人胚胎干细胞培养体系的研究进展

人胚胎干细胞(hES细胞)是来源于着床前人囊胚内细胞团的、具有自我更新能力和分化全能性的细胞.由于具有体外无限增殖和分化成三个胚层来源的各种细胞的潜能,hES细胞具有重要的科学意义和巨大的医学应用价值.目前,hES细胞常规体外培养技术多采用培养基与饲养层相结合的方法,但常规方法存在异源病原体污染的可能.近年来,优化hES细胞体外培养体系的研究取得较大进展,现就饲养层、无饲养层培养体系进行综述,分析目前在维持hES细胞未分化状态的优化培养研究中取得的新进展和存在的问题.     

胚胎干细胞转录因子Nanog研究进展

胚胎干细胞（ES细胞）的生物学功能由众多复杂的信号转导网络调控。其中保持ES细胞未分化状态的调控途径备受瞩目。Nanog是最新发现的一个在维持ES细胞自我更新和保持全能性中发挥重要作用的转录因子，独立于白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）途径和骨形成蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）途径，与OCT4，SOX2共同位于细胞全能性调控网络的顶端。就Nanog因子的结构、表达调控以及与生殖细胞肿瘤的关系作如下综述。     

两株人胚胎干细胞的无饲养层扩增

目的:建立两株中国人胚胎干细胞(hESCs)的无饲养层的培养体系,观察条件培养基所需的饲养层密度,并探索最佳的传代方式。方法:两株人胚胎干细胞hES-846XX和hES-1846XY分别使用不同密度(3×105/mL、6×105/mL和1.2×106/mL)获得的条件培养基(CM)在无饲养层培养体系培养12代以上,用机械分离法和Ⅳ型胶原酶法进行传代,观察比较结果并对所得hESCs鉴定。结果:6×105/mL～1.2×106/mL之间的密度都是合适密度;Ⅳ型胶原酶在长期传代中优于机械法传代;所得细胞维持干细胞未分化状态和全能性。结论:无饲养层的培养体系可以用于中国胚胎干细胞培养,两株中国人胚胎干细胞(hESCs)的倍增周期、所需饲养层密度及分化率等方面与国外hESCs有明显差别。     

胚胎干细胞转录因子Nanog研究进展

胚胎干细胞(ES细胞)的生物学功能由众多复杂的信号转导网络调控,其中保持ES细胞未分化状态的调控途径备受瞩目.Nanog是最新发现的一个在维持ES细胞自我更新和保持全能性中发挥重要作用的转录因子,独立于白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)途径和骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)途径,与OCT4,SOX2共同位于细胞全能性调控网络的顶端.就Nanog因子的结构、表达调控以及与生殖细胞肿瘤的关系作如下综述.     

人胚胎干细胞保持未分化状态调控机制

人胚胎干细胞保持未分化状态受到众多细胞因子和基因的调控,其机制尚未完全明确.白血病抑制因子(LIF)途径在人胚胎干细胞中并非起主导作用,OCT3/4、Nanog、Wnt、TGF等途径受到重视,经证实对保持干细胞的未分化必不可少.在鼠胚胎干细胞保持未分化状态调控系统的基础上,将维持人胚胎干细胞保持未分化状态的信号转导和转录调控途径综述.     

胚胎干细胞向生殖细胞分化的研究进展

<正>近年来,不断有研究证明人胚胎干细胞(hESC)的多能性,以及小鼠胚胎干细胞(mESC)能够分化为早期配子并形成囊胚样结构。2003年5月,Hbner等研究发现,小鼠胚胎干细胞在体外可分化为卵母细胞。Nayernia等研究发现,mESC可于体外分化为未成熟的精子,并且成功获得了存活的后代。这些研究对发展新的生殖工程学提供了开创性思     

