环境对CBA/J小鼠免疫相关自然流产的影响

哺乳动物胎仔有父方和滋养层抗原,这些抗原常可导致母体产生细胞免疫和体液免疫。正常情况下机体的免疫调节有利于胎仔的存活。同种妊娠鼠子宫局部淋巴结和蜕膜中的非特异性抑制细胞在维持胎仔免受母体排斥中起关键作用。曾报导正常CBA/J雌鼠与DBA/2雄鼠交配,胎仔吸收率高,并缺乏这种抑制细胞。CBA/J雌鼠交配前预先用BALB/c雄鼠脾细胞免疫可消除胎仔吸收,但用DBA/2者则不能。母鼠对免疫用脾细胞的免疫应答是此种实验模型中妊娠成功的一个决定因素。但此动物模型另外一些特征指出,妊娠成功取决于多     

Bax/Bak siRNA对抑制小鼠早期胚胎凋亡的效应

目的:探讨Bax-小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和Bak-siRNA对小鼠胚胎发育及凋亡的效应。方法:通过对体外培养小鼠早期胚胎激光打孔,完成Bax-siRNA(Bax-siRNA组)、Bak-siRNA(Bak-siRNA组)和Bax-Bak-siRNA(Bax-Bak-siRNA联合组)的转染,并以阴性siRNA和纯水为阴性对照组和空白对照组,对确定转染效果的胚胎观察形态变化、生长发育状况及囊胚形成率,应用Hoechst 33342和碘化丙啶的方法分析各转染组小鼠早期胚胎细胞凋亡和增殖程度以及凋亡颗粒率。结果:鼠胚激光打孔后可成功转染Bax-siRNA、Bak-siRNA和Bax-Bak-siRNA。Bak-siRNA组和Bax-Bak-siRNA联合组鼠胚的囊胚形成率显著高于阴性对照组(P<0.01),而且凋亡颗粒率显著低于阴性对照组(P<0.01)。Bax-siRNA组的囊胚形成率和凋亡颗粒率与阴性对照组比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:Bak-siRNA和Bax-Bak-siRNA可以改善小鼠胚胎的囊胚形成率,减少胚胎细胞的凋亡。     

肿瘤转移抑制因子CD82/KAI1在假孕小鼠子宫的表达及其对小鼠胚胎着床的影响

目的:研究CD82/KAI1mRNA及蛋白在假孕d1-8小鼠子宫中的表达规律,以及CD82/KAI1抗体对小鼠胚胎体外发育及着床的影响。方法:用RT-PCR及免疫组织化学技术观察CD82/KAI1mRNA及蛋白在假孕小鼠子宫的表达规律。将8-细胞小鼠胚胎培养于含不同浓度CD82/KAI1抗体的培养液中,观察囊胚形成及脱透明带的情况。妊娠d4小鼠宫角注射CD82/KAI1抗体,于妊娠d8观察小鼠胚胎植入数量。结果:①CD82/KAI1mRNA在假孕d1-8小鼠子宫中均有表达,于d4、d5表达最丰富。CD82/KAI1蛋白在假孕d1-8的子宫基质细胞及腺上皮细胞均有表达,假孕d1-4腔上皮细胞无表达,假孕d5子宫腔上皮细胞出现弱阳性表达,从d6开始子宫腔上皮细胞表达逐渐增强。②一定浓度的CD82/KAI1抗体可明显抑制囊胚的形成率(1∶400,P<0.05)和脱带率(1∶800,P<0.05)。③宫角注射一定量的CD82抗体可以显著提高小鼠胚胎的着床数(8.35±0.17vs4.52±0.24,P<0.05)。结论:CD82/KAI1在妊娠小鼠子宫的表达是非胚胎依赖性的。CD82/KAI1在小鼠胚胎发育和着床过程中发挥重要作用。     

