HBV-DNA荧光定量PCR检测的临床意义

目的通过与血清标志物(HBV-M),血清ALT的比较,探讨血清乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测的临床意义及其与病毒复制程度变化的关系与原因.方法采用FQPCR法对慢性乙肝病人进行血清HBVDNA定量检测并与血清中乙肝标志物及血清ALT进行相关性分析.结果血清HBVDNA水平与HBvM表现模式有关,其水平变化与HBsAg HBeAg有明显正相关关系,血清HBVDNA水平与ALT成负相关.结论HBV-DNA含量与HBeAg有明显关系,抗HBe阳性患者HBV-DNA含量仍高,病毒突变是其重要原因.HBV-DNA FQPCR检测能更准确地反映病毒复制程度,对乙肝的诊断治疗预后意义重大.     

HBV-DNA荧光定量PCR检测的临床意义

目的 探讨荧光定量PCR检测HBV-DNA在乙型肝炎的诊断、治疗及判断病情、预防 等方面的临床应用价值。方法 运用荧光定量PCR和ELISA法同时检测了180例乙型肝炎患者和56 例正常献血员血清中HBV-DNA的含量及其免疫标志物,并对结果进行了对比分析。结果 乙肝大 三阳患者HBV-DNA阳性率达100％(95／95),显著高于其他各组(P<0．01),HBV-DNA含量平均 为4．8×10~7copy／ml;小三阳患者HBV-DNA阳性率低于大三阳组(P<0．01),但平均病毒含量与大 三阳组无差异(P>0．05),高达2．1×10~7copy／ml;单独HBsAg阳性和单独HBsAb阳性组HBV- DNA阳性率分别为54％、33％,平均病毒含量分别为5．6×10~5copy／ml、3．8×10~4copy／ml;56例献血员 血清仍有3例HBV-DNA阳性,其病毒含量低于其他组。结论 荧光定量PCR检测HBV-DNA含 量比ELISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HBV在体内的复制情况,这对临床上抗病毒药 物的选择和判断疾病的预后意义重大。     

荧光定量PCR检测HBV-DNA

目的 探讨血清HBV-DNA水平与HBV标志物(HBVM)表现模式的关系。方法对1223例慢性乙型肝炎患者进行血HBV-DNA荧光定量PCR分析,HBVM检测采用ELISA法。结果血清HBV-DNA水平与HBV M表现模式有关,HbsAg与HbeAg的存在影响HBV-DNA水平变化。结论HbeAg水平与HBV-DNA有明显的相关,抗-Hbc、抗HBc阳性者病毒未完全停止复制,只是复制水平降低。     

两种HBV-DNA荧光定量PCR检测比较

目的优化HBV—DNA特异性定量检测方法。方法采用荧光定量PCR检测法，用10份正常血清、10份HBV高滴度（10^6 IU／mL）血清和梯度稀释的HBV克隆质粒标准品，验证两种检测方法的重复性、特异性和灵敏度；并将结果进行配对检验。结果10份正常血清标本均无假阳性HBV—DNA检测结果，特异性极好；10份HBV高滴度血清中检出1份YMDD变异，灵敏度均可达到10^3 IU／mL，重复性和灵敏度两者之间无显著性差异（t=0．702，P〉0．05）。结论该方法特异性和灵敏度高，可用于HBV的临床检测和科学研究。     

荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒的临床意义

目的 :对荧光定量 PCR(FQ- PCR)测定的 10 2例 HBV- DNA结果进行分析 ,以探讨其临床价值。方法 :对 10 2份临床血清标本用 FQ- PCR方法进行 HBV- DNA定量测定 ,并和 EL ISA两对半结果以及 AL T结果进行比较分析。结果 :2 5份 HBs Ag(+)、HBe Ag(+)、HBc Ab(+)的标本 HBV- DNA均为阳性 ,L og DNA平均值± 2 sd为 7.45± 2 .5 4;34份 HBs Ag(+)、HBe Ab(+)、HBc Ab(+)的标本 HBV- DNA阳性 15份 ,L og DNA平均值± 2 sd为 6 .33± 1.86 ;9份HBs Ag(+)、HBc Ab(+)的标本 HBV- DNA阳性 4例 ,L og DNA平均值± 2 sd为 5 .2 3± 4.6 0 ;14份 HBs Ab(+)的标本 HBV- DNA阳性 1例 ,18份全阴性的标本 HBV- DNA无阳性。以上五种两对半结果其相对应的 HBV- DNA值基本呈下降趋势 ,而且前二者之间有显著性差异 (P<0 .0 1)。急性乙型病毒性肝炎、慢性乙型病毒性肝炎、肝癌、肝硬化患者之间的 HVB- DNA定量结果无显著性差异。HBV- DNA和 AL T之间无相关性 (r=0 .17)。结论 :FQ- PCR定量测定HBV- DNA可以真实反应 HBV的感染和复制情况 ,可以用于临床治疗和疗效观察 ,但它在急性乙型病毒性肝炎、慢性乙型病毒性肝炎、肝癌、肝硬化的鉴别诊断上无帮助 ,和病情的轻重也无相关性。     

