肺癌组织中c PLA2和m PGES-1呈现高表达,c PLA2表达与临床病理参数无关,而m PGES-1表达与分化程度、是否存在淋巴结转移以及不同临床分期有关,两者检测对肺癌的早期诊断和靶向治疗有一定的临床意义。     

胞浆型磷脂酶A2在急性心肌梗死大鼠心肌组织中的表达

目的 观察急性心肌梗死早期心肌组织胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)mRNA及蛋白表达,探讨cPLA2在心肌细胞损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组,心肌梗死组(AMI组,按时间不同分5组,每组10只),建立大鼠急性心肌梗死模型,按照心肌梗死不同时间(0、1、2、3、6和12 h)处死动物.免疫组化检测心肌cPLA2蛋白表达情况.采用RT-PCR检测心肌cPLA2mRNA表达水平.通过透射电镜观察心肌细胞超微结构的改变.结果 ①与假手术组比较,AMI组心肌cPLA2mRNA水平均出现不同程度上调,以梗死后2 h达到峰值(0.655±0.035,P＜0.01).②假手术组与AMI组cPLA2蛋白都有阳性表达,AMI组cPLA2表达增加,且以梗死后2 h最为显著(0.207±0.018,P＜0.01).③假手术组心肌组织形态及超微结构改变不明显;AMI组心肌损伤较重,缺血心肌在急性心肌缺血后12 h内,其病理学变化未见显著改变.结论 心肌梗死后心肌组织cPLA2激活导致了心肌细胞及细胞器膜完整性破坏、能量代谢及收缩功能的障碍.     

支气管哮喘小鼠胞浆型和V型磷脂酶A2表达的研究

近年来人们对细胞膜磷脂代谢的研究产生了极大的兴趣 ,主要因为发现细胞膜磷脂不仅能维持细胞的结构 ,也是一个细胞信号传导分子的储存器 ,这些第二信使是由激活的细胞内外磷脂酶分解产生的 ,磷脂酶Ａ2 (ＰＬＡ2 )在这一过程中起重要作用。研究发现 ,ＰＬＡ2 分解膜磷脂产生白三烯类(ＬＴｓ)、前列腺素类 (ＰＧｓ)、血栓素Ａ2 (ＴＸＡ2 )、血小板活化因子(ＰＡＦ)等炎性介质 ,从而参与支气管哮喘 (简称哮喘 )等炎症性疾病的发病过程。因而研究开发ＰＬＡ2 抑制剂成为当前研究的热点[1] 。但国外对ＰＬＡ2 Ⅳ、ＰＬＡ2 ⅤｍＲＮＡ表达与哮…     

胞浆型磷脂酶A2与冠心病的相关性研究进展

胞浆型磷脂酶A2 (cytosolic phospholipase A2,cPLA2) 是一组数量众多的酶.它们能将膜上的磷脂水解为脂肪酸和溶血磷脂.这些脂类的产物可充当细胞内的第二信使,也可进一步代谢成为有效的炎症反应介导物.近年来,越来越多研究表明在冠心病的发病机制及预防性治疗上,cPLA2是一个新的有待研究的因子,可能成为冠心病治疗的新靶点.     

环氧合酶-1和前列腺素E2在多潘立酮对大鼠胃黏膜保护中的作用

目的　研究多潘立酮对大鼠胃黏膜损伤是否具有保护作用 ,并探讨胃黏膜细胞中环氧合酶 1(COX 1)及前列腺素 (PG)E2是否参与其中。方法　研究分为对照组和实验组。后者分别用多潘立酮 0 .5mg/kg、1mg/kg和 2mg/kg灌胃 ,3次 /d ,连续 3d。各组大鼠灌入无水乙醇后 ,肉眼观察胃黏膜损伤指数 (LI) ,光镜下观察黏膜缺损深度 ,并计算黏膜缺损深度与胃壁全层厚度百分比。放射免疫法测定各组胃黏膜PGE2的水平。免疫组织化学方法检测COX 1和COX 2蛋白表达水平并以平均吸光度值表示其强度。RT PCR检测胃黏膜COX 1和COX 2mRNA表达变化。结果　多潘立酮 1mg/kg组的LI及黏膜缺损深度与胃壁全层厚度百分比显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,0 .5mg/kg组和 2mg/kg的组LI亦显著低于对照组 (P <0 .0 5 )。多潘立酮 1mg/kg组大鼠胃黏膜COX 1蛋白表达水平及PGE2水平显著高于空白对照组 (P <0 .0 1)。各实验组和对照组在胃黏膜细胞内均无COX 2蛋白表达。三个实验组COX 1mRNA表达量与对照组比较差异均有显著性 (P <0 .0 1)。各组均未检测到COX 2mRNA表达。结论　多潘立酮对胃黏膜损伤具有保护作用 ,其机制之一可能与其增加胃黏膜COX 1mRNA和COX 1蛋白表达及促进胃黏膜PGE2分泌有关。     

