RNA干扰EFEMP1对卵巢癌细胞增殖、侵袭与转移的影响

目的:探讨fibulin糖蛋白家族中fibulin-3(EFEMP1)对卵巢癌细胞增殖、侵袭与转移的影响,为卵巢癌针对性治疗提供理论基础。方法:利用慢病毒转染RNA干扰的方式,转染具有高侵袭转移能力的S1克隆细胞株,抑制EFEMP1表达。Western blot、Real-time RT-PCR和免疫组化对转染效果进行验证。采用体外细胞功能分析技术检测干扰前后EFEMP1对细胞增殖、侵袭与转移能力的影响。建立裸鼠皮下移植瘤模型,体内观察EFEMP1对肿瘤生长的影响。结果:RNA干扰有效抑制EFEMP1表达,EFEMP1降表达显著抑制肿瘤细胞增殖、侵袭和转移能力,裸鼠体内成瘤率降低并且肿瘤体积显著下降,同时肿瘤组织Fibulin基因表达显著降低。结论:EFEMP1与卵巢癌发生发展及侵袭转移密切相关,为卵巢癌的治疗提供新的思路。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制物与卵巢癌的侵袭和转移

肿瘤的侵袭和转移是个多步骤的复杂过程 ,但是首先肿瘤细胞必须具备降解细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ )和基底膜的能力。这一过程中基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ)必不可少 ,它几乎能降解细胞外基质所有成分 ,被认为参与肿瘤的侵袭、转移和血管形成[1] ,它的组织抑制物 (ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏ ｔｅｎａｓｅｓ ,ＴＩＭＰｓ)亦参与这一降解过程的代谢调节 ,故近年来它们愈来愈被人们重视。1　ＭＭＰｓ分类、结构、调节及检…     

环氧化酶信号通道与卵巢癌侵袭及转移

归纳上皮性肿瘤的发生发展及侵袭和转移研究中的关键问题,以及环氧化酶2（COX-2）和锌指转录因子Snail蛋白在上皮性肿瘤的表达情况、调控环节。初步探讨COX信号通道[COX-前列腺素E（PGEs）依赖途径]在上皮性卵巢癌的侵袭转移中的意义。在卵巢癌发生发展过程中的COX-2高表达导致前列腺素E水平增高,上调锌指转录因子Snail蛋白表达,后者与E-钙粘蛋白（E-cadherin）启动子上的E-Box作用元件结合而抑制E-cadherin的转录。作为细胞黏附分子的E-cadherin表达下调,促进肿瘤细胞侵袭转移潜力。     

环氧化酶信号通道与卵巢癌侵袭及转移

归纳上皮性肿瘤的发生发展及侵袭和转移研究中的关键问题,以及环氧化酶2 （COX-2）和锌指转录因子Snail蛋白在上皮性肿瘤的表达情况、调控环节。初步探讨COX信号通道［COX-前列腺素E（PGEs）依赖途径］在上皮性卵巢癌的侵袭转移中的意义。在卵巢癌发生发展过程中的COX-2高表达导致前列腺素E水平增高,上调锌指转录因子Snail蛋白表达,后者与E-钙粘蛋白（E-cadherin）启动子上的E-Box作用元件结合而抑制E-cadherin的转录。作为细胞黏附分子的E-cadherin表达下调,促进肿瘤细胞侵袭转移潜力。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制物与卵巢癌的侵袭和转移

卵巢癌是最常见的女性恶性肿瘤之一，5年存活率低，与其侵袭和转移的特性有关。细胞外基质(extracellular matrix，ECM)在肿瘤的侵袭和转移中起了关键性的作用，ECM的降解主要依靠蛋白水解酶，基质金属蛋白酶是较为重要的一类。大量实验表明基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)介导的细胞外基质的降解对肿瘤的侵袭起着极为重要的作用，而基质金属蛋白酶的组织抑制剂(tissue inhibitor of matrx metalloproteinases,TIMPs)可抑制MMPs的活性，MMPs和TIMPs的平衡失衡可导致肿瘤的浸润转移。本文就近年来有关MMPs的TIMPs在卵巢癌浸润和转移中的作用作一综述如下。     