连续2次原因不明自然流产主动免疫治疗必要性的探讨

目的探讨应用淋巴细胞主动免疫治疗连续2次原因不明自然流产患者的必要性。方法将2003-2008年上海交通大学仁济医院145例连续2次原因不明流产患者作为研究对象(其中主动免疫组41例,非主动免疫组104例),对其妊娠结局进行回顾性分析。结果免疫组妊娠活产率82.9%(34/41),纠正活产率87.2%(34/39);非免疫组妊娠活产率85.6%(89/104),纠正活产率89.0%(89/100);两组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。两组间胎儿出生孕周及体重差异均无统计学意义(P>0.05)。结论连续2次原因不明自然流产患者,主动免疫治疗没有必要。     

过继转移FasL基因修饰的树突细胞对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响

目的:观察过继转移FasL基因修饰的树突细胞(DC)对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响,探讨它在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法:构建鼠源FasL(mFasL)真核表达载体pcDNA3.1-mFasL,用电转染法将它转染给DBA/2雄鼠骨髓来源的DC,将转染成功的mFasL-DC于交配前经腹腔注射给CBA/J母鼠。实验动物分为6组:(1)正常妊娠模型组(CBA/J×BALB/c);(2)未添加干预的流产模型组(CBA/J×DBA/2);(3)转输DC培养基(DCCM)的流产模型组;(4)转输单纯DC(DC)的流产模型组;(5)转输转染空质粒DC的流产模型组;(6)转输转染mFasL质粒DC的流产模型组,于妊娠第12~14天观察孕鼠胚胎丢失率。结果:转输mFasL-DC后孕鼠胚胎丢失率明显低于未添加干预或转输DC培养基的流产模型组(P<0.01),与转输单纯DC或带空质粒的DC组相比,其胚胎丢失率也明显下降(P<0.05),它与正常妊娠组相比胚胎丢失率无显著差异(P>0.05);转输单纯DC或空质粒的DC组与未添加干预流产模型组相比胚胎丢失率有所下降,但没有统计学差异;转输DC培养基组与未加干预组之间胚胎丢失率无统计学差异(P>0.05)。结论:过继转移mFasL-DC能诱导妊娠免疫耐受,降低小鼠自然流产模型孕鼠胚胎丢失率。     

内皮素受体A拮抗作用预防缺氧诱导的小鼠IUGR

妊娠期母体长期暴露于低氧环境可引起胎儿宫内发育迟缓(IUGR)。长期暴露于低氧环境可增强内皮素-1(ET-1)基因表达,使血ET-1水平升高,ET-1主要与受体ET_A结合发挥缩血管效应。为探讨ET在缺氧诱导IUGR中的关键作用,选择Sprague-Dawley雌性小鼠,实验及对照组各12只,于左颈静脉置管以6mg/kg/d分别注入生理盐水及ET_A拮抗剂ER139317;由右颈动脉插管至降主动脉,以采血样行血气分析。小鼠总孕期为22天,在妊娠第18天到第21天,将两组小鼠分别放在正常及低氧(氧含量14％)的实验环境中饲养,然后测小鼠体重,取血样行血气分析,切除子宫称胎鼠及胎盘重量,将获取     

促胃泌素释放肽(GRP)与小鼠自然流产的关系

目的:研究促胃泌素释放肽(gastrin-releasing peptide,GRP)与自然流产的关系,进一步探讨GRP在妊娠过程中所起的作用。方法:建立小鼠正常妊娠模型(对照组)和自然流产模型(实验组),于妊娠13.5 d计算胚胎吸收率;采用免疫组织化学法测定各组GRP的表达情况。结果:实验组孕鼠的胚胎吸收率明显高于对照组,差异显著(P<0.05)。实验组的GRP表达率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GRP参与正常妊娠过程,自然流产的发生可能与GRP的低表达有关。     

抗血栓素Ⅲ抑制精子顶体素活性及其对小鼠体外受精能力的影响

通过免疫转移吸附试验，我们检出精浆内有抗血栓素Ⅲ抗原的存在，含量约为血浆的百分之一，分子量约５７ｋＤ。体外实验证明，纯抗血栓素Ⅲ能抑制人、猪和小鼠精子顶体素活性，其中抑制猪顶体素的二级速率常数为Ｍ－１ｓ－１，这种抑制反应是通过在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上形成稳定的复合物而起作用的。小鼠体外受精试验表明，在培养基中加入抗血栓素Ⅲ能抑制精－卵结合和受精率。本研究提示，抗血栓素Ⅲ不仅存在于血凝过程中，而且还可能是生殖过程的调节因子。     

