1,25-二羟维生素D_3对胰岛β细胞免疫保护作用

目的研究1,25-二羟维生素D3对胰岛β细胞的免疫保护作用,为胰岛β细胞的免疫保护治疗提供实验依据。方法培养胰岛β细胞株NIT细胞及正常对照外周血单个核细胞,分别与以下4组作用：①（IL-1β＋IFN-γ）组,②（IL-1β＋IFN-γ＋D3）组,③D3组,④对照组（DMEM）。采用酶联免疫吸附分析（ELISA）检测培养上清液中IL-4、IFN-γ水平,用硝酸还原酶法检测上清液NO水平,用化学发光法检测上清液胰岛素水平。结果①IL-1β＋IFN-γ＋D3刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ刺激组相比,分泌IL-4水平增高（P〈0.01）、IFN-γ减少（P〈0.01）,IL-4/IFN-γ增高（P〈0.01）;②IL-1β＋IFN-γ＋D3刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ刺激组相比,分泌NO水平减少（P〈0.01）;③IL-1β＋IFN-γ＋D3刺激的NIT-1细胞与IL-1β＋IFN-γ刺激组相比,胰岛素分泌增加（P〈0.05）。结论 1,25-二羟维生素D3可减轻IL-1β＋IFN-γ对NIT细胞的损伤作用,保护NIT细胞的胰岛素分泌功能。     

雷公藤单体T4体外给药对IL—2R表达的影响

Ｔ１是中草药雷公藤的一类粗提物，临床治疗类风湿关节炎和系统性红斑狼疮等免疫性疾病效果显著。Ｔ４是进一步从Ｔ１中提取出的单体成分，以正常人外周血清单相核细胞（ＰＢＭＣ）为实验材料，测定了不同浓度的Ｔ１（０．０９８～３．１３Ｕ／ｍｌ）和Ｔ４（０．０３９～５ｎｇ／ｍｌ）对于Ｔ细胞功能的影响。结果表明，Ｔ１和Ｔ４对Ｔ细胞表面ＩＬ－２Ｒ的表达剂量相关的抑制作用。结果还显示，在药物作用下，ＩＬ－２对ＩＬ－２Ｒ     

雌激素对胰岛β细胞的作用及其机制

女性绝经后,2型糖尿病的发病率显著增加,雌激素替代治疗(hormone replacement therapy,HRT)能有效改善症状.以往通常认为雌激素是通过增强胰岛素的敏感性,改善糖、脂代谢的紊乱,从而缓解胰岛素抵抗.最近的研究表明,除上述机制外,雌激素直接作用于胰岛β细胞,防止其凋亡和促进胰岛素的分泌在其中也起着关键的作用.     

雷公藤甲素对诱导CD4+、CD8+T细胞凋亡的作用

目的 探讨雷公藤甲素对ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋Ｔ细胞凋亡的作用。方法 分离后的正常人外周血ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋Ｔ细胞在外培养条件下,加入雷公藤甲素处理,然后用３末端脱氧核苷酸基（ＴｄＴ）介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）检测凋亡细胞。结果 雷公藤甲素处理后ＣＤ４和ＣＤ８＾＋细胞凋亡率比对照组显著增加,但ＣＤ４＾＋、ＣＤ８＾＋Ｔ细胞凋亡率则针显著差别。结论 雷公藤甲素诱导诱活化的ＣＤ４＾＋、Ｃ     

雷公藤总甙在细胞周期多个阶段抑制T细胞增殖

用小剂量 PHA(0.15μg/ml)诱导人 T 细胞从 Go 相进入 G_((?)a)和 G_((?)b)相,但不能进入 S 相和 G_2/M 相,和用人 rIL-2诱导上述活化的 T 细胞进入 S 相和 G_2/M 相作模型,用 AO 和 PI 染色在流式细胞仪上分析了雷公藤总甙 T Ⅱ对 T 细胞增殖反应的影响。结果表明 T Ⅱ在细胞周期 Go→G_(?),G_(?)→G_((?)b),G_(?)→S,和 S→G_2/M 多个关键点上抑制 T 细胞的增殖反应。     

六黄合剂对胰岛素抵抗大鼠胰岛β细胞的保护作用

目的探讨中药复方六黄合剂对胰岛素抵抗大鼠胰岛β细胞的影响。方法动物随机分为空白对照组、模型对照组、六黄合剂组,每组8只。应用地塞米松致大鼠胰岛素抵抗模型,给予六黄合剂干预,检测空腹血糖(FBG),放射免疫分析法检测血清胰岛素(FINS)水平,化学比色法检测胰腺丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,透射电镜观察胰岛β细胞超微结构的变化。结果与模型对照组相比,六黄合剂组FINS水平和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)明显下降(p0.01),胰腺MDA含量下降(p0.01),SOD活性升高(p0.05)、GSH-Px活性升高(p0.01)。电镜观察IR大鼠胰岛β细胞可见凋亡早期改变,六黄合剂组β细胞超微结构的病理改变明显减轻。结论中药复方六黄合剂对β细胞的保护作用可能与减轻IR大鼠胰腺的氧化应激和增强抗氧化能力相关。     