Nanog介导FSH诱导卵巢癌转移和侵袭的研究

目的:探讨Nanog在FSH诱导的卵巢癌转移和侵袭中的作用。方法:采用Western blot法检测永生化卵巢上皮细胞Moody,良性卵巢肿瘤细胞Mcv152和卵巢癌细胞Hey、Ho8910、SKOV3中Nanog表达。使用FSH以浓度梯度和时间梯度的方式处理SKOV3细胞,Western blot法检测Nanog蛋白表达。使用FSH处理si-Con或si-Nanog转染卵巢癌SKOV3细胞,实验分组:0.1%DMSO+转染空白干扰RNA组(Con+si-Con)、FSH+转染空白干扰RNA组(FSH+si-Con)、0.1%DMSO+转染Nanog干扰RNA组(Con+siNanog)和FSH+转染Nanog干扰RNA组(FSH+si-Nanog)。使用划痕实验和Transwell侵袭实验检测4组细胞的转移和侵袭能力,Western blot法分析4组细胞中Nanog蛋白表达。应用免疫组化法检测卵巢癌组织中Nanog蛋白表达情况。结果:卵巢癌细胞系Hey、Ho8910、SKOV3中Nanog表达明显高于永生化和良性卵巢上皮细胞系(P0.05)。FSH上调Nanog表达以浓度和时间依赖的方式。对照组(Con+si-Con,Con+si-Nanog)的迁移和侵袭能力明显低于实验组(FSH+si-Con,FSH+si-Nanog)(P0.05)。卵巢癌组织中Nanog表达水平明显高于正常卵巢组织(P0.05),Nanog蛋白表达与卵巢癌转移相关。结论:Nanog是FSH重要的下游靶基因,介导FSH诱导的卵巢癌转移作用。     

羊水中明胶酶、白细胞介素8与胎膜早破关系的研究

目的　探讨明胶酶、白细胞介素 8(interleukin 8,IL 8)与胎膜早破 (PrematureRuptureofMembrane,PROM)发生的关系。　方法　PROM者 30例为观察组 ,正常孕妇 30例为对照组。于剖宫产时抽取羊水 3ml备存。羊水消化生物素标记明胶 ,用ELISA法测定剩余明胶的含量 ,换算出酶的活性。参照文献进行明胶电泳 ,酶经电泳分离后 ,将该处的明胶消化 ,染色后形成不着色的透明带 ;IL 8含量的测定 :用双抗体夹心ELISA法。　结果　 ( 1)在未临产、潜伏期和活跃期 ,观察组和对照组羊水总明胶酶的活性分别为 :( 85± 10 ) μg/L·12h、( 91± 7) μg/L·12h、( 10 4± 2 3) μg/L·12h和( 4 9± 15 ) μg/L·12h、( 5 8± 15 ) μg/L·12h、( 10 2± 2 9) μg/L·12h ,两组中活跃期显著高于未临产 (P <0 .0 1)。 ( 2 )在未临产期和潜伏期 ,观察组羊水中总明胶酶的活性均显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。 ( 3)羊水中较明确的明胶酶带有 4条 ,分子量分别为 92、83、72和 6 6kd。观察组在未临产时羊水中各明胶酶消化的明胶带较对照组宽。 ( 4 )在未临产、潜伏期和活跃期 ,观察组和对照组羊水IL 8的含量分别为 :( 0 .195± 0 .110 ) μg/L、( 0 .2 76± 0 .12 8) μg/L、( 0 .333± 0 .134) μg/L和 ( 0 .10 2± 0 .0 5 6 ) μg/     

基质金属蛋白酶在卵巢癌侵袭转移中的研究进展

侵袭和转移是卵巢癌患者死亡的直接原因,基质金属蛋白酶（MMPs）通过降解细胞外基质（ECM）在卵巢癌侵袭转移中发挥重要作用,深入研究MMPs降解ECM的机制,选择针对MMPs的抑制物来治疗卵巢癌转移是一个很有希望的目标。     