LAS对雄性小鼠及其子代生精功能毒性作用的研究

目的:探讨十二烷基苯磺酸钠(LAS)对雄性小鼠及其子代雄性小鼠生精功能的毒性作用。方法:将120只昆明种雄性小鼠随机分为4组,每组30只。实验A组:小鼠经灌胃方式染毒LAS(630mg/kg,1/2LD50),每天1次,连续8周后与正常雌鼠交配(交配比例1∶1)。实验B组:小鼠经灌胃方式染毒LAS,每天1次,连续8周,停止染毒4周后与正常雌鼠交配(交配比例1∶1)。两组交配后雄性小鼠即拉颈处死。实验A、B组的对照组分别为a、b组,以生理盐水灌胃后与正常雌鼠交配。4组所生子代雄性小鼠分别为A1、B1,a1、b1,养至6～8周后处死。比较各组小鼠的体重,睾丸重量,精子密度、活力及形态,睾丸的组织学结构和超微结构。结果:与对照组比较,实验组雄性小鼠及其子代雄性小鼠的精子密度、活率显著下降,畸形率显著升高;雄性小鼠精细小管内的各级精母细胞和精子细胞数量减少,生精细胞排列紊乱;精细小管内的间质细胞、支持细胞、精原细胞内线粒体出现不同程度嵴断裂,空泡样改变及髓样变,破坏广泛。停止染毒后4周,上述异常改变未见明显恢复。结论:LAS对雄性小鼠生精功能具有明显的毒性作用,且该毒性作用在停止染毒后的短时期内不能恢复。     

白血病抑制因子对体外培养小鼠早期胚胎发育的影响

目的：研究白血病抑制因子（ＬＩＦ）对胚胎发育的影响。方法：用小鼠的单细胞胚胎体外培养１２０ｈ,观察不同浓度的ＬＩＦ对早期胚胎发育的影响。结果：①０．１ｎｇ／ｍｌ、１ｎｇ／ｍｌ和１０ｎｇ／ｍｌ浓度的ＬＩＦ对小鼠早期胚胎的发育和胚泡的形成有促进作用,０．０１ｎｇ／ｍｌ和１００ｎｇ／ｍｌ浓度的ＬＩＦ对胚胎的发育无明显影响;②ＬＩＦ对小鼠早期胚胎发育的影响主要发生于桑椹胚和胚泡期,对１～８细胞期胚胎无明显影响。结论：适当浓度的ＬＩＦ可促进胚胎发育和胚泡形成。     

硒对妊高征的预防作用

硒对妊高征的预防作用翟桂荣吴连方黄醒华孔为民目前，妊高征（ＰＩＨ）仍是孕产期威胁母儿健康和生命的主要并发症，病因研究虽日益深入但仍未明了。有文献报道，ＰＩＨ孕妇血硒含量明显低于正常孕妇［１］。为探讨硒在预防ＰＩＨ中的作用，我们对我院２９５例有妊高征危...     

肿瘤转移抑制因子CD82/KAI1对植入前小鼠胚胎体外发育的影响

目的:研究CD82/KAI1mRNA及蛋白质在小鼠胚胎中的表达规律及其对小鼠胚胎体外发育的影响。方法:①应用RT-PCR及免疫荧光技术观察CD82/KAI1mRNA及蛋白质在小鼠不同发育时期胚胎中的表达规律。②在不同CD82/KAI1抗体浓度的培养液中,培养小鼠8-细胞胚胎,观察囊胚发育率、孵化率和胚胎细胞数的变化。结果:①CD82/KAI1mRNA在小鼠不同时期胚胎中均有表达,于8-细胞期及桑葚胚表达较丰富,CD82/KAI1蛋白表达于各期胚胎细胞的胞膜和胞浆,在桑葚胚期CD82蛋白还强表达于胚胎细胞的胞核。②一定浓度的CD82/KAI1抗体可明显抑制胚胎的发育速度(1∶800,P<0.05),降低囊胚的形成率(1∶400,P<0.05)和孵出率(1∶800,P<0.05),减少囊胚细胞数(1∶800,P<0.05)。结论:CD82/KAI1在小鼠胚胎的发育过程中可能发挥重要作用。     

