精子穿卵试验及其临床应用

用改良的SPA法检查了74例生育男子和85例"原因不明"性不育男子的受精能力,其值分别为64.7±24.2%和9.8±5.7%.两者在统计学上有非常显著差异(P<0.001).SPA与SFA无明显相关.以生育男子冷冻精液作为SPA的质量控制,求得批内变异系数(CV)为7.4%;批间CV为16.1%.两者均符合WHO颁布的SPA标准方法.据此,作者提出了生育男子SPA值为≥15%;而"原因不明"性不育男子SPA值≤14%.前者假阴性率为9.5%,后者假阳性率为2.4%.SPA值与男性生育力呈正相关.SPA值的测定可作为评价精子功能及男子生育力的有效手段.     

肥胖男性不育患者精子线粒体膜电位、游离脂肪酸、活性氧的关系

目的：探讨肥胖男性不育患者精子线粒体膜电位的改变,以及线粒体膜电位与精浆中游离脂肪酸、活性氧之间的关系。方法按照研究条件,随机整群选取正常生育男性51人（对照组）、正常体重指数不育男性36人（正常体重不育组）、超重不育男性44人（超重不育组）、肥胖不育男性45人（肥胖不育组）。精液常规分析,ELSA法检测精浆中游离脂肪酸、活性氧,流式细胞仪检测精子线粒体膜电位。结果线粒体膜电位正常率的比较中正常体重不育组（27.34%±13.38%）、超重不育组（28.26%±9.76%）、肥胖不育组（25.27%±7.51%）均低于对照组（35.12%±15.90%）,差异有统计学意义（P<0.01）。肥胖不育组中线粒体膜电位正常率虽然低于正常体重不育组及超重不育组,但差异无统计学意义。精子线粒体膜电位正常率与精子前向运动率呈明显正相关（r=0.29,P<0.01）。精浆中游离脂肪酸与精浆中活性氧呈明显正相关（r=0.30,P<0.01）,精浆中活性氧与精子正常线粒体膜电位呈明显负相关（r=-0.24,P<0.01）。结论超重及肥胖男性不育患者精浆中游离脂肪酸增高,引起活性氧增加,活性氧使得线粒体膜电位下降,最终可能导致精子运动能力下降。治疗时应考虑建议患者减少高脂餐、适当运动。     

男性不育患者精子质量和血清抗精子抗体分析

目的分析男性不育患者精子质量（密度、活率及活力）及其血清抗精子抗体的影响。方法采用ELISA法检测患者血清中抗精子抗体,用伟力彩色精子质量检测系统动态观察精子的密度、活率及活力。结果男性不育患者精子密度、活率、a级精子及a＋b级精子均明显低于正常生育组（57.66±11.88）×10^6/ml,（71.24±10.45）%,（39.47±8.24）%,（66.22±10.38）%v（s12.28±9.09）×10^6/ml,（34.46±10.02）%,（7.46±6.48）%,（21.03±11.21）%,P〈0.01。不育男性AsAb阳性组上述各指标也低于AsAb阴性组（P〈0.01）。结论男性不育患者精子密度、活率及活力均下降,同时血清抗精子抗体（AsAb）也可影响这些指标。     

少精子症、弱精子症和畸形精子症患者精子凋亡率比较

目的：比较少精子症、弱精子症和畸形精子症患者精子凋亡率。方法：应用计算机辅助精液分析（CASA）对生育组(n=14)、不育组［(n=48),少精子症(精子密度<10×10^６•mL^-1)11例、弱精子症(a+b级精子百分率<50%)25例、畸形精子症(形态正常精子百分率<14%)12例］进行精液参数检测,瑞-姬染色检测精子凋亡率。结果：不育组及不育组中的少精子症组精子凋亡率均明显高于生育组（P<0.05）;弱、畸形精子症组精子凋亡〖JP3〗率与生育组比较差异均无显著性（P>0.05）。密度异常组(精子密度<20×10⁶•mL^-1)精子凋亡〖JP〗率明显高于密度正常组(精子密度≥20×10⁶•mL^-1)（P<0.05）;a+b级异常组(a+b<50%)精子凋亡率与正常组比较差异无显著性（P> 0.05）;精子形态异常组(形态正常精子<14%)凋亡率与正常组比较差异无显著性（P> 0.05）。结论：不育组精子凋亡率高于生育组,尤其是少精子症患者精子凋亡率增加更明显。     

