慢性阻塞性肺疾病和缺氧性肺动脉高压的发病机理及药物防治研究

目的 研究慢性阻塞性肺疾病（COPD）和缺氧性肺动脉高压的发病机理及中药814、肺舒灵的防治作用。方法 建立弹性酶、吸烟、细菌感染、缺氧及脂多糖诱发COPD、肺动脉高压鼠模型及体外肺泡巨噬细胞、肺泡Ⅱ型上皮细胞培养,利用形态定量病理学、电镜、病理生理、免疫组化及分子生物学技术检测。结果 1、814、肺舒灵对COPD造成的气道、肺、肺小动脉的病理性结构改建有抑制（减轻）作用,降低肺动脉高压。2、814、肺舒灵能保护肺血管内皮细胞、抑制肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子TNF－α的产生和一氧化氮合酶NOS的异常表达;促进肺泡巨噬细胞发生凋亡。3、通过培养细胞的免疫组化,Westerm,Northem杂交检测,提示814可拮抗TNF－α对肺表面活性物质A、B、mRAN表达的抑制,并证明表面活性物质的基因表达变化与肺气肿病变的发生发展相关。提示内源性表面活性物质系统的改善有助于肺气肿的减轻。4、COPD及肺动脉高压肺组织中基质金属蛋白酶MMP－9、MMP－12mRNA表达增强,肺舒灵有抑制MMP表达增强,防治COPD的作用。结论 814、肺舒灵对动物实验性COPD、缺氧性肺动脉高压有明显防治作用。其主要作用机理可能是保护肺血管内皮细胞,抑制肺泡巨噬细胞TNF－α的产生和iNOS的表达,减少炎症因子,从而起到防治COPD的作用。     

MSP对COPD大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激和细胞因子产生的影响

目的 探讨巨噬细胞刺激蛋白(MSP)对COPD大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激和细胞因子产生的影响.方法 培养正常和COPD大鼠肺泡巨噬细胞,予不同浓度MSP干预,采用酶联免疫法检测细胞上清液中细胞因子TNF-α、IL-8、IL-1β和IL-10的浓度,比色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平.结果 经MSP处理后,正常大鼠和COPD大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8、IL-1β和IL-10呈浓度依赖性增加,而COPD大鼠肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-8和IL-1β浓度较正常大鼠增加更显著.MSP呈浓度依赖性刺激正常和COPD大鼠肺泡巨噬细胞分泌MDA增加,抑制其SOD的产生,而COPD大鼠肺泡巨噬细胞上清液中SOD水平较正常大鼠降低更加明显.结论 MSP能显著增加COPD大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8和IL-1β,抑制其产生SOD.提示MSP在COPD的发病机制中可能起重要作用.     

过氧化物酶体增殖物活化受体γ激动剂罗格列酮对慢支大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的研究过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)的外源性强力配体激动剂罗格列酮(RGD)对慢支大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法采用熏烟加气管内滴注内毒素法建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,用酶联免疫吸附实验、实时定量PCR等方法分别测定其MMP-9基因及蛋白水平表达的改变。同时为了进一步探讨罗格列酮在肺部微环境下对基质金属蛋白酶9活性的影响,通过支气管肺泡灌洗法得到了正常及慢支大鼠的肺泡巨噬细胞,使之与罗格列酮共同培养,观察其对肺泡巨噬细胞MMP-9表达的影响。结果用熏烟加气管内滴内毒素法建立的大鼠COPD模型,其病理形态学改变与人类COPD的改变相似。罗格列酮可以抑制烟雾和内毒素刺激所致大鼠肺组织MMP-9 mRNA及蛋白表达的增加。结论罗格列酮对COPD的防治作用可能是由于抑制了MMP-9mRNA表达进而抑制了MMP-9蛋白表达所致。     

中药814对肺泡巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子的影响

目的研究中药814对肺泡巨噬细胞(AMs)分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响进而探讨814对肺气肿的作用机理.方法支气管肺泡灌洗(BAL)收集金黄地鼠AMs,调整细胞浓度为5×105/ml,接种于24孔板培养,在脂多糖(LPS)刺激前后加入中药814分别收集培养细胞上清液,通过ELISA测定上清液TNF-α含量,以及运用TNF-α敏感的小鼠L929细胞株,测定上清液中TNF-α的细胞毒活性;此外,选取对人重组TNF-α(rhTNF-α)特异性的单克隆抗体(MAb)做中和培养上清实验.结果(1)ELISA检测显示:加814各组TNF-α量均明显低于LPS刺激组和单纯AMs上清组(P＜0.001),且814在LPS刺激后和与LPS共孵育时有剂量依赖性(P＜0.05).(2)L929细胞杀伤活性显示:加814各组TNF-α活性均低于LPS刺激组(P＜0.001),且814在LPS刺激前、后和与LPS共孵育时有剂量依赖性(P＜0.05).(3)中和实验显示:培养上清液的细胞毒是由于TNF-α造成的.结论中药814可能会抑制AMs分泌TNF-α从而减轻TNF-α介导的肺组织损伤.     

