KLF4、KLF6在人膀胱移行上皮癌组织中的表达及临床意义

目的:观察KLF4、KLF6在人膀胱移行上皮癌组织中的表达,并探讨其对膀胱癌发生、发展的影响。方法:采用实时定量荧光PCR技术检测49例膀胱癌手术切除标本癌组织与25例正常膀胱上皮组织内KLF4、KLF6mRNA的表达,并分析其与患者临床病理特征的关系,采用SPSS 19.0软件进行统计学分析。结果:实时定量荧光PCR结果显示KLF4在膀胱移行上皮癌组织中的相对含量为(0.218±0.046),在膀胱正常上皮组织中的相对含量为(0.311±0.056),二者之间差异有统计学意义(P0.05)。KLF6在膀胱移行上皮癌组织中的相对含量为(0.198±0.038),在膀胱正常上皮组织中的相对含量为(0.285±0.043),差异有统计学意义(P0.05)。膀胱移行上皮癌组织中,KLF4与肿瘤的组织学分级、TNM分期及有无淋巴结转移有关(P0.05),与患者的性别、年龄无关(P0.05);而KLF6表达与肿瘤的TNM分期有关(P0.05),与肿瘤组织学分级、淋巴结转移及患者的年龄性别均无关(P0.05)。结论:KLF4和KLF6表达降低可能与膀胱移行上皮癌的发生和浸润密切相关,通过干预KLF4和KLF6的活性可能成为治疗膀胱移行上皮癌的新靶点。     

Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的:检测抗凋亡(IAP)家族中生存素(Survivin)基因在膀胱移形细胞癌(BTCC)组织及癌旁组织的表达,探讨Survivin的表达在膀胱癌发生发展中的意义.方法:采用免疫组织化学和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-QPCR)方法,对30例BTCC患者中Survivin基因在癌组织和癌旁组织中的表达进行检测.结果:免疫染色标本中,在癌旁组织、BTCC和胚胎癌组织中Survivin的阳性表达率分别为0、60%和100%.同一患者,Survivin在BTCC的表达量远大于癌旁组织,Survivin在BTCC组织中的-△△CT值是癌旁组织的10.2829(9.0034～11.5624)倍,同时在病理分级之间和临床分期之间均有统计学意义(P＜0.05).结论:Survivin基因在癌旁组织中有少量表达,而在BTCC组织中的表达量远远高于癌旁组织;其表达量与病理分级和临床分期均有相关性.     

膀胱移行细胞癌中Survivin基因的检测及临床意义

目的：探讨Survivin基因在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义。方法：通过逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例膀胱癌和12例非膀胱癌组织及尿液标本中Survivin基因mRNA的表达,采用免疫组织化学方法（SP法）复检Survivin基因的表达并确定其临床病理分期和分级。结果：40例膀胱癌组织中Survivin基因的阳性表达率为67．5％,mRNA表达结果与免疫组织化学结果一致;在尿液中的阳性表达率为55．5％。12例非膀胱癌组织中Survivin基因的阳性表达率仅为8．3％;尿液中未见Survivin基因表达。显示Survivin基因在膀胱癌中的表达显著高于在非膀胱癌中的表达（P〈0．05）;而组织标本与尿液标本对Survivin基因的检出率无明显差异（P〉0．05）;Survivin的阳性表达与膀胱癌的恶性程度、临床病理分级或是否复发关系密切（P〈0．05）,Survivin基因的阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤的分期无明显相关性。结论：Survivin基因在膀胱癌的恶性程度、肿瘤转移及预后等方面可能有较大的临床意义,而检测尿液中Survivin基因的表达可作为膀胱癌的早期发现、早期诊断、术后复查的新方法。     

