白介素——8基因的克隆及DNA序列分析

本 文采用ＬＰＳ刺激健康人外周血的单核细胞，提取其总的ＲＮＡ，采用逆转录ＰＣＲ扩增目的基因，并且将获得的目的基因连接到克隆载体中，通过ＤＮＡ序列分析，证实获得的目的基因是所需的ＩＬ－８的基因。     

2型、5型腺病毒DNA与12型腺病毒DNA、大肠杆菌DNA序列的对比研究

目的通过对2型、5型人腺病毒DNA（Adv2、5 DNA）与Adv12 DNA及大肠杆菌DNA（EC DNA）序列进行对比研究,确定Adv2、5 DNA中能够拈抗细菌DNA的可能的活性片段——抑制性CpG寡核苷酸（CpG-N ODN）。方法从NCBI核酸数据库中获取Adv2、5、12 DNA和EC DNA序列,采用DNATools、BioEdit等软件对Adv2、5、12 DNA和EC DNA进行序列分析和比较,确定Adv2、5 DNA特征性的CpG基序,查找出Adv2、5 DNA中以上述CpG基序为核心的12碱基寡核苷酸（12-ODN）。结果确定了19种Adv2、5 DNA特征性的CpG基序,Adv2、5 DNA中以这19种CpG基序为核心的12-ODN共504条。结论504条12-ODN可能是Adv2、5 DNA的CpG-N ODN。     

鼠疫耶尔森菌DNA标识序列的鉴定及其应用研究

目的确定鼠疫耶尔森菌DNA标识序列,以用于鼠疫耶尔森菌的快速检测和鉴定。方法通过芯片比较基因组杂交和PCR验证,鉴定鼠疫耶尔森菌DNA标识序列,针对标识序列设计特定的PCR引物。结果鼠疫耶尔森菌基因组中存在3个区段,共28条基因,均是鼠疫耶尔森菌DNA标识序列。针对其中3条基因设计PCR引物,能特异性扩增出鼠疫耶尔森菌,与来自其他非鼠疫耶尔森菌的DNA无交叉反应。结论鼠疫耶尔森菌存在DNA标识序列,并能用于鼠疫耶尔森菌的快速检测与鉴定。     

小鼠AMCase基因突变体的cDNA克隆及序列分析

目的 克隆小鼠酸性哺乳动物几丁质酶（AMCase）,并进行序列分析。方法 从BALB/c小鼠胃组织中提取总RNA,逆转录成cDNA,运用PCR技术体外扩增获得AMCase基因,构建pMD18T／AMCase重组载体,测序后应用DNAMAN4.0软件与标准序列进行比较,并通过SignalP 3.0和TMHMM Serverv．2.0等服务器对等电点、氨基酸组成、信号肽和跨膜结构等特征进行分析。结果 所克隆基因共编码473个氨基酸,分子量为51．93kD。等电点为4．73。与AMCase同源性达99．57％,同属18家族的几丁质酶成员,由信号肽（氨基酸1～21）、催化区（氨基酸22～391）、铰链区（氨基酸392～425）和结合区（氨基酸426～473）组成。编码的蛋白质在催化区和铰链区分别发生了突变。292位氨基酸由Ala（丙氨酸）突变为Pro（脯氨酸）,404位氨基酸由Thr（苏氨酸）突变为Ser（丝氨酸）。结论 所克隆的基因为AMCase的一个突变体。其相关生物学信息的明确,为今后运用分子生物学技术进一步深入研究其作用奠定了基础。     

磁共振3D-SPACE、3D-TrueFISP、2D-FSE-PD序列膝关节软骨成像的比较研究

目的：比较三维可变反转角快速自旋回波序列(3D-SPACE)、三维真稳态进动快速成像序列(3D-Ture FISP)以及二维快速自旋回波质子像序列(2D-FSE-PD)膝关节软骨的成像质量。方法40例健康志愿者和20例患者在1.5T MR 上行3D-SPACE、3D-True FISP 和2D-FSE-PD 序列成像。比较各序列软骨信噪比(SNR)、对比信噪比(CNR)、损伤显示能力。结果3种序列中,3D-SPACE 序列的软骨信噪比、滑液与软骨的对比信噪比最高。3D-SPACE 比3D-True FISP 能更好地显示膝关节软骨的Ⅰ、Ⅱ级损伤,在软骨的Ⅲ、Ⅳ级损伤中,3D-SPACE 与3D-True FISP 无明显差异,对于各级软骨损伤,3D 序列均好于2D 序列。结论相比3D-True FISP、2D-FSE-PD 序列,3D-SPACE 序列能更好地显示膝关节软骨结构和损伤。     