肺泡表面活性物质在金黄地鼠实验性慢性阻塞性肺病中的防治作用

目的探讨肺泡表面活性物质(PS)对慢性阻塞性肺病(COPD)的防治作用.方法通过给金黄地鼠吸入烟雾或气道内注入弹性蛋白酶两种方法,经1～3个月建立COPD动物模型,并应用外源性PS进行防治.对动物肺组织行光镜、电镜观察及显微微机图像分析进行形态定量.免疫组织化学法观察肺泡Ⅱ型上皮细胞表面活性物质蛋白A(SP-A)的表达情况.结果吸烟3个月及气道内注入弹性蛋白酶1和3个月,动物有明显的慢性支气管炎和肺气肿的病理变化.应用PS防治1个月,肺组织病变无明显改善;防治3个月后,肺组织损伤明显减轻,肺泡Ⅱ型上皮细胞的数量明显多于模型组,SP-A的表达比模型组增加(P＜0.01).结论经3个月的外源性PS干预,可减轻吸烟及弹性蛋白酶对肺组织的损伤,保护肺泡Ⅱ型上皮细胞的结构和分泌PS的功能,从而可有效减轻COPD的肺部病变.     

受体相互作用蛋白140在脓毒症急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其作用

目的 探讨受体相互作用蛋白140 (receptor interacting protein140,RIP140)在脓毒症急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其在炎症反应过程中的作用.方法 36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组和盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症肺损伤3、6、12、24 h组.HE染色观察肺组织病理变化;免疫组化检测RIP140在肺组织的表达分布;Western blot及免疫荧光观察肺泡巨噬细胞RIP140的表达变化及定位;RT-qPCR测定肺泡巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平变化.结果 CLP组可见明显肺损伤病理改变且随时间进展逐渐加重.RIP140在脓毒症肺损伤大鼠肺组织中主要表达于炎性渗出细胞,且随时间进展,表达RIP140的细胞数量逐渐增多.CLP术后6h大鼠肺巨噬细胞RIP140蛋白表达水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,且主要表达于细胞核.CLP术后3h大鼠肺巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,下调肺泡巨噬细胞RIP140的表达可明显抑制IL-1 β、TNF-α、IL-6 mRNA的表达.结论 脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞可通过上调RIP140表达增强肺组织炎症反应,从而参与早期急性肺损伤的炎症应答.     

中药脑肺康对地鼠实验性肺气肿及肺动脉高压的防治作用

目的 观察中药肺康对缺氧性肺动脉高压和肺气肿的防治效果并探讨其作用机制。方法 以弹性蛋白酶溶液滴注入金黄地鼠气管内,正常饲养３０ｄ后,常压下缺氧１５ｄ,分别设立中药脑肺康预防组、治疗组、肺气肿＋缺氧组及正常对照组。于处死动物前,测量平均肺动脉压,取静脉血进行循环内皮细胞计数;处死后测量右心肥大指数,光镜下计数左侧肺支气管肺泡灌洗液内细胞总数,对右侧肺进行光镜图像分析。结果 中药脑肺康预防组和治疗３     

MAPK和PI3K调节缺氧诱导因子2α对慢性阻塞性肺疾病的作用

目的探讨缺氧诱导因子2α(HIF-2α)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),磷酸肌醇3-激酶(PI3K)的表达变化在缺氧性肺动脉高压(HPH)中的作用和意义。方法选择COPD患者(24例)和非COPD对照组(28例)患者为研究对象,行HE染色检测两组患者肺小动脉形态学改变,应用免疫组化检测肺小动脉壁内P-AKT、P-ERK、P-JNK、P-P38表达水平,应用原位杂交和免疫组化检测肺小动脉壁内HIF-2α的表达水平。结果 COPD患者管壁面积与管总面积比值及肺小血管中膜厚度均较对照组增高(P0.01)。COPD患者肺小血管壁P-ERK以及P-AKT和HIF-2α基因表达水平较对照组患者肺血管壁内增强,而P-JNK、P-P38表达水平较对照无明显变化。结论 MAPK信号通路和磷酸肌醇3-激酶(PI3K)信号通路以及HIF-2α可能参与了COPD患者HPH的发生。     

