PEDF对人晶状体上皮细胞生长调控的体内外研究

目的:探讨在体内及体外色素上皮衍生因子(PEDF)对人晶状体上皮细胞(LEC)生长的调节作用?方法:体内研究用ELISA法检测年龄相关性白内障患眼房水PEDF浓度,术中取前囊膜标本检测LEC密度,分析PEDF水平与LEC数量?白内障类型的关系;体外研究,加PEDF培养人晶状体上皮细胞株(HLE-B3),CCK8法检测细胞生长活性,流式细胞仪通过Annexin V-FITC/7-AAD双染法检测细胞周期和凋亡变化? 结果:120例白内障患眼房水PEDF浓度为(156.2 ± 41.2)ng/ml,中央区前囊下LEC密度随房水PEDF水平下降而降低(r = 0.556,P < 0.01),控制年龄因素后仍呈正相关(r = 0.387,P < 0.05),皮质型白内障房水PEDF浓度较核硬化型更低(P < 0.05);体外培养的LEC细胞株加入PEDF后,细胞生长明显加快(F = 187.33,P < 0.01),细胞凋亡被显著抑制,凋亡率从13.50%降为2.08%(t = 7.90,P < 0.01),细胞分裂活性增强,G2期 + S期细胞比例从28.54%升为54.05%(t = 6.32,P < 0.01)? 结论:人眼内PEDF可能作为LEC营养因子发挥细胞周期调控和抗凋亡的重要作用,参与晶状体生理性状维持和白内障发生发展?     

静脉注射后环丙沙星在人眼房水内的药物水平

 【目的】 研究人类血-眼屏障正常情况下环丙沙星在眼房水内的药物水平?【方法】 2006年8月至2007年2月在我院住院手术的老年性白内障病人45例(45眼),按2∶1随机分为实验组及对照组,实验组手术前1 h静脉注射环丙沙星(200 mg),两组术中取房水,用双缩脲法测定房水蛋白含量,反向高效液相色谱法测定房水环丙沙星浓度?【结果】 白内障病人房水蛋白含量是(0.067 ± 0.037)g/L,环丙沙星浓度是(0.172 ± 0.060)μg/mL?【结论】 老年性白内障病人血-房水屏障基本正常;血-眼屏障正常情况下,静脉注射环丙沙星房水中药物浓度不能达到大部分眼内致病菌90%菌株最小抑菌浓度,提示静脉注射环丙沙星不能单独作为白内障病人手术前预防性用药?     

增殖性糖尿病性视网膜病变玻璃体切割术前注射雷珠单抗对血清、房水血管内皮生长因子及色素上皮衍生因子表达的影响

[背景]观察增殖性糖尿病性视网膜病变(PDR)玻璃体切割术前注射雷珠单抗对血清、房水血管内皮生长因子(VEGF)及色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响.[病例报告]选择自2014年3月至2015年1月间收治的PDR患者70例(74眼),分为术前玻璃体腔未注射雷珠单抗组(A组,36例,38眼)及术前注射雷珠单抗组(B组,34例,36眼);另选择单纯性年龄相关性白内障患者作为对照组(C组,20例,20眼).采用ELISA法检测B组注射给药前、后及C组血清和房水VEGF,PEDF表达水平,比较A,B组临床疗效及B,C组VEGF,PEDF水平变化.B组注射给药前房水VEGF水平显著高于注射给药后(P<0.01),房水PEDF水平显著低于注射给药后(P<0.01).B组注射给药前血清VEGF,PEDF水平均显著高于C组(P<0.01),而与注射给药后比较差异均无统计学意义(P>0.05).[讨论]术前注射雷珠单抗可明显降低PDR患者房水中VEGF表达,提高PEDF表达,而对血清中VEGF,PEDF表达未见有明显影响,提示玻璃体切割术前行注射雷珠单抗治疗的局部疗效较好,安全性较高.     

