新疆居民HBV基因型的分布及其与临床表现关系的初步研究

目的 了解新疆地区乙肝患者HBV基因型的分布及其与临床表现的关系.方法 从2000余份血清中筛选出HBsAg阳性血清200份.利用巢式PCR法扩增血清中HBV DNA S基因进行测序并分型;统计分析基因型分布及与临床表现的关系.结果 新疆HBV有B、C、D三个基因型,其中B基因型10例（7.8%）,C基因型58例（45.7%）,D基因型59例（46.5%）.C基因型中汉族51例（87.9%）,D型中汉族27例（45.7%）,维吾尔族24例（40.7%）.结论 新疆地区HBV基因型以C、D型为主,少量为B型.C型以汉族为主,D型中汉族和维吾尔族占多数.C型与更严重的疾病及转归有关.     

乙型肝炎病毒基因B和C型与阿德福韦酯疗效关系的研究

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因B和C型与阿德福韦酯的疗效关系。方法选取应用阿德福韦酯10mg/d进行抗病毒治疗12、24、36、48周的136例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,用聚合酶链反应（PCR）-微板核酸杂交-酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测分析基因型,评价阿德福韦酯治疗不同基因型HBV的疗效。结果 136份样本中,HBV基因B型39份,HBV基因C型97份。在治疗12、24、36、48周时,B基因型患者丙氨酸氨基转移酶（ALT）的变化、血清HBVDNA水平下降比例≥2log10及完全抑制情况与C基因型患者相比差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论本研究所观察的样本中,阿德福韦酯的抗病毒疗效与HBV基因B型和C型均无相关性。     

HBV基因型与HBV感染慢性化、重症化的关系

目的 探讨HBV基因型与HBV感染后慢性化、重症化的关系.方法 应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国2922例HBV感染者进行HBV基因型检测,比较各临床类型HBV感染者基因型分布差异及各基因型HBV感染者肝功能和病毒学差异.结果 2922例HBV感染者中,基因型B、C、B/C、D分别占15.9%、83.5%、0.41%、0.21%.与慢性肝炎比较急性肝炎B基因型所占比例较高（P=0.003）,肝硬化和肝细胞性肝癌C基因型所占比例较高（P值均为0.000）,慢加急性肝衰竭与慢性肝炎比较基因型分布差异无统计学意义.急性肝炎和慢性肝炎B、C基因型患者HBeAg 阳性率、HBV DNA病毒载量、肝功能生化指标差异无统计学意义.慢加急性肝衰竭、肝硬化、肝细胞性肝癌组C基因型较B基因型患者HBeAg阳性率更高（P值分别为0.000、0.024、0.003）,肝细胞性肝癌C基因型患者HBV DNA病毒载量高于B基因型患者（P=0.025）,慢加急性肝衰竭和肝细胞性肝癌组C基因型较B基因型患者胆碱酯酶更低（P值为0.0004、0.02）.结论 中国HBV感染者的HBV基因型以B、C基因型为主,少量的B/C、D基因型;C基因型较B基因型HBV感染者更易发生慢性化和进展为肝硬化和肝细胞性肝癌,但未观察到基因型对慢加急性肝衰竭发生的差异.急性和轻症HBV感染者B、C基因型未显示对病情的明显影响,但重症和终末期HBV感染者C基因型较B基因型患者HBeAg阳性率、HBV DNA病毒载量更高,肝功能损害更严重.     

慢性乙肝病毒感染者基因分型及其临床意义

目的探讨江苏南通地区慢性乙肝病毒（HBV）感染者基因型分布状况及其临床相关性。方法采用多对型特异性引物巢式PCR法对220例南通地区血清HBV标志物和HBV-DNA阳性者,包括乙肝表面抗原携带者（ASC）30例,慢性乙型肝炎（CHB）97例,重型肝炎（CSH）29例,肝炎后肝硬化（LC）34例,肝细胞癌（HCC）30例,进行HBV基因型检测。结果220例中B型59例（26.8%）,C型150例（68.2%）,BC混合型11例（5.0%）;C基因型在CSH组、LC组、HCC组中的比例显著高于ASC组（P〈0.05）。B型、C型、BC混合型HBeAg阳性率分别为49.2%、54.0%和36.4%,差异无统计学意义（P〉0.05）。C型和BC混合型HBV-DNA载量显著高于B型,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论南通地区HBV基因型以B、C型为主,C型为优势基因型,并与重型肝炎、肝硬化、肝癌的发生及血清HBV-DNA高载量相关。     