尿及癌组织中Survivin的表达对膀胱癌的早期诊断价值

目的 通过对膀胱移行上皮癌患者尿脱落细胞及癌组织中抑制凋亡相关基因Survivin的检测，探讨早期发现、常规筛选膀胱癌且无损伤的方法。方法留取53例膀胱移行上皮癌、20例泌尿系其他疾病患者及10例健康志愿者新鲜中段晨尿200mL，对53例膀胱移行上皮癌患者术后癌组织，用巢式逆转录聚合酶链反应（nestedRT-PCR）检测Survivin的表达，同时行尿脱落细胞学检查及膀胱镜取材病检。结果用巢式RT—PCR检测53例膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin均有表达，所有样本尿中Survivin的表达敏感性为100％，特异性为90％。尿脱落细胞学敏感性为37．7％，特异性为100％。膀胱镜病检敏感性、特异性均为100％。尿及癌组织中Survivin与尿脱落细胞学敏感性比较有显著差异（P〈0．05），与膀胱镜检相同。而特异性分别为90％、100％、100％，P〉0．05，无差异。结论用巢式RT-PCR方法检测膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin的表达，其敏感性、特异性相同。尿脱落细胞Survivin表达敏感性、特异性高。尿取材无损伤、方便，敏感性优于尿脱落细胞学检查，与膀胱镜检相当，特异性与尿脱落细胞学检查及膀胱镜病检无差别，且对膀胱癌前病变的归转有一定价值。检测尿中Survivin有望成为临床诊断、筛检膀胱癌的较可靠方法。     

膀胱肿瘤中EphA2 mRNA的表达及其生物学行为关系研究

目的研究受体酪氨酸激酶EphA2在膀胱肿瘤中的mRNA表达,并对其致癌机制加以初步探讨。方法应用实时荧光定量RT—PCR技术检测49例膀胱尿路上皮癌（bladder urothelial carcinoma,BUC）、19例膀胱内翻性乳头状瘤（inverted papilloma of blader,IPB）和10例正常膀胱组织标本中EphA2mRNA的表达,并通过2△△CT方法分析相对基因表达的差异。结果相对于正常膀胱组织,EphA2mRNA在IPB和BUc中的表达量明显增加,分别平均上调约2．06（2．06±0．84）倍和2．57（2．57±0．97）倍;在IPB与BUC组间的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。EphA2tuRNA的表达与膀胱肿瘤临床分期（r=0．471,P=0．001）及病理分级（r=0．286,P=0．047）呈正相关,与BUC其它各临床病理特征之间没有相关性（P〉0．05）。结论EphA2过表达可能促成了IPB的癌性转化以及膀胱肿瘤的恶性进展,其核酸调控机制可能发生在膀胱肿瘤早期,甚或更有可能是在癌前病变进展期中起重要作用。     

Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

目的比较Survivin在正常组织与膀胱移行细胞癌中表达的差异，分析其表达与膀胱移行细胞癌生物学特性及预后的关系。方法选用中山大学附属第三医院2001年至2006年间外科切除及活检的膀胱癌石蜡块标本40例，其中24例为浅表性膀胱癌组织，16例为浸润性膀胱癌组织。另取10例正常膀胱组织石蜡块标本，用免疫组化染色显示组织中Survivin表达，并对结果进行相应的统计学分析。结果10例正常膀胱组织中未见Survivin表达。于G，级、G：级、G，级膀胱癌组织中Survivin的表达率分别为20％（2／10）、38．9％（7／18）、75％（9／12）。经多因素分析，Survivin的表达与膀胱癌细胞的病理分级及患者的无瘤生存时间相关，而与其肿瘤分期及生存率不相关。结论正常膀胱组织不表达Survivin。Survivin的表达率随肿瘤细胞分化程度的降低而升高。Survivin的表达水平反映患者的无瘤生存率，是预测膀胱癌复发的独立预后因子。     