新型HBV-DNA实时荧光定量PCR试剂盒的应用

目的:观察新型HBV-DNA荧光定量PCR试剂盒的临床应用价值。方法:采用荧光定量PCR检测法,用10份正常血清、10份HBV高滴度(106 IU/ml)血清和梯度稀释的HBV克隆质粒标准品,验证该试剂盒检测结果的重复性、特异性和灵敏度;并将该10份HBV高滴度(106 IU/ml)血清结果与同时用传统方法所测结果进行配对检验。结果:10份正常血清标本均无假阳性HBV-DNA检测结果,特异性极好;灵敏度可达到103 IU/ml,重复性和准确性两者之间差异无显著性(t=1.15,P>0.05)。结论:该方法特异性和灵敏度高,方便、快捷,可替代传统试剂盒用于HBV的临床检测和科学研究。     

荧光定量PCR技术测定HBV-DNA与乙肝血清学标志分析比较

最近的研究表明 ,利用荧光定量ＰＣＲ技术[1] 检测乙型肝炎病毒核酸含量是临床预测干扰素、拉米呋啶治疗是否有效的重要指标[2 ] 。也是乙肝病毒感染、复制、传染最直接的证据。乙型肝炎病毒血清学标志物[3] 是临床分析和判断患者病程和传染性的传统依据之一。为了进一步分析乙肝病毒核酸与标志物之间的关系 ,本文对 181份血清进行了检测。现将结果报告如下。1　材料1.1　标本　标本均来自本院门诊及住院患者 ,空腹采集静脉血 3ｍｌ,离心分离血清后置 - 2 0℃保存 ,并于 1周内检测。其中男 145例 ,女 36例 ,男女比例 4∶1;年龄 18～ 74岁 ,…     

HBVDNA荧光定量PCR检测及临床意义

血清HBV-DNA浓度与乙型肝炎病毒感染的严重程度和传染性有关,可用于判断病情和预后,以及观察抗病毒药物的治疗效果.通常血清 HBV-DNA持续阳性超过6个月会转为慢性肝 炎.抗-HBc阳性患者血清HBV-DNA持续阳性常提示肝受损严重,50%以上抗-HBc阳性慢性活动性肝炎患者,经平均4.5年发展为肝硬化,常与HBV-DNA持续阳性有关.     

乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测及其意义

目的 探讨荧光定量PCR法检测的乙型病毒DNA与乙肝病毒标志物之间的关系。方法 362例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBV DNA的检测,按照不同的乙肝病毒标志阳性情况分级后,进行乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物的分析研究。结果 乙肝病毒标志物HBsAg HBeAg HBcAb阳性组HBV DNA阳性率97.7%,拷贝数在10^4-10^8之间;HBsAg HBeAb HBcAb阳性组阳性率56％,拷贝数在10^2－10^7之间;HBsAg HBcAb阳性组阳性率54％,拷贝数在10^2－10^7之间;HBsAg HBeAg组阳性率100％,拷贝数在10^7之间;HBeAb HBcAb组3例,有1例阳性,拷贝数10^2;HBsAb组阳性率14.3%,拷贝数在10^3－10^7之间;189例全阴性有2例阳性（1.06%）,拷贝数在10^4－10^5之间。结论 HBV DNA在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出,但检出率相差甚大,从1.06%－100％;HBV DNA乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBV DNA阳性率及拷贝数较高;HBsAg及其抗体阳性者仍可检出HBV DNA,说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断病人是否具有传染性是不够的。     