登革2型病毒NS3基因的扩增及序列测定

采用热酚法从登革２ 型病毒４３ 株（Ｄ２ ４３） 感染的Ｃ６／３６ 细胞中提取了病毒ＲＮＡ,以病毒ＲＮＡ 为模板,进行Ｄ２ ４３ 株ＮＳ３ 基因ｃＤＮＡ 片段的反转录 ＰＣＲ 扩增,片段长度为１１７６ ｂｐ。将扩增的ｃＤＮＡ 片段克隆到Ｔ 载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ｋｓⅡ（ ＋ ） 中。通过双脱氧法测定了ｃＤＮＡ片段序列,与国际标准株ＮＧＣ株序列一致。     

Wistar大鼠c-ski基因部分序列的克隆、测序及实时荧光定量PCR的建立

目的 测定Wistar大鼠c-ski基因部分序列,并应用于检测大鼠c-ski基因表达的实时荧光定量PCR的建立.方法 提取培养的Wistar大鼠皮肤成纤维细胞总RNA,通过RT-PCR扩增,将扩增产物克隆到PMD-18T载体上并测序.根据获得的c-ski基因部分序列设计实时荧光定量PCR引物,建立SYBR green定量PCR检测方法,并检测培养的大鼠皮肤成纤维细胞c-ski mRNA表达水平.结果 获得的Wistar大鼠c-ski基因cDNA序列长561bp,为未曾报道的新序列,其与人、小鼠具有较高的同源性,Gen-Bank收录(收入号DQ409171).建立的SYBR green定量PCR检测标准品在103～109拷贝范围内的相关系数为0.991 49.体外培养的Wistar大鼠皮肤成纤维细胞样晶中c-ski mRNA水平为(1.024±0.18)×106拷贝/μl.结论 新获得了Wistar大鼠c-ski基因部分序列,该序列可用于实时荧光定量PCR的建立.     

基于深度学习重建算法HASTE序列肝脏MR图像质量：与BLADE序列的对照研究

目的:评估基于深度学习重建的半傅立叶采集单次激发快速自旋回波(HASTE_DL)序列在肝脏检查中的应用价值。方法:使用3.0T MR对36例患者(男28例,女8例)行上腹部MRI扫描,扫描序列包括单次屏气HASTE_DL和多次屏气刀锋伪影校正(BLADE)序列。由两位医师分别对肝脏成像质量(锐利度和伪影)进行五分制主观评分。分别在肝门水平肝脏的肝右叶和肝左叶、病灶显示最大层面及其相应层面同一相位方向的右侧背景区放置感兴趣区,测量两组图像上肝脏的信号强度(SI)及其标准差(SD,作为背景噪声),计算图像的信噪比(SNR)和对比噪声比(CNR)。测量病灶最大径(D_max),观察和记录图像错层率及病灶检出率。对两组图像上肝右叶和肝左叶内肝实质的SNR、CNR,病灶的SNR、CNR、D值,以及图像错层率、图像质量评分结果分别使用Wilcoxon检验或卡方检验进行组间比较。结果:两位医师对两组图像(HASTE_DL和BLADE序列)的主观评分和客观测量数据的一致性均为良好(Kappa和ICC值均大于0.75)。两组...     