雷公藤单体T_4体外给药对IL－2R表达的影响

Ｔ_Ⅱ是中草药雷公藤的一类粗提物，临床治疗类风湿关节炎和系统性红斑狼疮等免疫性疾病效果显著。Ｔ_４是进一步从Ｔ_Ⅱ中提取出的单体成分。以正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）为实验材料，测定了不同浓度的Ｔ_Ⅱ（０．０９８～３．１３Ｕ／ｍｌ）和Ｔ_４（０．０３９～５ｎｇ／ｍｌ）对于Ｔ细胞功能的影响。结果表明，Ｔ_Ⅱ和Ｔ_４对Ｔ细胞表面ＩＬ－２Ｒ的表达剂量相关的抑制作用。结果还显示，在药物作用下，ＩＬ－２对ＩＬ－２Ｒ表达的调节作用是很有限的。     

糖尿病临床胰岛β细胞功能的评估

狭义的胰岛β细胞功能是指β细胞对外界刺激作出适当反应,维持葡萄糖自稳态(glucose homeostasis)平衡的能力,广义上还包括自身因素的居中调节如自分泌、自身对损伤的修复能力等。2型糖尿病致病因素的复杂性已有大量实例证实是由胰岛β细胞功能及胰岛素敏感性缺陷引起[1],同时伴有肝、肾清除及再流通能力下降所导致的葡萄糖的增加     

TGF-β诱导猪CD4+ T细胞来源的foxp3high调节性T细胞

目的:应用TGF-β2诱导猪CD4 T细胞,分析其细胞表型,并鉴定其免疫生物学特性。方法:用磁珠阳性分选的方法从健康猪外周血淋巴细胞中获取CD4 T细胞,应用TGF-β2诱导培养、扩增CD4 T细胞,监测其细胞表型和foxp3表达,采用混合淋巴细胞培养鉴定其免疫生物学特性。结果:TGF-β2能够诱导CD4 T细胞高表达foxp3,诱导扩增的细胞能抑制同基因CD4 CD25-T细胞的活化,具有免疫抑制功能。结论:TGF-β2能够诱导CD4 T细胞成为具有与天然CD4 CD25 调节性T细胞相似抑制活性的细胞。     

雷公藤对SLE肾炎反抑制T细胞的影响

本文通过对19例狼疮肾患者进行反T 抑制细胞分析,其中6例服用雷公藤治疗(30mg/d),7例服用强的松治疗(30mg/d),6例未服药(初发病).结果显示狼疮肾患者的CD_8~+VV~+细胞高于正常对照者。服用雷公藤后CD_8~+VV~+明显下降,与未服药组比较有显著差别(P<0.05),由此推测减少CD_8~+VV~+细胞可能是雷公藤的药理作用之一。     

雷公藤对Ly—22.2^＋细胞（抑制性T淋巴细胞）的激活作用

本文用单克隆抗体观察了雷公藤对小鼠脾脏的Ｔｈｙ－１＾＋细胞，Ｌ３，ＬＴ＾＝细胞Ｌｙｔ－２．３％＋细胞和Ｌｙ－２２．２＾＋细胞的影响，发现Ｌｙ－２．３＾＋细胞增多的同时，Ｌｙ－２２．２＾＋细胞明显增加，Ｌ３Ｌ５＾＝细胞／Ｌｙｔ－２．３＾＋细胞明显下降。     

CFSE标记抗原特异性CD4+CD25+T细胞在胰岛移植体内归巢的研究

目的:观察抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞在小鼠同种异体胰岛移植后体内的分布特点,探讨抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞免疫调节可能机制。方法:构建小鼠同种异体胰岛移植模型。CFSE对抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞标记,经尾静脉输注。用组织冰冻切片和流式细胞术动态了解CFSE标记的抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞在受体内的分布和增殖变化。结果:抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞联合胰岛移植组胰岛移植物平均生存期为(34.57±17.15)d,较胰岛移植组生存时间(10.6±1.82)d,差异有统计学意义(P<0.01)。抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞在各级淋巴结均有能定居,但是胰腺淋巴结定居的细胞数量明显多于其他淋巴结。结论:抗原特异性Treg细胞抑制STZ诱导的糖尿病小鼠的急性移植排斥反应,细胞抑制功能与细胞在体内淋巴结的归巢有关。     

内质网应激对胰岛β细胞凋亡的损伤效应

胰岛β细胞具有高度发达的内质网,是对内质网应激最敏感的细胞之一.内质网应激是胰岛β细胞在受到应激条件下,细胞的适应性反应.内外环境中的多种因素：氧化损伤、脂毒性、细胞因子作用等均可打破内质网的稳态,导致蛋白质折叠障碍或错误折叠,进而触发内质网应激.严重而持久的应激将导致β细胞的凋亡,参与多种代谢性疾病乃至多种疾病的发生.综述多种因素诱导的内质网应激对胰岛β细胞的损伤效应.     