HBV-DNA荧光定量PCR检测的临床意义

目的:荧光定量聚合酶反应(FQ-PCR)检测血清中乙型肝炎病毒(HBV-DNA)的临床意义。方法:用荧光探针技术相结合所产生的实时荧光定量聚合酶反应。结果:150例乙型肝炎标本中,有91例大三阳(HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+),患者血清HBV-DNA阳性率100%,平均浓度2.8×106Copies/ml;有19例小二阳(HBsAg+,HBcAb+),患者血清HBV-DNA阳性94.7%,平均浓度4.3×l05Copies/ml;有40例小三阳(HBsAg+,HBeAb+,HBcAb+)患者血清HBV-DNA阳性率77.5%,平均浓度1.2×104Copies/ml。结论:FQ-PCR是了解HBV-DNA在体内复制和判断疗效的有利手段,并具有快速、特异、灵敏等优点,可真实反应HBV-DNA复制情况及病情变化,对乙肝临床诊断及治疗有较大的指导意义。     

荧光探针定量PCR在检测HBV-DNA的应用

目的　用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)方法准确地定量检测血清中的HBV DNA数量和免疫指标 ,以指导临床。方法　用FQ PCR方法和酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法分别检测 184份临床血清标本的HBVDNA和免疫指标。结果　用 (ELISA)作对照 ,经FQ PCR检测 ,HBeAg(+)组 (82份 )的阳性率为 10 0 % ,HBV DNA阳性拷贝数范围在 10 5～ 10 10 /ml;HBeAb(+)组 (5 2份 )的阳性率为 5 5 8% ,HBV DNA阳性拷贝数范围在 10 4～ 10 7/ml;HBsAb(+)组 (2 0份 )的阳性率为 15 % ,HBV DNA阳性拷贝数范围在 10 4～ 10 5/ml;对照组 (30份 )的阳性率为 0。HBeAg(+)组血清中HBV DNA含量 (10 7 2± 1 13 )显著高于HBeAb(+)组 (10 5 8± 1 4)和HBsAb(+)组 (10 4 67± 0 58)。结论　FQ PCR检测HBV DNA具有较高的灵敏度和特异性 ,且能准确定量 ,FQ PCR可以检测HBV的真实感染和复制情况 ,对乙型肝炎临床诊断 ,治疗及疗后观察有重要意义。     

Detection of Human Papillomavirus DNA in Oral Cancer Tissue Using Polymerase Chain Reaction

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＨｕｍａｎＰａｐｉｌｏｍａｖｉｒｕｓＤＮＡｉｎＯｒａｌＣａｎｃｅｒＴｉｓｕｅＵｓｉｎｇＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎＴａｏＺｈｅｎｊｉａｎｇ（陶震江）ＷａｎｇＬｉｎｚｈｏｎｇ（万林忠）ＹｅＹｕｘｉａ（叶玉霞）Ｘｉ...     

乙型肝炎病毒核酸定量检测中不确定度的研究

目的研究应用实时荧光定量PCR（Fluorescence Quantitative PCR,FQ-PCR）开展乙型肝炎病毒（Hepatitis Bvirus,HBV）核酸定量检测中的测量不确定度。方法通过实时荧光定量PCR进行乙型肝炎病毒核酸定量检测的实验分组设计与数据处理分析,计算分析该检测方法不同来源的测量不确定度值。结果对3组不同水平浓度值样本来源的数据采用两种方法进行统计分析,QDNA的组标准差远远大于LGQDNA的标准差,初始浓度数值经过对数转化后离散程度降低,统计平均值也发生了偏离。LGQDNA为3.465、4.927和6.018的样本,其浓缩过程来源的相对不确定度分别为0.020、0.019和0.009;LGQ无偏估计在3.706、6.750的样本的核酸提取来源相对不确定度分别为0.016和0.009;数据分析来源的LGQ不确定度为0.000～0.008;热循环仪来源的LGQ不确定度为0.002～0.008。结论使用核酸浓度值QDNA与使用其对数值LGQDNA进行数据统计分析的结果存在差异;标本制备过程中的浓缩和DNA提取是实时荧光定量PCR进行HBV核酸定量检测时测量不确定度的重要来源,标本制备环节是影响该项检测的关键因素,包括试剂、方法和操作者的准确操作能力。     

荧光定量-聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA及其临床价值

目的:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ PCR)技术检测血清乙型肝炎病毒(HBV)DNA,评价其临床应用价值。方法:用FQ PCR和酶联免疫吸法(ELISA)检测298份血清HBVDNA拷贝数和免疫学血清标志。结果:27份HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性的标本中,HBVDNA阳性率96.3%,平均拷贝数5.0×107mL;69份中检出率44.9%,平均拷贝数2.1×105mL;43份中检出率34.9%,平均拷贝数8.6×103mL。结论:FQ PCR可以准确、灵敏地判断HBV感染的实际情况及复制水平,可为选择治疗方案和评估药物疗效提供较可靠的理论依据。     