60Coγ射线诱导EJ细胞DNA损伤及γH2AX 表达的研究

目的 探讨不同剂量⁶⁰Coγ射线对EJ细胞DNA损伤的情况,不同剂量⁶⁰Coγ 射线照射EJ细胞后诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成,以及与γH2AX表达量的关系。方法 单细胞凝胶电泳检测DNA链断裂损伤情况。免疫荧光法检测不同剂量γ 射线照射后立即、以及2 Gy γ 射线照射后不同时间的EJ细胞中γH2AX焦点的数量。流式细胞分析法检测不同剂量γ 射线照射后EJ细胞中γH2AX 蛋白表达量的变化。结果 单细胞凝胶电泳结果显示,γ射线照射后DNA损伤情况明显加重,随照射剂量的增加,细胞尾矩不断加大,0 Gy组尾矩为0.24,4 Gy照射组尾矩为5.26;免疫荧光结果显示,随着照射剂量的增加,γH2AX焦点数目及大小均明显增加,照射的剂量范围从0.1~4 Gy均可检测,且照射剂量和焦点形成数目之间存在剂量-效应关系,0.1 Gy照射组每个细胞中的焦点数平均达12.37个,4 Gy照射组每个细胞中的焦点数平均达46个;2 Gy γ 射线照射后24 h仍可检测到γH2AX焦点,随时间延长焦点数目减少、强度减弱,具有时间依赖性。流式细胞检测结果表明,γ 射线照射后γH2AX 蛋白表达量明显增加,呈现明显量效关系,0.1和4 Gy照射组γH2AX阳性细胞表达率分别为7.4%和29.2%。结论 免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点数目比其他实验方法更能敏感、直观的反映DNA损伤及修复情况,有望成为检测辐射损伤的理想生物指标。     

4种T_1成像序列MOLLI、ShMOLLI、SASHA和SAPPHIRE准确性、精确性及可重复性的头对头对比研究

正摘要目的就4种常用心肌T1mapping序列(MOLLI、Sh MOLLI、SASHA、SAPPHIRE)的准确性、精确性及可重复性进行比较。材料与方法本研究遵从HIPAA,并通过伦理委员会批准。受试者均签署知情同意书。首先在体外,利用人体体     

基于深度学习的三翻转角2D SPGR MRI序列定量估算单侧肾动脉狭窄动物模型肾脏R1参数图的初步研究

目的 探讨基于深度学习实现对三翻转角2D SPGR MRI序列定量估算单侧肾动脉狭窄动物模型肾脏R1参数图的可行性。方法 共纳入12只平均体重3.2 kg的健康新西兰大白兔，对每只兔子施行左肾动脉部分结扎手术以建立单侧肾动脉狭窄(RAS)动物模型。RAS术前和术后每隔10 min采集一次2D单层三翻转角SPGR MRI数据，其中术前2次和术后9次，以获得单侧RAS造成肾脏水含量水平改变前后的肾脏R1参数图。最终获得127个2D图像对，每对图像包括一个由相同层面3个翻转角(15°,24°和33°)的SPGR序列图像组成三通道2D图像和一个传统可变翻转角R1估算方法得到相应层面的R1参数图图像。应用基于深度学习的编码器-解码器结构训练R1参数图生成模型。将RAS术后采集的92例数据分为训练集(74对)和调优集(18对),将RAS术前采集的34例数据及1例RAS术后的数据作为测试集(35对)。以测试集的峰值信噪比和结构相似性结果为R1参数图生成模型的评价指标。结果 在测试集中，R1参数图生成模型的峰值信噪比(dB)和结构相似性(%)分别为22.08±2.33和79.49±6.49。结论 基于...     

双相位扰相梯度回波序列T_1加权成像的原理、临床应用及研究焦点

双相位扰相梯度回波序列因其本身的特性,已广泛应用于临床疾病的诊断,尤其是在胸腺、肝脏、胰腺局限性脂肪增多症,肾上腺肿瘤、畸胎瘤及良恶性脊柱椎体骨折等方面,给疾病的定性诊断提供了可靠的依据.运用该序列对脂肪含量及铁沉积的定量研究也成为当前国际研究的新焦点.综述双相位扰相梯度回波序列T1加权成像的临床应用及研究焦点.     