前列腺素E1联合氧化苦参碱对大鼠肝纤维化防治作用评价

目的探讨前列腺素E1联合氧化苦参碱对大鼠肝纤维化的防治原理。方法采用预防和治疗两种方法在大鼠肝纤维化模型上观察氧化苦参碱、前列腺素E1单独及联合应用后对实验性肝纤维化大鼠透明质酸(HA)、Ⅲ型胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(PC-Ⅳ)、层黏蛋白(LN)的水平和肝功能的影响。结果氧化苦参碱单独和联合前列腺素E1应用后,大鼠的ALT、ALP和A/G均与模型组差异有统计学意义(P0.05),表明氧化苦参碱联合前列腺素E1对实验性大鼠肝纤维化的肝功能有一定的预防作用。结论氧化苦参碱和PGE1联合用药可显著增强对实验性大鼠肝纤维化的防治效果。     

溃疡性结肠炎组织中环氧合酶-2与一氧化氮合酶的表达及意义

环氧合酶(COX)是花生四烯酸转化为前列腺素和其它二十烷类的限速酶,至少存在COX-1和COX-2两种同工酶,前者呈原生性表达,其表达量不受刺激因素的影响,后者呈诱导性表达,很多因素如细胞因子、内毒素及致癌物等均可诱导其产生。研究表明COX-2在结肠、直肠癌、结肠腺瘤     

血红素氧合酶对慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠一氧化氮合酶基因表达的影响

一氧化碳 (CO)及其体内生成的主要限速酶———血红素氧合酶 (HO) ,近年来在肺动脉高压形成中的调节作用备受关注[1] 。一氧化氮 (NO)作为一种传统的内皮衍生舒张因子[2 ] ,在肺动脉高压形成中的调节作用已被学术界公认。曾有学者认为CO/HO系统与NO/一氧化氮合酶 (NOS)系统是一个此消彼涨的互补体系[3 ] ,但近来研究发现NO对CO/HO系统具有上调作用 ,而CO体系对NO/NOS系统具有何种调节作用至今尚不明了。我们采用慢性低氧 (O2 )高二氧化碳(CO2 )肺动脉高压大鼠模型 ,观察经血红素氧合酶激动剂———血晶素处理的大鼠肺细小动脉…     

氧化型低密度脂蛋白诱导RAW264.7细胞表达V型和X型分泌型磷脂酶A2

目的通过研究不同氧化程度的氧化型低密度脂蛋白对鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞表达Ⅳ型胞浆型磷脂酶A2、V型和X型分泌型磷脂酶A2的调节作用,探讨氧化型低密度脂蛋白在促动脉粥样硬化过程中的炎症机制。方法利用不同的氧化方法对低密度脂蛋白进行氧化修饰,分别制备轻微修饰低密度脂蛋白、轻度氧化低密度脂蛋白和重度氧化低密度脂蛋白,将此三型氧化型低密度脂蛋白用于刺激RAW264.7细胞,分别孵育4 h及8 h后收集细胞裂解液和细胞培养上清液,分别用逆转录聚合酶链反应法检测胞浆型磷脂酶A2、V型和X型分泌型磷脂酶A2的mRNA表达,Western blotting法检测胞内和细胞培养上清液中V型和X型分泌型磷脂酶A2蛋白的表达。结果与PBS对照组及低密度脂蛋白组相比,RAW264.7细胞经各型氧化型低密度脂蛋白刺激后胞浆型磷脂酶A2的mRNA表达差异无显著性(P>0.05),但V型分泌型磷脂酶A2和X型分泌型磷脂酶A2的mRNA表达水平和胞内及细胞培养液中蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05)。与轻微修饰低密度脂蛋白组和重度氧化低密度脂蛋白组相比,轻度氧化低密度脂蛋白组诱导V型分泌型磷脂酶A2和X型分泌型磷脂酶A2的mRNA和蛋白表达作用更强(P<0.05),而轻微修饰低密度脂蛋白组的作用又要强于重度氧化低密度脂蛋白组(P<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白可诱导RAW264.7细胞表达V型和X型分泌型磷脂酶A2,而两型轻度氧化的氧化型低密度脂蛋白诱导V型和X型分泌型磷脂酶A2表达的能力明显强于重度氧化程度的低密度脂蛋白,说明轻度氧化程度的氧化型低密度脂蛋白具有较强的诱导巨噬细胞产生炎症反应的能力。     

