悦宁定治疗肾性高血压的研究

目的：探讨悦宁定（马来酸依那普利，MSD）治疗肾性高血压的作用。方法：测定46名肾性高血压患者口服悦宁定前后的血压、心肾功能、蛋白尿并予以评价。结果：口服悦宁定后，高血压的症状逐渐缓解或消失，血压由24．7±1．8／14．6±1．3kPa降到17．9±1．5／11．2±1．4kPa，血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、24h尿蛋白排泄量、分别由17．8±5．6mmol／L、428．3±158．5μmol／L、3．79±0．51g／L，降到11．5±4．9mmol／L、335．7±131．8μmol／L、1．18±0．32g／L（P＜0．01），心功能改善，E／A由＜1好转到＞1。GOT、GPT、ALP、LDH、血糖、胆固醇、三酸甘油脂无变化。结论：悦宁定是安全、高效，对肾脏和代谢无明显副作用的降压药物。     

双侧肾上腺髓性脂肪瘤手术1例报告

患者，女，60岁，因上腹部间歇性疼痛13年，于2005年12月8日收入我院。患者既往有高血压史6年，自服罗布麻片能将血压控制在140／90mmHg以下。3年前体检时曾行CT检查，提示：双侧肾上腺占位性病变，当时未予特殊处理。本次入院查体未发现阳性体征。尿17-酮类固醇：53．8μmol／24h，尿17-羟类固醇：     

盐酸氟桂利嗪对同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞株黏附分子表达的干预

目的：观察盐酸氟桂利嗪对同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞株黏附分子表达的影响。 方法：实验于2005-02／08在西京医院神经内科实验室完成。人脐静脉内皮株细胞培养，取第4—7代指数生长期细胞，接种到96孔板，24h细胞贴壁后换液，加入药物处理，随机分为正常对照组、同型半胱氨酸组及盐酸氟桂利嗪组3组，正常对照组，仅予空白RPMI-1640培养基培养24h；同型半胱氨酸组，分别加入终浓度为100μmol／L、200μmol／L、500μmol／L．1000μmol/L的同型半胱氨酸培养24h；盐酸氟桂利嗪组：加入终浓度为10μmmol／L盐酸氟桂利嗪及终浓度分别为100μmol／L、200μmol／L、500μmol／L、1000μmol／L的同型半胱氨酸，培养24h。以上每组各种浓度共8孔。用ELISA法检测各组不同培养条件下可溶性细胞间黏附分子1和可溶性血管细胞黏附因子1的吸光度值（波长490nm）。 结果：同型半胱氨酸组中随着培养液同型半胱氨酸浓度的增加可溶性细胞间黏附分子1的吸光度值从（0．143&;#177;0.013）增至（0．175&;#177;0．006），与对照组相比差异有显著性意义（P〈0．01）；可溶性血管黏附分子1从（0．112&;#177;0．008）增至（0．147&;#177;0．014）．与对照组相比差异有显著性意义（P〈0．01）；10μmmol／L的盐酸氟桂利嗪＋100μmol／L同型半胱氨酸组与相同浓度的同型半胱氨酸组相比吸光度值也减少．差异无显著性意义（P〉0．05）；10μmmol／L的盐酸氟桂利嗪＋200μmol／L、500μmol／L、1000μmol／L同型半胱氨酸组的吸光度均低于相同浓度的同型半胱氨酸组．差异有显著性意义（P〈0．01）；表明盐酸氟桂利嗪明显抑制同型半胱氨酸所诱导的可溶性细胞间黏附分子1和可溶性血管细胞黏附因子1的表达。 结论：盐酸氟桂利嗪能够减少同型半胱氨酸引起的人脐静脉内皮细胞株黏附分子的上调，可能对细胞具有保护作用。     

思南县0～10岁儿童5种金属元素参考范围的调查

目的了解思南地区0～10岁儿童末梢全血中铜（Cu）、锌（Zn）、钙（Ca）、镁（Mg）、铁（Fe）5种金属元素的含量,确定其临床参考范围,为临床提供理论依据。方法采用原子吸收光谱法,采集儿童末梢血40μL加入专用稀释液中进行稀释,测定其中的Cu、Zn、Ca、Mg、Fe含量。结果检测0～10岁儿童964例,按照不同年龄特征将其分为5个组,以^-x1.96s作为参考范围,其结果分别是〈28d：Cu（13．80±7．94）μmol／L,Zn（73．72±38．59）μmol／L,Ca（1．32±0．63）mmol／L,Mg（1．56±0．59）mmol／L,Fe（10．48±5．15）mmol／L;～1岁：Cu（17．48±9．35）μmol／L,Zn（99±44．98）μmol／L,Ca（1．84±0．45）mmol／L,Mg（1．55±0．41）mmol／L,Fe（7．19±2．49）mmol／L;～3岁：Cu（17．43±8．64）μmol／L,Zn（100±41．24）μmol／L,Ca（1．78±0．51）mmol／L,Mg（1．59±0．43）mmol／L,Fe（7．67±2．19）mmol／L;～6岁：Cu（18．15±7．51）μmol／L,Zn（112．20±43．53）μmol／L,Ca（1．85±0．53）mmol／L,Mg（1．65±0．43）mmol／L,Fe（8．15±2．12）mmol／L;～10岁：Cu（15．60±5．70）μmol／L,Zn（120．67±45．92）μmol／L,Ca（1．73±0．49）mmol／L,Mg（1．60±0．39）mmol／L,Fe（8．17±1．98）mmol／L。各年龄组及各组男女之间检测结果经统计分析处理,P〉0．05,差异无统计学意义。结论以上调查结果作为临床参考范围,结果准确可靠,污染少,稳定性好,适宜0～10岁儿童。原子吸收光谱法简便快捷,标本易采集,用血量少,具有临床推广使用价值。该参考值范围仅供思南地区0～10岁儿童参考。     