国产环硫雄醇对小鼠抗着床作用及其毒性的观察

<正> 环硫雄醇(Epitiostanol)化学名:2α,-3α-环硫-5α-雄甾-17β醇(2α,3α-Epithio-5α-andro stanol17β-ol),分子式:C_(15)H_(30)OS·1/4H_2O,分子量:311.02。1983年福州大学化学系和福州市医药工业研究所利用龙舌兰制麻废液提取中间产物并合成该药。经化学结构、理化常数和纯度鉴定均符合标准。用小白鼠腹腔注射国产环硫雄醇时,急性毒性试验LD_(50)为1469±88mg/kg。亚急性毒性试验,取成年Wistar 大鼠40只,随机分为4组,每组10只,即:花生油溶剂组、环硫雄醇花生油溶剂低剂量组(5mg/kg)、中剂量组(20mg/kg)和高剂量组(100mg/kg),以上各组动物每天腹腔注射一次药物,于给药40天和60天时,     

GnRHa联合雌激素预防顺铂致小鼠卵巢功能损伤的保护作用

目的:研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)联合雌激素(E2)对顺铂(CDDP)所致小鼠卵巢功能损伤的保护作用。方法:选择具有正常性周期的5～6周龄雌性Balb/c小鼠40只,随机分为正常对照组、CDDP组、GnRHa+E2组、GnRHa+E2+CD-DP组,分别注射生理盐水、CDDP、GnRHa+E2和GnRHa+E2+CDDP。采用放免法测定各组小鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、E2水平。在停药后间期处死小鼠,卵巢称重后组织病理切片HE染色观察各组卵巢组织结构及卵泡数量变化。结果:CDDP组小鼠与Gn-RHa+E2+CDDP组比较,血清FSH明显升高,E2水平明显降低(P0.05)。CDDP组卵巢和子宫湿重明显低于GnRHa+E2+CDDP组(P0.05)。CDDP组与其他3组比较,卵巢卵泡总数最少(P0.05)。经统计学分析,CDDP与GnRHa+E2间有交互作用。结论:GnRHa联合雌激素能够减轻顺铂对卵巢结构及功能的破坏,在一定程度上保护卵巢的储备功能。     

复发性自然流产患者子宫蜕膜及绒毛组织白血病抑制因子基因表达的研究

目的 :探讨白血病抑制因子 (LIF)基因在子宫蜕膜及绒毛组织中的表达与反复自然流产 (RSA)的关系。方法 :采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,对 2 0例RSA患者和 30例正常妊娠妇女子宫蜕膜和绒毛组织进行LIFmRNA检测。结果 :RSA组蜕膜组织中LIFmRNA的表达水平为 0 5 12± 0 32 6 ( x±s,下同 ) ,正常妊娠组为 1 345± 0 885 ,RSA患者蜕膜组织中LIFmRNA表达显著性降低 (P <0 0 5 ) ;RSA组绒毛组织中LIFmRNA的表达水平为 0 6 0 1± 0 10 5 ,正常妊娠组为 1 75 9± 0 318,前者较后者明显降低 (P <0 0 1)。结论 :LIF对妊娠的维持可能起一定的作用。LIF基因表达减弱可能是导致复发性自然流产的原因之一     

早期自然流产妇女的非手术治疗对生育的影响

临床常遇到β-hCG 水平低,B 超检查未发现宫腔内有残留组织的早期自然流产病人,这些病人是否需要刮宫治疗尚无定论。作者对1983～1988年144例孕龄<10周,血清β-hCG 阳性但<500mIU/ml,超声检查未发现宫腔有残留组织的早期自然流产病人分别给予刮宫或保守治疗,并对两组的并发症、再次妊娠的可能以及妊娠结果进行比较。68例于入院后24小时内常规在麻醉下行刮宫术,其中52例术后有再妊娠要求者组成外科治疗组(外科组)。46例未行刮宫治疗,其中35例有再妊娠要求