氧化型低密度脂蛋白诱导RAW264.7细胞表达Ⅴ型和Ⅹ型分泌型磷脂酶A2

目的 通过研究不同氧化程度的氧化型低密度脂蛋白对鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞表达Ⅳ型胞浆型磷脂酶A2、Ⅴ型和Ⅹ型分泌型磷脂酶A2的调节作用,探讨氧化型低密度脂蛋白在促动脉粥样硬化过程中的炎症机制.方法 利用不同的氧化方法 对低密度脂蛋白进行氧化修饰,分别制备轻微修饰低密度脂蛋白、轻度氧化低密度脂蛋白和重度氧化低密度脂蛋白,将此三型氧化型低密度脂蛋白用于刺激RAW264.7细胞,分别孵育4 h及8 h后收集细胞裂解液和细胞培养上清液,分别用逆转录聚合酶链反应法检测胞浆型磷脂酶A2、Ⅴ型和Ⅹ型分泌型磷脂酶A2的mRNA表达,Western blotting法检测胞内和细胞培养上清液中Ⅴ型和Ⅹ型分泌型磷脂酶A2蛋白的表达.结果 与PBS对照组及低密度脂蛋白组相比,RAW264.7细胞经各型氧化型低密度脂蛋白刺激后胞浆型磷脂酶A2的mRNA表达差异无显著性(P>0.05),但Ⅴ型分泌型磷脂酶A2和Ⅹ型分泌型磷脂酶A2的mRNA表达水平和胞内及细胞培养液中蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05).与轻微修饰低密度脂蛋白组和重度氧化低密度脂蛋白组相比,轻度氧化低密度脂蛋白组诱导Ⅴ型分泌型磷脂酶A2和Ⅹ型分泌型磷脂酶A2的mRNA和蛋白表达作用更强(P<0.05),而轻微修饰低密度脂蛋白组的作用又要强于重度氧化低密度脂蛋白组(P<0.05).结论 氧化型低密度脂蛋白可诱导RAW264.7细胞表达Ⅴ型和Ⅹ型分泌型磷脂酶A2,而两型轻度氧化的氧化型低密度脂蛋白诱导Ⅴ型和Ⅹ型分泌型磷脂酶A2表达的能力明显强于重度氧化程度的低密度脂蛋白,说明轻度氧化程度的氧化型低密度脂蛋白具有较强的诱导巨噬细胞产生炎症反应的能力.     

脂蛋白相关磷脂酶A2与冠心病的相关性研究进展

脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）是由炎性细胞产生并与低密度脂蛋白（LDL）结合,可水解氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）而产生炎症介质促进动脉粥样硬化。Lp-PLA2编码基因PLA2G7的单核苷酸多态性与冠心病之间存在明显相关性。Lp-PLA2作为新型的炎症标记物,与动脉粥样硬化的发生发展密切相关,作为冠心病的一个独立危险因素逐渐被关注,Lp-PLA2可能成为治疗冠心病的新靶点。本文就Lp-PLA2与冠心病的相关性研究新进展进行综述。     

免疫调节治疗对老年慢性心力衰竭患者的影响研究

目的探讨免疫调节治疗对老年慢性心力衰竭的影响。方法选择我院2011年1月—2012年1月收治的老年慢性心力衰竭(充血性)患者100例,采用随机数字表法分为试验组和对照组,每组50例。两组患者均进行常规治疗和生活方式干预,试验组患者在此基础上加用免疫调节治疗,即胸腺五肽4 mg加入注射用水10 ml肌肉注射,1次/d,15 d为1个疗程,共治疗4个疗程。比较两组患者治疗前后血清TNF-α、IL-10、hs-CRP、IL-1β水平和明尼苏达生活质量量表评分。结果治疗前,两组患者血清TNF-α、IL-10、hs-CRP、IL-1β水平比较,差异均无统计学意义(P0.05);治疗后,试验组患者血清TNF-α、hs-CRP、IL-1β水平低于对照组,血清IL-10水平高于对照组(P0.05)。治疗前,试验组明尼苏达生活质量量表评分为(37.60±15.46)分,对照组为(37.00±15.23)分,差异无统计学意义(t=-0.19,P0.05);治疗后,试验组明尼苏达生活质量量表评分为(27.23±12.45)分,低于对照组的(35.27±14.68)分(t=2.95,P0.05)。结论免疫调节治疗可改善老年慢性心力衰竭患者促炎/抗炎因子失衡状况,提高患者生活质量,是一种治疗新方法。     