大鼠海马内去整合蛋白和金属蛋白水解酶10和17基因的表达

目的：观察大鼠海马内去整合蛋白和金属蛋白水解酶10和17基因表达的改变。方法：实验于2004-09／2005-06在中南大学湘雅医院神经病学实验室（实验室B级）完成。选择青龄（2月龄）健康雌性SD大鼠10只，老龄（20月龄）健康雌性SD大鼠10只。①反转录反应：反应体系20μL，取5μg（2μL）总RNA，加1g／L Oligo（dT）18 0．5μL，焦碳酸二乙酯处理过的水8．5μL，70℃保持5min，然后冰上骤冷30s，短暂离心3～5s，再加5&;#215;反转录buffer 4μL，10mmol／L dNTPMix 2μL，4U／μl Rnasin 0．5μL，焦碳酸二乙酯处理过的水1．5μL，轻轻混匀、离心3～5s，37℃保持5min，最后加200U／μL M-ulv反转录酶1μL，42℃保持1h，70℃保持10min变性，冰上冷却10min，反转录产物（cDNA）于-20℃保存备用。②聚合酶链反应：总反应体系25μL，包括10x聚合酶链反应buffer 2．5μL，25mmol／L氯化镁1．5μL，10mmol／L dNTP 1μL,2U／μL Taq酶0．5μL，上述反转录产物cDNA 2μL，50μmol／L上游目的引物0．5μL，50μmol／L下游目的引物0．5μL,ddH2O 16．5μL。各程序均采用95℃5min预变性，94℃，45s、退火温度30s，72℃ 1 min进行32个循环，最后72℃延伸10min。退火温度，去整合蛋白和金属蛋白水解酶10：62．3℃；去整合蛋白和金属蛋白水解酶17：50．2℃；肌动蛋白：46℃。取聚合酶链反应产物5μL于15g／L琼脂糖凝胶电泳，然后在凝胶图像处理系统上扫描，测定各目的基因和肌动蛋白扩增产物的吸光度值，分别计算其比值，即目的基因值：目的基因吸光度值／肌动蛋白吸光度值。结果：纳入动物20只，均进入结果分析。①老龄大鼠去整合蛋白和金属蛋白水解酶10的表达水平（1．2170&;#177;0．4308）低于青龄大鼠（1．5050&;#177;0.4958），但两组比较差异无显著性（t=1．239，P〉0．05）。②老龄大鼠去整合蛋白和金属蛋白水解酶17的表达水平（1．5720&;#177;0．5670）高于青龄大鼠（0．9740&;#177;0．3281），但两组比较差异无显著性（t=-1．476，P〉0．05）。结论：去整合蛋白和金属蛋白水解酶10和17的基因表达水平可能不是老龄人易发阿尔茨海默病的生物学基础。     

稀土化合物氯化镧对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞分泌-一氧化氮的影响

目的探讨氯化镧（LaCl3）由对脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激小鼠巨噬细胞（RAW264．7）分泌一氧化氮（nitric oxide，N01的影响。方法RAW 264．7细胞随机分成四组：空白对照组（培养基中不含LaCl3和LPS），氯化镧组（含LaCk2．5，5，10，20μmol／L培养24h）、氯化镧＋LPS组（分别以含LaCl3 2．5、5、10、20μmol／L的培养基培养24h后．更换含LPS 1mg／L的培养基继续培养24h）及LPS组（含LPS 1mg／L的培养基培养24h）。采用硝酸还原酶法测定各组细胞培养液上清一氧化氮（NO）的含量。结果LPS组培养上清NO浓度为52．82±12．60μmol／L与空白对照组（2．90±2．36μmol／L）和LaCl3组[（6．50±4．67μmol／L、9．52±4．47μmol／L、11．14±7．42μmol／L、6．74±2．00μmol／L]比较有显著性差异（P〈0．05）；LaCl3＋LPS组NO的浓度分别为26．00±5．83μmol/L（2．5μmol／L LaCl3＋LPS）、29．86±7．26μmol／L（5μmol／L LaCl3＋LPS）、34．62±6．24μmol／L （10μmol／L LaCl3＋LPS），与LPS组相比显著减少（P〈0．05），20μmol／L LaCl3＋LPS）组NO的产生为45．61±6．68μmol／L与LPS组比较无显著性差异。结论一定浓度的LaCl3可抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞产生NO的水平。     

