二甲双胍抑制分化型甲状腺癌的作用及机制

二甲双胍是治疗糖尿病的一线药物,晚近其抗肿瘤效应受到广泛关注.研究发现,服用二甲双胍的2型糖尿病患者分化型甲状腺癌(differentiated thyroid cancer,DTC)的风险降低,其机制可能与一方面通过改善胰岛素抵抗、下调促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone,TSH)和激...     

二甲双胍通过激活AMPK降低同型半胱氨酸对内皮细胞的损伤

目的探讨二甲双胍能否降低同型半胱氨酸(Hcy)对血管内皮细胞的损伤及其可能的机制。方法培养人血管内皮细胞株(EC304人血管内皮细胞),分为对照组、Hcy组、二甲双胍组和Hcy+二甲双胍组,采用CCK-8检测细胞活力,采用乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒测定内皮细胞LDH、SOD活性及细胞内MDA含量,采用RT-PCR检测SOD1、过氧化氢酶(CAT)和NADPH氧化酶2(NOX2)mRNA的表达,采用Western blot检测AMPKα和p-AMPKα蛋白的表达。结果与对照组相比,Hcy组内皮细胞活力明显下降,LDH活性增加,细胞内MDA含量升高,SOD活性下降,SOD1和CAT mRNA表达水平显著下降,而NOX2 mRNA表达水平则明显升高,二甲双胍能够抑制Hcy引起的细胞活力下降及LDH、MDA增加;二甲双胍增加SOD活性,增加SOD1和CAT mRNA表达水平,减少NOX2 mRNA表达水平。AMPK抑制剂Compoud C则可以逆转二甲双胍对Hcy引起的内皮细胞损伤的保护作用。结论二甲双胍激活AMPK可能通过调控细胞内氧化应激抑制Hcy对内皮细胞的损伤。     

二甲双胍调控AMPK通路对稳定期慢性阻塞性肺疾病小鼠的影响及机制

目的 探讨二甲双胍调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)小鼠的影响及机制。方法 野生型(WT)C57BL/6J小鼠随机分为AMPK-WT组、AMPK-WT+COPD组、AMPK-WT+COPD+二甲双胍组,肺AMPK特异性敲除小鼠随机分为AMPK-敲除(KO)组、AMPK-KO+COPD组、AMPK-KO+COPD+二甲双胍组,采用香烟烟雾吸入的方法建立稳定期COPD模型,给予二甲双胍干预。比较各组间肺组织病理改变、AMPK、核因子(NF)-κB、核因子E2相关因子(Nrf)2、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-12表达及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-8、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的差异。结果 AMPK-WT+COPD组肺组织出现了典型的COPD病理改变,p-AMPK、NF-κB、CHOP、Caspase-12的表达水平及TNF-α、IL-6、IL-8、MDA含量均明显高于AMPK-WT组,Nrf2表达水平及SOD的含量均明显低于AMPK-...     

二甲双胍和饮食因素对糖尿病小鼠骨骼肌AMPK活性的影响

将2型糖尿病KK-Ay小鼠分为二甲双胍／高脂饮食、二甲双胍／低脂饮食、高脂饮食和低脂饮食4组，通过测定骨骼肌中腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）活性，发现二甲双胍和低脂饮食均可使AMPK活性增加，二者不存在累加效应。     

二甲双胍通过AMPK/SIRT3通路促进脂肪酸培养的肌细胞自噬

目的探讨二甲双胍对高脂培养肌细胞自噬的作用及可能机制。方法用不同浓度棕榈酸(0.1、0.2、0.4、0.6 mmol/L)及二甲双胍(0.5、1、2、5、10 mmol/L)分别干预L6肌细胞24 h,CCK 8法检测肌细胞的存活率。棕榈酸和二甲双胍干预肌细胞24 h后,Western印迹检测微管相关轻链蛋白3(LC3Ⅱ)、自噬相关蛋白Beclin 1、泛素结合蛋白p62、沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)蛋白表达及腺苷酸活化的蛋白激酶(AMPK)磷酸化水平,RT-PCR技术检测上述基因的mRNA表达水平。结果棕榈酸剂量依赖性地降低肌细胞活力,2 mmol/L二甲双胍显示最佳的对抗作用。0.4 mmol/L棕榈酸和2 mmol/L二甲双胍干预肌细胞24 h后,棕榈酸显著减少LC3Ⅱ/LC3I、Beclin 1、SIRT3的蛋白及mRNA表达水平,降低AMPK磷酸化水平,显著增加p62的蛋白及mRNA表达水平(均P<0.05),棕榈酸的这些作用可被二甲双胍所对抗(均P<0.05)。结论二甲双胍可能通过刺激AMPK的磷酸化增加SIRT3的表达而增强脂肪酸培养的肌细胞自噬。     

