谷氨酸调节耳蜗内毛细胞游离钙的实验观察

目的 探讨谷氨酸（glutamate,Glu）对离体耳蜗内毛细胞（inner hair cells,IHC)内钙信号的调控作用及其生理病理意义。方法 在激光共聚焦显微镜下用钙敏荧光探针Fluo－3作为指示剂,观察外源性谷氨酸对分离的10个豚鼠耳蜗IHC胞内游离钙离子浓度（[Ca^2 ]i)的影响。结果 分离好的正常IHC呈烧瓶形态,有明显的颈部,皮板上可观察到静纤毛,大球形的细胞体中间可见圆形的细胞核。形态完好的IHC大约存活2h,Fluo-3 钙敏荧光探 针染色后IHC胞体、胞核及表皮板有明显的染色梯度,表明游离Ca^3 浓度从细胞 核向细胞逐渐减少。终浓度为3.85umol/L的Glu对游离IHC内[Ca^2 ]i有增高趋势,而对游离外毛细胞（outer hair cells,OHC)内[Ca^2 i]浓度无影响。观察10个IHC,发现9个[Ca^2 ]i浓度增加,1个无变化;观察10个OHC,发现7个[Ca^2 ]i无变化,3无略有下降。当Glu浓度增高后,IHC内[Ca^2 ]i先是迅速升高,继而逐渐下降,IHC外形由烧瓶状逐渐变成球形,提示IHC水种变性。结论 Glu可选择性调控IHC内[Ca^2 ]i ,而对OHC内[Ca^2 ]i无影响,而过量的Glu刺激,可造成IHC[Ca62 ]i的堆积,从而IHC水肿变性。     

听力学

20011713谷氨酸调节耳蜗内毛细胞游离钙的实验观察/李兴启…//中华耳鼻咽喉科杂志一2001,36(2)一101~104 目的:探索谷氨酸(Glu)对离体耳蜗内毛细胞(IHC一)内钙信号的调控作用及其生理病理意义。方法:在激光共聚焦显微镜下用钙敏荧光探针Flu。一3作为指示剂,观察外源性谷氨酸对分离的10个豚鼠耳蜗IHC胞内游离钙离子浓度([CaZ ]i)的影响。结果:分离好的正常IHC呈烧瓶形状,有明显的颈部,皮板上可观察到静纤毛,大球形的细胞体中间可见圆形的细胞核。形态完好的IHC大约存活2h,Flu。一3钙敏荧光探针染色后IHC胞体、胞核及表皮板有明显的染…     

应用显微荧光测钙技术研究乙酰胆碱对豚鼠耳蜗外毛细胞内游离钙的影响

介绍了应用显微荧光测钙技术研究豚鼠耳蜗外毛细胞（OHC）内游离钙浓度（[Ca~(2 )]i）变化的方法。该技术以钙敏感染料Fura－2作为胞内Ca~(2 )的指示剂，装载进入细胞后，与胞内游离Ca~(2 )结合，在特定波长光的激发下可发出荧光，由此可推算[Ca~(2 )]i的变化。结果发现乙酰胆碱（ACh）在含钙的细胞外液中可引起［Ca~(2 )］i升高。对显微荧光测钙技术在研究耳蜗毛细胞中的应用以及ACh引起［Ca~(2 )］i升高的机制进行了讨论。     

听力学

20030941内毛细胞的分离和形态学特点/杨仕明…//中华耳鼻咽喉科杂志一2002,37(6)一462~464 目的:探讨内毛细胞(l HC)的分离技术和形态学特征。方法:从豚鼠耳蜗制备基底膜活体铺片,微分干涉倒置显微镜下用显微分离结合酶消化的方法单离IHC。高倍显微镜下,用两个钨丝电极沿IHC和第一排外毛细胞(OHC)之间的Corti隧道显微切割,游离的IHC团被吸引至玻璃微吸管内。结果:从每只豚鼠耳蜗可分离到30一50个活性良好的单离IHC,并存活Zh左右。典型的IHC胞体具有特征性,呈梨状或长颈的烧瓶形状,胞体中间可见大的圆形细胞核。胞体内包含较多细胞…     