巢式PCR检测舌苔幽门螺杆菌临床研究

目的：幽门螺杆菌（H.pylori）是消化道疾病的常见致病菌,实验检测舌苔中是否存在H.pylori比较困难。利用巢式PCR检测舌苔幽门螺杆菌分布,并分析舌苔H.pylori与胃H.pylori的相关性。方法：用13C或14C尿素呼气试验（UBT）检测胃H.pylori;随机刮取80份舌苔样本,其中UBT阳性病人舌苔样本55份,UBT阴性病人舌苔样本25份,用巢式PCR检测舌苔H.pylori,以H.pylori的热休克蛋白HSP60基因为引物。结果 ：巢式PCR检测出44份的舌苔H.pylori感染为阳性;数据统计分析后,UBT阳性与PCR阳性的相关性较好（两组McNemar检验P=0.061〉0.05）。结论：胃H.pylori阳性的人群中,其舌苔感染H.pylori的可能性很大,舌苔是人体H.pylori的主要储存地,考虑为胃内H.pylori感染和复发的原因之一。     

荧光定量PCR在丙型肝炎病毒感染检测中的应用

目的　观察荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)在丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus ,HCV )感染检测中的临床应用情况。方法　用FQ PCR检测 3 15份怀疑HCV感染的临床血清标本 ,并同时采用酶联免疫吸附测定法 (ELISA)检测抗HCV ,用生化仪测定血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)水平 ,了解样本中HCV RNA含量与抗HCV及ALT的相关性。结果　 3 15份标本中有 2 2 5份HCV RNA含量高于 80拷贝·ml-1,2 5 0份抗HCV阳性 ,14 5例ALT异常 ,HCV RNA含量与抗HCV阳性率间有显著的相关性 (r =0 .682 ,P =0 .0 0 2 ) ;HCV RNA含量与ALT异常率间也有显著的相关性 (r =0 .92 3 ,P =0 .0 3 2 )。结论　FQ PCR技术检测HCV RNA特异性强 ,灵敏度高 ,具有良好的临床应用价值。     

采用通用引物进行PCR检测宫颈中人乳头瘤病毒的基因

采用可检测九个型别人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）的通用引物进行多聚酶链反应，在４７份宫颈糜烂患者的宫颈细胞标本中检出了ＨＰＶ阳性的标本２３份。在这２３份阳性标本中ＨＰＶ１６型特异性引物进一步用ＰＣＲ进行扩增，检出ＨＰＶ１６型阳性者１０份，在２４份ＨＰＶ阴性的标本中用ＨＰＶ１６型特异性引物未检出ＨＰＶ１６阳性的标本。结果表明：用通用引物进行ＰＣＲ检测人乳头瘤病毒的感染，方法简便、灵敏、经济，特别适合于ＰＣＲ     

竞争PCR用于乙肝病毒DNA定量检测初探

目的　评估竞争PCR这种检测方法的临床有效性。方法　用竞争PCR和荧光定量PCR两种方法对同一组患者血清HBVDNA进行了定量检测。竞争PCR是通过聚合酶链反应过程中竞争子和目的乙肝病毒DNA竞争同一反应管内的同一引物 ,通过凝胶成像比较目的乙肝病毒DNA和已知量竞争子的亮度 ,推测出目的DNA的含量。再将其结果与荧光定量PCR的结果相比较。结果　竞争PCR与荧光定量PCR检测的结果一致。结论　运用竞争PCR的方法对乙肝病毒DNA进行定量检测结果精确、成本较低 ,简便快速、易于操作 ,可推广使用。     

聚合酶链反应技术检测禽网状内皮组织增殖病病毒

目的建立聚合酶链反应(PCR)技术检测禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)的方法。方法提取感染REV-T和脾坏死病毒(SNV)的SPF鸡胚成纤维细胞DNA为模板,利用前病毒长末端重复序列(LTR)区引物进行扩增。采集肿瘤病鸡,以及人工感染REV 28 d后鸡肝脏、脾脏、肾脏、心脏、胸腺、法氏囊等器官,进行扩增。同时将采集的脏器组织,进行HE染色和免疫组化试验(IHC)。结果REV-T感染的组织未检测出电泳条带,而SNV感染的细胞中检测到了一条300bp特异而清晰的电泳条带,而且SNV感染的鸡组织中,PCR方法检测到了特异的条带。通过HE染色和免疫组化技术观察到了肿瘤组织,肿瘤细胞的形态、分布。结论PCR检测REV更快捷,特异更好。