FITC—PSA荧光标记法在检测人精子顶体结构中的应用

目的：探讨ＦＩＴＣ－ＰＳＡ荧光标记法在检测人精子顶体结构中的临床应用价值。方法：应用络合异硫氰酸荧光素的碗豆凝集素（ＦＩＴＣ－ＰＳＡ）进行精子顶体荧光标记,分别测定５８例不育患者及４６例正常生育男子的精液标本,比较两组间精子顶体完整率的差异。结果：正常生育组的精子顶体完整率显著高于不育组（Ｐ〈０．０１）。结论：ＦＩＴＣ－ＴＳＡ荧光标记法操作简单,技术结果可靠,特异性强,可作为评价人精子授精能力的一     

应用FITC—PSA荧光标记法检测人精子顶体结构及功能的初 …

目的：测定人类精子顶体结构及功能来探讨人精子的授精能力。方法：应用络合异硫氰酸荧光素的豌豆凝集素（ＦＩＴＣ－ＰＳＡ）进行精子顶体荧光票标记，分别测定５６例不育患者及３８例正常生育男子的精液标本，比较两组间精子顶体完整率，精子－透明带结合的差异。结果：正常生育组的顶体寒带率及精子－透明带结合率均显著高于不育组（Ｐ〈０．０１）。结论：ＰＩＴＣ－ＰＳＡ荧光标记法操作简便，技术结果可靠，特异性强，具有良好     

精子顶体酶活力测定在男性不育症辅助诊断中的作用

目的:研究精子顶体酶活力测定在评价男性生育能力中的作用。方法:测定14例生育能力正常者、20例弱精子症不育症患者及17例不明原因性不育症患者精子活动力及顶体酶活力。结果:生育能力正常者与不明原因性不育症患者精子活动力无显著差异,但后者顶体酶活力指数显著降低。弱精症不育组精子活动力及顶体酶活力指数均明显低于生育组。弱精症患者组精子活动力明显低于不明原因不育组,但顶体酶活力指数无明显差异。结论:精子顶体酶活动力检测在评价男性精子生育能力上具有相当的临床价值。     

慢性前列腺炎并不育患者血清抗精子抗体定量测定分析

目的：探讨慢性前列腺炎并不育患者血清抗精子抗体与不育的关系,为临床治疗提供依据。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测80例慢性前列腺炎并不育患者（A组）血清抗精子抗体（AsAb）,同时选择正常生育的慢性前列腺炎患者50例（B组）作对照。结果：A组80例,检出AsAb阳性37例,阳性率46.3%,抗精子总抗体（T-Ig）（126.25±45.47）U/ml,B组AsAb阳性6例,阳性率12.0%,T-Ig（41.25±14.20）U/ml,两组阳性率及抗精子总抗体比较,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论：慢性前列腺炎并不育患者存在免疫性因素,ELISA方法敏感度高,操作简便,对临床合并前列腺炎的不育患者探求病因提供指导。     

精子膜功能测定对不育症诊断探讨

为准确评估精子功能与潜在受精能力，采用精子低渗处理，ＨＥ染色和常规精液分析方法，对５０例健康青年（生育组）和５０例患不育症（不育组）的精子膜功能对照组比较。结果发现精子膜膨胀分１０型，其中Ｂ、Ｄ、Ｅ为优势精子，其它类型为劣质精子；生育组精子膜膨胀率明显大于不育组精子膜膨胀率（Ｐ〈０．０１）；精子膜功能与精子活率、活动力密度相关，精子膜膨胀率较高，其活率与活动力也高，认为精子膜膨胀测定并用ＨＥ染色，     