K+通道阻断剂四乙铵对胰岛β-细胞凋亡的作用机制研究

目的 研究K^＋通道阻断剂四乙铵（TEA）对诱导胰岛β-细胞凋亡的作用及机制。方法 以IFN-γ＋IL-1β诱导NIT细胞凋亡,同时加入TEA,通过AnnexinV检测、PI染色,利用四唑蓝比色实验（MTT法）检测不同浓度TEA对链脲佐菌素（STZ）处理细胞活性的影响;使用流式细胞术检测TEA对诱导NIT细胞凋亡的影响;通过硝酸还原酶法、硫代巴比妥酸TBA法、化学比色法、黄嘌呤氧化酶法、分别测定培养上清液中NO和氧自由基含量以及细胞裂解物中NO合成酶（NOS）及超氧化物歧化酶（super oxide dismutase,SOID）活性。结果 1mmol／L TEA能显著抑制IFN-γ＋IL-1β诱导的NIT细胞凋亡。IFN-γ＋IL-1β可显著增加NOS活性,降低SOD的活性,从而导致培养上清液中NO及氧自由基的含量显著增加;TEA可显著抑制STZ的作用。结论K^＋通道在胰岛β-细胞的凋亡中可能起着重要作用;K^＋通道阻断剂TEA可显著抑制IFN-γ＋IL-1β诱导的胰岛β细胞凋亡,其机制可能与下调NIT细胞诱导性NO合成酶（iNOS）活性,上调SOD活性,减少NO的产生以及增强其清除氧自由基的能力有关。     

胰岛β细胞保护的研究进展

多种因素可引起胰岛β细胞的损伤，因此通过保护胰岛β细胞来治疗糖尿病的研究受到人们广泛重视。保护途径较多，包括免疫机制、阻断细胞因子的作用、使用自由基清除剂、采用免疫隔离技术以及基因重组技术。胰岛细胞保护为治疗糖尿病提供了新的思路和方法。     

细胞因子和NO对胰岛β细胞凋亡的影响

细胞因子是导致1型糖尿病患者胰岛β细胞功能障碍的免疫效应分子.细胞因子一方面可通过诱导诱导型NO合酶(iNOS)表达,以NO为效应分子,激活可溶性鸟甘酸环化酶(GC),通过cGMP依赖性蛋白激酶途径,诱导β细胞凋亡;另一方面可通过Fas等途径介导β细胞凋亡.NO也可通过非cGMP途径诱导β细胞凋亡.     

雷公藤对Ly－22．2~＋细胞（抑制性T淋巴细胞）的激活作用

本文用单克隆抗体观察了雷公藤对小鼠脾脏的Ｔｈｙ─１￣＋细胞、Ｌ３、Ｔ＿４￣＋细胞、Ｌｙｔ─２．３￣＋细胞和Ｌｙ─２２．２￣＋细胞（抑制性Ｔ淋巴细胞，Ｔｓ）的影响，发现Ｌｖｔ─２．３￣＋细胞增多的同时（Ｐ＜０．０１），Ｌｙ─２２．２￣＋细胞明显增加，Ｌ３Ｔ＿４￣＋细胞／Ｌｙｔ─２．３＋细胞（即Ｔｈ／Ｔｓ）明显下降（Ｐ＜０，０５），而Ｔｈｙ─１￣＋和Ｌ３Ｔ＿４￣＋细胞比例不变，表明雷公藤在小鼠体内直接激活脾脏Ｔｓ，而发挥其免疫抑制作用。     

海洛因依赖对大鼠胰岛β细胞表达胰岛淀粉样多肽和葡萄糖转运蛋白2的影响

目的 探讨海洛因依赖对胰岛β细胞表达胰岛淀粉样多肽(IAPP)和葡萄糖转运蛋白2(Glut2)的影响及引起表达变化的可能机制. 方法 正常SD大鼠66只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组.皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、38天取胰尾组织.应用免疫组织化学SABC法及图像分析、形态计量法进行研究. 结果 1.免疫组织化学法显示,胰岛β细胞IAPP的免疫反应阳性产物定位于胞质.Glut2的免疫染色见于胞膜.2.与正常组和盐水组比较,海洛因依赖组大鼠胰岛IAPP阳性细胞免疫反应明显增强;24d以后细胞面数密度加大,与正常及盐水对照组比较有显著性差异;图像分析显示,海洛因依赖组IAPP阳性细胞的平均灰度值降低(P<0.05),以38d时间点最低.3.海洛因依赖组大鼠Glut2阳性细胞免疫反应也明显增强;图像分析显示海洛因依赖期间大鼠胰岛Glut2阳性细胞的平均灰度值下降,与正常及盐水对照组比较差异有显著性(P<0.05),也以38d时间点最低. 结论 在海洛因依赖期间,胰岛β细胞通过增加细胞数以及合成增多的方式,使IAPP和Glut2的表达增多,并参与了大鼠海洛因依赖期间机体代谢以及糖代谢的调节过程.