人参皂苷Rg1．对淀粉样β蛋白诱导大鼠海马神经元损伤的保护

目的：观察人参皂苷Rg1对淀粉样β蛋白25-35诱导的海马神经元细胞损伤是否具有保护作用，并分析其作用机制。 方法：实验于2004-03／2005-03在广州中医药大学临床药理研究所DME中心完成。①取新生24h清洁级SD大鼠，无菌环境下取出海马组织进行贴壁培养并以B27无血清培养基添加剂抑制非神经元细胞的生长。②海马神经元形态及细胞活力观察：细胞培养7d至分化成熟状态，然后被随机分为3组：人参皂苷Rg1预处理组（分为1，2,4，8，16μmol／L5个浓度组）。首先每加入各浓度的Rg1（中国药品生物制品检定所提供，批号：0703—200221）预作用24h后，再加入40μmoL／L淀粉样β蛋白25～35共孵育24h；模型组：每孔加入40μmol／L淀粉样β蛋白25-35作用24h；空白组：正常细胞培养用液；每组均为8孔。运用倒置显微镜进行海马神经元形态学观察，四甲基偶氮唑盐比色法法检澍细胞活力。即吸光度（A值），该值越高说明细胞活力越强。⑨检测核因子κB活性：调整细胞悬液密度为2&;#215;10^8L^-1，接种于6孔板（内置已用多聚赖氨酸包被的盖玻片），1mL／孔。随机分为5组（3孔／组）：正常组，模型组，2，4，8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组。细胞培养7d后，2，4，8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组加终浓度为2，4，8μmol／L的人参皂甙Rg1预作用24h后，与模型组一起加40μmol／L淀粉样β蛋白，作用24h。激光共聚焦显微镜检测核因子κB在细胞内的激活程度，以图像分析仪计算核区荧光与胞浆区荧光比值，比值越高说明核因子κB活性越高。④计量结果差异比较采用单因素方差分析。 结果：①神经元细胞形态：相差显微镜下可见人参皂甙Rg1预处理组细胞损伤相对较模型组轻，但较正常组严重。②海马神经元细胞活力：正常组和2，4μmol／L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组（P〈0．05），以4μmol／L人参皂甙Rg1预处理组最高；1，8，16μmol／L人参皂甙Rg1预处理组虽然也高于模型组，但差异不明显（P〉0．05）。⑧神经元细胞核因子κB活性：正常组和2，4，8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组明显高于模型组（P〈0．01），以4μmol/L人参皂甙Rg1预处理组最高；4,8μmol／L人参皂甙Rg1预处理组明显高于正常组（P〈0.01）。 结论：人参皂甙Rg1对淀粉样β蛋白25-35诱导的大鼠海马神经元损伤具有保护作用，尤以4μmol／L人参皂甙Rg1作用效果最明显。核因子κB信号通路可能是人参皂甙Rg1对抗淀粉样β蛋白25～35细胞毒性作用的重要途径之一。     

同型半胱氨酸致脑微血管内皮细胞损伤及丙丁酚拮抗作用的浓度依赖性

目的：观察同型半胱氨酸对大鼠脑微血管内皮细胞的损伤及抗氧化药物丙丁酚的拮抗作用，并观察这种拮抗作用是否有浓度依赖性。 方法：实验于2004-04／10在广西壮族自治区人民医院实验中心完成。取Wistar大鼠2只，用酶溶液消化大鼠脑皮质组织制成细胞悬液再进行培养传代。①经过鉴定的大鼠脑微血管内皮细胞分为损伤组和正常对照组，正常对照组加入无血清1640培养液；损伤组分别加入用无血清的培养液配制的浓度为0．1，0．5，1．0，1．5，2．0mmol／L的同型半胱氨酸，两个组孵育2，4，6，8，10h后计算血管内皮细胞损伤的指标乳酸脱氢酶释放率。②另将细胞分为3组，正常对照组换用无血清1640培养液孵育8h；损伤组加入1．0mmol几同型半胱氨酸孵育8h：干预组分别加入终浓度为10，20，30，40，50μmol／L的丙丁酚各孵育30min后再加入1．0mmol／L同型半胱氨酸孵育8h，然后计算乳酸脱氢酶释放率。⑧将细胞分为3组：正常对照组RPMI-1640培养基常规培养；损伤组：RPMI-1640培养基＋同型半胱氨酸1．0mmol／L进行培养；干预组：RPMI．1640培养基＋丙丁酚50μmol／L30min后再加入同型半胱氨酸1．0mmol／L进行培养。一共观察7d，并画出细胞生长曲线。 结果：①同型半胱氨酸在浓度1．0mmol／L孵育时间8h时乳酸脱氢酶释放率最高，显著高于对照组[（49．06&;#177;1．07）％，（19．6&;#177;2．04）％，P〈0．011。②丙丁酚在10，20，30，40，50μmol／L时乳酸脱氢酶释放率为（45．57&;#177;1.31）%，（41．17&;#177;1．25）％，（37．9&;#177;0．69）％，（32．57&;#177;9．47）％，（26.26&;#177;2.34）%，与损伤组相比差异显著[（49．03&;#177;1．12）％，P〈0．05]，且丙丁酚浓度越高，乳酸脱氢酶释放率越低。③细胞存活数：损伤组低于干预组和对照组（P〈0．01），后两组间无差异（P〉0．05）。 结论：同型半胱氨酸对大鼠脑微血管内皮细胞有毒性损伤作用，丙丁酚10～50μmol／L呈剂量依赖性拮抗作用同型半胱氨酸所致大鼠脑微血管内皮细胞损伤。     

