血管性痴呆小鼠海马结构SS及CCK蛋白表达的改变

目的:观察血管性痴呆小鼠海马结构生长抑素(SS)和胆囊收缩素(CCK)阳性神经元的数量变化,探讨血管性痴呆的发生机制。方法:复制小鼠血管性痴呆模型,利用Y-迷宫检测血管性痴呆模型小鼠学习记忆能力,采用ABC免疫组织化学方法,研究血管性痴呆小鼠与正常小鼠海马结构SS和CCK阳性神经元数量的变化。结果:血管性痴呆小鼠比正常小鼠Y-迷宫学习记忆训练次数明显增多,差异有统计学意义;海马结构CA1区、CA3区及齿状回(DG)区SS和CCK阳性神经元的数量明显减少,差异有统计学意义。结论:血管性痴呆的发生可能与海马结构CA1区、CA3区及齿状回(DG)区SS和CCK阳性神经元的数量明显减少有关。     

血管性痴呆大鼠记忆障碍与海马神经型一氧化氮合酶表达的关系

目的：探讨NO参与血管性痴呆大鼠学习记忆障碍的作用机制。方法：要用4－血管阻断的方法建立大鼠血管性痴呆模型,以免疫组化法检测海马神经型一氧化氮合酶蛋白表达的变化;以Nissl染色方法,结合图象分析统计海马神经元丢失比率,同时采用Y－型迷宫,进行行为学检测,定量测定其学习记忆成绩,结果：在血管性痴呆大鼠空间分辨学习记忆能力发生严重障碍时,海马CA1区神经元丢失比率较正常对照组增高,神经型一氧化氮合酶蛋白表达增加。结论：神经型一氧化氮合酶可能引起海马CA1区神经元凋亡或坏死增加,海马神经元受损,导致血管性痴呆大鼠学习记忆障碍。     

牛磺酸锌对血管性痴呆小鼠学习和记忆能力的影响

目的:研究牛磺酸锌(taurine-zinc,TZC)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)小鼠学习和记忆能力的影响及其相关机制。方法:将小鼠随机分为模型组、假手术组及TZC 50 mg/kg组、100 mg/kg和200 mg/kg给药组。给药组每天按10 m L/kg灌胃,假手术组和模型组给予等体积蒸馏水,灌胃14 d后,利用双侧颈总动脉阻断合并尾静脉放血法制备小鼠VD模型。ELISA检测脑组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的水平;分光光度计法检测脑组织诱导型一氧化氮合酶(i NOS)活性和一氧化氮(NO)含量的变化;利用跳台和水迷宫实验观察小鼠的学习和记忆能力。结果:TZC 50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg组小鼠脑组织中TNF-α、IL-1β、i NOS和NO水平均降低。在水迷宫实验中,与模型组相比,TZC 100 mg/kg和200 mg/kg组的潜伏期缩短,TZC 50mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg组的错误次数减少;在跳台实验中,TZC 50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg组较模型组潜伏期延长,错误次数减少(P0.05)。结论:TZC对VD小鼠的学习和记忆能力有改善作用,其机制可能与降低脑组织TNF-α、IL-1β、i NOS和NO水平有关。     

鱼油制剂中DHA对小鼠海马NOS阳性神经细胞表达的影响

目的　观察鱼油制剂中DHA(DecosahehexaenoicAcid)对小鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元表达的概况。方法　实验动物分为三组 :剂量组、对照组和空白对照组。应用NADPH d组化法显示小鼠海马CA1、CA3 区和齿状回NOS(NitricOxideSynthase)阳性神经元及其数量、突起及透光率。结果　剂量组的NOS阳性神经元数量及透光率匀大于对照组和空白组 ,剂量组胞体深染 ,透光率值低 ,对照组和空白组胞体数量少 ,透光率值高。结论　DHA对小鼠神经系统的生长发育可能具有促进作用。     

