戊二醛交联的异种/异体脱细胞真皮基质的制作及临床应用观察

目的：为降低异种／异体真皮组织的抗原性,便于临床大面积烧伤患者复合皮（ＣＳ）移植的推广。方法：将胰蛋白酶和戊二醛等处理的、含基底膜成分的１８例人（ｈ－ＣＳ）和８例猪（ｓ－ＣＳ）无细胞真皮基质（ＡＤＭ）与自体刃厚表皮一起重叠移植于１３种烧伤患者Ⅲ度切痂创面上,同时以邻近移植的自体刃厚皮（ＯＴＳ）和自体薄中厚皮（ＴＴＳ）为对照,观察无细胞真皮制作前后的组织结构变化和各组皮片移植的成活率及外观效果。结果     

脱细胞异体真皮和自体刃厚皮复合移植在功能部位深度烧伤早期治疗中的临床应用

目的探讨脱细胞异体真皮和自体刃厚皮复合移植在人体重要功能部位深度烧伤创面早期治疗中的临床效果。方法 2008年1月—2011年12月对37例53处关键功能部位深Ⅱ度^Ⅲ度烧伤创面于24Ⅲ度烧伤创面于24¹20 h内局部进行早期切削痂扩创后,用脱细胞异体真皮和自体刃厚皮行复合移植,观察复合植皮的成活率、关节功能恢复及后期瘢痕形成等情况。结果除2例3个部位复合皮片边缘有散在点状坏死延迟愈合外,其余35例手术均成功,50处关键功能部位复合皮片均成活愈合好。复合皮片光滑柔软,弹性好,关节功能恢复好;随访6120 h内局部进行早期切削痂扩创后,用脱细胞异体真皮和自体刃厚皮行复合移植,观察复合植皮的成活率、关节功能恢复及后期瘢痕形成等情况。结果除2例3个部位复合皮片边缘有散在点状坏死延迟愈合外,其余35例手术均成功,50处关键功能部位复合皮片均成活愈合好。复合皮片光滑柔软,弹性好,关节功能恢复好;随访6¹8(12·2±1.4)个月,供皮区无明显瘢痕,色泽接近正常皮肤,植皮区无明显增生挛缩的瘢痕,关节功能恢复接近正常水平。结论脱细胞异体真皮和自体刃厚皮应用于人体重要功能部位深度烧伤创面早期治疗是比较理想的方法,愈后植皮区关节功能恢复好,柔软度及弹性好,无明显增生及挛缩瘢痕。     

人工真皮支架修复猪Ⅲ度烧伤动物模型的构建

目的建立猪Ⅲ度烧伤所致全层皮肤缺损并植入人工真皮支架的动物模型,观察人工真皮支架移植后1、2、3周,支架血管化情况以及人工真皮支架上移植刃厚皮片的可能性。方法造成直径约3 cm的Ⅲ度烧伤创面,48 h后清创后植入胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶双层人工真皮支架,术后悬吊饲养、隔天换药护理。支架植入后1、2、3周观察创面并植刃厚皮片,植皮2周后观察植皮成活及创面修复。结果①造成约3 cm直径烧伤创面的铜锭最佳直径为2.5 cm;②为防止创面收缩必须应用移植环,手术后必须悬吊饲养;③支架植入后植皮时间最好选择在2周以后;④良好的术后处理是实验成功的重要因素。结论本实验模型稳定、可重复性强,为人工皮肤的研究和生物学意义的验证提供了良好的大型动物模型。     

无细胞真皮基质在特重烧伤晚期整形中的应用

目的　提高大面积特重烧伤后期缺乏自体供皮来源整形患者的治疗效果 ,改善移植皮肤的形态和功能。方法　应用自制无细胞真皮基质与自体刃厚皮片复合移植 ,修复烧伤瘢痕松解整形的创面以改善功能形态。结果　 1 2例患者应用本方法治疗 ,1例因感染致部分植皮坏死 ,其余均完全成活 ,未见排异反应 ,与单纯自体薄皮片移植对比观察 ,愈后表皮平坦光滑 ,质地柔软 ,皮肤可捏起 ,色泽较正常皮肤略深 ,较刃厚皮移植满意 ,功能良好 ,与全厚或中厚皮片移植相似 ,优于薄的断层皮片或刃厚皮片。结论　无细胞真皮基质与自体薄皮片复合是比较理想的修复材料     

复合皮移植修复颈部瘢痕挛缩畸形10例的护理

目的总结分析异体脱细胞真皮基质与自体整张刃厚皮复合移植修复颈部瘢痕挛缩畸形的护理效果。方法我院采用异体脱细胞真皮基质与自体整张刃厚皮复合移植修复颈部瘢痕切除后创面患者10例,对其进行综合护理。结果本组除2例因自体皮部分溶解经换药愈合外,其余病例移植的复合皮全部成活,无护理并发症,护理质量良好。术后随访1~2年,复合皮移植区皮肤外观较平整、弹性较好,无明显挛缩,颈部功能恢复良好。结论加强对异体脱细胞真皮基质与自体整张刃厚皮复合移植修复颈部瘢痕挛缩患者的护理,可防止并发症的发生,提高手术效果。     