大鼠脑组织缺血再灌注后促红细胞生成素对神经元的保护

目的：观察促红细胞生成素对缺血再灌注大鼠脑组织海马CA1区神经元数量、凋亡细胞数量变化、脑组织匀浆一氧化氮含量、丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性改变的影响。方法：实验于2003-03／2004-12在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室完成。选择健康Wistar大鼠66只，随机分为正常对照组6只，缺血再灌注生理盐水组30只(生理盐水对照组)，缺血再灌注促红细胞生成素组30只(促红细胞生成素治疗组)。除正常对照组线栓法制备大鼠大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型，缺血2h后再灌注。促红细胞生成素组于再灌注开始时经腹腔按2000U／kg注入生理盐水稀释的重组人红细胞生成素(200U／mL)，生理盐水对照组经腹腔注入等量的生理盐水。再灌注后观察时相点为2．6，12，24，48h，每个时间点6只。应用苏木精-伊红染色观察脑海马CA1区细胞数量情况，应用末端脱氧核苷酸转移酶缺口标记法检测海马CA1区神经元凋亡情况，应用硝酸还原酶法测定脑组织一氧化氮含量，羟胺法测定脑组织超氧化物歧化酶活性，硫代巴比妥酸法测定脑组织中丙二醛含量。结果：66只大鼠全部进入结果分析。①脑海马CA1区细胞计数：促红细胞生成素治疗组再灌注后12，24，48h比生理盐水对照组细胞数明显增加[(286.7&;#177;33.8)，(268.6&;#177;44.5)个／视野；(271．9&;#177;30．4)．(240．8&;#177;22，5)个／视野：(258，3&;#177;29．5)，(2018&;#177;307)个／视野；(t=3.189～5.589，P&;lt;0.01)]。②脑海马CA1区凋亡细胞计数：促红细胞生成素治疗组再灌注后6，12，24，48h比生理盐水对照组阳性细胞数明显减少[(21.5&;#177;5.8)，(28．4&;#177;6．51个／视野：(327&;#177;4．6)，(48.8&;#177;7.6)个／视野；(42.8&;#177;6.6)，(60．7&;#177;10.2)个／视野；(51.8&;#177;9.5)个／视野，(81.6&;#177;12．3)个／视野，(t=3.457～6.347,P&;lt;0.01)1。③脑组织一氧化氮含量：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6．12，24，48h比生理盐水对照组一氧化氮含量明显降低[(48．2&;#177;5．1)，(59，4&;#177;5．5)mmol／L;(51．4&;#177;6，3)，(66，3&;#177;98)mmol／L：(59．7&;#177;6．6)，(80.7&;#177;10.2)mmol／L；(55．7&;#177;8．1)，(77．8&;#177;9.2)mmol／L：(49.3&;#177;6．7)，[67．3&;#177;7，1)mmol／L，(t=3．258～5，624，P&;lt;0．01)]。④脑组织超氧化物歧化酶活性：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组超氧化物歧化酶活性明显增高[(3.78&;#177;0.74)，(3.21&;#177;0．31)μkat／L；(3．41&;#177;0.43)，(2．92&;#177;0.31)μkat／L；(3．21&;#177;0．35)，(2．51&;#177;0．27)μkat／L；(3．64&;#177;0．55)，(3.01&;#177;0.32)μkat／L；(4．10&;#177;0.56)，(3.55&;#177;0.41)μkat／L，(t=3．485～6，457，P&;lt;0．01)]。⑤脑组织丙二醛含量：促红细胞生成素治疗组再灌注后2，6，12，24，48h比生理盐水对照组丙二醛含量明显降低[(40.7&;#177;4．4)，(54.6&;#177;6．7)μmol／L；(51.3&;#177;5.4)，(65.7&;#177;8．8)μmol／L；(61.7&;#177;7．2)，(77.4&;#177;7.5)μmol／L；(53.8&;#177;6．4)，(67．8&;#177;9.1)μmol／L；(39．7&;#177;4．0)，(53．3&;#177;4.9)μmol／L，(t=3.541～6.045，P&;lt;0．01)]。结论：促红细胞生成素可增加大鼠局灶性脑缺血再灌注组织海马cAl区细胞存活数量，对海马CA1区细胞凋亡具有阻抑作用，降低一氧化氮生成量，使脂质过氧化反应的程度减轻，起到了对神经细胞的保护作用。     

