C-Fe@CN-CN对人肝癌细胞增殖的抑制作用

目的: 制备卡铂碳包铁纳米笼壳聚糖微球( C-Fe@CN-CN )，观察其对人肝癌细胞体外增殖的抑制作用。方法:采用反相微乳法制备C-Fe@CN-CN，测定其表征，观察其体外释药行为。采用MTT法检测C-Fe@CN-CN对人肝癌细胞体外增殖的抑制效应；计算IC50，绘制生长曲线。结果:C-Fe@CN-CN球形圆整，平均粒径（207±21）nm，载药量为(11.40±1.31)%。C-Fe@CN-CN的体外释药行为包括快速相和平稳相两阶段，可持续5d。C-Fe@CN-CN对人肝癌细胞增殖有明显抑制作用，并呈剂量和时间依赖性，作用24h时抑制效应低于原药，作用48h和72h时抑制效应等同于原药。C-Fe@CN-CN的24，48，72h IC50分别为135，18.84，6.09μg/mL。空白微球对肝癌细胞增殖无影响。结论:C-Fe@CN-CN具有长循环和肿瘤组织滞留潜能，磁靶向性强，可缓释药物。体外能有效地抑制肝癌细胞增殖，空白微球表现出良好的生物相容性。     

基因重组人生长激素对人肝癌细胞系生长的影响

目的 研究基因重组人生长激素(rhGH)作用人肝癌细胞系后细胞周期动力学的改变，了解其对人肝癌细胞系生长的影响。方法 不同浓度rhGH(0、2、5、25、50、150、500μg／L)作用于人肝癌细胞系HepG2，采用流式细胞仪检测作用24、48、72h后的细胞周期动力学，分析其增殖指数、S期细胞百分比及细胞凋亡率的变化。结果 rhGH作用后的HepG2细胞周期动力学改变与作用时间无显著相关；与对照组比较，在生理浓度(25μg/L)rhGH作用下，PI及S％显著上升(P＜0．05)，但在超生理浓度(500μg／L)rhGH作用下，PI及S％无显著改变(P＞0．05)；另2、5、25、50、150、500μg/L rhGH均诱导人肝癌细胞凋亡，且呈浓度—效应关系。结论 在体外培养体系中，rhGH在低于或等于生理浓度时，促进人肝癌细胞增殖；在高于生理浓度时，抑制人肝癌细胞增殖。     

全反式维甲酸对脑胶质瘤细胞Cyclin E、Caspase-3表达的影响

目的 探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖抑制作用及细胞周期素Cydin E和凋亡相关基因Caspase-3 mRNA表达的影响。方法 噻唑蓝（MTT）比色法检测全反式维甲酸（ATRA）在不同浓度（1、2、4、8、16μmol／L）、不同作用时间（24、48、72h）处理大鼠胶质瘤C6细胞系后，对细胞增殖抑制率的变化；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测细胞周期素Cyclin E和Caspase-3 mRNA在24、48、72h不同时间点表达变化。结果 ATRA对C6细胞有增殖抑制作用。具有时间和浓度依赖性；药物作用组与无药物作用组之间及药物作用各组之间的OD值和抑制率比较差异有统计学意义（P〈0．01）。随ATRA作用时间的延长，细胞周期素Cyclin E mRNA表达逐渐下降，与细胞凋亡相关基因Caspase-3 mRNA表达逐渐增高（P〈0．01）。结论 ATRA抑制C6脑胶质瘤细胞发生增殖，其机制可能与细胞周期素Cyelin E表达下调。凋亡相关基因Caspase-3上调有关。     

二十碳五烯酸对人肝癌HepG2细胞生长作用的实验研究

目的研究二十碳五烯酸（EPA）对人肝癌HepG2细胞生长影响。方法经EPA处理的HepG2细胞（实验组）,采用MTF法检测细胞增殖,荧光染色、透射电镜观察细胞凋亡形态改变,流式细胞胞仪检测细胞凋亡。结果与对照组比较,EPA在45ug/ml和60ug／ml两个浓度对HepG2细胞的抑制率在24h、48h、72h分别为36．7％和52．1％、68．1％和94．8％、94．2％和99．7％;形态学上可见实验组细胞的凋亡显著,凋亡小体明显著多。流式细胞仪可以见到明显的细胞凋亡。结论EPA呈剂量和时间依赖性方式抑制肝癌HepG2细胞的生长增殖。细胞凋亡是其途径之一。     