二甲双胍分子机制的研究进展

二甲双胍是治疗T2DM的一线用药,其分子机制未明。主要通过轻度抑制线粒体呼吸链复合物Ⅰ,进而激动腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)来减少肝脏葡萄糖输出。除降糖外,二甲双胍在治疗多囊卵巢综合征(PCOS)、降低糖尿病微血管及大血管并发症方面均发挥作用,还可用于癌症的辅助治疗。     

二甲双胍对心力衰竭大鼠心功能的影响及其机制

目的 探讨二甲双胍对心力衰竭大鼠心功能的影响及其可能的作用机制.方法 选择成年Wistar大鼠67只,采取结扎冠状动脉前降支的方法建立心力衰竭模型,随机分为二甲双胍治疗组19只、AMPK激动剂(AIC-AR)治疗组20只、生理盐水对照组13只,同时设假手术组15只,分别给予相应的处理.4周后,观察各组左室射血分数(LVEF)、血流动力学指标、血浆BNP水平,并留取心肌组织检测p-AMPKαThr-172蛋白表达.结果 与生理盐水对照组比较,二甲双胍治疗组、AICAR治疗组LVEF、左室收缩压和左室压力最大上升和下降速率均显著提高(P均＜0.05),左室舒张末压显著降低(P均＜0.05).所有心力衰竭大鼠用药前血浆BNP水平高于假手术组(P均＜0.05);药物干预4周后,二甲双胍治疗组、AICAR治疗组血浆BNP水平较生理盐水对照组明显降低(P均＜0.05).免疫组化显示,二甲双胍治疗组、AICAR治疗组P-AMPKαThr-172蛋白表达明显升高(P均＜0.05).结论 二甲双胍可明显改善心力衰竭大鼠的心功能状态,这种作用与激活AMPK信号转导通路有关.     

二甲双胍对2型糖尿病大鼠脂肪组织中AMPKα2表达的影响

目的观察二甲双胍对2型糖尿病大鼠脂肪组织中腺苷酸活化蛋白激酶α2（AMPKα2）表达及对糖、脂代谢的影响,探讨其改善血糖、血脂的可能机制。方法高脂饮食伴一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法制备2型糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型组和治疗组,后者给予盐酸二甲双胍灌胃治疗。测定大鼠治疗前后的体质量,实验末测定各组大鼠肾周及睾周脂肪重量,并检测各组空腹血糖（FBG）、胰岛素（FINS）、TC、TG、HDL、LDL水平,计算大鼠脂体比、胰岛素敏感指数（ISI）。同时以半定量RT-PCR检测脂肪组织AMPKα2 mRNA的表达。结果与模型组比较,治疗组脂肪组织AMPKα2的表达及血清FINS、HDL、ISI增高,FBG、TC、TG、LDL降低,P均〈0.05。结论二甲双胍可能通过上调2型糖尿病大鼠脂肪组织AMPKα2表达,调节机体糖、脂代谢,改善胰岛素敏感性。     

二甲双胍对胰岛素抵抗状态的小鼠胚胎成纤维细胞中腺苷酸活化蛋白激酶及葡萄糖转运子4表达的影响

目的观察二甲双胍对IR状态的小鼠胚胎成纤维(3T3-L1)细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)及葡萄糖转运子4(GluT4)mRNA表达的影响。方法诱导分化3T3-L1前脂肪细胞为成熟脂肪细胞并用油红O染色证明。用地塞米松诱导建立3T3-L1细胞IR模型,以葡萄糖氧化酶法测定不同时段细胞培养基中剩余葡萄糖浓度,以确定IR模型的建立。给予二甲双胍进行药物干预后,测定细胞培养基中剩余葡萄糖浓度并运用实时荧光定量PCR技术检测细胞AMPK和GluT4的mRNA基因水平。结果药物干预组给予不同浓度二甲双胍后,细胞培养基中剩余葡萄糖浓度均较模型组降低(P0.01)。药物干预组AMPK、GluT4mRNA水平较模型组均增加(P0.01)。结论二甲双胍上调处于IR状态的3T3-L1细胞中AMPK和GluT4mRNA水平,增加细胞对葡萄糖利用。     