听力学

990323应用显微荧光测钙技术研究乙酞胆碱对豚鼠耳蜗外毛细胞内游离钙的影响/杨 军…//临床耳鼻咽喉科杂志一1998,12(6)一271~273 介绍了应用显微荧光测钙技术研究豚鼠耳蜗外毛细胞(OHC)内游离钙浓度([Ca之‘]i)变化的方法。该技术以钙敏感染料F盯a一2作为胞内CaZ 的指示剂,装载进入细胞后,与胞内游离Ca“ 结合,在特定波长光的激发下可发出荧光,由此可推算仁Ca抖」i的变化。结果发现乙酞胆碱(ACh)在含钙的细胞外液中可引起仁CaZ‘]i升高。对显微荧光测钙技术在研究耳蜗毛细胞中的应用以及ACh引起[CaZ ]i升高的机制进行了讨论。图1参7…     

豚鼠耳蜗单离外毛细胞钙波的观察

目的：观察豚鼠耳蜗单离外毛细胞（outer hair cell,OHC)内游离钙浓度（[Ca^2]i)是否存在波动，即有无钙波。方法：健康豚鼠10只断头处死，在无Ca^2的dHanks液和含Ca^2的Hanks液中酶－机械法分离获得单离活性OHC，钙荧光抗体Fluo-3孵育后，分别加入乙酰胆碱或空白对照，用MRC－1024型激光扫描共聚焦显微镜（Bio-Rad，英国）观察OHC约50min内[Ca^2]i的变化。结果：dHanks液中加ACh组的5个OHC，[Ca^2]i呈明显的规律性的波动，即产生了钙波，钙波的周期约600s;Hanks液中加ACh组的6个OHC的[Ca^2]i均迅速升高，无钙波出现，在dHanks液和Hanks液中不加ACh分别观察了3个OHC，[Ca^2]i呈平坦型，无钙波，结论：ACh能刺激诱发豚鼠耳蜗单离OHC产生钙波。     

庆大霉素及其代谢产物对外毛细胞内游离钙浓度的影响

目的：探讨庆大霉素（GM）耳毒性与耳蜗外毛细胞（OHC）内游离钙（[Ca^2 ])之间的关系。方法：离体耳蜗OHC经钙荧光指示剂Fluo-3负载后，用激光扫描共聚焦显微镜测定高钾溶液、GM、GM代谢产物等对OHC[Ca^2 ])i的影响。结果GM使[Ca^2 ]i短暂下降，并阻滞高钾溶液引起的钙内流，GM代谢产物则使[Ca^2 ]i持续升高，对高钾引起的钙内流无明显影响，结论GM耳毒与外毛细胞[Ca^2 ]i持续升高有关。     

豚鼠耳蜗单离外毛细胞游离钙的胆碱能调控

目的　观察胆碱能兴奋剂和拮抗剂对豚鼠耳蜗单离外毛细胞 (OHC)内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)的影响 ,探讨OHC内 [Ca2 + ]i的胆碱能调控机制。方法　健康豚鼠 15只处死 ,Hanks液中分离活性单离OHC ,Fluo - 3/AM负载 30min。分 7组进行不同干预 ,包括乙酰胆碱 (ACH ,胆碱能M和N受体兴奋剂 )、毒蕈碱 (M受体兴奋剂 )、阿托品 (M受体拮抗剂 )、庆大霉素 (N受体拮抗剂 )、加Hanks液对照组和不加干预对照组 ;另 1组为dHanks液中加ACh。用激光扫描共聚焦显微镜 (Bio-Rad ,英国 )观察OHC内 [Ca2 + ]i的变化。结果　Hanks液中不加干预试剂、加毒蕈碱、加Hanks液对照和无钙dHanks液中加ACh等 4组 ,[Ca2 + ]i在 2 5～ 30min内升幅 <1.10倍。Hanks液中加ACh组 [Ca2 + ]i最高升幅平均为 3.0 9倍 ;阿托品 +ACh组 [Ca2 + ]i为 2 .92倍 ;庆大霉素 +ACh组[Ca2 + ]i为 1.81倍。结论　豚鼠耳蜗传出神经递质ACh通过兴奋N受体 ,开放OHC的细胞膜钙离子通道 ,使细胞外Ca2 + 内流外毛细胞内 ;[Ca2 + ]i增加需要细胞外液中钙离子存在。     