中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义

目的了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义。方法应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点及临床意义。结果2922例HBV感染者中,B、C、B／C、D基因型分别占15．9％、83．5％、0．41％、0．21％,未发现其他基因型。北方地区c基因型占绝大多数,南方地区浙江、江苏地区以c基因型为主,广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主。B基因型较c基因型HBV感染者平均年龄小（P〈0．001）;C基因型HBV感染者HBeAg阳性率较B基因型高（P=0．023）;B基因型HBV感染者乙型肝炎病毒载量较c基因型高（P=0．038）;C基因型HBV感染者CHE、ALB较低,差异有统计学意义（P值分别为0．016）。结论中国HBV基因型以B、c基因型为主,仅少量的B／C和D基因型。北方地区以c基因型为主,南方地区c基因型明显减少,部分南方地区以B基因型为主。c基因型HBV感染者年龄较大、HBeAg阳性率高、HBVDNA载量低,病情较重。     

HBV基因分型与病毒载量及血清标志物关系的探讨

目的探讨HBV基因型与HBV-DNA水平及血清标志物的相关性。方法选择125例乙肝患者血清HBV-DNA复制阳性的标本分别检测HBV病毒基因分型、HBV-DNA、乙肝血清标志物、谷丙转氨酶（ALT）和总胆红素（TBL）。结果 125例HBV-DNA复制阳性标本中HBV基因分型以B型为主占71.2%（89/125）,C型占24.0%（30/125）,BC混合型占2.4%（3/125）,非B非C型占2.4%（3/125）;B基因型患者血清ALT（297.3±193.6）U/L和TBL（105.1±59.7）mol/L水平高于C基因型患者ALT（158.1±107.5）U/L和TBL（53.1±22.7）mol/L,P〈0.01;B基因型患者血清抗-HBe阳性率91.0%（81/89）显著高于C基因型的23.3%（7/30）,P〈0.01;B型HBV-DNA水平（5.87±1.72）log10copies/mL与C型（6.01±1.91）log10copies/mL无差异（P〉0.05）。结论本地区HBV病毒基因型以B型为主,C型次之,B基因型对肝脏损害较C基因型重,并与HBV载量及HBeAg系统具有相关性,B基因型易发生YMDD突变。     

乙肝病毒基因型及病毒变异对慢性肝病进展的影响

目的进一步研究HBV基因型及病毒变异与慢性肝病进展的关系。方法用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）以及部分PCR产物测序的方法对401例慢性HBV感染者，包括112例HCC患者（HCC组）。129例无症状携带者（ASC组），70例肝硬化患者（LC组）和90例慢性肝炎患者（CH组）进行HBV基因分型以及BCP和PC变异检测。结果401例慢性HBV感染者中181例发生B基因型感染，220例发生C型感染。HCC组中C型分布高于其他3个疾病组；C基因型感染者BCP变异多于B基因型；B基因型感染者PC变异多于C基因型：同时BCP变异发生率随着病程进展而递增：在ASC组、CH组、LC组和HCC组里的BCP变异阳性率分别为22．4％、35．0％、50．0％、74．1％。C1与C2亚型相比，C1有较高BCP变异阳性率，而C2有较高PC变异发生率。结论BCP变异与肝病进程存在依从关系，因此BCP变异的检测对慢性HBV感染的疾病进展和临床结局的评估有重要意义。     