雌激素对紫外线照射后人角质形成细胞DNA损伤及分泌细胞因子IL-10、IL-6和TNF-α的影响

目的探讨雌激素（17β-estradiol,17β-E2）对B段紫外线（UVB）辐射引起皮肤损伤的保护作用及其保护机制。方法体外培养人永生化角质形成细胞（HaCaT）,并将其随机分为4组：对照组、UVB组、E2组和E2＋UVB组,分别给予不同的处理,经UVB照射后6 h,收集各组细胞上清液,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测UVB照射后6 h各组细胞上清液中白细胞介素10（IL-10）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）分泌量的变化;UVB照射后12 h,收集各组细胞,采用单细胞凝胶电泳技术检测各组细胞的DNA损伤程度。结果与对照组相比较,UVB组IL-10、IL-6和TNF-α的含量显著升高（P〈0.05）;经E2预处理后,E2＋UVB组细胞上清液中IL-10、IL-6和TNF-α的含量均显著降低（P〈0.05）。单细胞凝胶电泳检测结果显示,UVB组和E2＋UVB组均出现彗星样拖尾,应用CASP和SPSS软件分析统计后得出,UVB组细胞尾部DNA百分含量、尾长和尾矩与对照组相比具有统计学意义;经E2预处理后,UVB对细胞损伤程度明显降低,具有统计学意义（P〈0.05）。结论雌激素可降低UVB引起的IL-10、IL-6和TNF-α的产生,并能对抗UVB照射对细胞DNA的损伤,从而减轻紫外线辐射引起的皮肤损伤。     

基于复合灵敏度编码直方图参数及表观扩散系数对乳腺良、恶性病变的鉴别诊断

目的 探讨基于复合灵敏度编码(MUSE)序列的全容积表观扩散系数(ADC)直方图参数及ADC值鉴别诊断乳腺良、恶性病变的价值。资料与方法 回顾性分析2020年9月—2022年1月宁夏医科大学总医院经病理证实的112例乳腺病变患者，其中良性30例，恶性82例。术前均行MRI常规序列、动态对比增强MRI及MUSE高分辨率扩散成像(MUSE-DWI)。参照增强图像，对MUSE-DWI序列进行全瘤体勾画，获得病灶的15项ADC直方图参数；测量MUSE-DWI的ADC值(ADC＿MUSE)。评估数据测量的可重复性，比较乳腺良、恶性病变ADC直方图参数及ADC值的差异。采用受试者工作特征曲线评估参数的诊断效能。结果 除ADC偏度、ADC峰度及ADC熵外，其他ADC直方图参数在乳腺良、恶性病变组间差异均有统计学意义(P<0.05)。恶性组ADC均值、ADC 1%、5%、10%、25%、50%、75%、90%、95%、99%显著低于良性组，ADC标准差、ADC变异系数显著高于良性组。ADC 5%的鉴别诊断价值最高，曲线下面积为0.919，以0.94×10^-3 mm^...     

华中科技大学同济医学院附属同济医院放射科胡道予教授团队最新影像研究《基于多翻转脉冲空间标记技术的非对比剂增强磁共振血管成像序列显示移植肾血管解剖及血管并发症研究》登上Radiology封面

近日,国际影像界顶级杂志《放射学》（Radiology）刊发了华中科技大学同济医学院附属同济医院放射科胡道予教授团队的重要研究成果,并作为6月份的封面文章。论文题为《基于多翻转脉冲空间标记技术的非对比剂增强磁共振血管成像序列在显示移植肾血管解剖及血管并发症研究》（Depiction of Transplant Renal Vascular Anatomy and Complications： Unenhanced MR Angiography Using Spatial Labeling with Multiple Inversion Pulses）.     

基于去卷积法的动态对比增强乳腺肿瘤MR成像：肿瘤血流量与人表皮生长因子受体2状态及临床病理表现的相关性——初步结果

目的 评估多种多普勒超声血供测定方法联合灰度标准对鉴别乳腺肿块良恶性的诊断性能，用组织学作参照标准。材料与方法遵循机构审查委员会和HIPPA标准。预定行乳腺活检的78例女性（年龄26～70岁，平均49岁）被纳入研究。38例病人的扫描数据被分析并曾发表．另外40例扫描用作测试集，评估先前确定的分类指标。     

基于去卷积法的动态对比增强乳腺肿瘤MR成像：肿瘤血流量与人表皮生长因子受体2状态及临床病理表现的相关性——初步结果

目的 前瞻性地确定乳腺癌是否具有与病理及分子预后指标相关的特征性肿瘤血流量值（TRY）。材料与方法 机构伦理委员会批准了该研究。获得知情同意书后,57例经组织学证实的乳腺癌病人（年龄31～80岁）接受常规MR乳腺成像检查,包括整个乳腺的动态对比增强序列。在病灶最大强化层面行第2次对比剂团注动态单层涡流场自旋（turbo field-echo）成像。