急性缺氧小鼠海马CA1区NOS活力和nNOS蛋白表达的时程变化

目的观察急性缺氧小鼠海马CA1区一氧化氮合酶(NOS)和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的时程变化,探讨NO在脑缺氧中的作用并为抗脑缺氧提供依据.方法复制小鼠急性缺氧模型,采用NADPH-d组织化学和nNOS免疫组织化学方法,研究急性缺氧后不同时程点小鼠海马CA1区NADPH-d和nNOS阳性神经元数量的变化.结果与正常对照组相比较,急性缺氧后0.5h组小鼠海马CA1区NADPH-d和nNOS阳性神经元的数量无明显变化,差异无显著性(P＞0.05),3h、6h和12h组逐渐增多并于12h升高达到最高峰,差异有显著性(P＜0.05),而于24h后开始降低,48h恢复正常.结论急性缺氧后早期海马CA1区NOS和nNOS水平明显增多,NO在缺氧所致早期脑损伤中起重要作用.     

老年性痴呆模型大鼠海马结构nNOS神经元的变化

目的　研究老年性痴呆模型大鼠海马结构nNOS神经元的变化情况。方法　用 15月龄老年Wistar大鼠以D 半乳糖腹腔注射 4周加上鹅膏蕈氨酸 (ibotenicacid ,IBO)脑内Meynert核注射造模 ,然后运用免疫组织化学方法检测大鼠海马CA1、CA3和齿状回nNOS神经元数目。结果　老年性痴呆模型大鼠海马CA1、CA3和齿状回nNOS阳性神经元数目及其积分光密度较正常老年组和正常青年组有明显减少的趋势 ,组间比较有差异显著性。结论　大鼠海马结构nNOS神经元的减少是老年性痴呆病的主要病理变化之一     

急性缺氧小鼠海马CAl区NOS活力和nNOS蛋白表达的时程变化

目的:观察急性缺氧小鼠海马CAl区一氧化氮合酶(NOS)和神经元型一氧化氮合酶(nNOS) 阳性神经元的时程变化,探讨NO在脑缺氧中的作用并为抗脑缺氧提供依据。方法:复制小鼠急性缺氧模型,采用NADPH-d组织化学和nNOS免疫组织化学方法,研究急性缺氧后不同时程点小鼠海马CAl区NADPH-d 和nNOS阳性神经元数量的变化。结果:与正常对照组相比较,急性缺氧后0.5h组小鼠海马CAl区NADPH-d 和nNOS阳性神经元的数量无明显变化,差异无显著性(P>0.05),3h、6h和12h组逐渐增多并于12h升高达到最高峰,差异有显著性(P<0.05),而于24h后开始降低,48h恢复正常。结论:急性缺氧后早期海马CAl区NOS和nNOS水平明显增多,NO在缺氧所致早期脑损伤中起重要作用。     

噪声对大鼠学习记忆中海马区NOS阳性神经元表达的影响

目的：拟在白噪声下观察对大鼠学习记忆的影响及海马区NOS的变化，探讨噪声所致大鼠学习记忆下降的机制。方法：44只SD大鼠，其中20只随机分两组，分别在持续80dB(A)白噪声和无噪声的环境下，在Y—迷宫中进行空间辨别学习记忆训练，了解噪声对大鼠学习记忆的影响，另24只大鼠随机分三组：噪声训练组、正常训练组和噪声观察组，以同样的方法训练，用免疫组化的方法观察持续噪声对海马区NOS阳性神经元表达变化。结果：噪声能降低大鼠学习记忆能力，而且海马区NOS阳性神经元较正常对照组的数量及染色强度显著降低。结论：噪声降低海马区神经元活性，NOS的合成减少，抑制海马习得性长时程突触增强，影响记忆的获得与保持，延迟短时记亿向长时记忆的转化。     

