不同浸提介质对一次性使用血液灌流器体外细胞毒性评价的影响

目的:探讨不同浸提介质对一次性使用血液灌流器细胞毒性的影响.方法:采用能快速准确地评价细胞存活率和细胞毒性的定量分析方法-M T T法,分别检测不同血液灌流器在含血清培养基、非含血清培养基和0.9%氯化钠注射液三种浸提介质的浸提液对小鼠成纤维细胞相对存活率的影响.结果:检测结果表明,不同的浸提介质,细胞毒性结果差异明显.氯化钠注射液浸提的样品存活率最高,非含血清培养基次之,含血清培养基浸提的样品存活率最低.结论:在检测中,要根据产品的使用方法和用途选择适宜的浸提介质,尽量模拟临床使用进行选择.     

不同浸提介质对一次性使用血液灌流器体外细胞毒性评价的影响

目的：探讨不同浸提介质（去离子水、生理盐水、其他介质）对一次性使用血液灌流器体外细胞毒性评价的影响。方法：在研究时间段内（2023年2月至5月）,用MTT法测定了不同血液灌流器的细胞毒性。将血液灌流器浸泡在三种介质中,按国家药典委员会要求提取。用提取液替换培养基,与L929细胞共培养4h。加入MTT溶液,测定紫色产物的吸光度值,计算相对存活率,评估细胞毒性。结果：不同浸提介质对血液灌流器细胞毒性的影响不同。其中,0.9%氯化钠浸提时的相对存活率最高,培养基次之,含血清培养基浸提时的相对存活率最低。这可能是因为0.9%氯化钠浸提时,血液灌流器释放出的物质较少,对细胞的损伤较小;而含血清培养基浸提时,血液灌流器释放出的物质较多,对细胞的损伤较大。结论：不同浸提介质对一次性使用血液灌流器体外细胞毒性评价有显著影响,应根据实际应用场景选择合适的浸提介质进行评价。     

探讨医用胶细胞毒性试验方法的选择

目的:分析不同细胞毒性试验方法对医用胶细胞毒性评价的影响。方法:用浸提液法、直接接触法、间接接触法对α-氰基丙烯酸酯类粘合剂和多糖纤维素医用胶液进行细胞毒性试验,比较不同试验方法对其细胞毒性评价的影响。结果:同种样品采用不同试验方法得出的细胞毒性结果不同。结论:细胞毒性试验方法的选择应根据样品的物理性质和用途,尽量模拟临床使用情况进行选择。     

浸提方法对药用卤化丁基橡胶塞体外细胞毒性评价的影响

目的:研究不同浸提方法对药用卤化丁基橡胶塞体外细胞毒性评价的影响。方法:采用不同的浸提方法制备了浸提液,以MTT法评价药用卤化丁基橡胶塞浸提液对小鼠成纤维细胞L929活性与增殖的影响。结果:通过不同的浸提方法制备的浸提液,11批中的9批样品体外细胞毒性实验出现了有统计学意义的差异。结论:破坏原有样品的正常形态即改变表面积与体积比对于评价卤化丁基橡胶塞的体外细胞毒性实验(MTT)是有影响的。     

聚氯乙烯材质医疗器械细胞毒性检测方法的探究

目的：对聚氯乙烯（Polyvinyl Chloride,PVC）材质医疗器械的浸提液制备方法进行探索,为其细胞毒性检测提供依据。方法：按照GB/T16886.12中规定的浸提比例（0.2g/mL）,改变浸提温度（36°C、36.5°C、37°C、38°C）、时间（2h、4h、8h、12h、24h、48h）、湿度（100%、90%、80%、70%）和摇床速率（5000r/min、8000r/min、10000r/min）,通过体外细胞毒性检测方法评价PVC材质医疗器械不同的浸提液对细胞毒性的影响。结果：细胞毒性与浸提样品的时间、温度及摇床转速呈正相关性,其中38°C、48h及摇床转速8000r/min细胞毒性最高,均<70%,按照GB/T16886.5-2017判定均具有细胞毒性;结论：PVC材质医疗器械的体外细胞毒性对样品浸提液制备过程中浸提时间和摇床速率要求严格,在制备浸提液时应该根据产品的临床使用情况合理选择浸提时间和摇床的速率。     

医用超声耦合剂体外细胞毒性检测的探讨

应用MTT比色法和琼脂覆盖法检测无菌耦合剂的细胞毒性.MTT比色法检测时,同一浸提液在细胞接种密度高时,毒性级别低,反之亦然.同一材料琼脂覆盖法检测的细胞毒性结果与MTT法的结果也不一致.由于MTT比色法具有定量评价的优点,更适合耦合剂的细胞毒性检测,但是必须明确试验条件以及浸提液制备方法.建议进一步完善医用超声耦合剂体外细胞毒性检测方法.     