慢性乙型肝炎患者HBV C、B基因型与特异性细胞毒性T淋巴细胞表面PD-1表达的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者HBV C、B基因型与HBV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）表面程序性死亡受体-1（PD-1）表达的关系和意义.方法 共研究CHB患者71例,人白细胞抗原（HLA）-A2阳性,HBV DNA ＞103拷贝/ml,其中C基因型34例（47.89％）,B基因型36例（50.70％）.比较C、B基因型感染者外周血HBV特异性CTL表面PD-1的表达水平、HBV特异性CTL水平、HBV DNA水平、ALT和TBil的水平.结果 CHB C基因型感染者的HBV特异性CTL表面PD-1的表达水平（37.30±3.05％）高于B基因型感染者（26.19±3.06％）,t=15.47,P＜0.001,HBV特异性CTL水平（0.25±0.03％）低于B基因型感染者（0.45±0.13％）,t=21.54,P＜0.001,HBV DNA水平（6.75±0.77lo910拷贝/ml）高于B基因型感染者（4.96±1.12 log10拷贝/ml）,t=7.93,P＜0.001,ALT水平（487.39±87.36IU/L）高于B基因型感染者（235.25±90.91IU/L）,t=12.32,P＜0.001,TBil水平（49.73±6.45）高于B基因型感染者（28.48±5.89％）,t=9.01,P＜0.001.结论 CHB C基因型感染者外周血HBV特异性CTL表面PD-1表达水平高于B基因型感染者,导致C基因型感染者HBV特异性CTL水平低于B基因型感染者,HBV DNA水平高于B基因型感染者,因此,肝功能损害比B基因型感染者重.     

中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义

目的 了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义.方法 应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点及临床意义.结果 2922例HBV感染者中,B、C、B/C、D基因型分别占15.9%、83.5%、0.41%、0.21%,未发现其他基因型.北方地区C基因型占绝大多数,南方地区浙江、江苏地区以C基因型为主,广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主.B基因型较C基因型HBV感染者平均年龄小(P<0.001);C基因型HBV感染者HBeAg阳性率较B基因型高(P=0.023);B基因型HBV感染者乙型肝炎病毒载量较C基因型高(P=0.038);C基因型HBV感染者CHE、ALB较低,差异有统计学意义(P值分别为0.016).结论 中国HBV基因型以B、C基因型为主,仅少量的B/C和D基因型.北方地区以C基因型为主,南方地区C基因型明显减少,部分南方地区以B基因型为主.C基因型HBV感染者年龄较大、HBeAg阳性率高、HBV DNA载量低,病情较重.     

中国30个地区HBV基因型分布特点和临床意义

目的 了解中国乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型的分布特点和临床意义.方法 应用型特异性引物聚合酶链反应法,对中国30个省市自治区共2922份HBV感染者血清标本进行基因型检测,同时检测相关病毒学及肝功能生化指标,分析基因型分布特点及临床意义.结果 2922例HBV感染者中,B、C、B/C、D基因型分别占15.9%、83.5%、0.41%、0.21%,未发现其他基因型.北方地区C基因型占绝大多数,南方地区浙江、江苏地区以C基因型为主,广东、湖南、湖北、江西以B基因型为主.B基因型较C基因型HBV感染者平均年龄小(P<0.001);C基因型HBV感染者HBeAg阳性率较B基因型高(P=0.023);B基因型HBV感染者乙型肝炎病毒载量较C基因型高(P=0.038);C基因型HBV感染者CHE、ALB较低,差异有统计学意义(P值分别为0.016).结论 中国HBV基因型以B、C基因型为主,仅少量的B/C和D基因型.北方地区以C基因型为主,南方地区C基因型明显减少,部分南方地区以B基因型为主.C基因型HBV感染者年龄较大、HBeAg阳性率高、HBV DNA载量低,病情较重.     

乙型肝炎病毒C启动子区C1673T/C1799G联合突变的意义

目的 探讨HBV(乙型肝炎病毒)C启动子区(CP) C1673T/C1799G联合变异的生物学和临床意义.方法 136名慢性HBV感染者,包括无症状携带者(ASC) 25例,慢性乙型肝炎(CHB)38例,慢性重型乙型肝炎(CSHB) 24例,乙肝肝硬化(LC) 36例,肝细胞肝癌(HCC)13例,用半巢氏PCR的方法结合直接测序法检测HBV基因亚型及CP区变异,分析C1673T/C1799G联合变异在不同基因亚型中的发生率及与HBV复制、e抗原表达和不同慢性HBV感染疾病谱的关系.结果 本组病例中,Ba亚型110例,Bj亚型1例,C1亚型7例,C2亚型8例,C1673T/C1799G联合变异发生率为80.9％,其中在Ba亚型中为96.4％,C1亚型为14.3％,C2亚型为12.5％,Ba亚型与C1和C2亚型比较,差异有统计学意义(P ＜0.0001).变异组HBV DNA载量与非变异组比较差异无统计学意义(P＞0.05);e抗原阳性组变异率为71.4％,e抗原阴性组为87.5％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).从ASC、CHB、CSHB、LC到HCC组,变异的发生率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 C1673T/C17991G联合变异常见于Ba基因亚型,该变异不影响HBV DNA的复制水平,可能与不同慢性HBV感染疾病谱无关.     