氯胺酮对N-甲基-D-天冬氨酸诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞损伤的作用

背景：氯胺酮是临床常用的静脉全麻药，静脉或硬脊膜外腔用药都有镇痛作用，它是N-甲基-D-天冬氨酸受体非竞争性拮抗剂，可拮抗兴奋性氨基酸的毒性作用。 目的：观察氯胺酮对N-甲基-D-天冬氨酸受体过度激活诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞凋亡的影响，探讨其可能的作用机制。 设计：随机对照观察。 单位：郧阳医学院附属太和医院麻醉科。 材料：实验于2003-09／2005-01在郧阳医学院基础医学研究所细胞生物学实验室完成。由武汉大学动物实验中心提供新生两三天Wistar大鼠。 方法：取Wistar大鼠T11～L6脊髓背角星形胶质细胞原代纯化培养。胶质纤维酸性蛋白鉴定星形胶质细胞纯度达98％后用于实验。将培养细胞24孔板随机分为6组（每组9份）：①对照组加Hanks液50μL。（爹N-甲基-D-天冬氨酸组加药浓度为100μmol／L。（爹氯胺酮组加药浓度为1mmol／L。④100μmol／L N-甲基-D-天冬氨酸＋0．1mmol／L氯胺酮组。⑤100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋0．5mmol／L氯胺酮组。⑥100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋1mmol／L氯胺酮组。1mmol几氯胺酮为临床镇痛剂量。培养24h后检测超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量，免疫细胞化学观察Bcl-2蛋白和形态学变化，流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率。 主要观察指标：①Bcl-2蛋白免疫组织化学苏木精-伊红复染细胞着色及形态学变化。②流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率。③丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性变化。 结果：①Bcl-2平均吸光度值似）作为半定量测量Bcl-2蛋白表达水平：100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸组低于对照组，差异显著[分别为0．0544&;#177;．021，0．108&;#177;0．039，P〈0．01]，100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋1mmol／L氯胺酮组高于100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸组，差异显著[分别为0．148&;#177;0．045，0．054&;#177;0．021，P〈0．01]。②流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率：100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸组高于对照组，差异显著[分别为（25．26&;#177;6．13）％，（5．66&;#177;2．24）％，P〈0．01]，100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋1mmol／L氯胺酮组低于100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸组，差异显著[分别为（24．41&;#177;4．82）％，（25．26&;#177;6．13）％，P〈0．01]。③丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性变化：100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸使星形胶质细胞内丙二醛含量显著升高，而超氧化物歧化酶活性明显降低；1mmol／L氯胺酮明显降低丙二醛含量，显著增强超氧化物歧化酶活性，该效应在临床镇痛剂量以内有明显量效关系，与N-甲基-D-天冬氨酸组相比差异显著（P〈0．01）。1mmol／L氯胺酮组与对照组相比、100μmol／LN-甲基-D-天冬氨酸＋0．1mmol/L几氯胺酮组与N-甲基-D。天冬氨酸组相比差异均无显著性。 结论：N-甲基-D-天冬氨酸受体过度激活可诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞大量凋亡，适量氯胺酮显著抑制细胞凋亡，其机制可能增强星形胶质细胞Bcl-2蛋白表达，同时抑制自由基的产生和增强超氧化物歧化酶活性。     