Burn wound closure with cultured autologous keratinocytes and fibroblasts attached to a collagen-glycosaminoglycan substrate

Improved survival of patients with extensive burn injuries requires the development of better techniques for timely and permanent closure of the full-thickness wound. We developed procedures for establishing confluent, stratified layers of cultured, autologous keratinocytes on the surface of a modified collagen-glycosaminoglycan membrane that contains autologous fibroblasts. We transferred the composite grafts onto limited areas of excised full-thickness burn wounds of four patients with extensive burn injuries. Our results indicate that this composite graft material has acceptable "take," with formation of a basement membrane within 9 days of graft placement. Use of this technique for major wound coverage may offer a significant advance in the care of extensively burned patients and also may be useful for providing skin for reconstructive surgery.     

复合皮移植在关节部位深度烧伤中的临床应用

目的观察J-1型脱细胞异体真皮＋自体刃厚皮片（复合皮）移植治疗关节功能部位深度烧伤中的应用效果。方法我科近几年采用J-1型脱细胞异体真皮＋自体刃厚皮片复合移植治疗关节功能部位深度烧伤创面病人11例,其中包括颈部、手部、腕部、肘部、膝部、踝部共26处。结果11例病人26处部位通过复合皮移植,全部成活,无排异反应,创面收缩轻,外观平整,色素成着轻,质地较软,关节功能恢复良好,供区无增生疤痕。结论J-1型脱细胞异体真皮＋自体刃厚皮片复合移植修复深度烧伤创面不失为一种较理想的材料。     

壳多糖-胶原-糖胺聚糖凝胶人工皮肤的制备

目的 研制一种新型的凝胶类人工皮肤。方法 制备壳多糖－胶原－糖胺聚糖（GAGs)－成纤维细胞真皮替代物（DE），随后在“成熟”的DE表面接种KC，先浸没培养，再气液界面培养，构建完整的人工皮肤。对人工皮肤行组织学分析。结果 人工真皮浸没培养将发生一定程度的收缩，接种角质形成细胞将促进其收缩。液气界面培养一定时间后的人工皮肤有结构致密的真皮和分化良好的表皮。结论 我们制作的壳多糖－胶原－GAGs凝胶人工皮肤是有满意真皮表结构的新型人工皮肤。     

脱细胞异体真皮加自体刃厚皮复合移植在创面修复中的临床应用

目的寻找功能部位深度烧伤创面与瘢痕畸形修复的理想覆盖材料。方法将功能部位的深度烧伤创面和瘢痕切除后,创面行脱细胞异体真皮＋自体刃厚皮复合移植。结果25例患者复合皮全部成活,复合皮光滑柔软,局部弹性好,关节功能恢复良好。结论脱细胞异体真皮＋自体刃厚皮是功能部位创面修复的理想覆盖材料。     

一种新型真皮替代物--人发角蛋白-胶原海绵的制备及其生物活性研究

目的制备一种人发角蛋白-胶原海绵的三维立体多孔状结构材料,探讨将其作为真皮替代物的可行性。方法将人发在体内具有慢(Z)、中(B)、快(F)三种吸收速度的HHK组分材料编织成网孔为1 mm×1 mm的网格,以酸溶法从牛跟腱中抽提胶原原液,用离心、盐析、透析等方法制备Ⅰ型胶原蛋白溶液,向溶液中滴加胶原总量8％的6-硫酸软骨素(6-GAG)进行初交联。制备好的Ⅰ型胶原溶液与HHK网格混合后放入模具,真空冷冻干燥成海绵状膜,于0．25%戊二醛溶液中浸泡再交联。将制备好的HHK-胶原海绵膜切块(1 cm×1 cm)移植于21只大鼠的真皮与皮下组织之间(实验组),并与单纯胶原海绵膜组(阴性对照)、单纯全层皮肤切开组(空白对照)作对照。于术后3 d和1、2、4、6、8、12周7 个不同时间点取材料及其周围组织,行石蜡切片的HE染色、醛复红弹性纤维染色观察及扫描电镜观察检测其组织相容性、血管化能力及材料的体内降解情况。结果人发角蛋白呈棕黄色细丝状。胶原海绵膜为微黄色。半透明状,孔径为 50至300μm的三维立体状结构。皮下移植后3 d,各组均表现为中度炎症反应,以中性粒细胞和单核细胞为主。术后1 周,炎症反应稍减轻,材料周围可见少量成纤维细胞及新生血管,实验组较对照组明显。术后2周,实验组及阴性对照组,炎性细胞中巨噬细胞增多,实验组成纤维细胞增生活跃,分泌少量胶原物,材料周围新生血管数量增多。HHK及胶原海绵开始降解,创口表皮细胞增殖移行。电镜下可见实验组材料周围包绕的胶原纤维和弹性纤维,人发角蛋白毛小皮降解、剥离;术后4周,成纤维细胞分泌大量粗大的胶原物。创口的表皮细胞增殖移行明显,实验组基本愈合。两种材料崩解明显,胶原海绵网孔内可见巨噬细胞侵入及少量小血管长入。醛复红弹性纤维染色可见短棒或细长条状弹性纤维; 术后6至8周,成纤维细胞数量相对减少,分泌胶原物融合成均质粗大,实验组其排列趋于整齐,表皮层愈合良好。人发角蛋白材料中部出现降解裂隙,胶原海绵基本降解完全。实验组醛复红弹性纤维染色可见细长条状弹性纤维;术后12 周,人发角蛋白材料降解完全。结论人发角蛋白-胶原海绵膜是物理及生物学性能良好的材料,其组织相容性好,血管化能力强,能刺激细胞增殖,促进受损皮肤愈合,可作为真皮替代物。     