使用无水乙醇为浸提介质进行血液灌流器的遗传毒性试验研究

目的：通过试验探索无水乙醇作为血液灌流器遗传毒性试验浸提介质的可行性。方法：将无水乙醇作为浸提介质使用灌注的方式充满灌流器,使用浸提液分别进行细菌回复突变试验、体外哺乳动物细胞基因突变试验和体外哺乳动物细胞染色体畸变试验。结果：细菌回复突变试验中与阴性对照组相比5种菌株自发回复突变菌落数均无显著性差异;体外哺乳动物细胞基因突变试验中所有组的总突变频率与阴性对照组相比在统计学上无显著性差异;体外哺乳动物细胞染色体畸变试验中染色体畸变率与阴性对照组相比无显著性增加。结论：无水乙醇作为浸提介质时对试验体系中的细菌、细胞生长无影响,且在本试验条件下无致突变性,选择无水乙醇作为浸提介质进行试验是可行的。     

一次性使用无菌注射器及注射器用活塞体外细胞毒性研究

目的：探讨目前市场上一次性使用注射器及注射器用活塞的细胞毒性是否符合GB15810-2001《一次性使用无菌注射器》、YY/T0243-2016《一次性使用注射器用活塞》的要求。方法：使用含10%胎牛血清的DMEM培养基(DMEM)作为浸提介质,供试品分为两组,一组取注射器采用公称容量法浸提;另一组取注射器活塞,按重量法浸提,浸提液分别与L929细胞接触培养,采用四唑盐比色法(MTT法)进行吸光度检测,计算细胞的相对增殖率。结果：部分注射器用活塞细胞毒性较大。结论：需要加强对一次性使用无菌注射器的细胞毒性评价。     

医用胶原膜浸提液对CHL细胞染色体畸变作用的研究

目的：研究医用胶原膜用于医学领域的遗传毒性。方法：在代谢活化和非代谢活化测试系统下对胶原膜浸提液进行中国仓鼠肺（CHL）细胞的染色体畸变试验。结果：胶原膜浸提液终浓度在31.25～250μl/ml时,观察24h和48h收集的染色体,畸变率均在正常范围（〈5%）。直接诱变剂丝裂霉素C（0.20μg/ml）,在非代谢活化时染色体畸变率为31%～40%,间接诱变剂环磷酰胺（60μg/ml）在S9代谢活化时染色体畸变率为37%～46%,均使染色体畸变率增加。结论：在本实验条件下医用胶原膜浸提液未诱发CHL细胞染色体畸变率增加。     

不同灭菌方式对细胞毒性评价的研究

目的 探讨不同灭菌方式对4种医疗器械或材料细胞毒性评价结果的影响。方法 采用浸提液法和MTT法2种细胞毒性方法对4种常用医疗器械和材料(一次性使用医用口罩、一次性使用多功能手术解剖器(镊体)、注射用冷冻干燥用氯化丁基橡胶塞和一次性使用输液器)在不同灭菌方式(紫外辐照灭菌、高温湿热灭菌、环氧乙烷灭菌)后的细胞毒性进行测定。结果 一次性使用医用口罩、一次性使用多功能手术解剖器(镊体)、注射用氯化丁基橡胶塞在3种灭菌条件下细胞毒性分级均为1级,细胞存活率均>70%;一次性使用输液器在紫外辐照灭菌和高温湿热灭菌方式下细胞毒性分级均为1级,细胞存活率均>70%,环氧乙烷灭菌条件下细胞毒性分级为2级,细胞存活率<70%。结论 医疗器械或材料的灭菌方式会影响其细胞毒性结果的测定,根据产品理化性质和材料的不同,应选择适宜的灭菌方式。尤其多组分、多材料,涉及各种添加剂的器械产品,在进行细胞毒性试验时一定要根据产品的特性或与其临床使用灭菌方式保持一致。     