JAK2/STAT3信号通路介导小鼠骨性关节炎中软骨细胞代谢和抗氧化应激的研究

目的 在小鼠骨性关节炎（OA）模型中观察Janus酪氨酸蛋白激酶2/信号转导子与转录激活子蛋白3（JAK2/STAT3）信号通路对软骨细胞代谢的影响以及线粒体抗氧化应激能力的改变,探讨JAK2/STAT3信号通路在此过程中的作用。方法 将10只C57BL/6小鼠随机分为两组,选择其中一组小鼠建立OA模型,3周后取材,培养软骨细胞作为实验组,其余小鼠正常培养细胞作为对照组。在对照组和实验组中分别加入JAK2/STAT3信号通路激动剂SC-39100,运用蛋白印迹法（Western blotting）检测各组细胞p-JAK2、p-STAT3、B淋巴细胞瘤?2（Bcl-2）蛋白和Bax蛋白的表达,同时检测各组线粒体氧化应激指标琥珀酸脱氢酶（SDH）、细胞色素c氧化酶（COX）、丙二醛（MDA）改变。结果 与对照组相比,OA模型组软骨细胞p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2蛋白的表达偏低（P＜0.05）、Bax蛋白的表达水平偏高（P＜0.05）,且OA模型组软骨细胞SDH和COX的表达水平均偏低（P＜0.05）、MDA的含量偏高（P＜0.05）;当OA模型组加入SC-39100后,p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2表达均较OA模型组升高（P＜0.05）、Bax蛋白表达下降（P＜0.05）,SDH和COX的表达水平均较OA模型组升高（P＜0.05）,MDA的含量较OA模型组降低（P＜0.05）;对照组中加入SC-39100后的各指标与加入SC-39100前比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;OA模型加入SC-39100组后的各指标与对照组加入SC-39100比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 JAK2/STAT3信号通路和OA中软骨细胞变化密切相关,JAK2/STAT3信号通路激活后可抑制软骨细胞的凋亡;当激活的JAK2/STAT3信号通路活化时会增加软骨细胞线粒体抗氧化应激能力。     

两种不同途径沉默STAT3对乳腺癌裸鼠移植瘤的影响

目的应用RNA干扰技术沉默信号转导子与转录活化子3（STAT3）基因,探讨其siRNA通过瘤内注射和腹腔注射两种转染途径对裸鼠乳腺癌移植瘤的影响。方法制作乳腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为空白对照组、瘤内注射组和腹腔注射组。取肿瘤行HE及免疫组化染色,采用W estern B lot法检测STAT3表达情况。结果瘤内注射组和腹腔注射组出现大面积细胞坏死及细胞凋亡现象,STAT3为阴性,且STAT3表达明显低于空白对照组（P〈0.05）,但前两组间比较无统计学差异（P〉0.05）。结论两种转染途径均可沉默STAT3基因,抑制其表达和肿瘤生长,但两种途径之间无显著性差异。     

前列腺癌组织中Ob—R和STAT3的表达变化及意义

目的观察瘦素受体（Ob—R）及信号转导和转录激活因子3（STAT3）在前列腺癌（PCa）组织中的表达,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测41例Pea（PCa组）、22例前列腺上皮内瘤（PIN,PIN组）、25例良性前列腺增生（BPH,BPH组）组织中Ob—R和STAT3。结果在BPH、PIN和PCa组中,Pb—R阳性表达率分别为56．00％（14／25）、72．73％（16／22）、90．24％（37／41）,PCa组与BPH组比较,P〈0．01,余组间两两比较,P均〉0．05;STAT3阳性表达率分别为60．00％（15／25）、81．82％（18／22）、87．80％（36／41）,PCa组与BPH组比较,P〈0．01,余组间两两比较,P均〉0．05。Oh-R的表达与PCa病理分级、临床分期无关,STAT3的表达仅与PCa病理分级有关（P〈0．05）。0b—R与STAT3表达呈正相关（r=0．6897,P〈0．01）。结论PCa组织中0b—R和STAT3呈高表达。Ob—R和STAT3可作为判断PCa生物学行为的指标。     