卵巢癌血管内皮生长因子过度表达及肿瘤浸润转移机制的探讨

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)过度表达在卵巢癌浸润转移中的作用及可能机制。方法　脂质体介导VEGFcDNA转染卵巢癌细胞系CAOV3、COC1 ,并经逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术、蛋白印迹 (Westernblot)法检测转染VEGFcDNA前后卵巢癌细胞中VEGF、明胶酶A(MMP 2 )mRNA及其蛋白表达水平 ;Boyden小室体外侵袭实验比较VEGFcDNA转染前后卵巢癌细胞穿透人工重组基底膜能力的变化。结果　VEGFcDNA转染后卵巢癌细胞系CAOV3、COC1细胞中VEGFmRNA表达水平分别为 0 98± 0 0 5和 0 87± 0 0 6 ,MMP 2mRNA表达水平分别为 0 95± 0 0 3和 0 82±0 0 2 ,均较转染前 (分别为 0 84± 0 0 3和 0 62± 0 0 4 ,0 71± 0 0 2和 0 61± 0 0 1 )明显增加 (P <0 0 5) ;VEGF、MMP 2蛋白表达水平也呈相同变化趋势 (P <0 0 5) ;VEGFcDNA转染后的CAOV3、COC1细胞的穿透人工重组基底膜的能力分别为 (42 5± 4 1 ) % ,(2 6 8± 2 4) % ,较对照组 [(2 4 7± 1 9) % ,(8 6±1 1 ) % ]明显增加 (P <0 0 5)。结论　VEGF促进卵巢癌浸润、转移的机制可能与诱导MMP 2合成及分泌有关。     

卵巢癌与腹膜后淋巴转移

前言恶性肿瘤的发展方式有瘤体增大,周围浸润及转移。其转移途径可沿体腔、上皮管腔、淋巴管及血管。根据卵巢解剖学位置,卵巢癌以瘤体增大、盆腔脏器浸润及沿腹膜腔种植转移为主,故应重视对这些部位病灶的诊断和治疗。     

卵巢癌细胞与成纤维细胞相互作用对明胶酶释放与活化的影响

明胶酶-A(MMP-2)和明胶酶-B(MMP-9)具有降解细胞外基质的主要成分——Ⅳ型胶原和明胶的功能，参与恶性肿瘤的侵袭与转移。有研究发现，明胶酶免疫组织化学(免疫组化)着色重的区域集中在癌巢的边缘，提示卵巢癌细胞与成纤维细胞的相互作用，对明胶酶的释放和活化产生影响。我们观察了卵巢癌细胞与成纤维细胞在非接触性和     

整合素β1与卵巢癌侵袭性的相关研究

我们检测了整合素β1在人卵巢上皮性肿瘤组织及细胞中的表达,探讨了其在该细胞黏附和侵袭过程中的作用及临床意义。1　材料与方法1.1　材料　临床标本:取自2003年9月至2004年5月山东省立医院妇产科手术治疗,术后病理切片证实为卵巢上皮性肿瘤的患者90例为研究对象,分为3组:(1)良性肿瘤21例,16~75岁,平均(43±16)岁,其中浆液性囊腺瘤12例,黏液性囊腺瘤9例;(2)交界性肿瘤13例,30~61岁,平均(47±8)岁。其中交界性浆液性囊腺瘤6例,交界性黏液性囊腺瘤7例;(3)恶性上皮性肿瘤56例,21~74岁,平均(50±10)岁,其中卵巢浆液性囊腺癌20例,黏液性囊腺…     

卵巢癌细胞侵袭转移相关转录因子表达分析

目的:分析并比较卵巢癌细胞中与肿瘤转移、侵袭相关的转录因子。方法:采用细胞划痕及小室跨膜实验比较卵巢癌细胞HO-8910及其高转移株HO-8910PM的转移侵袭能力差异;采用高通量转录因子活性检测芯片(DNA/蛋白结合芯片)分析并比较两种细胞中转录因子的活化情况,明确与肿瘤侵袭、转移相关表达的转录因子;用转录因子酶联免疫活性分析方法验证芯片检测结果。结果:细胞划痕实验及侵袭实验表明HO-8910PM比HO-8910细胞转移侵袭能力强,在345个转录因子中共筛选出与肿瘤侵袭、转移相关的31个表达差异转录因子。HO-8910PM细胞与HO-8910细胞相比,表达上调的有13种,下调的有18种。v-Maf仅表达于HO-8910PM,HLF仅表达于HO-8910。结论:v-Maf、HLF等31种转录因子可能参与了卵巢癌侵袭转移的相关机制。     