核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌患者尿中含量及临床意义

目的 :探讨膀胱移行细胞癌患者尿核基质蛋白 2 2 (NMP2 2 )含量变化规律及临床意义。方法 :应用免疫酶标记法 (SLISA)对 98例膀胱癌患者、11例健康对照者的尿中NMP2 2含量进行检测并随访观察。结果 :尿中NMP2 2水平膀胱癌患者 [(2 1.3± 10 .8)× 10 3 u/L]显著高于健康对照组 [(1.1± 0 .6 )× 10 3 u/L](P <0 .0 1) ,T3 、T4期膀胱癌 [(5 7.1± 9.3)× 10 3 u/L]显著高于T1、T2 期膀胱癌 [(14 .2± 6 .6 )× 10 3 u/L](P <0 .0 5 ) ,复发性膀胱癌 [(38.7± 3.6 )× 10 3 u/L]显著高于初发性膀胱癌 [(18.3± 8.6 )× 10 3 u/L](P <0 .0 5 )。随访 1～ 3年 ,复发性膀胱癌组尿NMP2 2为 (4 0 .7± 11.3)× 10 3 u/L ,未复发膀胱癌组为 (17.6± 7.1)× 10 3 u/L(P <0 .0 5 )。结论 :尿NMP2 2水平可反映膀胱癌的发生及肿瘤浸润进展程度 ,尿NMP2 2检测对膀胱癌的预后判断有一定的指导意义。     

膀胱移行细胞癌中p53突变、Bcl-2的表达及其临床意义

我们应用免疫组织化学法检测石蜡包埋的膀胱癌标本中Ｂｃｌ 2和ｐ53这两种基因的表达 ,探讨在膀胱癌中Ｂｃｌ 2和ｐ53表达与细胞凋亡及病理参数的关系。一、材料和方法1 .标本来源 :62例膀胱癌患者 ,其中男 49例 ,女 1 3例 ,年龄 37～ 76岁 ,平均52岁。甲醛固定石蜡包埋的标本切成 5μｍ厚 ,置入经多聚赖氨酸处理过的载玻片中。典型切片用常规苏木素伊红(ＨＥ)染色分析。肿瘤分类采用国际抗癌协会 (ＵＩＣＣ)ＴＮＭ分期法。2 .免疫组织化学 :所有免疫组织化学试剂盒均由武汉博士德公司提供。切片常规脱蜡水化后、体积分数为 3 %过氧化氢 1 0…     

膀胱移行细胞癌中γ-catenin的异常表达及其临床意义

目的：探讨膀胱移行细胞癌中γ－catenin的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学方法（SP）对48例膀胱移行细胞癌和8例正常胱膀膜进行γ－catenin表达的研究。结果：48例膀胱移行细胞癌中28例（58．3％）出现γ－catenin的异常表达，其中G1为6／18（33．3％），G2为10／16（62．5％），G3为12／14（85．7％）。Ta－T1期为9／26（34．6％），T2－T4期为19／2（86．4％）。不同分期及分级组间γ－catenin异常表达率差异有显著性意义。γ－catenin异常表达者2年复发率明显高于表达正常者（P＜0．05）。结论：γ－catenin的异常表达可能在膀胱移行细胞癌的进程中起着重要作用，检测其表达对判断膛胱移行细胞癌的恶性程度及复发有一定临床意义。     

MCM5和PCNA在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的：研究微型染色体维持蛋A5（MCM5）和增殖细胞核抗原（PCNA）在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化S—P法检测56例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜中MCM5及PCNA的表达，分析它们的相关性及与膀胱移行细胞癌分化、分期和预后的关系。结果：①MCM5和PCNA在膀胱移行细胞癌与正常组织中皆有表达，两者在膀胱移行细胞癌组的表达明显高于正常组（P〈0．01）。②MCM5和PCNA的表达均与膀胱移行细胞癌的组织分级、临床分期、术后复发有关（P〈0．05）。③MCM5表达和PCNA表达呈正相关（相关系数r=0．854，P〈0．05）。结论：MCM5蛋白是膀胱移行细胞癌的一种可靠标志物，MCM5的表达可以预示膀胱移行细胞癌的恶性程度高低和复发倾向，并有助于临床判断患者的预后以及选择合适的治疗方法。     