解脲支原体感染与精液常规检测结果分析

目的 探讨解脲支原体感染与男性不育的关系.方法 用培养法及WHO推荐的精液参数检测方法分别检测422例不育症患者（不育组）的解脲支原体（UU）及精液常规,观察其解脲支原体感染率、精液常规,并与126例正常生育者（生育组）进行比较.结果 不育组解脲支原体感染率为40.2%,明显高于生育组的15.9%（P＜0.05）;不育组解脲支原体感染者精子活动力、活动率、精子密度均明显低于生育组无解脲支原体感染者（P均＜0.05）,并且精子畸形率明显增高（P＜0.05）.结论 解脲支原体感染可影响精液参数,与男性不育关系密切.     

附睾蛋白RhoA参与人精子顶体反应

目的:研究RhoA在男性生殖系统中的表达和功能.方法:采用RT-PCR来检测RhoA的mRNA表达,Western blot和免疫组化用来检测RhoA蛋白在人睾丸,附睾及成熟精子中的表达.免疫荧光用来观察这个蛋白在人精子上的定位.豌豆凝集素(PSA)染色用来确定精子顶体反应率.结果:只能在附睾中检测到RhoA的mRNA,而RhoA蛋白不仅在附睾上皮中表达,在人精子上也有表达.它位于人精子的顶体和尾部,并且随着顶体反应转移到精子的赤道部及顶体后区.同时特异的RhoA抗体能够显著地抑制精子发生顶体反应(P<0.01).结论:结果表明RhoA可能是在附睾成熟过程中带到人精子质膜表面,从而使精子获得发生顶体反应的能力.     

应用FITC-PSA荧光标记法检测人精子顶体结构及功能的初步研究

目的 :测定人类精子顶体结构及功能来探讨人精子的授精能力。方法 :应用络合异硫氰酸荧光素的豌豆凝集素 ( FITC-PSA )进行精子顶体荧光标记 ,分别测定 5 6例不育患者及 38例正常生育男子的精液标本 ,比较两组间精子顶体完整率 ,精子-透明带结合的差异。结果 :正常生育组的顶体完整率及精子 -透明带结合率均显著高于不育组 ( P <0 .0 1)。结论 :FITC-PSA荧光标记法操作简便 ,技术结果可靠 ,特异性强 ,具有良好的应用价值     

男性不育精子存活率与精液各参数的相关性分析

目的探讨不育男性精子密度,活动率,前向活动率(a b)的正常形态和存活率之间的相互关系.方法采用WHO推荐的标准化方法,对775例不育男性精液进行常规、形态学和精子活体染色技术检测分析.结果精子存活率与密度、活动率、前向活动率、正常形态各指标间均有正向相关性,相关系数(r)分别为0.175、0.803、0.749、0.274.结论精子存活率与精液常规检查参数和精子正常形态之间具有较好的相关性,精子存活率可作为评价精子活动率的补充指标,并且是一个很好的评估.     

精液白细胞与精子形态学参数的关系

目的：探讨精液白细胞与精子形态学参数之间关系。 方法：对278例不育患者采用精子形态检测系统下人工修正方法进行精子形态分析,采用精液白细胞计数法检测精液白细胞,采用改良巴氏染色法分析精子顶体形态。结果：白细胞精子症组形态正常精子率和顶体完整率均低于非白细胞精子症组（P<0.05）;形态正常精子率与精液白细胞浓度呈负相关关系（r=-0.243,P<0.01）;顶体完整率与精液白细胞浓度亦呈显著负相关关系（ r=-0.248,P<0.01）。结论：精液白细胞增多可能影响精子的形态和顶体的完整。     