Rab25 siRNA抑制人卵巢癌细胞粘附侵袭的实验研究

目的通过RNA干涉抑制Rab25在人卵第上皮性癌的过表达，观察Rab25基因沉默对卵巢癌A2780细胞的生物学效应，探讨Rab25基因沉默对卵巢癌侵袭及转移能力的影响。方法根据基因库上的Rab25mRNA序列，构建针对Rab25的siRNA重组质粒，稳定转染A2780细胞，通过RT-PCR检测Rab25的表达，利用粘附实验和transwell小室实验检测其对细胞的粘附力及侵袭能力的影响。结果成功构建Rab25的siRNA重组质粒，稳定转染靶细胞后可显著降低Rab25的表达，并且与对照相比，Rab25siRNA可显著影响卵巢癌细胞的侵袭粘附能力（P〈0．01）。结论成功构建Rab25siRNA显著抑制肿瘤细胞的侵袭粘附能力，对Rab25的研究有望为卵巢癌的基因治疗开辟新途径。     

缺氧微环境下HIF-1α对卵巢癌A2780细胞侵袭转移的影响及分子机制

目的:探讨缺氧微环境下HIF-1α在卵巢癌细胞系A2780侵袭转移中的作用。方法:常氧及缺氧微环境培养卵巢癌A2780细胞;RT-PCR及Western blot法检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA及蛋白的表达;siRNA干扰HIF-1α表达,检测干扰效率及MMP13表达的变化;Transwell小室侵袭实验检测siRNA干扰前后卵巢癌细胞侵袭转移能力。结果:缺氧诱导卵巢癌A2780细胞HIF-1α及MMP13表达上调,细胞侵袭数明显增多;siRNA能有效抑制HIF-1α表达及缺氧引起的MMP13增多,降低细胞侵袭能力。结论:HIF-1α通过调控MMP13表达增强缺氧环境下卵巢癌细胞的侵袭能力。     

卵巢癌脾转移2例

例 1.患者 5 7岁 ,住院号 :5 0 783。因左季肋部疼痛 2个月为主诉入院。病人 2年前因双侧卵巢癌在省肿瘤医院行双附件、子宫及直肠切除术 ,左下腹人工肛门。术后常规化疗 11次。Ｂ超显示 :脾内见 3 6ｃｍ× 2 8ｃｍ低回声区 ,边界不清。ＣＴ显示 :脾前部小低密度影直径 2 0ｃｍ ,诊为脾占位病变。行脾切除术。脾下极见一灰黄色肿物 3ｃｍ× 3ｃｍ× 2ｃｍ大小 ,病理诊断 (病理号 :11378) :脾内转移癌 ,符合卵巢浆液性乳头状癌。术后随访 1年 ,病情稳定。例 2 .患者 5 9岁 ,住院号 :4 5 6 39。以腰背部疼痛半年为主诉入院。1年前因卵巢癌在…     

PRMT5对卵巢癌细胞增殖及侵袭转移能力的影响

目的:研究精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)对卵巢癌A2780及SKOV3细胞增殖及侵袭转移能力的影响,探讨其可能机制。方法:设计并体外合成靶向PRMT5的siRNA序列(si P)及阴性对照序列(si C),分别转染卵巢癌细胞A2780、SKOV3。Brd U掺入实验检测细胞增殖能力;Transwell小室技术检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测PRMT5降调后E-cadherin蛋白表达变化。结果:转染si P后,卵巢癌细胞中PRMT5表达明显降低。A2780细胞中,si P组的Brd U阳性率明显低于si C组[(11.7±1.5)%vs(33.3±1.5)%,P0.001];SKOV3细胞中,si P组的Brd U阳性率明显低于si C组[(18.0±2.0)%vs(35.3±1.5)%,P0.001]。A2780和SKOV3细胞中,si P组的迁移和侵袭细胞数均显著少于si C组和N组,差异均有统计学意义(P0.001)。Western blot法显示,转染后72h,si P组中E-cadherin蛋白表达明显上调。结论:PRMT5参与了卵巢癌细胞的生长增殖和迁移侵袭的过程,干扰其表达能显著减慢细胞的增殖,减弱其迁移和侵袭能力。PRMT5可能通过调控E-cadherin表达参与卵巢癌细胞的迁移和侵袭过程。     