水杨酸钠对豚鼠耳蜗单离外毛细胞游离钙浓度影响及其调控机制研究

目的　观察水杨酸钠对豚鼠耳蜗外毛细胞 (outerhaircells,OHC)内游离钙浓度 [Ca2 ]i的影响 ,并对钙通道调控药物的拮抗作用进行观察 ,以深入探讨水杨酸钠耳毒性的分子生物学机制。方法　豚鼠全身麻醉后断头活杀 ,酶 机械法分离获得耳蜗单离OHC。 10 μmol/L的Fluo 3/AM负载30min后用ACASUltima型激光扫描共聚焦显微镜观察不同药物灌流下OHC[Ca2 ]i的变化。结果　OHC在标准细胞外液灌流过程中 [Ca2 ]i保持稳定。 1mmol/L水杨酸钠灌流致 8/ 10个细胞的 [Ca2 ]i明显升高。无钙细胞外液中灌流亦有 10 / 10个细胞 [Ca2 ]i明显的升高。经 3mmol/L利多卡因作用1h后 ,水杨酸钠灌流不能使细胞 [Ca2 ]i升高 (n =10 )。盐酸氟桂嗪可以明显阻断水杨酸钠导致的OHC[Ca2 ]i升高效应 (3/ 12细胞的 [Ca2 ]i升高 ) ,而尼莫地平无此效应 (7/ 7细胞的 [Ca2 ]i升高 )。结论　水杨酸钠可以导致OHC[Ca2 ]i明显增加 ,OHC[Ca2 ]i升高来源于细胞内钙库的动员和释放。使细胞内 [Ca2 ]i升高可能是水杨酸钠的耳毒性机制之一。     

内毛细胞的分离和形态学特点

目的　探讨内毛细胞 (innerhaircells ,IHC)的分离技术和形态学特征。方法　从豚鼠耳蜗制备基底膜活体铺片 ,微分干涉倒置显微镜下用显微分离结合酶消化的方法单离IHC。高倍显微镜下 ,用两个钨丝电极沿IHC和第一排外毛细胞 (outerhaircells,OHC)之间的Corti隧道显微切割 ,游离的IHC团被吸引至玻璃微吸管内。结果　从每只豚鼠耳蜗可分离到 3 0～ 5 0个活性良好的单离IHC ,并存活 2h左右。典型的IHC胞体具有特征性 ,呈梨状或长颈的烧瓶形状 ,胞体中间可见大的圆形细胞核。胞体内包含较多细胞器 ,颗粒状 ,粗糙感。大部分可观察到静纤毛 ( 93 / 98)。静纤毛分布沿表皮板一侧 ,排列呈线状或“C”形。部分细胞可观察到明显狭窄的颈部 ( 61/ 98)。IHC的表皮板一般为倾斜状 ,凹面向上 ,较厚。另外 ,IHC的表皮板通常与细胞胞体长轴成锐角或钝角。豚鼠耳蜗IHC长度为 13～ 3 1μm ,平均 ( 2 2 45± 4 14) μm ( x±s,n =98,下同 ) ;直径为 7～ 15 μm ,平均 ( 11 95±1 5 9) μm。静纤毛长度为 2～ 7 5 μm ,平均 ( 5 2 1± 1 0 0 ) μm。 结论　本研究成功建立一种能够分离到大量的、生物活性好的IHC的技术 ;内、外毛细胞单离后在形态学上的鉴别要点是表皮板 ,尤其是表皮板与细胞胞体长轴的成角特征     