多奈哌齐对血管性痴呆小鼠学习记忆及海马Akt、p-Akt表达的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)小鼠学习记忆能力及对海马Akt、p-Akt表达的调节作用。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型。90只雄性昆明小鼠随机分为3组,假手术组(30只)、模型组(30只)及盐酸多奈哌齐组(30只)。在术后第29天、第30天,经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化和western blot方法检测各组小鼠海马Akt、p-Akt的表达变化。结果小鼠的学习和记忆能力VD模型组明显低于假手术组,而盐酸多奈哌齐治疗组明显高于VD模型组小鼠(0.05);免疫组化和Western blot结果发现,小鼠海马CAl区Akt、p-Akt蛋白相对表达水平VD模型组明显低于假手术组,而盐酸多奈哌齐治疗组显著高于VD模型组(0.05)。结论盐酸多奈哌齐改善血管性痴呆(VD)小鼠学习和记忆功能可能与上调VD小鼠Akt、p-Akt的表达相关。     

Alzheimer型痴呆与血管性痴呆临床及脑电图比较

对３７例Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ型痴呆（ＡＤ）及４２例血管性痴呆（ＶＤ）进行了临床及脑电图比较。结果表明ＡＤ病人７８％有精神症状，而ＶＤ病人９０％有精神症状；痴呆程度ＡＤ病人重于ＶＤ病人，脑电图ＡＤ病人主要是双额叶及双枕叶的节律改变，以δ、θ波为主要活动；而ＶＤ病人以不对称为主要表现。     

金纳多对内毒素诱导小鼠急性肺损伤保护作用机制的初步研究

目的：初步探讨银杏叶提取物金纳多（Ginaton）对内毒素（lipopolysaccharide, LPS）诱导小鼠的急性肺损伤(acute lung injury, ALI)保护作用的可能机制。方法：于小鼠腹腔注射LPS（10 mg/kg）复制ALI动物模型。将小鼠随机分为对照组、LPS组、Ginaton组和Ginaton＋LPS组。观察各组肺组织病理学改变,测量肺湿/干重比,支气管肺泡灌洗液蛋白含量及乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）活性,测量丙二醛（malondialdehyde, MDA）、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase, iNOS）和髓过氧化物（myeloperoxidase,MPO),免疫组织化学方法检测血红素加氧酶（heme oxygenase HO-1）及iNOS蛋白表达。结果： 金纳多可有效减轻LPS所致肺组织病理学变化,并降低肺湿/干重比和肺泡灌洗液中蛋白含量,降低肺泡灌洗液中LDH活性、肺组织MPO和iNOS活性,同时MDA和NO含量下降。免疫组织化学结果显示,LPS组iNOS表达上升（P＜0.01）,而血红素加氧酶（HO-1）蛋白表达未见明显变化;而预先给予Ginaton可显著提高HO-1的表达,降低iNOS的表达（P＜0.01）。结论：Ginaton可减轻LPS所致急性肺组织损伤,其机制可能与诱导HO-1的表达,下调iNOS的表达和活性有关。     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠空间学习记忆和海马NMDAR1表达的影响

目的:观察银杏叶提取物(EGb761)对血管性痴呆(VaD)大鼠空间学习记忆和海马N-甲基-D-天冬氨酸型离子型谷氨酸受体1型亚单位(NMDAR1)表达的影响。方法:采用四血管阻断法制备VaD大鼠模型,设立假手术组、模型组、尼莫地平组(10 mg/kg/d,灌胃30 d)和银杏叶提取物组(50 mg/kg/d,灌胃30 d)。利用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆的改变,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠海马神经元NMDAR1蛋白水平的变化,实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马NMDAR1的mRNA表达变化。结果:与假手术组相比,模型组大鼠水迷宫逃避潜伏期延长,撤后台靶象限平均探索次数减少(P<0.05),银杏叶提取物明显改善了VaD大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆成绩(P<0.05);假手术组、尼莫地平组与银杏叶提取物组之间比较无统计学差异(P>0.05)。模型组大鼠的NMDAR1蛋白及其mRNA在海马CA1区的表达水平较假手术组明显降低(P<0.05);银杏叶提取物组大鼠海马的NMDAR1蛋白及mRNA表达水平较模型组明显升高(P<0.05)。结论:银杏叶提取物可以减轻脑缺血再灌注对海马CA1区神经元的损伤,这可能与上调海马组织内NMDAR1蛋白及mRNA的表达密切相关。     