Effect of extracts from Spirulina platensis bioaccumulating cadmium and zinc on L929 cells

The uptake of cadmium and zinc by Spirulina platensis was investigated using a laboratory culture of this cyanobacterium. The cells were treated with metal concentrations increasing from 0.5 to 2.0 mg L(-1), in order to evaluate their adsorption capacity and survival potential. Afterwards, the cytotoxicity of cell extracts bioaccumulating heavy metals was evaluated on cultured L929 mouse fibroblasts. Cadmium was removed with higher yield (84.0-88.7%) than zinc (54.5-68.0%) and the maximum specific removal of these metals was 1.82 and 2.60 mg g(-1), respectively. Cadmium bioaccumulating algal extracts caused higher cell mortality of L929 cells than zinc accumulating ones, with a clear dose-response trend. EC(50) estimated by Trimmed Spearman-Karber (TSK) method were 7.21 and 9.59cells mL(-1) for cadmium and zinc, respectively. The capability to accumulate heavy metals could have a remarkable importance for the utilization of algal species in human or animal feeding.     

TCu220C与TCu380AIVD体外细胞毒性研究

目的:评价两种含铜宫内节育器体外细胞毒性.方法:采用TCu220C和TCu380A,10?S-DMEM浸提后,与L929细胞接触培养,通过倒置相差显微镜观察其形态,采取MTT(四唑盐)比色法量化细胞毒性,计算相对增值率(RGR),并进行毒性评价.结果:TCu220C表现出轻度的细胞毒性(1～2级),TCu380A表现出明显的细胞毒性(4级).结论:相同形状的两种含铜宫内节育器因含铜面积不同,其表现出来的细胞毒性也不同,含铜面积越大,细胞毒性越大.     

TCu220C与TCu380A IUD体外细胞毒性研究

目的:评价两种含铜宫内节育器体外细胞毒性。方法:采用TCu220C和TCu380A,10%FBS-DMEM浸提后,与L929细胞接触培养,通过倒置相差显微镜观察其形态,采取MTT(四唑盐)比色法量化细胞毒性,计算相对增值率(RGR),并进行毒性评价。结果:TCu220C表现出轻度的细胞毒性(1～2级),TCu380A表现出明显的细胞毒性(4级)。结论:相同形状的两种含铜宫内节育器因含铜面积不同,其表现出来的细胞毒性也不同,含铜面积越大,细胞毒性越大。     

Ellagic acid,phenolic acids,and flavonoids in Malaysian honey extracts demonstrate in vitro anti-inflammatory activity

Natural honey has been used in traditional medicine of different cultures throughout the world. This study looked into the extraction of Malaysian honey and the evaluation of the anti-inflammatory activity of these extracts. It was hypothesized that honey extracts contain varying amounts of phenolic compounds and that they possess different in vitro anti-inflammatory activities. Honey extracts were analyzed using liquid chromatography–mass spectrometry to identify and compare phenolic compounds, whereas high-performance liquid chromatography was used for their quantification. Subsequently, honey methanol extract (HME) and honey ethyl acetate extract (HEAE) were tested in vitro for their effect on nitric oxide production in stimulated macrophages. The extracts were also tested for their effects on tumor necrosis factor–α (TNF) cytotoxicity in L929 cells. The major phenolics in the extracts were ellagic, gallic, and ferulic acids; myricetin; chlorogenic acid; and caffeic acid. Other compounds found in lower concentrations were hesperetin, p-coumaric acid, chrysin, quercetin, luteolin, and kaempferol. Ellagic acid was the most abundant of the phenolic compounds recorded, with mean concentrations of 3295.83 and 626.74 μg/100 g of honey in HME and HEAE, respectively. The median maximal effective concentrations for in vitro nitric oxide inhibition by HEAE and HME were calculated to be 37.5 and 271.7 μg/mL, respectively. The median maximal effective concentrations for protection from TNF cytotoxicity by HEAE and HME were 168.1 and 235.4 μg/mL, respectively. In conclusion, HEAE exhibited greater activity in vitro, whereas HME contained a higher concentration of phenolic compounds per 100 g of honey.     