耳廓开放性外伤的治疗方法探析

目的 探讨耳廓开放性外伤的治疗方法。方法 23耳耳廓开放性外伤经彻底清创，肝素生理盐水冲洗伤口后，对位缝合。术后用抗生素抗感染、丹参扩张血管、罂粟碱改善微循环。结果 23耳中2耳失访，18耳完全成活，1耳部分成活，2耳完全坏死。结论 耳廓撕裂伤、断伤、带有皮蒂的耳廓离断伤，由于断端双侧血管丰富，经对位缝合后容易成活。但耳廓完全离断伤由于缺乏血供，经对位缝合后不易成活，可采用去皮血管植入包埋法，带肌蒂皮瓣移植法或尝试显微外科技术施行血管吻合，以提高耳廓完全离断伤的成活率。     

Effects of time of contact and concentration of caustic agent on generation of injuries

OBJECTIVES: Solid caustic soda (CS) ingestion levels continue high in Brazil. The aggressiveness of a caustic agent depends, among other factors, on its concentration and time of contact with mucosa. However, the interdependence of these factors in the production of caustic lesion in the esophageal mucosa is not known, especially regarding CS as the strongest corrosive agent. We analyze the effects of concentration and time of contact on the aggressiveness of CS to the esophagus of live animals. STUDY DESIGN/METHODS: One milliliter of CS at concentrations between 1.83% and 73.33% was applied to rats. The solution was kept in contact with the mucosa for 10 to 120 minutes. Internal and external organ aspects were analyzed and the epithelium, submucosa, muscle layer, and adventitia were analyzed microscopically RESULTS: Epithelial necrosis was observed at all concentrations. Among the necrotic layers, the submucosa was observed starting at the 7.33% concentration, and the muscular layer and adventitia were observed at 14.66% concentration. Damage to the pulmonary parenchyma and trachea occurred at 33.66% after 10 minutes, and perforation of the esophagus was observed only after 120 minutes. After 10 minutes, important corrosive lesions installed in the esophageal layers, expanding in depth and superficial extension. The use of heparin had no effect on the production of lesions. CONCLUSIONS: Ten minutes were sufficient to provoke necrosis, and longer contact increased the area of necrosis. Solution concentration levels were more important in damage production: 1.83% was sufficient for epithelial necrosis, 7.33% caused submucosal necrosis, and 14.66% muscle and adventitia necrosis; 33.66% solutions caused lung and trachea damage after 10 minutes and esophageal perforation after 120 minutes.     

急性化脓性耳廓软骨膜炎手术疗效分析

目的 探讨能够缩短化脓性耳廓软骨膜炎疗程,降低耳廓畸形发生率且具个体化的局部治疗方法.方法 回顾分析1 989年4月～2010年2月我科诊治的25例化脓性耳廓软骨膜炎的临床资料.除进行抗生素治疗外,局部治疗方法包括清创术后重新行耳甲腔成行术;脓腔穿刺置静脉留置针进行持续负压引流;清创后创腔置管引流.结果 自定义疗效评定...     

Scales of degree of facial paralysis: analysis of agreement

IntroductionIt has become common to use scales to measure the degree of involvement of facial paralysis in phonoaudiological clinics.ObjectiveTo analyze the inter- and intra-rater agreement of the scales of degree of facial paralysis and to elicit point of view of the appraisers regarding their use.MethodsCross-sectional observational clinical study of the Chevalier and House & Brackmann scales performed by five speech therapists with clinical experience, who analyzed the facial expression of 30 adult subjects with impaired facial movements two times, with a one week interval between evaluations. The kappa analysis was employed.ResultsThere was excellent inter-rater agreement for both scales (kappa > 0.80), and on the Chevalier scale a substantial intra-rater agreement in the first assessment (kappa = 0.792) and an excellent agreement in the second assessment (kappa = 0.928). The House & Brackmann scale showed excellent agreement at both assessments (kappa = 0.850 and 0.857). As for the appraisers’ point of view, one appraiser thought prior training is necessary for the Chevalier scale and, four appraisers felt that training is important for the House & Brackmann scale.ConclusionBoth scales have good inter- and intra-rater agreement and most of the appraisers agree on the ease and relevance of the application of these scales.     