2型糖尿病患者房水中VEGF及PEDF水平的研究

目的探讨2型糖尿病患者与健康人房水中血管内皮生长因子及视网膜色素上皮源性因子水平是否存在差异。方法糖尿病患者组39例39只眼,存在糖尿病性视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）患者18例18只眼,无DR患者21例21只眼,老年性白内障患者20例20只眼作为对照组。用酶联免疫吸附法检测房水中VEGF及PEDF的水平。结果在2型糖尿病组中存在DR及无DR患者房水中VEGF浓度分别为（1241．39±274．71）pg／ml及（1183．31±231．12）pg／ml,与对照组[（951．47±280．39）pg／m1]相比,差异有统计学意义（P=0．004,P=0．013）。对照组、DR组及无DR组患者PEDF浓度分别为（40．11±15．87）ng／ml、（50．13±46．73）ng／ml、（34．68±4．77）ng／ml,与对照组相比,无DR患者房水中PEDF浓度明显降低（P=0．042）。对照组、DR组及无DR组患者房水中VEGF／PEDF分别为26．15±11．92、32．41±12．11、34．58±7．97,与对照组相比,其余两组患者房水中VEGF／PEDF明显升高（P=0．038;P=0．002）。结论糖尿病患者房水中VEGF水平及VEGF／PEDF升高,提示2型糖尿病患者房水中VEGF与PEDF的失衡可能与糖尿病性视网膜病变的发生、发展有关。     

息肉状脉络膜血管病和脉络膜新生血管患者房水中血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子的表达水平

目的：研究活动性息肉状脉络膜血管病，（PCV）与继发于年龄相关性黄斑病变（AMD）和病理性近视的脉络膜新生血管（CNV）房水中血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）的表达水平。设计：前瞻性对照研究。方法：收集32例PCV或CNV患者32只眼的房水。其中11只眼为活动性症状性PCV，12只眼为继发于AMD的活动性CNV，9只眼为继发于病理性近视的活动性CNV。市售酶联免疫吸附检测试剂盒检测VEGF和PEDF水平。收集10例白内障手术无其他眼部和全身疾病患者的房水作为对照组。结果：PCV患者、继发于AMD的CNV的患者和继发于病理性近视的CNV的患者房水中VEGF的浓度较对照组显著增加（ANOVA，P〈0．001）。PCV患者房水中VEGF水平显著低于渗出性AMD的患者（P=0．045）。组间PEDF的表达水平明显不同（ANOVA，P=0．001），PCV患者、继发于AMD的CNV患者和继发于病理性近视CNV患者房水中PEDF水平增加。结论：活动性PCV患者房水中VEGF和PEDF共表达，并具有正相关和增高性。PCV和AMD患者中两因子表达水平的不同提示两者独特的临床表现或不同的血管发生过程。     

房水中IL-17、VEGF、TNF-α表达水平与先天性白内障摘除术后无晶状体眼青光眼的相关性

目的:探讨白细胞介素17(IL-17)、血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤坏死因子(TNF-α)在先天性白内障摘除术后无晶状体眼青光眼(AG)患儿房水的表达水平,并分析其与疾病进程的相关性.方法:150例先天性白内障摘除手术未植入人工晶状体患儿根据术后随访期内是否发生青光眼分为青光眼组(AG组,n=56例)和非青光眼组(非AG组,n=94例),比较两组随访期间房水中IL-17、VEGF、TNF-a表达水平和眼压情况.结果:术中,AG组和非AG组房水IL-17、VEGF、TNF-α水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);术后4个月、8个月和12个月,AG组房水IL-17、VEGF、TNF-α水平与术中比较明显升高,且高于对照组(P＜0.05);术后4个月、8个月和12个月,AG组眼压高于非AG组各时间点的眼压,差异有统计学意义(P＜0.05);Pearson相关性分析表明,AG组术后4个月、8个月和12个月房水IL-17、VEGF、TNF-α水平与眼压呈正相关(P＜0.05);受试者工作曲线(ROC)分析术后4个月房水IL-17、VEGF、TNF-α对无晶状体眼青光眼患者的诊断价值发现,IL-17、VEGF、TNF-α的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.714,0.708,0.724,三者联合检测的AUC值为0.792.结论:房水IL-17、VEGF和TNF-α可作为无晶状体眼青光眼的潜在的生物标志物.     