蛋白酶体抑制剂Velcade诱导肝癌细胞HepG2凋亡

目的探讨蛋白酶体抑制剂Vekade诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的作用和机制。方法以不同浓度Velcade处理HepG2细胞24h和48h。四甲基偶氮唑蓝比色法评价细胞生长情况；流式细胞术检测细胞凋亡；Westernblot测定caspase3改变；RT—PCR检测Bcl-2家族、CyclinA和CyclinDmRNA的表达。结果不同Velcade浓度（32、64、128、256、512nmol／L）处理HepG2细胞48h后，细胞活性较对照组明显减少（分别是91．4％±2．1％、75．0％±3．7％、57．3％±1．6％、52．7％±1．6％和31．4％±2．6％），与对照组（100．0％±1．7％）比较具有显著性差异（P〈0．05）。128nmol／L的Velcade处理HepG2细胞，48h流式细胞仪检测结果显示SubGl细胞百分数明显升高，SubGl细胞百分数（27．3％±5．3％），与对照组（4．3％±0．5％）差别显著（P〈0.05），同时，Pro—caspase3明显下降；但Velcade对Bcl-2家族表达无明显影响；Velcade诱导HepG2细胞G2／M阻滞，抑制CyclinA和CyclinD表达。结论Velcade诱导肝癌细胞凋亡不通过改变Bcl-2家族表达，可能存在其它途径；Velcade诱导肝癌细胞G2／M周期阻滞与调节通过下调CyclinA和CyclinD表达相关。     

苯乙酸对人结直肠癌细胞HCT-8的G1细胞周期阻滞及增殖抑制作用

摘要：目的 探讨诱导分化剂苯乙酸（PA）对人结直肠癌细胞系HCT 8细胞周期及增殖的影响。 方法 应用MTT比色法，以1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mmol/L的PA作用于体外培养的HCT 8细胞，分别于24，48，72h后对细胞增殖进行检测；流式细胞术分析细胞周期。结果 随着PA浓度的增加（1～5 mmol/L）或药物作用时间的延长（24～72h），肿瘤细胞生长抑制率明显增加。PA1~5mmol/L作用24h细胞生长抑制率为5.1%-24.3%，48h为16.7%-72.3%，72h为30.2%-93.4%。PA作用细胞72h后，G0/G1期比例显著下降，S期比例相对升高，组间差异显著（P＜0.05）。结论 PA在诱导分化结直肠癌HCT 8细胞过程中，可诱导G1细胞周期阻滞，抑制细胞增殖。     

细胞周期素D1反义cDNA治疗肝癌的研究

目的 通过基因反义封闭技术抑制细胞周期素D1（CydinD1）的表达，研究其对肝癌细胞增殖以及成瘤性的影响。方法 以肝癌HepG2细胞株为研究对象，通过转染可表达CyclinD1反义互补脱氧核苷酸（AScDNA）的质粒后，观察CyclinD1反义cDNA对肝癌细胞CyclinD1基因表达、体外增殖活性及裸鼠体内成瘤性的影响。结果 噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活性显示转染表达反义CydinD1的质粒后，HepG2细胞的增殖受到抑制．抑制作用在48h左右最强；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测显示CyclinD1 mRNA基因的表达明显被抑制；间接免疫荧光检测结果显示CyclinD1蛋白表达显著降低；流式细胞仪检测结果显示G0／G1期的细胞比例增高，G2＋M和S期的细胞比例下降，HepG2细胞周期在G1期被阻滞；裸鼠成瘤试验显示肝癌HepG2细胞的成瘤性受到明显抑制。结论 CyclinD1反义cDNA可以特异性的抑制肝癌HepG2细胞株CyclinD1蛋白的表达，从而调控细胞周期，抑制肝癌细胞增殖及体内成瘤性。CyclinD1反义cDNA对于肝细胞癌的生物治疗具有一定的应用前景。     