应用扩增受阻突变检测系统（ARMS）检测HBV基因型

目的建立扩增受阻突变检测系统（ARMS）检测乙型肝炎病毒（HBV）基因型方法,并对慢性乙型肝炎（CHB）患者HBV基因型进行分析。方法通过对HBV全基因组序列比对分析,设计ARMS特异性引物和探针体系,建立检测HBVB和C基因型方法,对50例临床标本进行检测。结果50例临床样本中,B型的检出率为26％（13例）,C型为74％（37例）,其实验结果与测序结果完全一致。常州及周边地区乙型肝炎病毒C基因型HBV为优势株。C基因型患者A1762T／G1764A突变率为62％,明显高于B型。结论ARMS检测HBV基因型,快速、准确;常州及周边地区HBV基因型主要为B、C型,且C型携带A1762T／G1764A双突变率较高,与较为严重的肝病相关。     

HBV rtA181位点突变的病毒学特点及临床耐药研究

目的 回顾性研究HBV rtA181位点突变模式与临床核苷（酸）类似物耐药的关系及挽救治疗效果.方法 核苷（酸）类似物治疗过程中发现HBV rtA181位点突变的45例慢性乙型肝炎或肝硬化患者,检测其血清HBV DNA水平,PCR产物直接测序检测HBV变异模式及基因型,收集突变前用药史及突变后的挽救治疗方案及疗效相关资料.结果 HBV rtA181位点共发现三种突变形式,其突变率分别为rtA181T 66.67％ （30/45）,rtA181V 31.11％ （14/45）,rtA181S 2.22％ （1/45）,rtA181T多见于HBV C基因型患者（P＜0.05）;涉及rtA181的HBV突变模式共发现13种,多位点联合突变率为57.78％ （26/45）,其中rtA181与rt236位点联合突变率为40.00％ （18/45）,与rt204位点联合突变率为22.2％ （10/45）,多位点突变患者较单位点突变患者有病毒载量分布更高的趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）,多位点突变与基因型及突变形式无关（P＞0.05）;发生rtA181突变的患者97.78％ （44/45）有拉米夫定（LAM）和（或）阿德福韦酯（ADV）治疗史,另外1例有替比夫定（LdT）治疗史.其后的挽救治疗采用加用或换用恩替卡韦（ETV）、LAM联合ADV以及LdT联合ADV均能在一个月内将HBV DNA降低2个lg值,继续随访效果最显著的方法为加用或换用ETV.结论 HBVrtA181位点突变模式多样,与LAM、ADV或LdT长期单药或序贯治疗有关,加用或换用ETV可取得显著的挽救治疗效果.     

Impact of hepatitis B virus (HBV) x gene mutations on hepatocellular carcinoma development in chronic HBV infection

The hepatitis B virus (HBV) PreS mutations C1653T, T1753V, and A1762T/G1764A were reported as a strong risk factor of hepatocellular carcinoma (HCC) in a meta-analysis. HBV core promoter overlaps partially with HBx coding sequence, so the nucleotide 1762 and 1764 mutations induce HBV X protein (HBx) 130 and 131 substitutions. We sought to elucidate the impact of HBx mutations on HCC development. Chronically HBV-infected patients were enrolled in this study: 42 chronic hepatitis B (CHB) patients, 23 liver cirrhosis (LC) patients, and 31 HCC patients. Direct sequencing showed HBx131, HBx130, HBx5, HBx94, and HBx38 amino acid mutations were common in HCC patients. Of various mutations, HBx130+HBx131 (double) mutations and HBx5+HBx130+HBx131 (triple) mutations were significantly high in HCC patients. Double and triple mutations increased the risk for HCC by 3.75-fold (95% confidence interval [CI] = 1.101 to 12.768, P = 0.033) and 5.34-fold (95% CI = 1.65 to 17.309, P = 0.005), respectively, when HCC patients were compared to CHB patients. Functionally, there were significantly higher levels of NF-κB activity in cells with the HBx5 mutant and with the double mutants than that of wild-type cells and the triple-mutant cells. The triple mutation did not increase NF-κB activity. Other regulatory pathways seem to exist for NF-κB activation. In conclusion, a specific HBx mutation may contribute to HCC development by activating NF-κB activity. The HBx5 mutation in genotype C2 HBV appears to be a risk factor for the development of HCC and may be used to predict the clinical outcomes of patients with chronic HBV infection.     