胚胎干细胞的分化研究

胚胎干细胞的分化研究已成为发育生物学和临床细胞替代治疗的研究热点。本文仅就胚胎干细胞分化的理论基础、定向分化研究现状及临床潜在应用价值作一综述。     

胚胎干细胞的分化研究

胚胎干细胞的分化研究已成为发育生物学和临床细胞替代治疗的研究热点。本文仅就胚胎干细胞分化的理论基础、定向分化研究现状及临床潜在应用价值作一综述。     

人胚胎干细胞转化为肝细胞

干细胞技术现已应用于肝病临床，如生物人工肝、干细胞移植治疗终末期肝病和筛查疑有不良反应的药物等。人胚胎干细胞（RESC）是最有潜能的干细胞，可向各类细胞分化，但调控分化的机制未明，有报告显示wnt信号通路可能是其中重要机制之一。     

人胚胎干细胞保持未分化状态调控机制

人胚胎干细胞保持未分化状态受到众多细胞因子和基因的调控，其机制尚未完全明确。白血病抑制因子（LIF）途径在人胚胎干细胞中并非起主导作用，OCT3／4、Nanog、Writ、TGF等途径受到重视，经证实对保持干细胞的未分化必不可少。在鼠胚胎干细胞保持未分化状态调控系统的基础上，将维持人胚胎干细胞保持未分化状态的信号转导和转录调控途径综述。     

诱导人胚胎干细胞向子宫内膜样细胞分化的初步研究

目的:探讨无饲养层培养的人胚胎干细胞诱导分化为子宫内膜样细胞的方法。方法:将无饲养层培养的人胚胎干细胞分别通过共培养诱导法和细胞因子诱导法向子宫内膜样细胞诱导,流式细胞术检测分化的细胞中子宫内膜上皮细胞标志物细胞角蛋白18和间质细胞标志物波形蛋白的表达情况。结果:共培养诱导法和细胞因子诱导法在分化第7天均出现长梭状细胞样改变。分化第8天通过流式细胞术检测发现细胞波形蛋白表达均为阴性,部分细胞角蛋白18表达阳性,共培养诱导法分化率高于细胞因子诱导法[(55.63±10.29)%vs.(13.90±0.26)%,P<0.05]。结论:共培养诱导法和细胞因子诱导法均可使人胚胎干细胞分化为子宫内膜上皮样细胞,但前者的分化效率更高。     

人胚胎干细胞研究的现状与前景

胚胎干细胞 (ｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ ,ＥＳ细胞 )是从早期胚胎的内细胞团 (ｉｎｎｅｒｃｅｌｌｍａｓｓ ,ＩＣＭ)或原始生殖细胞 (ｐｒｉｍｏｒｄｉａｌｇｅｒｍｃｅｌｌｓ ,ＰＧＣＳ)分离出来的多潜能细胞系。它具有与早期囊胚ＩＣＭ或ＰＧＣＳ 相似的生物学特性 ,在体外能够保持正常二倍体核型和未分化状态 ,并且有多方向分化潜能。在适当条件下 ,ＥＳ细胞可被诱导分化为多种细胞、组织 ,也可以与受体胚胎嵌合 ,形成嵌合体。1998年 ,美国威斯康星大学Ｔｈｏｍｓｏｎ等[1] 率先成功分离、克隆了人胚胎干细胞 ,并建立了细胞系 …     

人胚胎干细胞向肝脏样细胞诱导分化中限定性内胚层分化的研究进展

胚胎干细胞(ESC)是来源于囊胚内细胞团的一种高度未分化细胞,具有无限增殖和发育全能性等特点,可自发分化为多种细胞类型,如神经细胞、肝脏细胞、胰腺细胞和心肌细胞等.在之前的诱导分化方案中,主要通过ESC形成拟胚体后,再进一步进行各种细胞的诱导分化,诱导分化效率较低.目前的研究表明,直接添加诱导因子能够使ESC直接分化成限定性内胚层,并在此基础上进一步诱导分化形成肝脏细胞,从而显著提高向肝脏细胞的诱导分化效率.通过鉴定限定性内胚层的表面标记因子SOX17和FOX2来评定限定性内胚层的诱导分化效率.但是,何种诱导因子的组合诱导分化效率最高并最接近人胚胎正常发育过程并不十分明确.     