脉络膜新生血管患者房水中血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子的浓度

目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)在活动性脉络膜新生血管膜(CNV)患者房水中的表达。方法:应用酶联免疫吸附测定法对32例活动性CNV患者和10例白内障患者(对照组)的房水标本进行VEGF和PEDF检测。结果:CNV患者房水中的VEGF为(523.0±273.7)pg/m l,PEDF为(16.58.±13.11)ng/m l;对照组患者房水中的VEGF为(108.3±72.3)pg/m l,PEDF为(0.35±0.57)ng/m l。两组间的VEGF和PEDF均有显著性差异(均P=0.000)。结论:活动性CNV患者房水中VEGF和PEDF增高,可能与脉络膜新生血管的形成有关。     

原发性开角型青光眼房水蛋白含量的检测及其与中医证型关系的研究

目的：探讨原发性开角型青光眼患者眼房水蛋白含量的改变及其与中医辨证分型之间的关系。方法采用溴甲酚绿比色法对128例128只眼原发性开角型青光眼和64例64只眼老年性白内障患者的房水蛋白进行了测定。结果开角型青光眼疾病分类各组及中医证型(肝郁气滞证、痰湿犯目证、肝肾阴虚证)各组均表现为房水白蛋白和总蛋白含量增高,与老年性白内障组相比,各组均有非常显著性差异(P＜0.01)。开角型青光眼疾病分类组间比较及中医证型组间比较,房水白蛋白和总蛋白含量亦均有显著性差异(P＜0.05)或非常显著性差异(P＜0.01)。结论原发性开角型青光眼患者的血-房水屏障功能遭到破坏,房水的粘度增加,房水淤积于眼内。     

老年性白内障患者房水中钙离子变化的分析

为进一步研究皮质性和核性老年性白内障患者房水中Ca~(2 )的变化,以探讨白内障的发病机制,检测了30例老年性白内障患者血清及房水中Ca~(2 )的浓度。结果显示:皮质性及核性白内障患者血清中Ca~(2 )浓度分别为2.3620±0.0874mmol/L、2.3713±0.0767mmol/L,两者均无显著增高(均P>0.05);房水中Ca~(2 )浓度分别为1.3267±0.0902mmol/L和1.3927±0.0573mmol/L,两者有显著性差异(P<0.05)。提示:皮质性及核性白内障患者房水中Ca~(2 )浓度存在差异,这可能与晶状体上皮细胞状况有关,房水中Ca~(2 )浓度变化可间接反映晶状体内的病理生理变化。     

房水PAI-1与后房型人工晶体前纤维蛋白膜的关系

目的探讨房水微环境纤溶系统对后房型人工晶体IOL(posterior chamber IOL,PcIOL)前纤维蛋白膜形成的影响. 方法测定31例白内障患者术前房水中纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)含量,观察术眼术后PcIOL前纤维蛋白膜形成情况,根据术前患眼的病史,分为葡萄膜炎组、青光眼组及对照组并进行统计学分析. 结果术前有葡萄膜炎和青光眼病史的患眼术后PcIOL前纤维蛋白膜的发生率和术前房水中PAI-1含量均显著高于对照眼.白内障术后PcIOL前有纤维蛋白膜形成眼的术前房水中PAI-1含量(5 01±2.96ng/ml)显著高于术后无纤维蛋白膜眼(1.23±1.42ng/ml)(P＜0.05).青光眼组PcIOL前纤维蛋白膜形成眼术前房水PAI-1含量(5.95±2.42ng/ml)显著高于无纤维蛋白膜眼(1.64±0.91ng/m1)(P＜0.05). 结论房水纤溶系统的破坏可能与白内障术后PcIOL前纤维蛋白膜形成有关.     

甲型H1N1流感病毒在季流病毒、禽流感病毒共感染时变异可能性的验证

目的 甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009分别与A/Brisbane/10/07和A/ShenZhen/406H/06共感染小型香猪,预测甲流病毒在与季流H3N2病毒/甲流病毒与禽流感病毒共感染时是否会发生变异.方法 分别将A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)对5～6月龄小型猪共感染,小型猪经复方氯胺酮0.1 mL/kg麻醉后进行滴鼻感染,感染后第5天安乐死动物,取动物肺组织作病毒测序分析.结果 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2)共感染后,A/California/7/2009病毒PB1基因993位G→A突变,PA基因1659位G→A突变,没有氨基酸的变异.A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后A/California/7/2009病毒PB2基因1711位T→C突变.碱基的突变未引起氨基酸的变异.结论 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后在猪的体内没有发生病毒重组、变异.     