枸杞子芦丁微波提取-高效液相含量测定法研究

目的建立一种微波提取一反相高效液相测定枸杞子芦丁含量的方法。方法色谱条件：Dikma Kromasil C18色谱柱（4．6mm×200mm,5μm）,以甲醇-0．3％磷酸（37：63）为流动相,采用等度洗脱的方式,流速为1ml·min^-1,检测波长为257mm,柱温为25℃,进样量为5脚;用回流提取、超声提取、微波提取三种方法前处理样品,考察它们对枸杞芦丁含量测定的影响：对枸杞芦丁微波提取-反相高效液相色谱含量测定方法进行了方法学考察。结果芦丁的线性范围为0．004—0．11mg／ml（相关系数为0．9998）。平均回收率（n=5）为101．48％,不同产地枸杞子样品中的芦丁含量存在着较大的差异,真伪枸杞子样品中的芦丁含量存在着极大的差异。结论该方法准确可靠,重现性好,适用于测定枸杞子中芦丁的含量,为枸杞子的质量标准研究提供了实验数据。     

聚氨酯海绵细胞毒性和溶血毒性研究

为评价聚氨酯海绵应用于人体的安全性，给临床安全使用提供可靠依据，本实验采用细胞毒性和溶血毒性试验方法，检测聚氨酯海绵是否存在细胞毒性和溶血反应。结果显示：聚氨酯海绵对Ｌ－９２９细胞株无毒性作用，对兔血无溶血反应。结果表明，聚氨酯海绵可以作为医用材料使用     

血管内速溶支架的细胞毒性和植入实验研究

目的:检测一种新型的血管内速溶支架的生物相容性。方法:分别对血管内速溶支架进行细胞毒性实验和皮下植入实验。细胞毒性实验:速溶支架粉末与L929细胞接触培养,倒置显微镜观察形态,采用MTT(四唑盐)比色法量化细胞毒性,并进行毒性分级。皮下植入实验:在12只新西兰白兔右侧背部皮下植入血管内速溶支架,左侧作为空白对照,分别于植于支架后3、7、14、28 d,肉眼和镜下观察植入点炎症反应情况。结果:血管内速溶支架细胞毒性为0级。皮下植入后无炎症反应,局部组织无刺激。结论:该课题组黏合吻合血管用血管内速溶支架材料满足ISO 10993要求,具有良好的生物相容性。     

壳聚糖创伤敷料的生物学评价

目的:对壳聚糖创伤敷料进行生物学评价。方法:进行皮肤致敏以及细胞毒性试验,溶血试验,并按照国家统一标准判定。结果:细胞毒性试验:镜下见小鼠成纤维细胞生长良好,可见少量圆形细胞,偶见细胞溶解,细胞相对增值度为81%,细胞毒性总评级为1级,极轻细胞毒性。致敏试验:产品材料等级评分为0,无致敏反应。溶血试验:溶血率为0.386%,<5%,表明无溶血现象。     

硫酸铟对小鼠成纤维细胞毒性作用的研究

[目的]了解硫酸铟对小鼠成纤维细胞（L929）的细胞毒性、DNA损伤及活性氧含量的影响。[方法]以体外培养的L929细胞为研究对象,采用四氮唑盐比色分析法（MTT法）观察不同染毒浓度（1、2、4、8mmol／L硫酸铟）在不同时间段（2、24、48h）染毒对L929细胞的毒性作用;采用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）检测在2h作用下,不同浓度（1、2、4mmol／L硫酸铟）染毒致DNA损伤的情况及活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量的变化。[结果]硫酸铟对L929细胞生长具有抑制作用,在各个浓度及时间段内光密度值随染毒浓度增加及染毒时间延长而降低,阴性组与染毒组差异有统计学意义（P〈0．05）。单细胞凝胶电泳结果显示,彗星拖尾率、彗尾DNA％、尾长、Olive尾矩随染毒浓度增加而增加,阴性组与染毒组之间的差异有统计学意义（P〈0．05）,且ROS含量随染毒浓度增加表现递增。[结论]本实验条件下,硫酸铟能够明显抑制L929细胞增殖,存在明显的剂量-效应关系和时间-效应关系,并在短时间内能够引起DNA单链断裂及ROS含量增多。