用Y染色体特异的DNA探针对冷冻异体胎儿真皮移植后的追踪观察

为了直观而特异地观察了追踪冷冻异体胎儿真皮移植后的转归。采用生物素标记的人Ｙ染色体特异的ＤＮＱＡ探针，对５例临床冷冻异体异性胎儿真皮－自体表皮复合移植患者的６个标本作原位杂交。异体胎儿真皮移植１２，１９，２０，２１和４１ｄ后仍存活。证明冷冻异体胎儿真皮复合移植后至少可存活４１ｄ。     

无细胞异体真皮基质在关节功能部位整复中的应用

目的 观察无细胞异体真皮基质(ADM)在功能部位的移植效果。方法 选择11例大面积烧伤后产生增生性瘢痕伴有关节功能障碍的患者，将13块经胰蛋白酶等处理制成的网状ADM与超薄断层自体皮片(USSG)重叠。一次性移植于9例患者四肢关节部位的切瘢创面上，并以邻近的断层中厚自体皮片(TSSG)移植物为对照组。2W后首次换药，定期作CS随访和组织活检观察。结果 与对照组一样。CS移植物全部成活，随访1～5年未见排异反应和瘢痕增生，外观质地和功能接近正常皮肤。真皮层无皮肤附件，胶原排列有序，仅有少量淋巴细胞散在浸润。结论 充当真皮替代物的ADM可以用于功能部位瘢痕挛缩的整复治疗。     

冷冻异体胎儿真皮—自体表皮复合移植在Ⅲ度烧伤切痂创面的应用

目的：为观察异体胎儿真皮临床应用的可行性．方法：通过１９例经胰蛋白酶处理的冷冻异体胎儿真皮与自体表皮重组复合皮，并以单纯自体表皮为对照，作移植实验和动态观察．结果：复合皮移植后抗感染力强，成活率与自体表皮移植组无显著性差异（Ｐ＞０．０５），且可防止组织收缩和疤痕形成．同时提出异体胎儿真皮移植首先应满足血型的一致，否则对复合皮质量产生影响．结论：经胰蛋白酶处理的冷冻异体胎儿真皮可作自体表皮移植的载体，是理想的真皮替代物．临床应用异体胎儿真皮一次性完成复合皮移植术，提高了植皮外形效果，节省了患者的皮源，可以临床推广应用．     

复合皮的临床应用与展望

复合皮由自体皮和异体真皮/异种真皮或人工真皮组合成,可以用于深度烧伤创面、烧伤晚期残余创面及瘢痕整形等领域的治疗,效果较理想。因为目前还没有皮肤附属器和良好的渗透性,以致不能达到自体全厚皮的功能和要求。复合皮将会在重建表皮、皮肤附属器和三维真皮支架几个方面发展,成为良好的皮肤替代物。     

大面积烧伤瘢痕的后期整复治疗

目的为解决大面积烧伤患者后期瘢痕整复治疗时的皮源问题提供一种有效的临床治疗方案。方法选择大面积烧伤后期进行整复治疗的患者21例,其中行瘢痕皮片移植术15例（47例次手术）,瘢痕皮瓣移植术6例。分别在患者的瘢痕部位切取断层皮片或瘢痕皮瓣,行皮片移植术或皮瓣移植术,并在供皮区行邮票皮片回植。结果在47例次瘢痕皮片移植术中,皮片全部成活42例,手术部位外观明显改善,功能恢复。6例瘢痕皮瓣移植术病例中,5例皮瓣全部成活,手术部位创面修复,功能改善;1例瘢痕皮瓣表皮坏死,经过局部换药后伤口愈合,手术部位功能基本恢复。结论临床实践证实瘢痕皮片和瘢痕皮瓣移植适用于皮源奇缺的大面积烧伤患者的后期整复治疗,能提供足够的皮源。     