STAT3信号蛋白与食管鳞癌上皮间质转化的关系及其意义

目的:探讨食管鳞癌中STAT3、p-STAT3蛋白表达与食管鳞癌上皮间质转化的关系及其在食管鳞癌浸润转移中的作用.方法:采用免疫组织化学技术检测80例食管鳞癌中STAT3、p-STAT3及上皮间质转化标志物E-cadherin和Vimentin的表达.结果:食管鳞癌组织中STAT3、P-STAT3、E-cadherin和Vimentin蛋白阳性率与癌旁正常组织相比有显著性差异(STAT3: 87.5% vs 70.0%; p-STAT3: 72.5% vs 28.8%; E-cadherin:37.5% vs 78.8%; Vimentin: 48.8% vs 0%,均P<0.01).食管鳞癌组织STAT3、p-STAT3的表达均与E-cadhcrin的表达呈负相关(r=-0.41 0,-0.506;均P=0.000),与Vimentin表达均呈正相关(r=0.293,0.321;P=0.008,0.004),且与癌组织的浸润深度密切相关(均P<0.05).结论:信号蛋白STAT3可能参与了食管鳞癌的上皮间质转化过程,并与食管鳞癌的侵袭转移相关.     

姜黄素抑制STAT3信号通路对胰腺癌细胞增殖的影响

目的:研究姜黄素对STAT3活性的调控作用,以探讨姜黄素对人类胰腺癌细胞增殖的影响.方法:应用MTT法检测姜黄素在不同浓度(20、40、60、80、100 μmol/L)及以中效浓度(IC50)的姜黄素分别作用于胰腺癌SW1990细胞0、4、12、24、48、32 h后对胰腺癌SW1990细胞增殖活性的影响;不同浓度姜...     

益生菌VSL#3治疗大鼠溃疡性结肠炎的疗效观察及对STAT6、STAT4的影响

目的观察益生菌VSL#3对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的疗效和对信号转导与转录活化因子STAT4、STAT6蛋白表达的影响,了解益生菌VSL#3治疗大鼠实验性结肠炎的可能作用机制。方法采用5%DSS溶液诱导建立UC模型,32只SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、美沙拉嗪组、益生菌组,每组8只。模型组、美沙拉嗪组、益生菌组均采用5%DSS溶液造模,正常对照组正常饮食,美沙拉嗪组给予美沙拉嗪混悬液灌胃,益生菌组给予益生菌VSL#3灌胃;采用组织损伤学评分及HE染色检测各组干预疗效,免疫组化及Western blotting法检测大鼠大肠组织中STAT4和STAT6的表达。结果模型组大鼠组织病理损伤最重,明显高于正常对照组、美沙拉嗪组和益生菌组(P0.05)。与模型组比较,美沙拉嗪组和益生菌组大鼠结肠黏膜组织破坏明显减轻,破坏程度介于正常对照组和模型组之间。与模型组比较,益生菌组、美沙拉嗪组STAT4蛋白和STAT6蛋白表达均降低(P0.05)。结论益生菌VSL#3对大鼠UC有治疗作用,其部分机制可能是通过抑制STAT4和STAT6的表达水平而发挥治疗作用。     

STAT3与甲状腺癌

信号转导与转录激活因子(STAT)3是STATs家族的重要成员之一,能影响一系列基因的转录和表达,在细胞增殖、分化、衰老和凋亡中发挥重要作用.研究发现,在多种人类肿瘤细胞中均有STAT3持续性激活诱导的相应蛋白高表达,这些蛋白可以促进肿瘤发生、发展、侵袭和转移,并抑制肿瘤细胞凋亡.活化的STAT3与甲状腺癌的发生、发展及恶性生物学行为密切相关,有望成为甲状腺癌治疗的新靶标.