香烟暴露对大鼠肺组织及人血管内皮细胞MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的 探讨香烟暴露对大鼠肺组织及人血管内皮细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)表达的影响.方法 采用烟熏法建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型,记录模型组(M组)及对照组(N组)大鼠的一般观察指标、肺功能指标、肺组织病理学指标、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数和分类及肺组织中MMP-9和TIMP-1的表达.用Western blot检测不同浓度香烟提取物干预后人血管内皮细胞中MMP-9和TIMP-1表达的变化趋势.结果 M组大鼠出现毛发脱落、反应迟钝、呼吸频率加快等变化.M组与N组比较,大鼠BALF中炎性细胞计数、肺组织形态学指标、肺功能指标、肺组织MMP-9和TIMP-1的表达及MMP-9/TIMP-1的差异均有统计学意义(P < 0.05).随着香烟提取物浓度增高,人血管内皮细胞中MMP-9和TIMP-1的表达逐渐增强.结论 吸烟是COPD的一个重要致病因素.肺内MMP-9/TIMP-1的失衡及血管内皮细胞中MMP-9和TIMP-1的表达可能在COPD的发生发展中起一定作用.     

MAPK和P13K调节缺氧诱导因子2α对慢眭阻塞性肺疾病的作用

目的探讨缺氧诱导因子2a（HIF-2α）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）,磷酸肌醇3-激酶（P13K）的表达变化在缺氧性肺动脉高压（HPH）中的作用和意义。方法选择COPD患者（24例）和非COPD对照组（28例）患者为研究对象,行HE染色检测两组患者肺小动脉形态学改变,应用免疫组化检测肺小动脉壁内P-AKT、P-ERK、P-JNK、P-P38表达水平,应用原位杂交和免疫组化检测肺小动脉壁内HIF-2α的表达水平。结果COPD患者管壁面积与管总面积比值及肺小血管中膜厚度均较对照组增高（P〈0．01）。COPD患者肺小血管壁P-ERK以及P-AKT和HIF-2α基因表达水平较对照组患者肺血管壁内增强,而P-JNK、P-P38表达水平较对照无明显变化。结论MAPK信号通路和磷酸肌醇3-激酶（P13K）信号通路以及HIF-2α可能参与了COPD患者HPH的发生。     

肺动脉高压影像学改变在诊断急性肺栓塞中的价值

目的:探讨急性肺栓塞所致肺动脉高压的影像学特征,以提高对急性肺动脉栓塞诊断的准确性.方法:回顾性分析26例经临床确诊且均行64排CT血管成像(CTA)检查的急性肺动脉栓塞合并肺动脉高压的胸部影像学表现.结果:26例肺栓塞合并肺动脉高压患者中,10例接受胸片检查:肺血管纹理改变7例,肺浸润灶4例,肺膨胀不全6例,纤维索条影3例.10例均可观察到有肺动脉段突出、肺动脉主干增宽、右心室大.11例胸部CT平扫:肺周密度不均的浸润灶、纤维索条灶和肺不张6例.中央肺动脉扩张、右室肥大11例.胸腔积液和局限性胸膜肥厚3例,肺膨胀不全、叶间裂移位2例.26例行肺动脉CTA:肺动脉主干病变17例.分支肺动脉病变9例.右心房显著增大6例,右心室增大11例,主肺动脉增粗18例.结论:对急性肺栓塞所致肺动脉高压影像学改变的认识,有助于提高对急性肺栓塞诊断的准确性.     

IPF动物造模及造模方法研究

特发性肺纤维化(IPF)是一种慢性、进行性、纤维化性间质性肺炎,因缺乏有效的治疗方法,常预后不良。因此探究其发病机制,开发有效药物显得至关重要。该文回顾整理近年来有关IPF动物造模及试验方法研究,为特发性肺纤维化的药物研究提供良好的实验基础。     

11例核素肺通气/肺灌注显像诊断肺栓塞的观察和护理

目的 :为了提高肺通气 /肺灌注 (V/ Q)显像对肺栓塞诊断的准确性 ,探讨影响 (V/ Q)显像质量的因素 ,给予护理干预。方法 :通过对 11例可疑肺动脉栓塞 (PE)病人行 (V/ Q)显像 ,对其中 1例同时进行 99m Tc-大颗粒聚合白蛋白 (MAA)下肢静脉和肺灌注显像进行的观察 ,有针对性地实施护理措施。结果 :11例可疑 PE病人中 ,有 9例 (V/ Q)显像图像质量清晰 ,有 2例 (V/ Q)显像中的肺通气不成功。结论 :肺通气显像的成败取决于患者吸气的方法 ,应从加强病人在检查前作有效的腹式呼吸训练着手 ,有针对性地实施护理措施 ,是提高 (V/ Q)显像成功与否的关键     