联合评估凋亡相关蛋白Survivin和突变型p53在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的：探讨凋亡相关蛋白Survivin和突变型p53在膀胱移形细胞癌（BTCC）中的表达及其临床意义。方法：应用SP免疫组织化学法检测50例BTCC及10例正常膀胱黏膜组织石蜡切片中Survivin和p53表达的情况,结合临床资料进行分析。结果：Survivin在BTCC的肿瘤标本中的阳性表达率为76％（38／50）,而正常对照组中无一例呈阳性表达;Survivin的表达与BTCC的组织学分级、预后显著相关（二者均P〈0．05）,但与临床病理分期无关（P〉0．05）;p53在13TCC肿瘤标本中的阳性表达率为68％（34／50）,与对照组阳性表达率30％（3／10）相比有统计学意义（P〈0．05）。p53的表达与BTCC组织学分级、临床分期及复发相关（均P％0．05）;相关性分析表明,BTCC肿瘤组织中Survivin的表达与p53表达呈正相关（r=0．317,P〈0．05）。结论：Survivin在BTCC组织中选择性表达,与BTCC的分化程度及复发密切相关;p53蛋白在BTCC中的表达与分级、分期及复发相关,联合评估Survivin和p53蛋白对于判断BTCC预后有重要临床指导意义。     

BRMS1mRNA在膀胱移行细胞癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨膀胱移行细胞癌组织中乳腺癌转移抑制基因（breast cancer metastasis suppressor1,BRMSl）mRNA表达水平与膀胱移行细胞癌的发生和转移的关系。方法：以β-actin为内参照,用荧光RT—PCR方法分别检测正常膀胱、未转移膀胱癌、转移膀胱癌三组标本组织中BRMSlmRNA的表达。结果：未转移膀胱癌和转移性膀胱癌BRMslmRNA表达水平显著低于正常膀胱组织（P〈0．01）,转移膀胱细胞癌BRMSlmRNA水表达平显著低于未转移膀胱细胞癌（P〈0．01）。结论：BRMSlmRNA在膀胱癌组织中的表达水平与膀胱癌的发生和淋巴结转移呈负相关;BRMSlmRNA表达的下降可能促进了膀胱癌的转移。     

维甲酸受体β在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨维甲酸受体β（retinoic acid receptor-beta,RAR-β）在膀胱移行细胞癌中表达的意义。方法应用免疫组织化学方法检测80例膀胱移行细胞癌组织标本中RAR-β的表达。病理分级：Ⅰ级26例,Ⅱ级22例,Ⅲ级32例;临床分期：T120例,T220例,T322例,T418例;其中复发性膀胱癌46例。以10例正常膀胱组织作为对照。结果10例正常膀胱粘膜组织中RAR-β均为强阳性表达。80例膀胱移行细胞癌中RAR-β阳性表达28例（35.0%）。RAR-β表达在病理分级Ⅰ级以及临床分期T1、T2期膀胱癌中表达较高;在复发性与非复发性膀胱移行细胞中的表达分别为17.4%和58.9%,差异显著（P〈0.05）。结论RAR-β在膀胱移行细胞癌组织中存在表达缺失,其表达缺失程度与肿瘤病理分级、临床分期及复发相关,有作为膀胱移行细胞癌预后指标的可能。     

膀胱移行细胞癌中FHIT基因启动子甲基化及其蛋白的表达

目的：探讨膀胱移行细胞癌（BTCC）FHIT基因启动子甲基化状态及其与FHIT蛋白表达的关系。方法：采用甲基化特异性PCR（MSPCR）方法及免疫组织化学S-P法检测62例BTCC组织和10例正常膀胱组织中FHIT基因启动子甲基化状态及FHIT蛋白表达。结果：BTCC组织、正常膀胱组织FHIT基因启动子甲基化频率分别为19．4％（12／62）,0（0／10）。FHIT蛋白在正常膀胱组织、BTCC中阳性表达率分别为100．0％（10／10）和46．77％（29／62）,肿瘤不同分级中随恶性程度的增高,表达减少,Ⅰ级与Ⅲ级比较,差异有统计学意义（P〈0．05）,不同临床分期中随分期的增高,表达减少,Tis～T1与T2～T1比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。FHIT基因的启动子甲基化和蛋白阳性表达有相关（P〈0．05）。结论：FHIT基因的启动子甲基化可能是基因失活重要机制之一,FHIT基因启动子甲基化及表达在BTCC的发生、发展中起重要作用。     