CT对鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤起源的探讨

目的 探讨鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤起源的CT影像学特点。 方法 回顾性分析47例经鼻内镜手术及术后病理组织学确诊的鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者的CT影像学资料。对肿瘤病变在CT上的骨质变化进行分析,并与术中发现的肿瘤起源根蒂部位进行对比,分析CT影像中骨质改变与肿瘤起源之间的关系。 结果 47例患者中,39例有骨质增生影像表现,其中37例骨质增生部位与肿瘤起源的根蒂部位一致,一致性达78.7%,提示可根据骨质增生部位推测肿瘤起源位置。 结论 CT影像中的骨质增生与鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的根蒂起源部位有较高的一致性,有助于术前评估肿瘤起源和指导术前制定合理的手术方案。     

诊治7例鼻腔嗅神经母细胞瘤的体会

目的：提高临床对鼻腔嗅神经母细胞瘤的认识及治疗效果。方法：７例患者按Ｋａｄｉｓｈ分期，Ｂ期２例，Ｃ期５例，单纯放疗３例，术前放疗４例，放射剂量为５０００￣７０００ｃＧｙ。均随访至１９９７年１２月，结果：存活５例，存活时间分别为２０，２２，２３，２９及７６个月；结论：放疗对该肿瘤有效；放疗与化疗结合的方法值得探讨，该瘤病理上可能存在不同的亚型。     

术前使用布地奈德对声带息肉手术疗效的影响

目的 研究术前使用布地奈德雾化吸入治疗对手术疗效的影响。方法 按病程将3个月以内和1年以上患者随机分为两组,一组术前给予布地奈德雾化治疗,一组没有,术后两周复诊。分别于初诊、手术前和复诊时使用嗓音测试仪对病人进行测试并记录参数。结果 病程3个月以内患者术前给予雾化治疗后,其术后声学参数明显改善。结论 病程3个月以内患者术前给予雾化治疗能缩短术后恢复时间。     

中耳癌20例报告

目的：提高临床对中耳癌的认识，做到及时诊断与治疗。方法：20例均先行手术治疗，其中14例采用扩大的乳突根治术，3例行侧颞骨切除术，3例行颞骨次全切除术；有颈淋巴结转移的3例同时行根治性颈淋巴结廓清术。术后均辅以放疗。结果：随访5～13年，3、5年生存率分别为55．0％(11／20)，45．0％(9／20)。结论：中耳癌手术治疗应根据其侵及中耳乳突的范围，以及有助于放射治疗发挥作用而选择不同的术式。     

10例耳部原发性横纹肌肉瘤的临床病理分析

目的分析耳部原发性横纹肌肉瘤的临床病理特征及其免疫组织化学特点，为该肿瘤的诊断提供依据。方法对10例耳部原发性横纹肌肉瘤采用光学显微镜和免疫组织化学染色方法观察。所用抗体有：波形蛋白（Vimentin），结蛋白（Desmin），平滑肌肌动蛋白（SMA），肌红蛋白（Myoglobin）。结果10例中男性8例，女性2例，平均年龄8．6岁，其中胚胎性横纹肌肉瘤9例，葡萄型横纹肌肉瘤1例；免疫组织化学：Vimentin及Myoglobin染色10例均呈阳性，Desmin染色7例阳性。SMA染色8例阳性。结论耳部原发性横纹肌肉瘤缺乏特异性临床表现。故诊断困难，对可疑病例及时做活检进行HE染色和免疫组织化学检查方可对该病作出诊断。     

Experimental Analysis of Behavior of Homing Pigeons as a Result of Functional Disorders of their Lagena

Behavioral experiments concerning the homing abilities of pigeons were done by sectioning their lagenal nerves or interfering with the function of the lagena using a magnet. Twenty-one birds were treated in this way and 30 birds from the same loft of racing pigeons were used as controls. The results of homing tests clearly revealed a magnetic influence on the function of the lagena in terms of the navigation ability of pigeons: the treated birds were either lost or significantly delayed while the controls returned within 30 min of release. The lagena of birds is a unique organ and it is concluded that it is a key element in the magnetic sensory system of birds.