稀土化合物氯化镧对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞分泌-一氧化氮的影响

目的探讨氯化镧（LaCl3）由对脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激小鼠巨噬细胞（RAW264．7）分泌一氧化氮（nitric oxide，N01的影响。方法RAW 264．7细胞随机分成四组：空白对照组（培养基中不含LaCl3和LPS），氯化镧组（含LaCk2．5，5，10，20μmol／L培养24h）、氯化镧＋LPS组（分别以含LaCl3 2．5、5、10、20μmol／L的培养基培养24h后．更换含LPS 1mg／L的培养基继续培养24h）及LPS组（含LPS 1mg／L的培养基培养24h）。采用硝酸还原酶法测定各组细胞培养液上清一氧化氮（NO）的含量。结果LPS组培养上清NO浓度为52．82±12．60μmol／L与空白对照组（2．90±2．36μmol／L）和LaCl3组[（6．50±4．67μmol／L、9．52±4．47μmol／L、11．14±7．42μmol／L、6．74±2．00μmol／L]比较有显著性差异（P〈0．05）；LaCl3＋LPS组NO的浓度分别为26．00±5．83μmol/L（2．5μmol／L LaCl3＋LPS）、29．86±7．26μmol／L（5μmol／L LaCl3＋LPS）、34．62±6．24μmol／L （10μmol／L LaCl3＋LPS），与LPS组相比显著减少（P〈0．05），20μmol／L LaCl3＋LPS）组NO的产生为45．61±6．68μmol／L与LPS组比较无显著性差异。结论一定浓度的LaCl3可抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞产生NO的水平。     

补充铬对Ⅱ型糖尿病患者血糖和胰岛素变化的影响

铬是正常糖代谢和脂代谢必需的营养物质。长期以来,人们认为铬与糖尿病的发病机制有关。然而,以前关于在非胰岛素依赖性糖尿病（NIDDM）患者补充铭来改善糖控制的效果的研究并没有得到相应的结果。本文作者在180例NID－DM患者中观察了补充铬对血糖控制的影响。将这180例患者随机地分成三组,一组为安慰剂组,一组每天补充两次,每次19．2μmol（1000μg）铬,一组每天补充两次,每次9.6μmol（500μg）铬。这些患者继续服用他们平时所用的药物,并且也不改变饮食和生活习惯。2个月以后,在每天接受19．2μmol（1000μg）铬的那组患者,HbAlc位明显改善,并且在4个月以后低于另一组补充铬的患者（安慰组HbAlc为8．5％±0．2％;9．6μmol铬组为75％±0．2％;19．2μmol铬组为6．6％±0.1％）。2和4个月以后19．2μmol组的空腹血葡萄糖也最低（4个月时的位：安慰组8．8±0．3mmol／L,19．2μmol铬组7.1±0.2mmol／L）,并且该组的餐后2h血葡萄糖值也明显降低（4个月时的值;安慰组12．3±0．4mmol／L,19．2μmol格组10．5±0．2mmol／L）。在2和4个月后,在补充钻的两组中空腹和餐后2h血清胰岛素值明显降低,在每天刊、充19.2μmol铬的那组,4个月以后血浆总胆固醇也降低。这些结果表明补铬对巨型糖     

尿石症临床分析与防治

目的：了解尿石症流行变化情况。方法：对1998—2006年尿石症住院患者3500例进行分析。结果：本组中，肾结石969例（27．7％）、输尿管结石1462例（41．7％）、膀胱结石638例（18．2％）、尿道结石431例（12．3％）。上、下尿路结石的比例为2．17：1。结石成分分析结果：草酸钙20％。草酸钙＋磷酸钙占43．2％，磷酸钙15．8％，草酸钙＋磷酸钙＋尿酸盐7．8％。尿酸4．3％，磷酸铵镁＋碳酸磷灰石5．4％。胱氨酸3．5％。高钙尿患者278例（23．0％）、高钙血症314例（26．0％）；低血钙（〈2．03mmol／L）41例（3．3％）。血尿酸测定2005例。高尿酸血症（〉400μmol／L）657例（32．7％）；低尿酸血症（〈180μmol／L）182例（9．0％）。结论：本组尿石症患者以上尿路结石为主，含钙结石仍占绝大多数。     

类风湿关节炎滑膜细胞凋亡过程中白藜芦醇的诱导作用及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的活化