临床和肺生理指标与特发性肺纤维化预后的相关性研究

目的 探讨临床指标、肺功能和动脉血气指标与特发性肺纤维化(IPF)患者预后的关系.方法 经临床诊断的49例IPF患者行呼吸困难评分、肺功能和动脉血气检测.采用Kaplan-Meier检验比较组间生存率,采用Cox比例风险回归评价各指标的死亡风险度.结果 在平均随访31个月内,IPF患者诊断后的中位生存期为25.7个月.糖皮质激素和(或)细胞毒类药物不能改变IPF患者的预后.单因素Cox比例风险回归分析显示,呼吸困难评分、肺泡动脉血氧分压差(PA-aO2)、用力肺活量占预计值百分比(FVC%pre)、肺总量占预计值百分比(TLC%pre)和一氧化碳弥散量占预计值百分比(DLCO%pre)是影响IPF患者预后的因素(P＜0.05),多因素Cox比例风险回归分析结果表明仅TLC%pre[HR=0.98,95%CI(0.95,0.99),Wald值=4.16,P=0.04]和DLCO%pre[HR=0.97,95%CI(0.94,0.99),Wald值=4.35,P=0.047是影响lPF患者预后的主要因素.结论 糖皮质激素和(或)细胞毒类药物不能改变IPF患者的预后.TLC%pre和DLCO%pre是影响肼患者预后的主要因素,与IPF患者预后呈正相关.     

汉防己甲素对肺腺泡内动脉构形重建和肺动脉高压的作用

以野百合喊复制Ｗｉｓｔａｒ大鼠肺动脉高压模型，应用光镜和电镜观察汉防己甲素对肺腺泡内动脉构形的影响。结果表明：汉防己甲素可使肺腺泡内动脉中膜厚度、中膜厚度占血管外径百分比、肌型动脉数及部分肌型动脉数分别减少１６．４％、３０．５％、２４．３％和１６．４％，并使无肌型动脉数增加２４．７％，肺腺泡内动脉内皮细胞变性减轻，中膜胶原纤维和周细胞的增生和肌样分化减少。对其作用机制进行了探讨。     

CT肺动脉成像在急性肺栓塞诊断中的应用现状及研究进展

急性肺栓塞是临床中较为常见的心脑血管疾病,其最终诊断需依靠影像学检查方法。近年来随着CT扫描技术的迅速发展,CT肺动脉成像(CTPA)已取代肺动脉造影及核素肺通气/灌注显像,成为诊断肺栓塞的一线检查方法。随着人们对CT辐射危害及碘对比剂的肾毒性越来越重视,多种CT血管造影技术联合应用于CTPA中,在保证图像质量满足临床诊断的前提下也降低了受检者的辐射剂量及对比剂用量。CTPA联合双能量肺灌注成像在肺栓塞的早期诊断和预后评估中也显示出了重要作用。     

闭塞性肺动脉高压的肺阻抗血流图

分析32例闭塞性肺动脉高压的肺阻抗血流图资料,并与右心导管检查相对照,结果表明闭塞性肺动脉高压的肺阻抗基本波形为多峰递增波,波峰延迟为其主要特点,延迟的程度与肺动脉压呈正相关。     

肺叶切除肺动脉重建术治疗中心型肺癌

目的:回顾分析肺叶切除肺动脉重建术治疗中心型肺癌的效果。方法:采取肺叶切除肺动脉重建术治疗中心型肺癌,其肺动脉均受到肿瘤侵犯。肺部肿瘤部位左上叶45例,右上叶29例。处理方法为:浸润血管壁局部切除+直接缝合术27例;浸润血管壁局部切除+缺损血管壁补片术21例;浸润血管壁袖状切除+端端缝合术11例;浸润血管袖状切除+再造导管间置术15例。结果:本组74例患者中,无手术死亡,术后发生并发症15例,肺炎13例次,心律失常1例次,心功能不全1例次,胸腔积液5例,经保守治疗均痊愈。结论:肺血管成形肺叶切除是治疗中心型肺癌安全可靠的方法之一。     

肺炎支原体肺部感染后肺小动脉的改变及对肺动脉压和右心室的影响

以同月龄大鼠作肺炎支原体反复肺部感染的实验性研究，应用光镜结合全自动图像分析仪及形态学测量技术观察肺小动脉的构形改变，同时测量肺动脉压及右心室肥大指数的变化情况，结果发现，肺小动脉肌化增强，并延伸至无肌细小动脉，肺泡间隔内动脉数减少，肺小动脉中膜增厚、管腔狭窄，肺动脉压力增高，右心室肥大等。提示反复肺炎支原体肺部感染对肺动脉高压的形成和肺心病的发生发展可能起一定的作用。