冷冻方法和冷冻保护剂对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响

目的：探讨冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响。 方法：16例男性不育患者精液分别于冷冻前、加入甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)和甘油两种冷冻液以快速和慢速冷冻6个月后,采用伊红染色分析精子活率和尾部低渗肿胀率。 结果：冷冻后精子活率和尾部低渗肿胀率明显低于冷冻前(P<0.001, P<0.05);GYC和甘油两种冷冻保护剂对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响差异无显著性(P>0.05);速冻和缓慢冷冻对精子活率和尾部低渗肿胀率的影响差异亦无显著性（P>0.05）。 结论：冷冻后精子活率和尾部低渗肿胀率明显降低,不同冷冻方法和冷冻保护剂类型对精子活率和尾部低渗肿胀率无影响。     

两种精子优选法对精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率的影响

目的：评价Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法对人精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率影响。方法：收集12例男性不育症患者精液样本,分别采用Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法(简称上游法)进行精子优选,应用伊红-Y染色分析优选前后精子活率和尾部低渗肿胀率,应用改良巴氏染色法分析优选前后精子形态。结果：①Percoll法和上游法优选后精子活率和尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较精子活率和尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。Percoll法和上游法优选后B-G型精子尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较B-G型精子尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。②Percoll密度梯度离心法和上游法优选后形态正常精子百分率均明显高于优选前（P<0.05）,上游法优选后形态正常精子百分率明显高于Percoll法优选后形态正常精子百分率（P<0.05）。上游法优选后锥型头、无定型头和颈/中段缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;Percoll法优选后锥型头、无定型头和尾部缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;上游法优选后无定型头、颈/中段缺陷和尾部缺陷形态异常精子百分率明显低于Percoll优选后（P<0.05）。结论：Percoll法和上游法优选后精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率较优选前明显改善, 此两种优选法均可广泛应用于生殖医学,其中上游法优于Percoll法。     

单精子卵胞浆内注射术中不同来源精子的处理方法

目的：介绍单精子卵胞浆内注射术（ICSI）中不同来源精子的洗涤处理方法。方法：轻度少、弱精精液或正常精液精子,采用Percoll梯度离心法或直接离心加上游法处理;严重少、弱精液精子或无精子症的附睾液精子,采用直接离心法处理;无精子症的睾丸组织内精子,采用组织磨碎加直接离心法处理。结果：三种方法处理后,均获得足够的活动精子用于ICSI治疗。ICSI操作均能顺利进行。采用直接离心法获得的精子行ICSI可以获得相似的治疗结果。结论：不同来源精子都可以经直接离心法处理,并能有效用于ICSI治疗中。     

烹调油烟对大鼠精子的形态学影响

雄性ｗｉｓｔａｒ大鼠吸入烹调油烟后，通过对其精子形态学进行观察，发现吸入烹调油烟后的雄性大鼠精子数量减少，活动率降低，活动度变差，畸形率增加，且畸形精子类型多为无钩型和香蕉型。提示：吸入烹调油烟对大鼠精子具有毒作用，可能是通过遗传损伤、直接损伤作用等多种途径干扰生精细胞的分化与代谢，从而导致精子形态学改变。     

800例男性不育患者精液分析

目的：分析不育男性精液,探索不孕不育的病因.方法：采用计算机辅助分析技术对不育男性精液进行分析.结果：800例不育男性患者,精子异常患者占63.80％,主要是精子活力下降,其次是精子活率、精子畸形.结论：男性不育主要原因是精子异常.     

利血平对人精子顶体反应的影响

用间接免疫荧光法对利血平作用后的人精子顶体反应进行了观察和分析。结果表明:利血平对由ionophore A23187(A23187)诱导的人精子顶体反应有明显的抑制作用,其抑制强度随利血平浓度的降低而减弱。提示利血平有希望成为一种新的外用避孕药。