重组腺病毒介导MDA-7/IL-24对Hep3B选择性杀伤和抑制增殖的研究

目的观察黑色素瘤分化相关基因7（MDA-7／IL-24）基因对人肝癌细胞Hep3B和正常的肝细胞L02的作用，并且探讨其该作用机制。方法将携带人MDA-7／IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞Hep3S，逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）和ELISA方法观察MDA-7／IL-24基因的表达，噻唑蓝染色法（MTT）观察MDA-7／IL-24对肝癌细胞的生长抑制，Hoechst染色和Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检二种细胞的凋亡，利用PI染色后流式细胞仪检测细胞周期，RT-PCR方法检测bcl-2的表达变化。结果Ad．mda-7能介导外源基因MDA-7／IL-24在肝癌细胞株Hep3B和正常细胞L02中高效表达，细胞培养上清液中MDA-7／IL-24蛋白的表达（Hep3B：L02分别为790：810ng／L）。MDA-7／IL-24能明显抑制肝癌细胞的生长（抑制率分别是83％和1．2％），能促进肝癌细胞的凋亡（58％：2．2％），阻滞肝癌细胞在G2／M期（48．29％：7．95％）。而对正常的肝细胞没有促凋亡和增殖阻滞作用；能明显的抑制Hep3B的凋亡抑制基因bcl-2的表达。结论Ad．mda-7能介导MDA-7／IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达，选择性的杀伤肝癌细胞Hep3B，促进细胞增殖阻滞，其机制是通过抑制bcl-2的表达诱导肿瘤细胞凋亡。     

他克莫司在体外对肝癌细胞HepG2和HepG2.2.15增殖的影响

目的：研究他克莫司（tacrolimus ,FK506）在体外对肝癌肿瘤株HepG2和乙肝相关肝癌株HepG2.2.15增殖的影响。方法：体外培养肝癌细胞HepG2和HepG2.2.15,采用MTT法、流式细胞技术,分别检测细胞增殖、细胞周期、CyclinA。结果：FK506可以显著抑制HepG2和HepG2.2.15细胞增殖,其抑制增殖作用随剂量增加而增强;FK506诱导细胞产生G0/G1期阻滞,这种抑制作用有浓度依赖性;FK506对周期蛋白CyclinA表达的影响呈浓度负相关性,FK506浓度越高,周期蛋白CyclinA表达越少。结论：FK506可以抑制肝癌细胞HepG2和乙肝相关肝癌细胞HepG2.2.15的增殖,这种作用可能与诱导细胞周期阻滞有关。     

DCPIB对小胶质细胞株BV-2细胞增殖的抑制作用

目的 探讨容积调控性氯离子通道(VRACs)阻断剂DCPIB对小胶质细胞BV-2细胞增殖的影响及作用机制.方法 不同浓度的DCPIB(10、20、40 μmol/L)作用于BV-2细胞相应的时间后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测DCPIB对细胞增殖的抑制率;流式细胞术检测药物处理后BV-2细胞周期的分布;Western blot检测细胞周期相关蛋白Cyclin D1的表达.结果 VRACs阻断剂DCPIB可使细胞生长曲线下移,呈时间和浓度依赖性;DCPIB抑制细胞增殖,作用细胞48 h后的抑制率分别为(29.20±3.99)％、(38.93±2.36)％、(68.52±2.16)％,与正常对照组比较均有明显增高(P＜0.01).细胞周期阻滞在G0/G1期,G2/M期和S期细胞明显减少.DCPIB作用BV-2细胞72 h后,与对照组比较,Cyclin D1蛋白表达明显降低.结论 VRACs阻断剂DCPIB可以抑制BV-2细胞增殖,其作用机制可能与阻滞细胞周期和下调Cyclin D1蛋白的表达有关.     