复方ANBP对小鼠皮肤移植创面愈合的疗效观察

目的观察复方ANBP[由仙鹤草(Agrimonia eupatoria, A),藕节(Nelumbo nucifera Gaertn, N),乳香(Boswellia carteri, B)和蒲黄(Pollen Typhae, P)组成]对皮肤移植创面愈合的促进作用。方法选用40只雌性C57BL/6小鼠,制成背部直径1.2 cm圆形全层皮肤缺损小鼠模型,后进行自体原位皮肤移植术,随机分为对照组和实验组,实验组给予复方ANBP粉末敷于皮肤移植区,对照组不予处理。通过肉眼、HE染色观察比较两组皮肤移植区14 d及21 d时皮肤愈合情况,计算创面愈合率并进行统计学分析。结果 (1)皮肤移植14 d、21 d后,实验组小鼠创面愈合率高于对照组(P<0.05)。(2)HE染色结果:皮肤移植14 d,实验组较对照组皮肤移植交界处平坦、表皮嵴浅且连接紧密;皮肤移植区表皮层变薄、新生毛囊数量较多且发育良好。皮肤移植21 d,实验组较对照组皮肤移植交界处皮下组织紧密呈更强的收缩感;皮肤移植区毛囊更成熟、发育趋于完善,出现了明显的毛干、皮脂腺等皮肤附属器。结论复方ANBP能够加快皮肤移植区与周围皮肤衔接,加速皮肤移植愈合,促进皮肤附属器发育及皮肤塑形,提高愈合质量。     

异体真皮对复合皮功能重建的作用研究

目的 :探讨异体真皮对复合皮功能重建的作用。方法 :大鼠动物模型分为两组。组 1,在大鼠背部创面移植自体角朊细胞膜片 (CKS) ;组 2 ,在大鼠背部创面重叠移植异体真皮和自体CKS。小香猪动物模型分三组 :A组为异体普通乳猪真皮 +成年小香猪自体表皮皮片 ;B组为异体成年真皮 +成年小香猪自体表皮皮片 ;C组为成年小香猪自体表皮皮片。术后观察皮片的存活质量及组织学变化。结果 :大鼠中 ,组 1质地及组织学结构欠佳 ,且太薄易破溃和收缩。组 2不仅移植物成活好 ,且质地、组织结构、创面收缩及抗磨损等方面均优于组 1。小香猪组中 ,根据皮片的成活率、收缩率、瘢痕增生和组织结构的完整性等情况进行综合分析 ,皮片质量的优劣依次是A组 ,B组 ,C组。结论 :异体真皮的存在能显著改进复合皮移植的质量     

自体大张中厚皮片修复关节部位肉芽创面的研究

目的：研究烧伤病人关节功能部位并发感染肉芽创面的皮片移植。方法：对感染创面清创,控制感染,移植大张中厚皮片封闭创面。结果：该方法操作简单,皮片易成活,成活后的皮片弹性好,皮色变化少。结论：感染的关节功能部位肉芽创面移植中厚皮片能恢复关节功能,避免或减少后期整形。     

PDGF-AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩影响的差异

目的：研究血小板衍生生长因子(PDGF)—AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞一胶原网(FPLC)收缩影响的差异,探讨PDGF—AB促进伤口愈合的作用机制及其在瘢痕增生中的作用．方法：取体外培养的人正常皮肤(NsFb)及增生性瘢痕成纤维细胞(HTsFb),建立成纤维细胞—胶原网模型,比较PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩影响的差异．结果：PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩均有明显促进作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异．结论：PDGF—AB可能通过刺激伤口收缩促进创面愈合,同时可能在瘢痕挛缩性疾病中起重要作用。     

猪复合皮移植的实验研究

目的：为使复合皮移植的动物实验结果进一步接近临床,用小香猪作动物模型,探讨复合皮移植的术后效果和成活机制。方法：实验分3组,A组为移植异体普通乳猪真皮+成年小香猪自体表皮皮片;B组为移植异体成年小香猪真皮+成年小香猪自体表皮皮片;C组为移植成年小香猪自体表皮皮片。术后观察3组皮片的存活质量及组织学变化。结果：3组皮片早期成活情况均较好,A组和B组晚期收缩率及瘢痕程度均比C组低。A组和B组的组织学结构较完整,异体普通乳猪真皮的成活情况优于异体成年小香猪真皮。结论：异体真皮的存在能改进复合皮移植的质量,而且以含异体普通乳猪真皮组成的复合皮效果最佳。