前列地尔对慢性心衰大鼠心肌基质金属蛋白酶表达及纤维化的影响

目的探讨前列地尔对慢性心衰大鼠心肌组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达及心肌纤维化的影响。方法 70只雄性SD大鼠随机分成假手术组和模型组。模型制备采用腹主动脉缩窄法,4周后模型组大鼠死亡7只。根据前列地尔给药浓度,将存活的51只模型大鼠随机分为未治疗组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,给药2周。Masson染色于光镜下观察心肌间质胶原纤维沉积情况,测定胶原容积分数(CVF)、羟脯氨酸(HYP)水平及胶原总含量。实时荧光定量PCR检测各组心肌组织MMP-2、MMP-9 mRNA表达,明胶酶谱法检测其活性变化。结果低、中、高剂量组大鼠心肌CVF、HYP水平及胶原总含量明显低于未治疗组(P0.05或P0.01)。与未治疗组比较,低、中、高剂量组大鼠心肌MMP-2、MMP-9 mRNA表达和活性水平均下调(P0.05或P0.01),低、中剂量组间MMP-2、MMP-9 mRNA表达无统计学差异(P0.05),高剂量组MMP-2、MMP-9 mRNA表达明显低于低、中剂量组,差异有统计学意义(P0.05);随前列地尔剂量增加,低、中、高剂量组间MMP-2、MMP-9活性水平逐渐下降,三组间差异有统计学意义(P0.05)。前列地尔剂量与大鼠心肌CVF、HYP水平、胶原总含量、MMP-2和MMP-9 mRNA表达及活性水平均存在负相关(P0.05或P0.01)。结论前列地尔可能通过抑制基质金属蛋白酶的表达及活性而减轻心肌纤维化,限制慢性心衰大鼠心室重塑和心衰进展,改善慢性心衰的预后。     

脂蛋白相关磷酯酶A2基因A379V多态性与冠心病关系的Meta分析

目的 对脂蛋白相关磷酯酶A2基因A379V多态性与冠心病的相关性进行Meta分析.方法 制定文献的纳入标准及检索策略,计算机检索PubMed、Elsevier SDOS系统、外文医学核心期刊、维普中文科技数据库、万方数据库和中国期刊全文数据库中的文献,收集脂蛋白相关磷酯酶A2基因A379V多态性与冠心病相关性的病例对照研究,剔除不符合要求的文献,应用STATA 10.0和RevMan 5.0软件进行Meta分析.结果 共7篇文献符合纳入标准.包括6 718例病例和3 824例对照.Meta分析结果显示脂蛋白相关磷酯酶A2基因A379V位点VV/AA和VA/AA与冠心痛的关系的合并OR值(95%CI)分别为0.98(0.66～1.46)和0.98(0.89～1.07),均无统计学意义(P>0.05).按种族进行分组后,亚洲人群和欧洲人群脂蛋白相关磷酯酶A2基因A379V位点VV/AA与冠心病易感性的关系研究的合并OR值(95%CI)分别为1.15(0.50～2.61)和0.89(0.68～1.17),均无统计学意义(P>0.05);亚洲人群和欧洲人群VA/AA与冠心病易感性的关系研究的合并OR值(95%CI)分别为1.11(0.96～1.27)和0.88(0.66～1.18),无统计学意义(P>0.05).结论 根据目前研究结论,未发现脂蛋白相关磷酯酶A2基因A379V多态性与冠心病易感性有关.     

参松养心胶囊改善心力衰竭大鼠QT离散度及缝隙连接蛋白43的表达

目的观察参松养心胶囊对压力超负荷所致心力衰竭大鼠的QT离散度及缝隙连接蛋白43表达的干预作用。方法采用腹主动脉缩窄法建立大鼠心力衰竭模型,经参松养心胶囊治疗8周。用皮下插入自制电极检测心室电生理变化,经HE染色观察其形态结构变化,Masson染色判断心肌纤维化沉积,免疫组织化学法观察缝隙连接蛋白43在左心室心肌组织的分布。结果心力衰竭大鼠QT离散度明显延长(37.20±9.94 ms,P<0.05),心肌细胞排列紊乱,心肌组织纤维沉积面积明显增加(101217.30±33970.02μm2,P<0.05),心肌组织缝隙连接蛋白43表达明显减少(55.93±11.61,P<0.05)。参松养心胶囊可缩短心力衰竭大鼠的QT离散度(25.50±8.21 ms),减少心肌组织纤维沉积面积(13580.64±8213.73μm2)并增加缝隙连接蛋白43的表达(69.09±16.59)。结论参松养心胶囊可以缩短心力衰竭大鼠的QT离散度,增加心肌组织缝隙连接蛋白43表达并减少纤维化面积。     

脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与汉族人群冠心病易感性的关系

目的探讨脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与冠心病遗传易感性及冠状动脉病变程度的关系。方法采用单荧光标记探针技术检测261例冠心病患者及263例正常人脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性。结果冠心病组RH基因型和H等位基因频率显著高于对照组(P<0.05和<0.01)。RH基因型、H等位基因人群冠心病风险增高(P均<0.01)。Logistic回归分析显示,R92H多态性是冠心病的独立危险因素(P<0.05)。冠心病组中RH和HH基因型者总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平高于RR基因型者(P<0.05和<0.01),高密度脂蛋白胆固醇水平显著低于RR基因型者(P<0.05)。冠心病组中,RH和HH基因型者多支血管病变率比RR基因型者明显升高(P<0.05)。结论脂蛋白相关磷脂酶A2基因R92H多态性与中国汉族人群冠心病相关,携带RH、HH基因型人群发生冠心病风险较高,且与更严重的冠状动脉病变有关。     

氯沙坦钾对慢性心力衰竭小鼠肾脏水通道蛋白2表达的影响

目的探讨慢性心力衰竭小鼠肾脏水通道蛋白2(AQP-2)的表达。了解氯沙坦钾对慢性心衰小鼠肾脏 AQP-2表达的影响。方法昆明小鼠33只随机分为3组:假手术组(n=10);慢性心力衰竭组(CHF 组,n=13);氯沙坦钾组(n=10)。以左冠状动脉结扎建立小鼠 CHF 模型,其中氯沙坦钾组在结扎术后2周给予氯沙坦钾(10 mg/kg·d)灌胃8周。观察各组小鼠一般情况、心率、血压、肾/体质量及死亡率。光镜下观察 HE 染色后小鼠肾组织的病理改变;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小鼠肾脏组织 AQP-2 mRNA 的表达;用免疫组织化学和 Western blot 分析法检测肾组织 AQP-2蛋白的表达。结果假手术组小鼠术后8周均存活,且一般情况佳;CHF 组死亡3只(23%);氯沙坦钾组小鼠术后8周均存活。与假手术组比较,CHF 组小鼠心率、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、肾/体质量均显著增高(P<0.05);氯沙坦钾组以上各项指标较 CHF 组显著下降(P<0.01),但仍高于假手术组。CHF 小鼠肾小管上皮细胞有明显空泡形成,经氯沙坦钾治疗后病理改变有所减轻。CHF 小鼠肾组织AQP-2基因和...     

咪达普利对舒张功能不全大鼠心功能的保护与减轻心肌线粒体损伤有关

目的探讨咪达普利对舒张功能不全心力衰竭大鼠心脏功能保护作用的机制。方法30只雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、用药1组、用药2组和用药3组共5组。采用腹主动脉缩窄建立舒张功能不全心力衰竭模型,对照组只开腹和分离腹主动脉。3个用药组大鼠术后分别灌胃给予咪达普利1.5 mg/(kg.d)、3或6 mg/(kg.d);对照组和模型组大鼠灌胃给予同等量的生理盐水共4周。4周末心脏B超检测心功能,颈动脉插管记录血流动力学变化,取心脏称重,计算与体重的比例,分光光度计检测线粒体丙二醛、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶变化,电镜检测心肌线粒体超微结构改变。结果心脏超声心动图发现舒张功能不全心力衰竭组大鼠室间隔和左心室后壁厚度、E/A比值明显增高,血流动力学检测发现收缩压、舒张压、左心室收缩压、左心室舒张期末压升高,左心室松弛时间常数延长,左心室内压最大下降速率下降,心脏指数和左心室质量指数增加。咪达普利使增加的室间隔和左心室后壁厚度、E/A、收缩压、舒张压、左心室收缩压、左心室舒张期末压、心脏指数和左心室质量指数降低,左心室松弛时间常数缩短,左心室内压最大下降速率升高,随着咪达普利剂量的增加,改变的程度越明显。线粒体功能检测发现,舒张功能不全心力衰竭组大鼠超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶下降,丙二醛增加,电镜观察发现心肌细胞肌丝排列不整齐、线粒体肿胀及空泡化等线粒体损伤;咪达普利减轻线粒体结构和功能损伤。结论咪达普利通过减轻心肌细胞和线粒体损伤改善舒张功能不全心力衰竭大鼠的心脏功能。