9-硝基喜树碱及其脂质体对HepG2、L02细胞周期和凋亡作用的研究

目的 研究9-硝基喜树碱及其脂质体对人肝癌细胞株HepG2和人正常肝细胞L02细胞周期、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 HepG2、L02细胞用含不同浓度9-硝基喜树碱及其脂质体的培养液孵育后,利用MTT法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,WesternBlot验证周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达变化.结果 9-硝基喜树碱及其脂质体对两种细胞生长呈时间和剂量依赖性抑制.药物处理后S期和G2/M期细胞明显增多,浓度大于0.1 μmol/L时24 h后HepG2细胞完全阻滞于S期;0.1 μmol/L孵育72 h后,超过95%HepG2细胞阻滞于G2/M期.药物对细胞凋亡的诱导作用也呈明显的剂量和时间依赖关系.Western Blot显示:Bax、Caspase3表达增高,Cyclin A、Cdk2、Cyclin E、Bcl-2表达减低.与L02相比,HepG2细胞对药物更加敏感.结论 9-硝基喜树碱及其脂质体可以通过调控细胞周期和诱导凋亡有效抑制细胞生长,其对肿瘤细胞的抑制作用强于正常肝细胞.9-硝基喜树碱脂质体体外抗肿瘤效果略强于9-硝基喜树碱单体.

Abstract：

Objective To investigate the modulating effects and explore their mechanism of 9-nitrocamptothecin and its liposomes to induce apoptosis and inhibit cell cycle in HepG2 and L02 cell lines. Methods Cells were incubated with 9-nitrocamptothecin(9NC) or with 9-nitrocamptothecin liposomes for 24 h, 48 h and 72 h, then, the cell viability was measured via MTT assay; cell cycle and apoptosis was evaluated by flow cytometry after stained by PI and Annexin V-PE/7AAD. Additional, Western Blot was used to evaluate the expression of cell cycle and apoptosis related protein. Results Both cells viability were apparently inhibited by the 9-nitrocamptothecin and 9-nitrocamptothecin liposomes, the inhibitory effect showed a time-dependent and dose-dependent manner. Both S and G2/M phases arrest were observed after incubated with drugs. HepG2 cell was completely arrested in S phase when 9NC concentration over than 0. 1 μmol/L after incubation for 24 h, while more than 95% cells arrested in G2/M phase when 9NC concentration is 0. 1 μmol/L after incubation for 72 h. Apoptosis induction effect also showed a time-dependent and dose-dependent manner. Western Blot results showed the expression of Bax and Caspase-3 were upregulated while Cyclin A, Cdk2, Cyclin E and Bcl-2 were downregulated. More importantly, the compounds were more cytotoxic to the cancer cell lines than to the normal liver cell. Conclusions 9-nitrocamptothecin and 9-nitrocamptothecin liposomes can potently inhibit cell growth via regulation of cell cycle and induction of apoptosis, and this effect was preferentially in cancer cell. Inhibitory of 9-nitrocamptothecin liposomes was slightly better than the 9-nitrocamptothecin.     

苦参碱含药血清对大鼠肝干细胞的影响

目的 研究苦参碱含药血清对大鼠肝干细胞系WBF-344细胞的增殖及AFP、Notch1蛋白和mRNA表达的影响.方法 用MTT法检测苦参碱含药血清对WBF-344细胞增殖的影响,免疫细胞化学及RT-PCR方法检测苦参碱含药血清对WBF-344细胞AFP、Notch1蛋白和mRNA表达的影响.结果 5%、10%、20%浓度的苦参碱含药血清作用于WBF-344细胞24 h、48 h、72 h均有不同程度的抑制增殖作用,且存在时间、剂量依赖性.正常培养WB-F344细胞有少量AFP、Notch1蛋白和mRNA表达,肝癌前病变模型组血清培养后AFP、Notch1蛋白和mRNA表达上调,苦参碱含药血清培养后AFP、Notch1蛋白和mRNA表达较模型组血清AFP、Notch1蛋白和mRNA表达下调. 结论肝癌前病变模型组血清可能具有诱导WBF-344细胞向肝癌细胞方向分化的作用,苦参碱含药血清可逆转此作用,以上作用与调节Notch1表达关系密切.     