银杏叶提取物联合盐酸文拉法辛对抑郁大鼠海马nNOS蛋白表达及NO水平的影响

目的 :探讨抑郁症脑损伤的机制 ,研究银杏叶提取物 (EGb)及合成抗抑郁药盐酸文拉法辛(Venlafaxine)对抑郁大鼠的抗脑损伤及神经元保护作用。方法 :慢性应激建立大鼠抑郁模型。将 84只雄性大鼠分为正常对照组、抑郁模型组和不同治疗组。快速断头法处死 ,取海马后一侧进行免疫组化反应 ,观察海马CA3区nNOS蛋白的表达 ;另一侧检测NO含量 ;同时测定血清中NO含量。结果 :抑郁模型组海马nNOS表达增加 ,海马及血清中NO含量增加 ,P <0 0 1;联合用药组海马nNOS表达下降 ,海马及血清中NO含量减少 ,P <0 0 1。结论 :慢性应激增加海马nNOS表达 ;EGb有减轻神经元损伤 ,保护神经元的作用 ,其与Venlafaxine合用可能会达到对抑郁进行多靶点、多层次的治疗 ,弥补单一用药的不足。     

银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠海马突触素表达的影响

目的：研究银杏叶提取物(EGb761)对血管性痴呆模型大鼠海马突触素表达的影响。方法:以双侧颈总动脉反复夹闭再通同时腹腔注射硝普钠建立血管性痴呆模型大鼠，采用Morris 水迷宫和免疫组化方法分别观察大鼠空间学习记忆能力及海马突触素(SYN)表达情况。结果:模型组大鼠在1月、2月和4月不同时点测得的Morris水迷宫逃避潜伏期(EL)均较假手术组明显延长(P<0.01)，药物组EL均显著短于模型组，但仍长于假手术组(P<0.05或P<0.01)；模型组海马SYN表达弱于假手术组，而药物组海马SYN表达高于模型组(P<0.01)。结论:EGb761增加海马结构SYN表达可能是其改善VD大鼠学习记忆障碍的重要机制。     

血管性痴呆大鼠海马超微结构的变化及药物干预

目的：探讨血管性痴呆病理机制及黄精口服液的作用机制。方法：结扎双侧颈总动脉建立血管性痴呆模型,黄精口服液灌胃,应用透射电镜观测神经细胞、胶质细胞、微血管病理变化和突触结构参数的变化。结果：血管性痴呆大鼠海马CAI区神经组织线粒体肿胀、嵴断裂、模糊或消失,微管断裂、排列紊乱,神经毡中突起肿胀、变性,突触结构参数明显改变;毛细血管内皮细胞局部基膜和星形胶质细胞也有病理改变。黄精口服液干预的大鼠海马组织病理变化明显减轻;海马CAI突触界面曲率增大、突触后致密物增厚、突触活性区增长。结论：(1)突触结构变化是血管性痴呆的病理机制之一;(2)黄精口服液促进突触重建、改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力。     