人类胚胎干细胞

干细胞（stem Cell）研究成果曾被Science评为1998年世界科技十大成果之首、2000年世界科技十大成果之一和六大热点发展领域之首。1998年人胚胎干细胞建系后,研究者开始真正重视干细胞产业,全球掀起以人胚胎干细胞为中心的干细胞研究和应用热潮,并带来广阔的产业化前景。     

首次利用胚胎干细胞培养出人造精子

据2009年7月7日《干细胞与发育》（StemCellsandDevelopment）刊文介绍,英国纽卡斯尔大学科研人员首次研究发出人造精子。生物学家卡里姆调制出一种化学物质和维生素构成的“鸡尾酒”,在这种“鸡尾酒”培养环境下,人体干细胞可转变成精子。干细胞是一类具有自我复制能力（self-renewing）的多潜能细胞,在一定条件下,可分化成多种功能细胞,医学上称之为“万能细胞”。干细胞的发育受多种内在机制和微环境因素影响。目前人类胚胎干细胞可在体外成功培养。最新研究发现,成体干细胞可横向分化为其他类型细胞和组织,为干细胞的广泛应用提供了基础。     

胚胎干细胞和成体干细胞的鉴定

胚胎干细胞是一种具有在体外不分化的无限增殖能力，而在一定条件下又能分化为体内多种细胞类型的原始细胞。自1998年美国Thomson等建立人胚胎干细胞系以来，对人胚胎干细胞的建系及开发利用引起了国内外的高度重视。而人胚胎干细胞系的建立以及定向分化的成功与否必须通过鉴定来确定。现就胚胎干细胞和成体干细胞的鉴定如下综述。     

胚胎干细胞和成体干细胞的鉴定

胚胎干细胞是一种具有在体外不分化的无限增殖能力,而在一定条件下又能分化为体内多种细胞类型的原始细胞。自1998年美国Thomson等建立人胚胎干细胞系以来,对人胚胎干细胞的建系及开发利用引起了国内外的高度重视。而人胚胎干细胞系的建立以及定向分化的成功与否必须通过鉴定来确定。现就胚胎干细胞和成体干细胞的鉴定如下综述。     

体外培养胚胎干细胞分化为心肌细胞特性的初步研究

目的了解干细胞在实验条件下分化发育为心肌细胞的特征表达与培养时间的关系。方法收集体外培养条件下第2、4、6、8、10、12、14、16、18和20天的胚胎干细胞,采用RT-PCR方法对其中心肌细胞特异表达基因(浕/β-MHC)的表达量进行检测,并通过管家基因(GAPDH)表达量作为内对照;另外收集第0、3、5、10天培养的干细胞,检测3种管家基因(GAPDH、HGPRT、β-tublin)表达的稳定性。结果胚胎干细胞在体外特定培养条件下,第6天起浕/βMHC出现,且表达量随培养时间延长逐渐增加,至14天时表达量最高,其后随着培养时间延长,表达量保持稳定;不同管家基因表达量随培养时间的变化,稳定性相差较大,其中GAPDH基因表达的波动相对稳定。结论EST实验体系分化抑制实验的周期设计为10~14天较为合理,GAPDH适合用于作为目的基因表达量检测的内对照。     

浅析我国人胚胎干细胞发明的可专利性

本文对人胚胎干细胞发明在我国专利制度下的可专利性进行分析.目前,我国专利制度与欧洲专利制度相似,对于发明是否能被授予专利权都添加了道德因素的考量.通过比较中国与西方对"胚胎是否等同于人"的观念、国家对人胚胎干细胞研究的立场、<人胚胎干细胞研究伦理指导原则>在相关研究中的作用等,说明以违反社会公德为由一概否定人胚胎干细胞发明的可专利性略显武断.基于我国专利法的立法目的 以及TRIPs 协议中对公众健康予以保护的规定,笔者认为应进一步完善我国专利制度并以是否具有全能性为界限对人胚胎干细胞发明的可专利性予以区分处理.