9-硝基喜树碱脂质体对肝癌细胞株HepG2的抑制作用及机制

目的 观察9-硝基喜树碱脂质体对HepG2肝癌细胞的抑制作用及其机制.方法 9-硝基喜树碱(9NC)及其脂质体(9NC-LP)处理HepG2细胞后,MTT法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞周期及凋亡相关蛋白表达.建立HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为空白对照组,空白脂质体组,DMSO组,9NC低、高剂量组,9NC-LP低、高剂量组,每组10只.尾静脉给药后持续监测各组裸鼠肿瘤体积、体重变化.给药后28 d处死裸鼠,切取肿瘤提取总蛋白后Western Blot检测蛋白表达变化.结果 在体外实验,9NC-LP对肿瘤细胞生长呈时间和剂量依赖性抑制.药物处理后S期和G2/M期细胞明显增多,浓度大于0.1 btmol/L时24 h后细胞完全阻滞于S期;0.1μmol/L 孵育72 h后,超过95%HepG2细胞阻滞于G2/M期.在体内实验,与空白对照组比较,各剂量的9NC及9NC-LP均引起肿瘤体积下降(P<0.05)和裸鼠体重减轻(P<0.05).空白脂质体组与空白对照组、DMSO组比较差异无显著性(P>0.05).肿瘤生长最高抑制率9NC-LP(2.5 mg/kg)组、9NC-LP(1.5 mg/kg)组、9NC(1.5 mg/kg)组,分别为87.02%、51.57%和35.47%.9NC (2.5 mg/kg)组用药14 d过半动物死亡.结论 9NC及9NC-LP可以通过调控细胞周期和诱导凋亡有效抑制肝癌细胞生长.与原料药相比9-硝基喜树碱脂质体在体内对肝癌细胞的抑制增强,副作用减弱.9-硝基喜树碱脂质体是一种极具前景的纳米靶向药物.

Abstract：

Objective To observe the inhibitory effect and mechanism of 9-nitrocamptothecin liposomes on HepG2 liver carcinoma cells. Methods HepG2 cells were incubated with 9-nitrocampto-thecin(9NC) or with 9-nitrocamptothecin liposomes(9NC-LP) for 24 h, 48 h and 72 h. Cell viability was then measured by the MTT assay. Cell cycle and apoptosis were evaluated by flow cytometry.Western Blot was used to determine the expression of cell cycle and apoptosis related proteins. HepG2tumor-bearing mouse models were then established. The HepG2 tumor-bearing mice were randomly divided into control group, free liposomes group, DMSO group, 9NC low dose group, 9NC high dose group, 9NC-LP low dose group and 9NC-LP high dose group. There were 10 mice in each group.Drugs were administered by tail vein and tumor volume and body weight were observed 28 days after administration. Then animals were sacrificed and the expression of proteins from tumor homogenates was analyzed by Western blotting. Results In vitro, HepG2 cell viability was apparently inhibited by 9NC and 9NC-LP, and the inhibitory effect increased in a time-dependent and dose-dependent manner.Both S and G2/M phase arrests were observed after incubation with drugs. HepG2 cells were completely arrested in S phase with 9NC concentration over than 0.1 μmol/L after incubation for 24 h,while more than 95% of cells arrested in G2/M phase when 9NC concentration was 0.1 μmol/L after incubation for 72 h. In vivo, compared with the control group, the average tumor volume was reduced in both the 9NC and 9NC-LP group (P<0.05) , and the average animal body weight also decreased in both the 9NC and 9NC-LP group (P<0.05). There was no significant difference among the control group, free liposomes group, and DMSO group. The lights inhibition rates of tumor growth in the 9NC-LP(2.5 mg/kg),9NC-LP(1.5 mg/kg),and 9NC(1.5 mg/kg)groups were 87.02%, 51.57%and 35.47%, respectively. In the 9NC-LP(2.5 mg/kg)group, >50% of animals died 14 days after drug administration. Conclusion 9NC and 9NC-LP can inhibit HepG2 cell growth via cell cycle arrest and apoptosis induction. 9NC-LP has a more potent anti-tumor effect and fewer side effects in vivo,which means 9NC-LP is a promising compound for cancer therapy via intravenous administration.     