青岛地区乙型肝炎病毒基因分型及YMDD自然变异的研究

目的 研究青岛地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布以及不同基因型HBV病毒的复制能力与YMDD自然变异情况,探讨其临床意义.方法 对144例HBV-DNA阳性患者采用荧光定量PCR方法检测HBV基因分型及YMDD自然变异,并进行统计学分析.结果 114例患者中C型130例(90.3％),B型12例(8.3％),非B非C型2例(1.4％);有33例(22.9％)存在自然YMDD变异,其中YVDD阳性25例(75.5％),YIDD阳性3例(9.1％),YVDD与YIDD同时阳性5例(15.2％).经统计学分析,乙肝病毒基因型与临床诊断、HBV-DNA病毒载量及YMDD自然变异之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 青岛地区HBV基因型以C型为主,未经治疗的慢性乙肝患者存在YMDD自然变异株,未发现HBV基因型与YMDD自然变异及疾病进程相关.     

Identification of hepatitis B virus X gene mutation in Hong Kong patients with hepatocellular carcinoma.

BACKGROUND: Chronic infection by hepatitis B virus (HBV) is the leading cause of hepatocellular carcinoma (HCC) in man. The viral transactivator HBV X (HBx) gene plays a critical role in the molecular pathogenesis of HBV-related HCC. OBJECTIVES: The aim of this study was to investigate whether there were particular HBx mutations associated with the Chinese Hong Kong patients with HCC. STUDY DESIGN: We have examined HBx in 113 tumor tissue samples from patients with HCC and 48 serum samples from the same group. In addition, we also examined the expression of HBx protein and the index of apoptotic cell death in tumor tissues of HCC. The entire coding region of HBx gene from the sample was sequenced and aligned with the published HBx gene sequence. RESULTS AND CONCLUSIONS: We have identified total 54 different types of mutations in HBx gene. HBx mutations occurred in a very high percentage of samples tested. Mutation of HBx was found in 95.2% and 95.3% of the tumor tissue and serum samples, respectively. Most of samples contained more than one type of the mutation. Relative risk analysis indicated that the mutations in 12 sites of tissue HBx and nine sites of serum HBx were highly associated with HCC, suggesting a potential role of these mutants in carcinogenesis. An insert mutation at position 204: Insert 204AGGCCC, was always found to co-exist with point mutations at 260 (G-->A) and 264 (G/C/T-->A). Furthermore, this particular pattern of HBx mutation was most frequently detected. Immunochemical staining of HBx protein revealed that the nuclear localization of HBx protein in hepatocytes of tumor tissues was highly associated with this particular pattern of HBx mutation. In conclusion, HBx mutation occurs frequently in HCC samples tested and a sample usually has multiple types of mutations. A special pattern of insert at 204 and point mutations at 260 and 264 was identified, and it appears to be associated with the nuclear localization of HBx protein. The development of multiple types of mutations in a given sample may contribute to the process of multiple steps in hepatocarcinogenesis.     

Detection of hepatitis B virus X gene and PreC promoter mutations from chronic hepatitis B patients in the south of Turkey

Hepatitis B virus (HBV) infection is a global health problem with more than 2 billion infected individuals. HBV infection leads to diverse outcomes ranging from acute to chronic hepatitis, which may result in severe complications as liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma (HCC). HBV is one of the most important human DNA viruses having strong oncogenic potential. Recently, many studies have reported on HBV X gene and PreC promoter mutations associated with HCC. In order to detect the prevalence of HBx gene and PreC promoter mutations possibly related to HCC, we have analyzed sera samples collected from 61 patients with chronic hepatitis B. We have detected T1653 mutation in 1 of 61 (1.63%), A1896 mutation in 10 of 61 (16.39%), and T1762-A1764 dual mutation in 4 of 61 (6.55%). T1653 and T1762-A1764 dual mutations were suggested significantly related to HCC in earlier reported studies. Our findings demonstrate that HBx gene and PreC promoter mutations related to HCC are present in our region and prospective clinical chord studies would be useful for better patient management and of early diagnosis of possible HCC cases.