microRNA-106a促进上皮性卵巢癌细胞系迁移和侵袭的研究

目的:探讨microRNA-106a(miR-106a)在上皮性卵巢癌(EOC)细胞迁移和侵袭中的作用,并验证TGFBR2是否系miR-106a的直接靶点。方法:选取具有不同转移能力的EOC细胞系(SKOV-3,A2780),用Real-time RT-PCR检测miR-106a在其中的表达。通过transwell实验,体外分析miR-106a是否具有促进EOC细胞系迁移和侵袭的作用。通过稳定性表达转化生长因子-β受体2(TGFBR2)或者沉默TGFBR2,探讨了miR-106a可能的作用靶点。结果:miR-106a在转移性EOC细胞(SKOV-3)中高表达(P0.05),可在体外促进EOC细胞的迁移和侵袭(P0.05)。这些表型上的改变并非由于miR-106a可同时促进癌症细胞的增殖所引起。miR-106a促进EOC细胞迁移和侵袭的作用是通过抑制TGFBR2来实现的。结论:miR-106a可通过直接抑制抗转移分子而促进EOC细胞的迁移和侵袭。     

miRNA-93在卵巢癌OVCAR3细胞的侵袭和迁移中的作用研究

目的:研究miR-93对卵巢癌细胞系OVCAR3侵袭及迁移能力的影响。方法:用miR-93的成熟模拟物过表达miR-93,用化学合成的特异性抑制物下调miR-93的表达。通过miRNA特异的定量PCR验证miR-93的过表达和抑制效率,采用MTT、软琼脂集落形成和Transwell侵袭实验分析miR-93表达对OVCAR3细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。结果:miR-93过表达后,OVCAR3细胞的侵袭和迁移能力显著增强(分别达3.82倍和2.56倍)。降低内源性miR-93的表达后,OVCAR3细胞的侵袭和迁移能力分别下降了66.57%和57.26%。结论:miR-93能明显促进卵巢癌OVCAR3细胞的侵袭和迁移。     

卵巢癌细胞与腹膜间皮细胞相互作用对卵巢癌细胞运动及侵袭的影响

目的:探讨卵巢癌细胞与腹膜间皮细胞(HPMC)相互作用对卵巢癌细胞运动及侵袭的影响。方法:检测卵巢癌细胞SKOV3条件培养液(CM)及转化生长因子β1(TGF-β1)中和抗体培育HPMC后,HPMC-CM对SKOV3趋化性、趋触性及侵袭性的影响。Checkerboard实验检测HPMC-CM诱导SKOV3运动的方向性。用ELISA检测不同HPMC-CM中纤维粘连蛋白(Fn)及透明质酸(HA)的水平。结果:未刺激组的HPMC-CM1诱导SKOV3趋化、趋触及侵袭(P<0.01)。抗Fn抗体或透明质酸酶(HAase)均可部分抑制HPMC-CM1的作用(P<0.05),二者合用抑制作用增强(P<0.01)。Checkerboard实验证实HPMC-CM1诱导的细胞运动是方向性的。HPMC-CM2Fn及HA蛋白水平高于HPMC-CM1(P<0.01),HPMC-CM3Fn及HA水平较HPMC-CM2降低(P<0.05)。HPMC-CM2诱导趋化、趋触及侵袭的细胞数较HPMC-CM1增多(P<0.01),HPMC-CM3诱导运动及侵袭的细胞数均低于HPMC-CM2(P<0.05)。结论:HPMC合成Fn及HA诱导卵巢癌细胞运动及侵袭,卵巢癌细胞分泌TGF-β1可能通过诱导HPMC合成Fn及HA而促进自身的运动及侵袭。二者相互作用促进卵巢癌的腹膜转移。