目的 探讨来自植物中的天然活性成分白藜芦醇诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡过程中，凋亡执行因子天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的活化状态及其参与作用，并分析其浓度与时间作用。方法：实验于2003-05／10在中南大学湘雅二医院中心实验室完成。人类风湿关节炎滑膜组织取自中南大学湘雅二医院骨科2003-05诊治的1例男性50岁患者。①将手术切取的滑膜组织，剔除脂肪及纤维组织后经清洗、剪碎、消化、离心、培养、传代、获得3-5代细胞，电子显微镜观察滑膜细胞生长过程中的形态变化。②将细胞分为3组，对照组(未用药处理的滑膜细胞)；白藜芦醇组(50，100，200，400μmol／L白藜芦醇处理12h的细胞及用200μmol／L白藜芦醇处理4，8，12，18，24h的细胞)；天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3抑制剂+白藜芦醇组(先用1mmol几天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3抑制剂预处理2h，再用白藜芦醇处理的滑膜细胞)，各组均设3复管。③比色法测定用200μmol/L白藜芦醇处理后的类风湿关节炎滑膜细胞的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的相对活性；不同浓度的白藜芦醇处理12h后的类风湿关节炎滑膜细胞的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的相对活性。④采用Western-blot分析不同浓度白藜芦醇处理24h的类风湿关节炎滑膜细胞，天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3酶原的裂解。⑤实验设计为分组匹配对照。结果：①滑膜细胞培养过程中形态学改变：组织块贴壁后三四天，周边有少量滑膜细胞游走爬出。细胞呈多边形或长梭形，有两个或多个突起。培养7d左右，细胞数目增多，逐渐融合。得到第1代滑膜细胞。传代2次以上的滑膜细胞性状稳定，细胞形态以成纤维样细胞为主。②用200μmol／L白藜芦醇分别处理类风湿关节炎滑膜细胞4，8，12，18，24h．天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3活性于4h后明显升高，12h达高峰，持续至24h以上，白藜芦醇组不同处理时间与对照组比较，均显著增高(P&;lt;0．05)。③对照组及用50，100，200，400μmol／L白藜芦醇处理滑膜细胞12h，天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3活性分别为(1．00&;#177;0．07)、(1．80&;#177;0．17)、(1．96&;#177;0．18)、(2．45&;#177;0．17)、(3．25&;#177;0．24)，呈浓度依赖性的升高，白藜芦醇组不同浓度与对照组均显著增高(P&;lt;0．05)。④对照组及用50，100，200，400μmol／L处理培养的类风湿关节炎滑膜细胞24h，天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3酶原的表达随药物浓度的增加而减少，100μmol/L时开始出现活性裂解片断P11(Mr11000)，400μmol/L时P11增加。结论：①不同浓度的白藜芦醇处理类风湿关节炎滑膜细胞12h和200μmol／L白藜芦醇处理类风湿关节炎滑膜细胞时，天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的相对活性在4h开始升高，12h达高峰后缓慢下降，提示此现象具有浓度和时间的依赖性。②白藜芦醇浓度为400μmol／L时出现天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的活性裂解片断P11(Mr11000)吸光度积分值高于100μmol／L，证实了在白藜芦醇诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡过程中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3被活化，并发挥了作用。     

小儿重叠综合征1例报告

1病历报告男，7岁。不规则发热、水肿、血尿、剧烈腹痛20天。1周前颜面出现皮疹、消退后留有少许鳞片状脱皮及褐色色素沉着。头发稀疏，双侧颈淋巴结轻度肿大，两肺散在子鸣音。P120／min，BP22～28／12～16kPa。血常规：RBC3．44X1012／L，Hb70g／L，WBC51X109／L，N0．95，L0．05，BPC86X109／L。尿常规：红细胞满视野／HP，颗粒皆型1～2／HP，尿蛋白。血沉45mm／h，血胆固醇5．3mmol／L。血浆蛋白电泳分析：A27％，a12．19％，a213％，B19%，r22％。ASOSOOU。BUN36．4mmol／L，CO2CP17.5mmol／L。A／B：28／18。血钾…     

老龄与幼年犬体外冠状血管环对17β-雌二醇作用敏感性的比较

目的：观察17β-雌二醇对幼年犬和老龄犬的冠状动脉收缩作用的影响。方法：实验于2005—08／12在甘肃省心血管病研究所完成。①取雄性杂交幼年家犬（犬龄〈1岁）和老龄家犬（犬龄〉8岁）心脏。②血管环温育平衡后，向浴槽中累积加入KCl5-50mmol／L，建立量效曲线。用K-H液反复冲洗平衡后，并加入30μmol／L17β-雌二醇温育20min后，重新建立KCl量效曲线。血管环在无Ca^2＋K—H液中温育30min，先加入80mmol／LKCl，打开电压依赖性钙通道，10min后，加入累积浓度为1&;#215;10^-5，3．16&;#215;10^4，1&;#215;10^-4，3．16&;#215;10^-4，1&;#215;10^-3，3．16&;#215;10^4和1&;#215;10^-2mol／L的CaCl2，观察30μLmol／L17β-雌二醇对CaCl2量效曲线的影响。③血管环稳定后，向浴槽中加入50mmol／LKCl，待血管环收缩张力达峰值后，用K-H液冲洗。20min换液一次，平衡30min后重复上述实验，待血管环张力达高峰并稳定后，分别加入17β-雌二醇，累积浓度分别为1，4，8，40和80μmol／L，观察血管环张力变化。观察去除内皮细胞后，17β一雌二醇在这2种血管环上舒血管作用的变化。比较17β-雌二醇对KCl50mmol／L预收缩在这两种血管平滑肌上的舒张作用的差异，并随时记录张力的变化值。④用线性回归法计算17β-雌二醇使激动剂效应降低50％时所采用的拮抗剂的浓度。计算量效曲线实验中KCl和CaCl2的激动剂产生其50％最大效应所需摩尔浓度的负对数值。结果：①5-50mmol／LKCl可诱发冠状动脉血管环产生明显的量效收缩作用。加入累积浓度为3．16&;#215;10^-5～1&;#215;10^-2mol／L的CaCl2后，动脉环产生明显的剂量依赖性收缩（尤其是3．16&;#215;10^-4～l&;#215;10^-2mol／L]。17β-雌二醇（30μcmol／L）分别使KCl，CaCl2量效曲线明显右移，使血管环对KCl和CaCl22种血管激动剂的敏感性和最大收缩反应明显降低（P〈0．05～0．01），且降低程度存在明显差异（P〈0．01）。②17β-雌二醇均可使50mmol／LKCl预收缩冠状动脉血管环产生剂量依赖性舒张作用，幼年犬和老龄犬使激动剂效应降低50％时所采用的拮抗剂的浓度值分别为（16．37&;#177;5．19）μmol／L和（28．47&;#177;8．26）μmol／L，差异明显（P〈0．01）。去除内皮细胞后，17β-雌二醇对50mmol／LKCl预收缩动脉血管环产生的舒张作用有明显改变（P〈0．05-0．01），但老龄犬内皮细胞的舒张份额远大于幼年犬，分别为36％和22％（P〈0.01）。结论：老龄犬冠状动脉血管环对雌激素的敏感性远低于幼年犬，电压依赖性钙通道明显老化。     