胰腺细胞缩胆囊素和胆碱能受体对细胞内Ca~2 的调节

本文使用Fura-2做为细胞内钙离子荧光指示剂,在大白鼠胰腺分离细胞观察缩胆囊素和乙酰胆碱对细胞内钙离子的影响及其相互作用.结果表明1nmol/L缩胆囊素和lmmol/L乙酰胆碱分别使细胞内钙离子浓度从基础水平的122±8nmol/L增高至360±32nmol/L和380±20nmol/L,半最大有效浓度分别为0.45nmol/L及54μmol/L。不同剂量的缩胆囊素和乙酰胆碱彼此不同程度抑制对方的作用,后加入的试剂提高细胞内钙离子浓度的幅度与先加入的试剂所引起的增加幅度成反比,加入各自相应的受体拮抗剂可使细胞恢复对另一激素(蛙皮素)刺激的反应。说明了缩胆囊素受体和胆碱能受体的相互调节影响细胞内钙离子的活动.加入受体拮抗剂后,细胞恢复反应过程中的时间动力学改变可能与受体阻滞后钙离子通道关闭的程度和时间有关.     

甲型H1N1流感病毒感染小鼠的发病机制

目的 甲型H1N1 流感病毒A/California/7/2009感染BALB/c小鼠,研究甲型H1N1流感病毒病毒性肺炎发病机制.方法 4～6 周龄雌性BALB/c 小鼠60只,随机分为2组,实验组和对照组,每组30只.CA7 流感病毒滴鼻制备甲流病毒感染小鼠模型.攻毒后第5天解剖实验和对照组小鼠,取肺组织,测定肺组织中IL-2,IL-6,TNF-α含量.结果 结果实验组肺组织中IL-6,TNF-α,水平明显高于对照组,IL-2水平明显低于对照组,差异均有显著性(P<0.05).结论 IL-6、TNF-α、IL-2这3种细胞因子在感染甲流病毒后的显著性变化与病毒感染后的肺组织病理损伤有密切的关系.     

A/California/7/2009与A/California/4/2009病毒感染力比较

目的甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009与A/California/4/2009病毒序列比较同源性在99%以上,本实验旨在比较两株病毒感染BALB/c小鼠研究感染力强弱。方法分别将A/California/7/2009(CA7)与A/California/4/2009(CA4)两株病毒分别连续10倍稀释后,对4~6周龄雌性BALB/c小鼠经乙醚麻醉后进行滴鼻攻毒,每个稀释度接种10只实验小鼠,测定CA7 MLD50为101.24/0.05 mL,检测小鼠感染、致病的多项指标,观察期为14 d。结果相同TCID50的CA7和CA4病毒感染小鼠,CA4感染小鼠后14 d内死亡率为20%,而CA7感染小鼠后8 d内死亡率为100%。CA7 106TCID50感染的小鼠病理表现为重度弥漫性间质性肺炎,CA4 106TCID50感染的小鼠病理表现为中度-重度间质性肺炎。结论在相同条件下,CA7感染力明显强于CA4。     

可手术胃癌血清HER-2/neu ECD水平与临床特征及疗效的研究

目的：探讨可手术胃癌患者血清HER-2/neu胞外域部分(ECD)水平与临床特征及疗效的关系。方法：收集江苏省连云港市第二人民医院2010年01月至2010年12月,可手术胃癌患者46例进入研究,术前、术后收集血清,同时获取15例正常人、22例胃良性病变患者血清为对照组。另外收集7例血清HER-2/neu ECD阳性患...     