EGb761对脑缺血大鼠脑组织的保护作用及机制

目的： 研究标准银杏叶提取物（EGb761）预先给药对脑内eNOS表达的影响,探讨EGb761脑保护作用机制。方法: 96只SD大鼠随机分为4组（n=24）。正常对照组;大脑中动脉栓塞（MCAO）组;EGb 1组（EGb761 30 mg·kg-1·d-1,腹腔注射给药,连续3 d后行MCAO）;EGb 2组 (EGb761 60 mg·kg-1·d-1,其余同上）。每组动物均在手术后24 h进行神经功能评分并过度麻醉取脑计算大脑含水率、TTC染色计算梗死灶大小和免疫组化测定脑组织eNOS表达。结果: 与MCAO组比较EGb761预先给药能明显减轻缺血后大鼠神经功能缺损程度(P<0.01)、降低大脑含水率(P<0.05)、缩小脑梗死灶体积(P<0.01)和显著升高脑组织eNOS表达(P<0.01)。结论: EGb761预先给药对MCAO后脑组织具有保护作用,其机制可能与上调eNOS表达有关。     

老龄大鼠海马结构脑源性神经营养因子表达的改变

目的：探讨大鼠海马结构脑源性神经营养因子（BDNF）表达的老龄性改变，为脑衰老提供可靠的免疫组织化学资料。方法：选用雌性Wistar大鼠24只，分为青年组和老龄组。应用免疫组化方法结合图像分析技术对2组大鼠海马结构BDNF阳性产物进行定性、定量分析。结果：老龄组海马CA3和CA1区神经元BDNF含量比青年组分别下降了13．3％、10．4％，然而，齿状回从青年到老年变化不显著。结论：老龄时海马CA3和CA1区神经元的BDNF表达发生了明显的变化，其含量明显降低。提示老龄大鼠海马CA3和CA1区神经元BDNF表达的改变，可能是老龄动物海马结构营养及学习记忆障碍的形态学基础。     

Ovary and ovulation: Cell-specific localization of nitric oxide synthases (NOS) in the rat ovary during follicular development, ovulation and luteal formation

Nitric oxide (NO) has emerged as one of several important intraovarianregulatory factors. In particular, NO has been implicated inthe processes of ovulation and atresia-related apoptosis. Theaim of the present study was to investigate the presence anddistribution of the NO-generating nitric oxide synthase (NOS)enzymes in the ovary during follicular development, ovulationand luteal formation of the equine chorionic gonadotrophin (ECG)/humanchorionic gonado-trophin (HCG)-primed rat NADPH diaphorase activitywas used as a histochemical marker for NOS within the ovary.Diaphorase reactivity was most abundant in the stroma (S) ofthe ovary and in the theca (T) layer of the follicle. In luteinizedovaries, weaker diaphorase reactivity was present within thecorpora lutea (CL). Two different isoforms of NOS, the constitutivelyexpressed endothelial NOS (eNOS) and the inducible isoform ofNOS (iNOS), were immunolocalized in ovaries of immature ratsand in ECG/HCG-primed rats during the periovulatory period fromHCG injection until 2 days after ovulation. In addition, ovarianconcentrations of eNOS and iNOS were quantified by immunoblotting.Immunoblotting with a monoclonal anti-eNOS antibody demonstratedthe presence of eNOS mainly in the residual ovary (ROV) duringthe periovulatory period. In luteinized ovaries, higher concentrationsof eNOS were seen in CL, while those in the ROV at this stagewere lower than in the periovulatory ovary. Immature ovariescontained diminutive amounts of eNOS, detectable mostly in theROV compartment. In contrast, iNOS was barely detectable duringfollicular development to the preovulatory stage. A slight elevationof iNOS was observed in the granulosa cells at 6 h after theHCG injection. The levels of iNOS during the luteal phase werealso low. Immunohistochemical analysis using polyclonal eNOSand iNOS antibodies revealed the localization of these two isoformsprimarily in the S and the T of the periovulatory ovary. Inluteinized ovaries, positive immunoreactivity was also seenwithin the CL. With a monoclonal antibody against eNOS, intenseimmunoreactivity was observed in the S, T and within CL. Therewas a particularly strong staining in blood vessels. These datademonstrate the presence of an intraovarian NO-generating system.The localization of this system to the S, T and CL suggestsa role for NO in the ovulatory process and in the regulationof CL function.