Sysmex系列血细胞分析仪所用试剂的研制与应用

日本生产的Sysmex系列血细胞分析仪所用的稀释液和溶血剂与清洗液，价格非常昂贵。作者研制的上述三种试剂，价格很便宜，使用效果也很满意。每份标本所用的试剂成本比日本产的要降低35.2倍，而两者测定结果又完全相同，现报告如下。1材料与方法1．1仪器日本SysmexF－820血细胞分析仪．1．2试剂①稀释液。109．15mmol／NaCl，16．17mmol／LH3BO3，786.5μmol／LNa2B4O7，483.5μmol／LEDTA－Na2．②溶血剂：89．08mmol／LKCN，3．69mmol／LNa2Fe（CN）5NO，100ml／L乳化剂OP．③清洗液：128．3mmol／NaCl，0．629mmOI／LNa…     

血小板活化因子受体拮抗剂的神经保护作用

目的：探讨血小板活化因子(platelet-activating factor，PAF)所致的神经元损伤是否通过PAF受体而起作用，PAF受体拮抗剂对神经元损伤是否具有保护作用。方法：实验于2003-05／2004-05在南京大学医学院附属鼓楼医院神经科研究室和美国约翰霍普金斯大学Dr．Tao实验室完成。使用原代野生型小鼠皮质神经元细胞培养系统；不同剂量PAF处理神经元细胞24h，并经PAF拮抗剂5μmol／L BN52021预处理；碘化物／钙黄绿素染色检测细胞凋亡，MTT法测定神经元生存能力。结果：0．3和0．6μmol／L PAF明显增加神经元细胞死亡率，0.01和0．10μmol／L增加死亡率不明显；PAF受体拮抗剂5μmol／L BN52021明显地抑制0．3μmol／L PAF所致的神经毒性。结论：PAF介导的神经元损伤是通过其受体而作用的，PAF受体拮抗剂对神经元损伤具有保护作用。     

液体单试剂检测血氨方法的建立

目的配制液体单试剂，建立酶两点动力法测定血浆中血氨含量。方法在荷兰威图科学公司DPU-41型半自动生化仪和美国贝克曼公司CX5-CE型全自动生化仪上研究酶两点动力法，建立实验参数。结果试剂含量：三乙醇胺缓冲液（pH7．4）0．25mol／L，α-酮戊二酸15mmol／L，还原型辅酶0．3mmol／L，谷氨酸脱氢酶大于160U／L。该法最低检出限为1．9μmol／L，线性范围达321μmol／L（r=0．9961），批内CV=2．2％，批间CV=4．4％，平均回收率=99．3％，胆红素〈175．8μmol／L，血红蛋白〈3．4g／L，对测定结果无显著影响。结论本法灵敏度高，线性、精密度好，结果准确，胆红素、血红蛋白干扰小，操作简便，适用于全自动及半自动生化分析仪，可推广运用。     

用自动酶法检测血清和尿中肌酸含量

我这里介绍一个用自动酶法测定血和尿中肌酸含量的方法．该法不需预先处理标本，肌酸激酶（CK）和丙酮酸激酶（PK）作为辅酶，乳酸脱氨酶（LD）用作反应的指示剂。CK也被用作初始反应剂，现在的方法与Jaffe法相比，提高了精密度，血肌酸正常参考值：男13～74μmol／L.．女13～89μmol／L．24h尿肌酸；男175～70pμmol／L女150～1200μmol／L.1仪器Hitachi704自动分析仪(BoehringerMannheimMannheim,Germany)2试剂2.1试剂1甘氨酸－MgCl2缓冲液（0．25mol／L甘氨t，16uunol／LMPCI：．PHg．0）测血清中肌酸时，该皈加上ATP370mg…