镉对大鼠胚胎损害作用的实验研究

目的 :探讨镉对大鼠胚胎的毒性效应及可能机制。方法 :雌雄性 SD大鼠按 2∶ 1同笼交配获取 38只孕鼠 ,随机分为 4组 (对照组 ,低镉组 ,中镉组 ,高镉组 )。分别在妊第7、1 0、1 3天经腹腔注射生理盐水和不同剂量的氯化镉 ( Cd Cl2 ) ,妊 2 1 d,剖宫取胎鼠 ,活杀取出胎鼠的肝、脑组织称重后测定 Cd、Zn、Ach、AKP、DNA含量。结果 :1高镉组未见存活胎鼠 ;2染镉组胎鼠肝中镉增加 ( P<0 .0 5 ) ,脑中锌有下降趋势 ;3染镉组胎鼠肝组织中的AKP活性 ,脑组织中的 Ach、DNA含量较对照组减低。结论 :1高剂量的镉可使孕鼠胚胎发育异常 ;2母鼠染镉可致胎鼠肝中 AKP酶活性降低及脑组织中 Ach、DNA含量减少 ,抗脂质过氧化能力减弱。     

服镁后血镁钙及24小时尿钙和钙/肌酐比值变化

研究服镁后，血镁钙及24h尿钙和钙／肌酐比值变化及与妊高征发生的关系。方法：采用前瞻性随机双盲的方法，对治疗组52例（治疗1组24例和治疗2组28例）孕妇自孕28周起，连续服用葡萄糖酸镁，每日3g。结果：治疗组血钙明显高于对照组；治疗2组的尿钙和钙／肌酐明显高于对照2组，且妊高征发生率3．57％，明显低于对照2组（30．77％）；治疗组和对照组尿钙与钙／肌酐比值分别呈正相关关系。结论：服镁后，调节体内钙平衡，使妊高征发生率降低。     

动脉粥样硬化相关性疾病血清胆红素与血脂检测结果分析

目的:探讨血清胆红素浓度与四种动脉粥样硬化( AS)性疾病的关系。方法:观察组分为四组,单纯性高血压组、冠心病组、糖尿病组、脑梗死组,对照组为同年龄段健康查体者,检测空腹血清总胆红素、直接胆红素、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇,低密度脂蛋白胆固醇,计算间接胆红素,并对检测结果进行统计学分析。结果:与对照组比较,观察组中直接胆红素均有所下降,但差异无显著统计学意义( P>0 .0 5 ) ,总胆红素与间接胆红素除脑梗死组外,其他各组均明显降低( P<0 .0 5 ) ;除脑梗死组HDL - C与对照组无显著差异外,其他观察组血脂各指标与对照组比较均有显著统计学差异( P<0 .0 5 ) ,且糖尿病组三酰甘油及冠心病组低密度脂蛋白胆固醇与对照组比较有极显著统计学差异( P<0 .0 1 )。结论:高血压、冠心病、脑梗死、糖尿病等动脉粥样硬化相关性疾病血清胆红素浓度有不同程度降低,其中,间接胆红素降低更明显,提示可将胆红素水平作为AS患者体内氧化活性增加的一个临床监测指标     

赐百龄胶囊质量标准的实验研究

赐百龄胶囊系选用螺旋藻为原料直接精制而成。本研究采用吸收光谱法鉴别蓝藻蛋白，可见６２０ｎｍ的特征吸收峰。采用三氯化锑试管反应鉴别β－胡萝卜素，显蓝绿色。采用ＴＬＣ鉴别氨基酸，可显７个斑点。采用ＴＬＣ鉴别多糖水解液，可显３个斑点，其中２个斑点与葡萄糖、半乳糖对应．采用氨基酸分析仪测定游离、水解氨基酸，含丰富的人体必需的氨基酸，总量高达５５％以上。采用凯氏定氮法测定总氮量，提示蛋白质总量高达６０％以上。采用柱层析－ＵＶ法测定β－胡萝卜素，含量为４４ｍｇ％。     

青蒿琥酯静脉注射7天疗程治疗恶性疟疗效观察

青蒿琥酯注射剂治疗恶性疟以及凶险型疟疾的推荐剂量为3天疗程,总量240mg。该剂量具有速效、低毒的优点,但原虫复燃率高达50%左右.试用7天疗程,总量480mg方案治疗恶性疟40例,原虫复燃率降至5.6%,亦未见毒副反应。本文结果提示,适当延长青蒿琥酯注射剂的疗程和增加总剂量,可明显地降低疟原虫的复燃率;延长疗程、增加总剂量而不增加每天量,未见毒副作用出现。