CD147 mRNA及蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的：研究膀胱移行细胞癌（BTCC）及正常膀胱组织中CD147mRNA及其蛋白的表达,探讨其临床意义。方法：采用原位核酸分子杂交和免疫组化S-P法检测67例BTCC组织和12例正常膀胱组织中CD147mRNA和蛋白的表达情况,探讨其与BTCC部分临床生物学特性的相关性,及CD147mRNA和蛋白表达的一致性。结果：正常膀胱组织未见CD147mRNA和蛋白表达。BTCC组织中CD147mRNA及蛋白阳性率分别为59．7％和68．7％。CD147蛋白表达与病理分级显著相关（r=0．482,P〈0．001）,与临床分期朱见相关;CD147mRNA表达定位于胞浆,与膀胱癌病理分级、临床分期未见相关;CD147mRNA和蛋白表达呈正相关（r=0．285,P=0．019）。结论：BTCC中有CD147mRNA和蛋白的表达,其表达呈正相关,CD147有可能成为判断BTCC侵袭力的重要指标,阻断CD147的表达可能成为治疗膀胱肿瘤的新靶点。     

趋化因子受体CXCR4在膀胱移行细胞癌中的表达

目的：研究趋化因子受体CXCR4在膀胱移行细胞癌（BTCC）组织中的表达及其临床意义。方法：运用免疫组化技术，检测42例膀胱移行细胞癌组织、5例腺性膀胱炎组织、5例移行细胞乳头状瘤及10例正常膀胱黏膜上皮CXCR4的表达，染色结果采用免疫反应积分（IRS）和积分光密度值（IOD）分别进行评分。结果：42例BTcc组织中，4｜D例cxcR4表达阳性（95.2％）。随着肿瘤细胞病理分级、临床分期的增加，CXCR4的表达强度升高（P〈0.05）。正常膀胱组织和各阳性对照组中CXCR4的表达呈阴性。结论：CXCR4的表达与BTCC的分级分期有相关性；CXCR4的异常表达与BTCC的复发、转移有关，并有可能成为一种新的预后判断指标。     

DLL4与VEGF在膀胱移行细胞癌中的表达和意义

目的：探讨DLL4和VEGF在膀胱移行细胞癌（BTCC）中的表达和意义。方法：采用免疫组化（S-P法）结合计算机图像定量分析技术检测50例BTCC组织和10例正常膀胱组织中DLL4和VEGF的表达情况,测定平均光密度（MOD）。结果：BTCC组中DLL4和VEGF阳性表达率分别为90％（45／50）和64％（32／50）,对照组膀胱组织中DLL4无表达,1例VEGF阳性表达,DLL4与VEGF在BTCC组织和正常对照组表达均有统计学意义（P〈O．05）;BTCC组织中DLL4表达与组织学病理分级呈负相关,VEGF表达与组织学病理分级呈正相关（P〈0．05）;BTCC组织中DLL4表达与临床分期呈负相关,VEGF表达与临床分期呈正相关（P〈0．05）;初发性和复发性BTCC组织中DLL4表达量的差异与VEGF表达量的差异均有统计学意义;BTCC组织中DLL4和VEGF之间的表达呈负相关（r=-0．604,P=0．035）。结论：DLL4和VEGF表达与BTCC的分期、分级及肿瘤的预后有关;综合DLL4和VEGF在BTCC组织中的表达情况判断肿瘤预后,从而可以在早期选择更优化的治疗方案,并且靶定DLL4可能成为一个新的抗血管生成的治疗方法。