NF-κB、Caspase-3在腺苷诱导人HepG2细胞凋亡中的作用

目的 研究NF-κB、Caspase-3在腺苷(ADO)体外诱导人肝癌HepG2细胞凋亡中的作用.方法 将不同浓度的ADO(0.1～5 mmol/L)作用于HepG2细胞,采用MTT法测定ADO抑制细胞增殖的时间效应和剂量效应.2.0 mmol/L ADO单用或联合NF-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC,100 μmol/L)作用HepG2细胞12 h、24 h,采用Hoechst 33342荧光染色法及流式细胞术(FCM)观察细胞凋亡及细胞周期,Western blot技术检测NF-κB蛋白表达;荧光比色法测定Caspase-3酶活性.结果 ADO对HepG2细胞生长具有显著抑制作用,并呈一定的量效和时效关系.药物作用24 h、48 h的IC50分别为2.52 mmol/L和1.89 mmol/L.ADO单独处理HepG2细胞12 h和24 h或联合PDTC处理后,细胞凋亡率分别为8.30%、22.32%;20.18%、30.89%,均显著高于对照组(0.81%,P<0.001);ADO作用HepG2细胞后荧光显微镜观察到细胞凋亡的形态学改变,FCM分析药物处理组显示典型特征性的亚二倍体凋亡峰(sub-G1),细胞生长周期阻滞于G0/G1期;同时伴有Caspase-3活性显著升高(P<0.05).ADO处理后显著增加了NF-κB蛋白表达(P<0.05);PDTC有效抑制了NF-κB表达,同时增加了 Caspase-3活性及ADO的细胞毒作用(P<0.05).结论 ADO诱导了HepG2细胞凋亡并活化Caspase-3.抑制NF-κB活性可通过Caspase-3途径增强ADO的细胞毒作用.     

游离脂肪酸对大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨游离脂肪酸（FFAs）对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖和生长周期的影响。方法：用不同浓度的游离脂肪酸处理大鼠HBZY-1细胞株（即大鼠肾小球系膜细胞）24h～72h。采用噻唑蓝比色（MTT）法检测内皮细胞增殖情况,流式细胞术（FCM）分析法测定细胞周期变化。结果：游离脂肪酸可抑制HBZY-1细胞的生长增殖（与对照组比较,P〈0.01）,且这种抑制作用具有剂量和时间依赖性;游离脂肪酸作用于HBZY-1细胞24h、48h、72h,细胞周期发生明显改变,G1期细胞数增多,S期细胞数减少（与对照组比较,P〈0.01）。结论：游离脂肪酸可通过停滞细胞生长于G1期,抑制大鼠肾小球系膜细胞的生长增殖。     

二甲双胍对胃癌细胞株增生及Cyclin D1表达的影响

目的 观察二甲双胍在体外对人胃癌细胞株SGC-7901生长的作用,并初步探讨其作用机制.方法 体外培养胃癌SGC-7901细胞,MTT法测二甲双胍在不同浓度和不同作用时间对胃癌细胞增生的影响;Western blot法检测二甲双胍对胃癌细胞CycLn D1表达的影响.结果 MTT法结果显示:用不同浓度(50 mmol/L、100 mmol/L)的二甲双胍处理胃癌细胞SGC-7901在24h.48h、72h后,50 mmol/L二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制率分别为32.93%、48.64%和61.40%.100 mmol/L二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制率分别为35.34%、75.44%和88.30%,不同浓度的二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制率与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),100mmoL/L二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制与50mmol/L二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制率相比具有显著性差异(P<0.05)二甲双胍呈时间、浓度依赖性抑制胃癌细胞的增生.胃癌细胞高表达Cyclin D1,Western blot检测表明二甲双胍能显著降低Cycfin D1蛋白的表达,且呈一定时间、剂量依赖性.结论 二甲双胍可以下调胃癌细胞株SGC-7901 Cycfin D1的表达,抑制胃癌细胞的增生.     

PCNA反义寡核苷酸抑制人肝癌细胞体外增殖的研究

目的 观察增殖细胞核抗原（PCNA）反义寡核苷酸对人肝癌细胞株体外增殖的影响及生物学特性的改变，方法 MTT法，集落形成试验观察PCNA反义寡核苷酸对人肝癌细胞的生长抑制，免疫组化技术检测PCNA的蛋白表达，流式细胞仪分析细胞周期变化。结果 PCNA反义核酸作用后的肝癌细胞生长明显受到抑制，抑制效应于作用后48h最为明显，并于72h后逐渐减弱，集落形成率明显下降，PCNA蛋白表达明显下降，细胞周期中S期细胞数明显减少。结论 PCNA反义寡核苷酸能显著抑制人肝癌细胞的生长。